CN104096268B - 一种矿化胶原人工骨膜及其制备方法 - Google Patents
一种矿化胶原人工骨膜及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供一种矿化胶原人工骨膜，该人工骨膜使用纳米钙磷盐与胶原纤维有序排列的矿化胶原制成，具有与天然骨膜一致的物质组成和微观及宏观结构，并具备良好的力学性能和生物降解特性，可以用于骨膜的替代和修复。本发明的人工骨膜可以在修复过程中将其它植骨材料限制在骨缺损部位，避免植骨材料脱出及肌肉、脂肪等组织被挤压进入骨缺损部位中，影响修复效果。该人工骨膜的孔隙结构有利于血管的再生和营养物质的输送，从而有益于骨缺损的修复。由于矿化胶原人工骨膜由纳米钙磷盐和胶原纤维组成，因此该人工骨膜在体内可随骨组织及骨膜的再生而逐渐被降解。本发明还提供了该人工骨膜的制备方法。
Description
技术领域
本发明涉及生物医用材料领域，具体涉及一种用于骨膜的替代和修复的矿化胶原人工骨膜及其制备方法。
背景技术
骨折、骨不连、骨延迟愈合等是临床上常见的骨科疾病，除了存在骨组织缺损，这些疾病还都涉及骨膜的缺损。因此，在进行骨缺损修复的同时，还应当对骨膜的缺损进行修复，以达到更好的临床修复效果。然而，目前还没有可供临床使用的人工骨膜产品。
骨膜是覆盖在除关节部位以外骨表面的薄膜，是一层坚固的结缔组织包膜。天然的骨膜可分为内外两层：外层为纤维层，由胶原纤维紧密结合而成，含有成纤维细胞；内层为发生层，含有较粗的胶原纤维，并含有骨祖细胞，可以在特定条件下向成骨细胞分化。成纤维细胞和骨祖细胞都会分泌一定的细胞外基质，该细胞外基质主要是一种天然的矿化胶原成分，其中胶原呈规则排列的多级结构，并为钙磷盐的矿化提供模板，从而形成有序排列的矿化胶原复合体。骨膜可通过血管向骨组织提供营养物质，对骨组织的生长发育以及骨组织缺损的修复起到至关重要的作用。
目前，在手术中对于骨折、骨不连、骨延迟愈合及其它骨缺损的修复主要采用骨移植的办法，使用自体骨、同种异体骨或人工骨等各类骨植入材料对骨缺损进行填充，以期达到修复的目的。然而，现行的手术方案在植骨后通常并不对骨膜进行修复，而是直接逐层缝合肌肉和皮肤，使得植骨材料难以被很好地限制在缺损部位而产生脱出，或者肌肉、脂肪等组织被挤压进入骨缺损中，影响修复效果，甚至造成更严重的并发症（例如植骨材料脱出后压迫其它组织和神经）。
因此，有必要在骨修复手术中对植骨后的骨缺损修复区域进行包覆，达到替代和重建骨膜的目的，降低植骨材料脱出的风险，以及防止肌肉、脂肪等组织被挤压进入骨缺损部位，影响修复效果。目前临床上并没有专门的骨膜修复产品，一些膜状植入材料可以被用作骨膜的替代和修复，这类材料主要有脱细胞基质膜、可降解聚合物膜、胶原膜等，然而这些材料均各自存在较大缺陷。
脱细胞基质膜通过对人或其它动物来源的组织进行处理，获得以细胞外基质为主要成分的膜状材料。该材料的免疫原性较大，植入体内易引起免疫排斥反应，不利于骨缺损的修复。可降解聚合物膜包括可降解天然生物质材料（如壳聚糖）、可降解人工合成材料（如聚乳酸）等，天然生物质材料作为外源性生物制品，普遍存在引发免疫排斥反应的风险，而聚乳酸、聚羟基乙酸等人工合成材料的降解产物呈酸性，易引发无菌炎症，对骨的矿化不利。现有的胶原膜产品则存在机械性能差、降解速率过快等缺陷，达不到临床上对人工骨膜的性能要求。因此，现有的膜状植入材料均各自存在较大缺陷，不利于骨缺损愈合，不适合用作骨膜的替代物或用于骨膜的修复。
发明内容
针对上述现有技术的不足，本发明提供一种矿化胶原人工骨膜，该人工骨膜使用纳米钙磷盐与胶原纤维有序排列的矿化胶原制成，具有与天然骨膜一致的物质组成和微观及宏观结构，并具备良好的力学性能和生物降解特性，可以用于骨膜的替代和修复。本发明还提供了该人工骨膜的制备方法。
