CN104032006A - 单个金纳米颗粒表面等离子共振探针及其制备方法 - Google Patents
单个金纳米颗粒表面等离子共振探针及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104032006A CN104032006A CN201410259872.XA CN201410259872A CN104032006A CN 104032006 A CN104032006 A CN 104032006A CN 201410259872 A CN201410259872 A CN 201410259872A CN 104032006 A CN104032006 A CN 104032006A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- gold nano
- nano grain
- probe
- solution
- gold
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6813—Hybridisation assays
- C12Q1/6816—Hybridisation assays characterised by the detection means
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种单个金纳米颗粒表面等离子共振探针及其制备方法，首先利用柠檬酸钠还原氯金酸得到金种子，将得到的金种子溶液稀释后依次加入盐酸羟胺和氯金酸溶液生长得到球形金纳米颗粒；然后，将球形金纳米颗粒均匀固定于清洗干净的ITO玻璃基底表面，制得到金纳米颗粒SPR芯片；最后将发夹形特定序列的单链DNA探针分子通过金硫共价键作用修饰固定在制得的SPR芯片上的金纳米颗粒表面，得到单个金纳米颗粒表面等离子共振探针。所述球形金纳米颗粒的粒径直径在40~90nm之间，散射光谱峰位于540~600nm，该探针的检测限可低于3nM，结合SPR技术在动态检测肺癌核酸标志物方面有良好的效果。
Description
技术领域
本发明涉及表面等离子体共振探针，具体涉及一种单个金纳米颗粒表面等离子共振探针及其制备方法。
背景技术
肺癌是世界范围内最常见、致死人数最多的肺原发性恶性肿瘤，并且近三十年来许多国家报道其发病率明显增高。因此早期诊断肺癌具有非常重要的意义。常用的肿瘤诊断手段包括痰细胞和胸部X线造影检查、CT、核磁共振、PCR、B超、红外扫描等。然而早期患者症状不典型或者没有自觉症状导致诊断率低，同时传统的肺癌筛查方法过程痛苦、耗资大，使得高危人群的依从性较差。因此众多学者致力于肺癌标志物进行早期诊断。
在肺癌发生的早期，很多肺癌标志物可以反映肿瘤的存在，包括胚胎抗原（CEA）、细胞角蛋白19降解片段(cyfra21-1)、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、糖类抗原（CA125等）、组织多肽特异性抗原（TPS）、乳酸脱氢酶（LDH）、基质金属蛋白酶（MMPs）、以及核酸标志物MicroRNA（如miR-29，miR-202，miR-203，miR-205等）。
近年来，基于纳米材料的生物检测技术日益成熟，基于金纳米粒子的表面等离子共振生物传感器具有化学稳定性好、免标记、能够实现实时快速检测等优点，可以用于检测肿瘤早期血液样本中的低丰度核酸标志物，为实现肺癌早期检测带来了新希望。
发明内容
技术问题：本发明提供了一种基于单个金纳米颗粒表面等离子共振探针及其制备方法，以及用该探针动态检测肺癌核酸标志物的方法，并验证了该探针的普适性。
本发明技术方案如下：
单个金纳米颗粒表面等离子共振探针，为发夹形单链DNA修饰的纳米金表面等离子探针，其结构是将球形金纳米颗粒固定在预处理过的玻璃表面，发夹形的识别单链DNA通过功能基团连接到金纳米颗粒表面。
所述识别单链DNA的序列为：5’-TGA CT -X- AGT CAT TTT TTT TTT-(CH2)6-SH-3’，其中X部分序列为T CAA CAT CAG TCT GAT AAG CTA，C AGA CTC CGG TGG AAT GAA GGA或者C TAG TGG TCC TAA ACA TTT CAC。
所述单个金纳米颗粒表面等离子共振探针以金纳米球为基础，球形金纳米颗粒的粒径直径在40~90 nm之间，散射光谱峰位于540~600 nm。
