CN104147000B - 一种防治牛羊焦虫病及传播媒介蜱的药物喷涂剂及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种防治牛羊焦虫病及传播媒介蜱的药物喷涂剂及其制备方法,其特征将聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯、残杀威、青蒿琥酯、中碳链三甘酯、1,2丙二醇、无水乙醇纳入棕色三角瓶中,置棕色三角瓶于恒温磁力搅拌器上,以300~500rpm搅拌0.2h,直至药物完全溶解,再往瓶加入氮酮过程中,搅拌,直至体系均一、透明、澄清为止。该制剂为外用制剂,其中残杀威用于牛羊焦虫病体外传播媒介-蜱的驱杀,青蒿琥酯用于牛羊体内感染焦虫的预防与治疗;该制剂不仅给药方式简单易行,并且根据药物的特性通过一次给药,可以对体内外两种寄生虫起到治疗与预防双重作用,大大提高了牛羊焦虫病的防治效果,节省人力、物力,提高养殖效益。
Description
技术领域
本发明属于兽药领域,涉及牛羊焦虫病体外传播媒介-蜱及体内焦虫病预防与治疗的药物新制剂,具体是指一种防治牛羊体内焦虫病及驱杀牛羊体外传播媒介昆虫蜱的药物喷涂剂(简称“内外双杀药物喷涂剂”)及其制备方法和应用。
背景技术
牛羊焦虫病病原在体外传播媒介昆虫蜱体内经有性的配子生殖并产生孢子,当蜱叮咬牛羊吸血时即将病原注入牛羊体内,在牛羊红细胞内不断进行无性繁殖,首先侵入网状内皮系统细胞,在肝、脾、淋巴结与肾脏内进行裂体繁殖,并进入红细胞内寄生,病原传播者蜱吸食牛羊血液时病原又进入蜱体内发育,在传播季节(每年的3~5月,9~11月)和流行地区周而复始流行发病。焦虫病发病地区的共同特点是气候较暖,放牧地有森林或灌木丛,地处半农半牧地区,一年发生两次,有明显的季节性,每年的3~5月发病,以4月下旬至5月上旬发病最多,秋季发生于10月左右,但发病数较少,病情较轻。焦虫病的传播者主要是蜱(主要包括玻璃璃眼蜱、青海血蜱、草原革蜱三种),因此防治本病首先应该灭蜱,消灭牛羊身体上寄生蜱和圈舍内外的蜱,可采取人工捉蜱或体表喷洒药物的方法(用2.5%敌杀死油乳剂按1∶200~250倍稀释,每隔15d带畜喷雾1次,或1.5%~2%敌百虫溶液,每7d喷雾一次,还有如残杀威、溴氰菊酯、氯氰菊酯、驱蜱灵等按说明书剂量使用),对圈舍内墙面、缝隙应定期喷洒药物灭蜱,用药时谨防人畜中毒;另外,结合人工种草,深翻土地,改良土壤等措施,破坏蜱的生存条件,以消灭外界环境中的蜱;在发病季节前用三氮脒、青蒿琥酯等药物按治疗量的一半对牛羊注射可起到药物预防焦虫病的作用,一般一次用药可预防2个月左右,在老疫区一般在整个发病期内(每年3~6月)间隔一个月应进行2~3次预防。
残杀威纯品为白色晶体,为世界卫生组织(WHO)公认作为室内、户外卫生害虫及牲畜卫生害虫防治中最好的杀虫药剂之一,该药没有腐蚀性,为中等毒性,以含250ppm残杀威的饲料喂大鼠两年无危害;由于残杀威防治效果好,该药具有击倒快、残效期长的特点,能有效杀灭家庭及公共场所中的各种卫生害虫,对温血动物经皮毒性低,在自然环境下残效期长,在国外被广泛用于防治温血动物的体外寄生虫,在环境卫生方面被广泛用于防治蚊、蝇、蚤、臭虫、蟑螂等害虫。