本发明的第一方面，提供了一种矿化胶原人工骨膜。该人工骨膜在宏观上呈扁平膜状结构，厚度0.1 ~ 0.5 mm，具有一定的孔隙结构，孔隙率为10% ~ 30%。在微观结构上，该人工骨膜的基本结构单元为有序排列的纳米钙磷盐与胶原纤维，其中纳米钙磷盐晶体的c轴沿胶原纤维的长轴方向排列。
所述矿化胶原人工骨膜可自由弯曲和折叠。
所述矿化胶原人工骨膜中胶原与钙磷盐的质量比为2:1 ~ 5:1。
所述纳米钙磷盐的粒径为20 ~ 200 nm，钙元素和磷元素的摩尔比为1/1 ~
2/1。进一步地，所述纳米钙磷盐为纳米羟基磷灰石，粒径为20 ~ 200 nm。
本发明的第二方面，提供了本发明第一方面所述矿化胶原人工骨膜的制备方法，包括以下操作步骤：
步骤S1、矿化胶原仿生复合材料制备，具体包括：
步骤S1-1、将胶原溶于盐酸、硝酸或醋酸中的任何一种，配制成胶原的酸溶液，其中胶原浓度为5.0×10-5 ~ 5.0×10-3
g/mL；
步骤S1-2、持续搅拌步骤S1-1所得溶液，缓慢滴加含钙离子的溶液，钙离子的加入量为每克胶原对应加入钙离子0.002 ~ 0.01 mol；
步骤S1-3、持续搅拌步骤S1-2所得溶液，缓慢滴加含磷酸根离子的溶液，磷酸根离子的加入量与步骤S1-2中钙离子加入量的摩尔比为Ca/P = 1/1 ~ 2/1；
步骤S1-4、持续搅拌步骤S1-3所得溶液，缓慢滴加NaOH溶液至混合体系pH = 6 ~ 8，当pH =
5 ~ 6时，混合体系开始出现沉淀，当pH = 7时，混合体系出现白色悬浊液；
步骤S1-5、将步骤S1-4所得混合体系静置24 ~ 120小时，分离出沉淀并洗去杂质离子，随后对混合体系进行浓缩，直至获得固液比为0.03
~ 0.06 g/mL的矿化胶原胶冻。
步骤S2、矿化胶原的灌模及冷冻干燥，具体包括：
步骤S2-1、量取一定量步骤S1-5获得的矿化胶原胶冻填入模具中并铺平，根据所制备矿化胶原人工骨膜的厚度，使得模具上每cm2装填的矿化胶原胶冻中含有固体0.006 ~ 0.032 g；
步骤S2-2、将步骤S2-1灌模后的矿化胶原胶冻进行充分冷冻干燥，获得矿化胶原海绵。
步骤S3、矿化胶原的交联，具体包括：
步骤S3-1、配制0.005
~ 0.25 wt%的戊二醛的乙醇溶液作为交联剂；
步骤S3-2、将步骤S2-2获得的矿化胶原海绵浸泡于步骤S3-1配制的交联剂溶液中24 ~ 48小时，进行交联；
步骤S3-3、将步骤S3-2获得的矿化胶原海绵从交联剂溶液中取出，置于层析柱中，以流动的纯水洗涤48 ~ 72小时，以除去残留的交联剂；
步骤S3-4、将步骤S3-3获得的矿化胶原海绵进行真空干燥或者冷冻干燥，获得交联的矿化胶原海绵。
步骤S4、矿化胶原膜的成型，具体包括：
步骤S4-1、将步骤S3-4获得的交联的矿化胶原海绵置于辊压机上，施加8 ~ 20 MPa的压力，并保压5 ~ 20秒，获得矿化胶原膜；
步骤S4-2、根据临床需求对步骤S4-1获得的矿化胶原膜进行切割、修剪，获得矿化胶原人工骨膜。
其中，步骤S1-5所述分离出沉淀并洗去杂质离子的过程可以采用离心的方法，也可以采用抽滤、超滤、透析等膜分离技术进行；所述浓缩可以采用离心的方法，也可以采用抽滤、超滤、透析等膜分离技术进行，也可以采用低温真空干燥的方法进行。当采用透析方法进行浓缩时，包括以下步骤：
步骤I、测定洗涤后混合体系沉淀的渗透压π1，然后将该混合体系沉淀置于截留分子量为10,000 ~ 20,000的透析袋中，将透析袋端口密封；
步骤II、将透析袋置于渗透压为π2的溶液D（如1,000,000分子量聚环氧乙烷的水溶液）中进行透析，其中π2 > π1；
步骤III、记录透析袋刚放入溶液D时π2的下降变化率为r0，监控透析过程中π2的变化，当π2的下降变化率小于r0/10时更换透析袋外的溶液D，并重新测定透析袋内的渗透压π1；
步骤IV、重复步骤II和III，直到透析袋内获得目标浓度的矿化胶原胶冻。