本发明的单个金纳米颗粒表面等离子共振探针的制备方法包括以下步骤：
1）金种子溶液的制备：将2~8 mL40 mM柠檬酸钠溶液一次性加入到沸腾的40~60 mL0.01%HAuCl4溶液中，加热煮沸5~30 min；
2）球形金纳米颗粒的生长：在烧杯中加入10~30 mL水、0.5~5 mL步骤1）制备的金种子溶液和0.1~5 mL0.2 M盐酸羟胺溶液，以0.06 mL/min的速度加入1~10 mL0.1%HAuCl4溶液，得到金纳米溶液；
3）金纳米颗粒玻璃基底的制备：将ITO玻璃依次浸入洗洁精溶液、丙酮、无水乙醇、超纯水中超声清洗0.5~5 h，取出后用N2吹干备用；取步骤2）中的金纳米溶液0.5 mL，按比例1:1~1:50稀释后，放入ITO玻璃片，浸泡0.5~20 min后用超纯水冲洗并用N2吹干；
4）发夹形DNA分子的修饰：将步骤3）中制备的金纳米颗粒玻璃基底浸泡在1 μM的发夹形单链DNA溶液中，经摇床20~30℃摇匀5~20 h，取出玻璃基底用超纯水冲洗并用N2吹干，得到单个金纳米颗粒表面等离子共振探针。
所述的单个金纳米颗粒表面等离子共振探针在动态检测肺癌标志物中的应用。
本发明所述识别单链DNA的序列为：5’-TGA CT -X- AGT CAT TTT TTT TTT-(CH2)6-SH-3’，其中X部分序列可以根据检测对象miRNA来设计，设计为任意想检测对象miRNA的互补链，即可实现目标对象的检测。
例如：当识别单链DNA的序列为：5’-TGA CT T CAA CAT CAG TCT GAT AAG CTA AGT CAT TTT TTT TTT-(CH2)6-SH-3’时， 如SEQ.1所示，其X部分为T CAA CAT CAG TCT GAT AAG CTA，是肺癌标志物miRNA-21（序列如SEQ.4所示）的互补链，该探针可以动态检测肺癌标志物miRNA-21，具体步骤为：将修饰了单个金纳米颗粒表面等离子共振探针的ITO玻璃置于载物台上，滴上浓度为1 pM~100 μM的目标RNA溶液(miRNA-21，序列如SEQ.4所示)50~250 μL，用暗场显微镜找到单颗粒探针，利用光谱仪采集不同时间单颗粒的散射光谱，观察目标RNA与探针DNA发生杂交的过程。
当识别单链DNA的序列为：5’-TGA CT C AGA CTC CGG TGG AAT GAA GGA AGT CAT TTT TTT TTT-(CH2)6-SH-3’时， 如SEQ.2所示，其X部分为C AGA CTC CGG TGG AAT GAA GGA，是肺癌标志物miRNA-205（序列如SEQ.5所示）的互补链，该探针可以动态检测肺癌标志物miRNA-205，具体步骤为：将修饰了单个金纳米颗粒表面等离子共振探针的ITO玻璃置于载物台上，滴上浓度为1 pM~100 μM的miRNA-205溶液50~250 μL，用SPR暗场光谱显微镜拍摄不同时间单颗粒的散射光谱，观察目标RNA与探针DNA发生杂交的过程。
当识别识别单链DNA的序列为：5’-TGA CT C TAG TGG TCC TAA ACA TTT CAC AGT CAT TTT TTT TTT-(CH2)6-SH-3’时， 如SEQ.3所示，其X部分为C TAG TGG TCC TAA ACA TTT CAC，是肺癌标志物miRNA-203（序列如SEQ.6所示）的互补链，该探针可以动态检测肺癌标志物miRNA-203，具体步骤为：将修饰了单个金纳米颗粒表面等离子共振探针的ITO玻璃置于载物台上，滴上浓度为1 pM~100 μM的miRNA-203溶液50~250 μL，用SPR暗场光谱显微镜拍摄不同时间单颗粒的散射光谱，观察目标RNA与探针DNA发生杂交的过程。
有益效果：本发明的单个金纳米颗粒表面等离子共振探针具有结构简单、制作方便等优点，并且具有良好的监测性能，根据实验结果可计算出该探针的检测限可低于3 nM，结合SPR技术在动态检测肺癌核酸标志物方面有良好的效果，实现了对肺癌标志物的实时监测，同时具有良好的普适性，对其他miRNA同样适用。
附图说明
图1是探针结构及识别原理图。
图2是金种子溶液和金纳米球溶液的紫外光谱图。
图3是金纳米球的TEM图。
图4是纳米金传感器暗场彩照(a)与原位SEM图像(b)以及单个金纳米颗粒SEM放大图像(c)。
图5是采用实施例1制备的单个金纳米颗粒表面等离子共振探针进行瑞利散射光谱随时间的变化图(a)，0-120min局部放大图(b)。