研究结果显示:残杀威透皮给药对牛羊体外寄生的各种蜱虫都具有很好的驱杀作用,药物的残效期达3个月之久,每年在发病季节前,即2月份和9月份各用药一次,能使牛羊焦虫发病率由用药前的80%降至用药后的25%;但蜱虫是因吸食含有残杀威的动物血液后致死,但蜱虫吸食血液的同时也将焦虫病病原注入牛羊体内,导致仍有25%的犊牛、羔羊发病,发病后不经药物治疗,病死率高达85%-100%,发病后用青蒿琥酯治疗,可将病死率降至10%以下;但须残杀威和青蒿琥酯至少两次用药,并且由于畜主疏忽往往错过最佳用药时期,试验还显示青蒿琥酯按治疗量的一般剂量提前用药,对牛羊的焦虫病有很好的预防作用,药物持续期达2个月之久,鉴于此本研究团队依据两种药物的理化特性,研制了两种药物含量为5%的外用涂膜剂,通过一次用药达到驱杀牛羊体外蜱虫和预防体内焦虫的双重作用,节省人力、物力、提高药物的防治效果,效果非常显著。
发明内容
针对残杀威对牛羊体外寄生的各种蜱虫都具有很好的驱杀作用,青蒿琥酯对牛羊的焦虫病有很好的预防作用,本发明结合两者的特点,提供一种防治牛羊焦虫病及传播媒介蜱的药物喷涂剂,该喷涂剂为兽医临床用于牛羊体外传播媒介-蜱及体内血液焦虫病治疗与预防的药物,通过一次用药,起到对动物体外的截肢昆虫(蜱)的治疗和体内的血液原虫(焦虫)预防双重作用。
本发明的另一目的在于一种防治牛羊焦虫病及传播媒介蜱的药物喷涂剂的制备方法。
本发明的再一目的是该喷涂剂用于牛羊焦虫病体外传播媒介-蜱的驱杀,和牛羊体内感染焦虫的预防与治疗。
本发明的目的是通过以下技术方案来实现:
一种防治牛羊焦虫病及传播媒介蜱的药物喷涂剂,由下列质量或体积分数的原料组成:
聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯420ml
残杀威50g
氮酮30ml
青蒿琥酯50g
中碳链三甘酯280ml
1,2丙二醇220ml
无水乙醇50ml
以上溶液总量为1000ml,残杀威和青蒿琥酯两种药物的含量均为5%(W/V)。
上述药物喷涂剂的制备方法,包括以下步骤:
将聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯、残杀威、青蒿琥酯、中碳链三甘酯、1,2丙二醇、无水乙醇纳入棕色三角瓶中,置棕色三角瓶于恒温磁力搅拌器上,以300~500rpm搅拌0.2h,直至药物完全溶解,再往瓶加入氮酮,搅拌,直至体系均一、透明、澄清为止。
喷涂剂的理化性质:该喷涂剂为无色、均一、透明、澄清液体,密度为0.9545g/ml,质地较粘稠,常温下性质稳定,无混浊、无沉淀析出。
本发明的优点和产生的有益效果是:
1、从原料的优化配伍实现药物的疗效。
本发明除了利用残杀威对牛羊体外寄生的各种蜱虫都具有很好的驱杀作用和青蒿琥酯对牛羊的焦虫病有很好的预防作用外,本发明所采用聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯和中碳链三甘酯为中短链脂肪,对畜体不仅无毒,而且研究显示具有一定的营养作用(聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯和中碳链三甘酯为中短链脂肪,营养作用是由这两种物质的理化性质决定的);1,2丙二醇和无水乙醇在本制剂中做为表面活性剂和助溶剂使用,用量越低愈好;氮酮在本制剂中做为促渗透剂,促进药物吸收,按正交试验方法反复试验各成分按如下量:聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯420ml、残杀威50g、青蒿琥酯50g、中碳链三甘酯280ml、1,2丙二醇220ml、无水乙醇50ml、氮酮30ml,制备时制剂的稳定性和防治效果最好。在抗寄生虫药物制剂制备时,要求复配药物的共毒系数越高越好,研究结果显示残杀威和青蒿琥酯复配,共毒系数达180以上,符合国家对复配制剂的相关规定,且二药等量时复配效果最好。