其中，步骤S2-2中，灌模后的模具在冷冻干燥的预冻步骤中必须使模具底面处于水平状态，以免冷冻干燥后得到的矿化胶原海绵厚度不均匀。
其中，步骤S3-3的交联剂去除过程除了水洗，也可以采用乙醇洗，或者水洗和乙醇洗相结合的方法。
实施本发明，可以获得与天然骨膜物质组成和微观及宏观结构均高度一致的矿化胶原人工骨膜。该人工骨膜适用于骨缺损修复中骨膜的替代和修复，可以在修复过程中将其它植骨材料限制在骨缺损部位，避免植骨材料脱出及肌肉、脂肪等组织被挤压进入骨缺损部位中，影响修复效果。该人工骨膜的孔隙结构有利于血管的再生和营养物质的输送，从而有益于骨缺损的修复。由于矿化胶原人工骨膜由纳米钙磷盐和胶原纤维组成，因此该人工骨膜在体内可随骨组织及骨膜的再生而逐渐被降解。总而言之，本发明所提供的矿化胶原人工骨膜具备高度仿生性，填补了目前临床上骨膜替代和修复材料的一大空白，具有广阔的应用前景。
附图说明
图1为本发明的矿化胶原人工骨膜的制备方法流程图；
图2为本发明的矿化胶原人工骨膜产品照片；
图3为本发明的矿化胶原人工骨膜与天然骨膜的X射线衍射图谱对比。
具体实施方式
为了更好的说明本发明的内容，下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例
1
，
30 mm
×
25 mm
×
0.25 mm
人工骨膜的制备
图1所示为本发明矿化胶原人工骨膜的制备方法流程图。根据图1所示步骤，长30 mm、宽25 mm、厚0.25 mm的矿化胶原人工骨膜的制备步骤为：
步骤S1-1、将1 g胶原溶于2 L浓度为0.5 mol/L的醋酸溶液，配制成胶原的酸溶液；
步骤S1-2、持续搅拌步骤S1-1所得溶液，缓慢滴加30 mL浓度为0.2 mol/L的CaCl2溶液；
步骤S1-3、持续搅拌步骤S1-2所得溶液，缓慢滴加30 mL浓度为0.12 mol/L的Na2HPO4溶液；
步骤S1-4、持续搅拌步骤S1-3所得溶液，缓慢滴加0.5 mol/L的NaOH溶液至混合体系pH = 7；
步骤S1-5、将步骤S1-4所得混合体系静置48小时，过滤出沉淀，并用纯水离心洗涤5次，随后采用离心的方法进行浓缩，至混合体系总体积为25 mL时停止浓缩，获得矿化胶原胶冻；
步骤S2-1、量取2.6 mL步骤S1-5获得的矿化胶原胶冻填入长33 mm、宽27 mm的模具中并铺平；
步骤S2-2、将步骤S2-1灌模后的矿化胶原胶冻进行充分冷冻干燥，获得矿化胶原海绵；
步骤S3-1、配制0.1
wt%的戊二醛的乙醇溶液作为交联剂；
步骤S3-2、将步骤S2-2获得的矿化胶原海绵浸泡于步骤S3-1配制的交联剂溶液中48小时，进行交联；
步骤S3-3、将步骤S3-2获得的矿化胶原海绵从交联剂溶液中取出，置于层析柱中，以流动的纯水洗涤72小时，以除去残留的交联剂；
步骤S3-4、将步骤S3-3获得的矿化胶原海绵进行冷冻干燥，获得交联的矿化胶原海绵；
步骤S4-1、将步骤S3-4获得的交联的矿化胶原海绵置于辊压机上，施加10 MPa的压力，并保压10秒，获得矿化胶原膜；
步骤S4-2、根据临床需求对步骤S4-1获得的矿化胶原膜进行切割、修剪，获得矿化胶原人工骨膜。
经灼烧实验检测，实施例1所获得的矿化胶原人工骨膜中胶原与钙磷盐的质量比为3:1；经ICP-MS测定，钙磷盐中的钙元素和磷元素的摩尔比为Ca/P
= 1.62，稍低于羟基磷灰石中理论的钙磷摩尔比1.67。可知步骤S1的矿化胶原复合材料制备过程中，添加到混合体系中的钙元素和磷元素并没有完全转变成产物人工骨膜的钙磷盐，所形成钙磷盐中钙磷摩尔比也与投料比例不完全一致。这是因为步骤S1-4的矿化胶原的仿生矿化过程中，体系的pH值最终被调节为7.0，呈中性环境，因而所加入的钙元素和磷元素并未全部转变成磷酸盐，有部分钙元素和磷元素依然以离子形式存在于仿生矿化的混合体系中，并在步骤S1-5的离心洗涤过程中被除掉。同时，也有少量胶原存在于步骤S1-5所述静置之后的上清液中，并在离心洗涤过程中被除掉。由于人工骨膜的制备在空气中进行，受到CO2的影响，形成含碳酸根的钙磷盐，导致其钙磷比相对于投料的比例偏低。因此，本发明所述矿化胶原人工骨膜制备工艺的产率并不能达到100%，所获得的产品中胶原与钙磷盐的比例以及钙磷盐中的钙磷比也不能完全通过原料的投料量来确定，还需要通过对实际产物进行表征分析，指导生产中工艺参数的确定。