图6是采用实施例1制备的单个金纳米颗粒表面等离子共振探针监测不同浓度miRNA-21结合动力学过程。
图7是采用本发明制备的单个金纳米颗粒表面等离子共振探针对miRNA-21检测的浓度线性曲线。
具体实施方式
为了更好地理解本发明的内容，下面将结合实施例和附图来进一步阐述本发明。
probe DNA(21): 5’-TGA CTT CAA CAT CAG TCT GAT AAG CTA AGT CAT TTT TTT TTT-(CH2)6-SH-3’ SEQ.1。
probe DNA(205): 5’-TGA CTC AGA CTC CGG TGG AAT GAA GGAAGT CAT TTT TTT TTT-(CH2)6-SH-3’ SEQ.2。
probe DNA(203): 5’-TGA CTC TAG TGG TCC TAA ACA TTT CAC AGT CAT TTT TTT TTT-(CH2)6-SH-3’ SEQ.3。
miRNA-21: 5’-UAG CUU AUC AGA CUG AUG UUG A-3’ SEQ.4。
miRNA-205: 5’-UCC UUC AUU CCA CCG GAG UCU G-3’ SEQ.5。
miRNA-203: 5’-GUG AAA UGU UUA GGA CCA CUA G-3’ SEQ.6。
以上DNA和RNA序列均从上海皓嘉科技发展有限公司（南京分公司）购买。
探针DNA可形成发夹形结构，序列中下划线部分可与对应的目标RNA互补配对。
实施例1
单个金纳米颗粒表面等离子共振探针的制备，具体步骤如下：
1）20 nm金种子溶液的制备：将5 mL40 mM柠檬酸钠溶液快速加入到沸腾的50 mL0.01%HAuCl4溶液中（百分比为质量百分比，下同），加热煮沸20 min；
2）球形金纳米颗粒的生长：在烧杯中加入20 mL水、1 mL金种子溶液和0.5 mL0.2 M盐酸羟胺溶液，以0.06 mL/min的速度加入3.5 mL0.1%HAuCl4溶液；
3）纳米金玻璃基底的制备：将ITO玻璃依次浸入洗洁精溶液、丙酮、无水乙醇、超纯水中超声清洗1 h，取出后用N2吹干备用；取步骤2）中的金纳米溶液0.5 mL，按比例1:20稀释后，放入ITO玻璃片，浸泡1 min后用超纯水冲洗并用N2吹干；
4）发夹形DNA的分子的修饰：将步骤3）中制备的金纳米颗粒玻璃基底浸泡在1 μM的识别单链DNA (probe DNA(21)，SEQ.1)溶液中，经摇床25℃摇匀13 h，取出玻璃基底用超纯水冲洗并用N2吹干。
上述制备得到的单个金纳米颗粒表面等离子共振探针，将球形金纳米颗粒固定在预处理过的玻璃表面，发夹形识别单链DNA通过功能基团连接到球形金纳米颗粒表面，球形金纳米颗粒通过紫外可见光谱仪（图2）和透射电镜（图3）进行表征，结果显示金纳米颗粒的平均粒径在75 nm左右，散射光谱峰位于570 nm左右。
实施例2
利用实施例1制备的单个金纳米颗粒表面等离子共振探针进行动态检测肺癌标志物，具体步骤如下：
1）将上述制备的单个金纳米颗粒表面等离子共振探针的ITO玻璃置于载物台上，滴上浓度为20 μM的miRNA-21溶液100 μL，用暗场显微镜找到单颗粒探针，利用光谱仪采集不同时间单颗粒的散射光谱，观察目标RNA与探针DNA发生杂交的过程，miRNA-21与探针DNA杂交过程140分钟内各性能参数见表1。
表1：
| 时间/min | 散射峰值/nm | 红移量/nm |
| 0 | 567.113 | 0 |
| 7 | 567.949 | 0.836 |
| 12 | 568.576 | 1.463 |
| 18 | 568.785 | 1.672 |
| 20 | 568.994 | 1.881 |
| 22 | 568.785 | 1.672 |
| 25 | 568.785 | 1.672 |
| 30 | 569.831 | 2.718 |
| 32 | 568.576 | 1.463 |
| 40 | 569.621 | 2.508 |
| 42 | 569.412 | 2.299 |
| 72 | 569.203 | 2.09 |
| 79 | 568.994 | 1.881 |
| 97 | 568.994 | 1.881 |
| 102 | 569.621 | 2.508 |
| 110 | 568.576 | 1.463 |
| 114 | 569.621 | 2.508 |