2、本发明在常温常压下进行,原料易购,成本低,给药方式简单易行,为兽医临床提供新型的抗寄生虫药物新制剂,通过一次透皮用药,起到对动物体外的截肢昆虫(传播媒介蜱)的治疗和可能感染的体内血液原虫病(焦虫病)预防双重作用,大大提高了牛羊焦虫病的防治效果,节省人力、物力,提高养殖效益。
具体实施方式
下面,通过实施例对本发明的技术方案再作进一步说明,并在实施例基础上通过药物的药剂学、药理学和毒理学试验来说明本发明用于牛羊焦虫病体外传播媒介-蜱的驱杀,和牛羊体内感染焦虫的预防与治疗达到的效果。
实施例:
一种防治牛羊焦虫病及传播媒介蜱的药物喷涂剂(简称“内外双杀药物喷涂剂”),其步骤是:按量称取聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯420ml、残杀威50g、青蒿琥酯50g、中碳链三甘酯280ml、1,2丙二醇220ml、无水乙醇50ml纳入棕色三角瓶中(青蒿琥酯见光易分解),置棕色三角瓶于恒温磁力搅拌器上,以300~500rpm搅拌0.2h,直至药物完全溶解,加入氮酮30ml过程中,搅拌,直至体系均一、透明、澄清为止。
实验例1:“内外双杀药物喷涂剂”对大小鼠的透皮毒性试验
1试验目的
为阐明“内外双杀药物喷涂剂”的毒性,指导临床用药,对其溶液进行了昆明种小鼠和透皮急性毒性试验。
试验材料
2.1供试药品:“内外双杀药物喷涂剂”,无色、透明液体,规格:100ml:5g,批号:120301,中国农科院兰州畜牧与兽药研究所农业部新兽药创制重点实验室,密度为0.9545g/ml。
2.2试验动物:昆明种小鼠(普通级)30只,雌雄各半,体重18-22g,购自兰州大学实验动物中心,许可证号:SCXK(甘)2009-0004。Wistar大鼠(清洁级)30只,雌雄各半,体重180-220g,购自兰州大学实验动物中心,许可证号:SCXK(甘)2009-0004。试验动物饲养在清洁、安静的环境下每日定量喂给鼠粮,自由饮水,给药前适应饲养7d。
试验方法[1-3]
3.1预试验
大鼠、小鼠各10只,在肩胛背部分开被毛按10g/kg体重透皮给予“内外双杀药物喷涂剂”,观察动物的毒副反应
试验结果:大鼠、小鼠按10g/kgBW透皮给予“内外双杀药物喷涂剂”,未见任何毒副反应。
3.2正式试验
大鼠、小鼠各20只,在肩胛背部分开被毛分点按10g/kg体重透皮给予高剂量“内外双杀药物喷涂剂”,观察动物的毒副反应。
试验结果
试验结果:小鼠透皮给予“内外双杀药物喷涂剂”的试验结果详见表1-5所示。
表1-1小鼠透皮给与溶液的试验数据统计结果
透皮给予大鼠、小鼠“内外双杀药物喷涂剂”10g/kg体重,未见任何毒副反应,饮食与活动正常。
结论
大鼠、小鼠透皮给予“内外双杀药物喷涂剂”,其最大耐受量LD0即一只动物都不死亡的剂量大于10g/kg体重,那么其半数致死量LD50值必大于该剂量,即大于10g/kg体重,故“内外双杀药物喷涂剂”对大鼠和小鼠是实际无毒的。
实施例2:“内外双杀药物喷涂剂”的稳定性考察
将批号为20090202,20090203,20090204三批“内外双杀药物喷涂剂”,装入100ML无色透明玻璃瓶,封口后100℃流通蒸汽消毒,于25+2℃、RH60+5%的条件下放置,分别于0、3、6、9、12、18、24、36个月取样分析,观察制剂的外观、色泽、性状;检测有效成分残杀威和青蒿琥酯的含量及相对密度,并与0天的结果进行比较,结果见表2-1。