经检测，实施例1所获得的矿化胶原人工骨膜的孔隙率为21%。
图2所示为本发明实施例1的矿化胶原人工骨膜产品照片。可以看到该人工骨膜厚度均一，表面平整，并有一定的粗糙度，有利于新生骨膜组织中成纤维细胞的贴附和增殖。
图3所示为本发明实施例1的矿化胶原人工骨膜与天然骨膜的X射线衍射图谱对比。可以看到，本发明的矿化胶原人工骨膜与天然骨膜的物相组成高度一致，其中无机成分的物相均为羟基磷灰石。根据X射线衍射结果计算，矿化胶原人工骨膜中的羟基磷灰石的平均粒径为100 nm。
实施例
2
，
50 mm
×
20 mm
×
0.4 mm
人工骨膜的制备
根据图1所示步骤，长50 mm、宽20 mm、厚0.4 mm的矿化胶原人工骨膜的制备步骤为：
步骤S1-1、将1 g胶原溶于1 L浓度为1 mol/L的醋酸溶液，配制成胶原的酸溶液；
步骤S1-2、持续搅拌步骤S1-1所得溶液，缓慢滴加100 mL浓度为0.05 mol/L的CaCl2溶液；
步骤S1-3、持续搅拌步骤S1-2所得溶液，缓慢滴加100 mL浓度为0.03 mol/L的Na2HPO4溶液；
步骤S1-4、持续搅拌步骤S1-3所得溶液，缓慢滴加0.5 mol/L的NaOH溶液至混合体系pH = 7；
步骤S1-5、将步骤S1-4所得混合体系静置60小时，过滤出沉淀，并用纯水离心洗涤5次，随后采用低温真空干燥的方法进行浓缩，至混合体系总体积为40 mL时停止浓缩，获得矿化胶原胶冻；
步骤S2-1、量取11 mL步骤S1-5获得的矿化胶原胶冻填入长52 mm、宽27 mm的模具中并铺平；
步骤S2-2、将步骤S2-1灌模后的矿化胶原胶冻进行充分冷冻干燥，获得矿化胶原海绵；
步骤S3-1、配制0.05
wt%的戊二醛的乙醇溶液作为交联剂；
步骤S3-2、将步骤S2-2获得的矿化胶原海绵浸泡于步骤S3-1配制的交联剂溶液中48小时，进行交联；
步骤S3-3、将步骤S3-2获得的矿化胶原海绵从交联剂溶液中取出，置于层析柱中，以流动的纯水和无水乙醇交替洗涤共72小时，以除去残留的交联剂；
步骤S3-4、将步骤S3-3获得的矿化胶原海绵进行冷冻干燥，获得交联的矿化胶原海绵；
步骤S4-1、将步骤S3-4获得的交联的矿化胶原海绵置于辊压机上，施加16 MPa的压力，并保压20秒，获得矿化胶原膜；
步骤S4-2、根据临床需求对步骤S4-1获得的矿化胶原膜进行切割、修剪，获得矿化胶原人工骨膜。
经检测，实施例2所获得的矿化胶原人工骨膜中胶原与钙磷盐的质量比为2.6:1，钙磷盐中的钙元素和磷元素的摩尔比为Ca/P = 1.63，人工骨膜的孔隙率为12%。
实施例
3
，
30 mm
×
20 mm
×
0.2 mm
人工骨膜的制备
根据图1所示步骤，长30 mm、宽20 mm、厚0.2 mm的矿化胶原人工骨膜的制备步骤为：
步骤S1-1、将2 g胶原溶于5 L浓度为0.25 mol/L的醋酸溶液，配制成胶原的酸溶液；
步骤S1-2、持续搅拌步骤S1-1所得溶液，缓慢滴加50 mL浓度为0.15 mol/L的CaCl2溶液；
步骤S1-3、持续搅拌步骤S1-2所得溶液，缓慢滴加50 mL浓度为0.1 mol/L的Na2HPO4溶液；
步骤S1-4、持续搅拌步骤S1-3所得溶液，缓慢滴加0.5 mol/L的NaOH溶液至混合体系pH = 7；
步骤S1-5、将步骤S1-4所得混合体系静置72小时，过滤出沉淀，并用纯水离心洗涤5次，随后采用离心的方法进行浓缩，至混合体系总体积为50 mL时停止浓缩，获得矿化胶原胶冻；
步骤S2-1、量取1.8 mL步骤S1-5获得的矿化胶原胶冻填入长33 mm、宽22 mm的模具中并铺平；
步骤S2-2、将步骤S2-1灌模后的矿化胶原胶冻进行充分冷冻干燥，获得矿化胶原海绵；
步骤S3-1、配制0.16
wt%的戊二醛的乙醇溶液作为交联剂；
步骤S3-2、将步骤S2-2获得的矿化胶原海绵浸泡于步骤S3-1配制的交联剂溶液中36小时，进行交联；
步骤S3-3、将步骤S3-2获得的矿化胶原海绵从交联剂溶液中取出，置于层析柱中，以流动的纯水洗涤60小时，以除去残留的交联剂；
步骤S3-4、将步骤S3-3获得的矿化胶原海绵进行冷冻干燥，获得交联的矿化胶原海绵；
步骤S4-1、将步骤S3-4获得的交联的矿化胶原海绵置于辊压机上，施加12 MPa的压力，并保压15秒，获得矿化胶原膜；
步骤S4-2、根据临床需求对步骤S4-1获得的矿化胶原膜进行切割、修剪，获得矿化胶原人工骨膜。
经检测，实施例3所获得的矿化胶原人工骨膜中胶原与钙磷盐的质量比为4.1:1，钙磷盐中的钙元素和磷元素的摩尔比为Ca/P = 1.48，人工骨膜的孔隙率为20%。
Claims (10)
1.一种矿化胶原人工骨膜的制备方法，包括以下操作步骤：
步骤S1、矿化胶原仿生复合材料制备，具体包括：
步骤S1-1、将胶原溶于盐酸、硝酸或醋酸中的任何一种，配制成胶原的酸溶液，其中胶原浓度为5.0×10-5～5.0×10-3g/mL；
步骤S1-2、持续搅拌步骤S1-1所得溶液，缓慢滴加含钙离子的溶液，钙离子的加入量为每克胶原对应加入钙离子0.002～0.01mol；
步骤S1-3、持续搅拌步骤S1-2所得溶液，缓慢滴加含磷酸根离子的溶液，磷酸根离子的加入量与步骤S1-2中钙离子加入量的摩尔比为Ca/P＝1/1～2/1；
步骤S1-4、持续搅拌步骤S1-3所得溶液，缓慢滴加NaOH溶液至混合体系pH＝6～8，当pH＝5～6时，混合体系开始出现沉淀，当pH＝7时，混合体系出现白色悬浊液；
步骤S1-5、将步骤S1-4所得混合体系静置24～120小时，分离出沉淀并洗去杂质离子，随后对混合体系进行浓缩，直至获得固液比为0.03～0.06g/mL的矿化胶原胶冻；
步骤S2、矿化胶原的灌模及冷冻干燥，具体包括：
步骤S2-1、量取一定量步骤S1-5获得的矿化胶原胶冻填入模具中并铺平，根据所制备矿化胶原人工骨膜的厚度，使得模具上每cm2装填的矿化胶原胶冻中含有固体0.006～0.032g；
步骤S2-2、将步骤S2-1灌模后的矿化胶原胶冻进行充分冷冻干燥，获得矿化胶原海绵；
步骤S3、矿化胶原的交联，具体包括：
步骤S3-1、配制0.005～0.25wt％的戊二醛的乙醇溶液作为交联剂；
步骤S3-2、将步骤S2-2获得的矿化胶原海绵浸泡于步骤S3-1配制的交联剂溶液中24～48小时，进行交联；
步骤S3-3、将步骤S3-2获得的矿化胶原海绵从交联剂溶液中取出，置于层析柱中，以流动的纯水洗涤48～72小时，以除去残留的交联剂；
步骤S3-4、将步骤S3-3获得的矿化胶原海绵进行真空干燥或者冷冻干燥，获得交联的矿化胶原海绵；
步骤S4、矿化胶原膜的成型，具体包括：
步骤S4-1、将步骤S3-4获得的交联的矿化胶原海绵置于辊压机上，施加8～20MPa的压力，并保压5～20秒，获得矿化胶原膜；
步骤S4-2、根据临床需求对步骤S4-1获得的矿化胶原膜进行切割、修剪，获得矿化胶原人工骨膜。
2.权利要求1所述一种矿化胶原人工骨膜的制备方法，其特征在于，步骤S1-5所述分离出沉淀并洗去杂质离子的过程包括采用离心的方法，或者采用抽滤、超滤或透析的膜分离技术进行；所述浓缩包括采用离心的方法，或者采用抽滤、超滤或透析的膜分离技术，或者采用低温真空干燥的方法进行。
3.权利要求2所述一种矿化胶原人工骨膜的制备方法，其特征在于，当采用透析方法进行浓缩时，包括以下步骤：