表2-1长期试验结果
室温留样考察结果表明,3年内样品有效成分检出、产品外观均无明显变化。由稳定性考察的结果结合农业部对外用溶液剂保存期限的一般规定,“内外双杀药物喷涂剂”的保存期限暂定为3年。
实施例3:“内外双杀药物喷涂剂”的皮肤刺激性试验
1试验目的
“内外双杀药物喷涂剂”为外用制剂,为了解该药在使用过程中对皮肤的刺激性,指导临床安全使用,本试验对日本大耳白兔进行了一次性给药的完整皮肤及破损皮肤的刺激性试验。
试验材料
试验药物:“内外双杀药物喷涂剂”,为无色、透明液体,规格:100ml:5g,批号:120301,密度为0.9545g/ml;生理盐水即0.9%氯化钠溶液;均有中国农科院兰州畜牧与兽药研究所农业部新兽药创制重点实验室提供。
试验动物:日本大耳白兔4只,雌雄各半,体重2kg左右,购自中国农业科学院兰州兽医研究所实验动物场。
试验方法
动物试验前处理:试验前24h用脱毛剂对用药区(背部两侧)进行脱毛处理,去毛范围为3cm×3cm。
试验操作:对兔子进行保定,将兔子背部左侧定位为对照区,右侧定位为试验区,每侧有前后两个区,前面为破损皮肤试验区,后面为完整皮肤试验区,破损皮肤试验区用碘伏消毒并用注射器针头划“井”字破口,破损区面积3cm×3cm,划痕间距1cm,完整皮肤试验区用记号笔标记3cm×3cm的面积。兔子左侧每个受试区给与对照物生理盐水0.5ml,右侧每个受试区给予“内外双杀药物喷涂剂”0.5ml,加纱布覆盖保护,用胶布固定。24h后擦除受试物,温水洗净,去除受试物10min,30min,1h,2h,24h,48h,72h观察涂敷部位有无红斑和水肿情况,以及上述变化的恢复时间和情况。
结果评价
单次给药皮肤刺激性试验,按照表3-1的评分标准计算每一观察时间点各组受试物以及对照品皮肤反应积分的平均分值,按表3-2进行刺激强度评价。
表3-1.皮肤刺激反应评分标准
表3-2.皮肤刺激强度评价标准
5试验结果
表3-3.皮肤刺激强度得分结果统计
去除受试物24h后完整皮肤试验区和破损皮肤试验区的皮肤均已无刺激性,根据上述得分将“内外双杀药物喷涂剂”的皮肤刺激反应程度判为轻度刺激。
结论
“内外双杀药物喷涂剂”一次给药对家兔完整皮肤和破损皮肤的刺激性是轻度刺激,红斑和水肿在给药后24h消失,通过本次试验得出赛拉菌素溶液作为外用制剂,对皮肤刺激性为轻度刺激性,故可以供临床使用。
实施例4:“内外双杀药物喷涂剂”用于羊焦虫病及传播媒介蜱的防治试验
1.材料和方法
1.1试验地址:按流行病学,选择山羊焦虫病高发地区甘肃省永靖县三条峴、陈靖镇、盐锅峡等乡镇个体羊场开展防治试验。
试验时间:依据牛羊焦虫一年发生两次,有明显的季节性,每年3~5月发病,以4月下旬至5月上旬发病最多;秋季发生于10月左右,本发明于2012年4月10日~5月30日,2012年9月10日~10月30日开展了“内外双杀药物喷涂剂”用于羊焦虫病及传播媒介蜱的防治试验。
试验药物:
试验用药:5%“内外双杀药物喷涂剂”,中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所生物制药重点开放实验室提供;
对照药物:“杀虫油剂”,新兽药字(2000)×042123,新疆畜牧科学院兽药厂,市售。
分组及用药:
1~6个月的羔羊和1~2岁的幼年羊800只,按下述方法在发病季节各用药防治1次。