步骤I、测定洗涤后混合体系沉淀的渗透压π1，然后将该混合体系沉淀置于截留分子量为10,000～20,000的透析袋中，将透析袋端口密封；
步骤II、将透析袋置于渗透压为π2的溶液D中进行透析，其中π2>π1；
步骤III、记录透析袋刚放入溶液D时π2的下降变化率为r0，监控透析过程中π2的变化，当π2的下降变化率小于r0/10时更换透析袋外的溶液D，并重新测定透析袋内的渗透压π1；
步骤IV、重复步骤II和III，直到透析袋内获得目标浓度的矿化胶原胶冻。
4.权利要求1所述一种矿化胶原人工骨膜的制备方法，其特征在于，步骤S2-2中，灌模后的模具在冷冻干燥的预冻步骤中必须使模具底面处于水平状态，以免冷冻干燥后得到的矿化胶原海绵厚度不均匀。
5.权利要求1所述一种矿化胶原人工骨膜的制备方法，其特征在于，步骤S3-3的交联剂去除的方法包括水洗、乙醇洗、水洗和乙醇洗相结合的方法。
6.一种矿化胶原人工骨膜，其特征在于，采用权利要求1-5中任一项所述的方法制备，且该人工骨膜在宏观上呈扁平膜状结构，厚度0.1～0.5mm，具有一定的孔隙结构，孔隙率为10％～30％；在微观结构上，该人工骨膜的基 本结构单元为有序排列的纳米钙磷盐与胶原纤维。
7.权利要求6所述的一种矿化胶原人工骨膜，其特征在于，该矿化胶原人工骨膜可自由弯曲和折叠。
8.权利要求6所述的一种矿化胶原人工骨膜，其特征在于，该矿化胶原人工骨膜中胶原与钙磷盐的质量比为2:1～5:1。
9.权利要求6所述的一种矿化胶原人工骨膜，其特征在于，所述纳米钙磷盐的粒径为20～200nm，钙元素和磷元素的摩尔比为1/1～2/1。
10.权利要求9所述的一种矿化胶原人工骨膜，其特征在于，所述纳米钙磷盐为纳米羟基磷灰石，粒径为20～200nm。
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|---|---|---|---|---|
| CN104367402B (zh) * | 2014-11-12 | 2017-01-25 | 杨述华 | 一种自稳型颈椎椎间融合器及其制造模具和制造方法 |
| CN105327394A (zh) * | 2015-09-30 | 2016-02-17 | 王松灵 | 一种矿化胶原基生物牙根支架材料及其制备方法 |
| CN105536061A (zh) * | 2015-09-30 | 2016-05-04 | 王松灵 | 含仿生牙周膜的生物牙根支架/细胞/膜片复合体及其组织工程构建方法 |
| CN105457097A (zh) * | 2015-11-12 | 2016-04-06 | 谢宝钢 | 一种可注射矿化胶原骨修复材料及制备方法 |
| CN107952115B (zh) * | 2016-10-17 | 2021-10-26 | 北京湃生生物科技有限公司 | 一种仿生生物矿化人工骨修复材料及其制备方法与应用 |
| CN106620898A (zh) * | 2017-01-13 | 2017-05-10 | 北京奥精医药科技有限公司 | 一种高分子基引导组织再生膜及其制备方法和应用 |
| CA3112625A1 (en) * | 2018-09-14 | 2020-03-19 | Orthocell Limited | Artificial periosteum for delivery of bone active agents |
| CN109323910B (zh) * | 2018-12-03 | 2021-01-08 | 徐州市中心医院 | 一种高纯度低密度脂蛋白的制备方法 |
| CN110420359B (zh) * | 2019-08-07 | 2021-11-19 | 北京奥精医疗器械有限责任公司 | 一种引导组织再生膜及其制备方法 |