试验高剂量组(Ⅰ组):150只,按体重大小,剂量为10-12ml/只,术者戴乳胶手套用小型喷雾器在试验羊尾巴及大腿内侧被毛较少的地方喷涂,只用药一次。
试验中剂量组(Ⅱ组推荐剂量组):300只,按体重大小,剂量为5-6ml/只,术者戴乳胶手套用小型喷雾器在试验羊尾巴及大腿内侧被毛较少的地方喷涂,只用药一次。
试验低剂量组(Ⅲ组):150只,按体重大小,剂量为2-3ml/只,术者戴乳胶手套用小型喷雾器在试验羊尾巴及大腿内侧被毛较少的地方喷涂,只用药一次。
药物对照组(Ⅳ组):150只,按体重大小,5-7ml/只,术者戴乳胶手套用小型喷雾器在试验羊尾巴及大腿内侧被毛较少的地方喷涂,只用药一次。
空白对照组(Ⅴ组),50只,不用任何药物防治。
防治效果判定:
发病率=发病羊只数/试验羊只数×100%;
有效保护率=未发病羊数/试验羊数×100%;
病死率=死亡羊数/发病羊数×100%。
防治结果:防治结果统计详见表4-1。
表4-1Art纳米乳等对羔山羊治疗结果
根据流行病学调查,1~6个月的羔羊和1~2岁的幼年羊发病率最高,在海拔较高(2200)石山放牧发病率高达90%以上,病死率在61~80%之间,而在海拔较低(1800)的土山、滩地放牧发病率在20~30%,病死率也在61~80%之间;在甘肃省永靖县三条峴、陈靖镇、盐锅峡三个乡镇的养殖户,对去年生一岁羔羊和当年生羔羊约800只按量进行防治结果显示,试验高、中、低及药物对照组发病率依次为:12%、11%、13%、11%,与空白对照组的发病率70%相比大大较低,差异均非常显著(p<0.01);试验高、中、低及药物对照组发病羊的病死率依次为:17%、16%、20%、19%,与空白对照组的病死率80%相比大大较低,差异均非常显著(p<0.01);试验高、中、低及药物对照组有效保护率依次为:88%、89%、87%、89%,与空白对照组的发病率30%相比大大提高,差异均非常显著(p<0.01)效果非常显著。
结论
中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所生物制药重点开放实验室提供的5%“内外双杀药物喷涂剂”和市售的“杀虫油剂”,对山羊焦虫病高发地区甘肃省永靖县三条峴、陈靖镇、盐锅峡等乡镇的1~6个月的羔羊和2岁内幼羊的焦虫病都有显著的防治作用,值得在流行季节,该病流行区域大面积推广应用。
Claims (3)
1.一种防治牛羊焦虫病及传播媒介蜱的药物喷涂剂,由下列质量或体积分数的原料组成:
聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯420ml
残杀威50g
氮酮30ml
青蒿琥酯50g
中碳链三甘酯280ml
1,2丙二醇220ml
无水乙醇50ml
以上溶液总量为1000ml,残杀威和青蒿琥酯两种药物的含量均为5%(W/V)。
2.一种制备权利要求1所述防治牛羊焦虫病及传播媒介蜱的药物喷涂剂的方法,其步骤是:
取聚乙二醇-12-羟基硬脂酸酯、残杀威、青蒿琥酯、中碳链三甘酯、1,2丙二醇、无水乙醇纳入棕色三角瓶中,置棕色三角瓶于恒温磁力搅拌器上,以300~500rpm搅拌0.2h,直至药物完全溶解,再往瓶中加入氮酮的过程中,搅拌,直至体系均一、透明、澄清为止。
3.权利要求1制备的药物喷涂剂在制备用于牛羊焦虫病体外传播媒介-蜱的驱杀和牛羊体内感染焦虫病的预防与治疗药物中的应用。
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