| CN110368525B (zh) * | 2019-09-03 | 2021-11-23 | 山东奥精生物科技有限公司 | 一种用于附着龈重建的口腔膜及其制备方法 |
| CN112546299B (zh) * | 2020-12-18 | 2022-07-29 | 中国人民解放军总医院第八医学中心 | 一种3d打印的人工骨膜、人工骨、人工骨骼及其制备方法 |
| CN112972763A (zh) * | 2021-02-25 | 2021-06-18 | 中国科学院长春应用化学研究所 | 一种表面包被矿化细胞外基质的peek多孔微球、其制备方法及应用 |
| CN113786516B (zh) * | 2021-09-30 | 2022-05-24 | 华南理工大学 | 一种PCL/Col/MC梯度三层人工骨膜及其制备方法与应用 |
| CN114010840B (zh) * | 2021-11-16 | 2022-09-16 | 清华大学 | 一种膜的压合方法 |
| CN113913961B (zh) * | 2021-11-16 | 2023-05-16 | 清华大学 | 一种活性元素掺杂的矿化胶原纳米纤维及其制备方法 |
| CN114081996A (zh) * | 2021-11-16 | 2022-02-25 | 清华大学 | 一种高矿物含量诱导骨再生纤维膜 |
| CN114404669A (zh) * | 2022-02-08 | 2022-04-29 | 博纳格科技(天津)有限公司 | 一种合成矿化胶原骨塞及其制备方法 |
| CN115554467B (zh) * | 2022-11-10 | 2024-01-30 | 奥精医疗科技股份有限公司 | 一种颅骨修复材料及其制备方法 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101229392A (zh) * | 2007-01-24 | 2008-07-30 | 张立海 | 反相结晶胶原-羟基磷灰石骨修复材料及其制备方法 |
| CN102085392A (zh) * | 2011-01-28 | 2011-06-08 | 成都维德医疗器械有限责任公司 | 纳米钙磷盐/胶原复合支架及其制备方法与应用 |
| CN103071190A (zh) * | 2013-01-25 | 2013-05-01 | 广州华美康联生物科技有限公司 | 一种组织引导再生用胶原基复合生物膜的制备方法 |
-
2014
- 2014-06-19 CN CN201410275022.9A patent/CN104096268B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101229392A (zh) * | 2007-01-24 | 2008-07-30 | 张立海 | 反相结晶胶原-羟基磷灰石骨修复材料及其制备方法 |
| CN102085392A (zh) * | 2011-01-28 | 2011-06-08 | 成都维德医疗器械有限责任公司 | 纳米钙磷盐/胶原复合支架及其制备方法与应用 |
| CN103071190A (zh) * | 2013-01-25 | 2013-05-01 | 广州华美康联生物科技有限公司 | 一种组织引导再生用胶原基复合生物膜的制备方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 纳米羟基磷灰石复合胶原材料骨膜下引导成骨及可吸收性的研究;刘冰 等;《实用口腔医学杂志》;20051130;第21卷(第6期);第835-837页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
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