| 119 | 569.203 | 2.09 |
| 127 | 569.831 | 2.718 |
| 132 | 569.203 | 2.09 |
| 138 | 569.621 | 2.508 |
由表1可知，单个金纳米颗粒表面等离子共振探针可以有效监测肺癌标志物miRNA-21与互补DNA的结合过程，且具有简便高效的特点。
2）将修饰了单个金纳米颗粒表面等离子共振探针的ITO玻璃置于载物台上，用暗场显微镜找到单颗粒探针，拍摄其暗场显微镜下的彩色照片，并利用SEM拍摄其反应前后的原位照片。
结果显示，单个金纳米颗粒等离子共振峰随着时间的推移逐渐发生红移（图5），这一现象表明探针DNA与miRNA-21在单个金纳米颗粒的表面发生杂交反应，如图6所示，在反应初期红移量快速增加，随后逐渐达到峰值，当时间达到2 h时，红移量达到2.1 nm；反应前后的SEM照片显示（图4），单个金纳米颗粒在反应前后其形貌没有变化，可适用于该项研究。
实施例3
利用实施例1制备的单个金纳米颗粒表面等离子共振探针进行动态检测肺癌标志物，将上述制备的修饰了单个金纳米颗粒表面等离子共振探针的ITO玻璃置于载物台上，滴上不同浓度的miRNA-21溶液100 μL，用暗场显微镜找到单颗粒探针，利用光谱仪采集不同时间单颗粒的散射光谱，观察目标RNA与探针DNA发生杂交的过程，浓度参数及结果见表2。
表2：
由表2可知，结合不同浓度的miRNA-21后的单颗粒纳米金表面等离子共振散射光谱都有红移现象发生，并且随着目标RNA（miRNA-21）浓度的降低而减少。
实施例4
单个金纳米颗粒表面等离子共振探针的制备，具体步骤如下：
1）20 nm金种子溶液的制备：将5 mL40 mM柠檬酸钠溶液快速加入到沸腾的50 mL0.01%HAuCl4溶液中，加热煮沸20 min；
2）球形金纳米颗粒的生长：在烧杯中加入20 mL水、1 mL金种子溶液和0.5 mL0.2 M盐酸羟胺溶液，以0.06 mL/min的速度加入3.5 mL0.1%HAuCl4溶液；
3）纳米金玻璃基底的制备：将ITO玻璃依次浸入洗洁精溶液、丙酮、无水乙醇、超纯水中超声清洗1 h，取出后用N2吹干备用；取步骤2）中的金纳米溶液0.5 mL，按比例1:20稀释后，放入ITO玻璃片，浸泡1 min后用超纯水冲洗并用N2吹干；
4）发夹形DNA的分子的修饰：将步骤3）中制备的金纳米颗粒玻璃基底浸泡在1 μM的识别单链DNA (probe DNA(205)，SEQ.2)溶液中，经摇床25℃摇匀13 h，取出玻璃基底用超纯水冲洗并用N2吹干。
利用利用上述探针进行动态检测肺癌标志物miRNA-205，具体步骤如下：
将修饰了单个金纳米颗粒表面等离子共振探针的ITO玻璃置于载物台上，滴上浓度为1 μM的miRNA-205溶液100 μL，用暗场显微镜找到单颗粒探针，利用光谱仪采集不同时间单颗粒的散射光谱，观察目标RNA与探针DNA发生杂交的过程。
结果显示，单个金纳米颗粒等离子共振峰随着时间的推移逐渐发生红移，这一现象表明探针DNA与miRNA-205在单个金纳米颗粒的表面发生杂交反应，当时间达到2 h时，红移量达到1.7 nm。
实施例5
本实施例与实施例4的区别仅在于步骤4）时，玻璃基底浸泡在1 μM的识别单链DNA (probe DNA(203)，SEQ.3)溶液中，其他条件均一致。
制备得到的探针可以进行动态检测肺癌标志物miRNA-203，具体步骤如下：
将修饰了单个金纳米颗粒表面等离子共振探针的ITO玻璃置于载物台上，滴上浓度为1 μM的miRNA-203溶液100 μL，用暗场显微镜找到单颗粒探针，利用光谱仪采集不同时间单颗粒的散射光谱，观察目标RNA与探针DNA发生杂交的过程。
结果显示，单个金纳米颗粒等离子共振峰随着时间的推移逐渐发生红移，这一现象表明探针DNA与miRNA-205在单个金纳米颗粒的表面发生杂交反应，当时间达到2 h时，红移量达到1.6 nm。
序列表
<110> 南京邮电大学
<120> 单个金纳米颗粒表面等离子共振探针及其制备方法
<130>
<160> 6
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 42
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 1
tgacttcaac atcagtctga taagctaagt catttttttt tt 42
<210> 2
<211> 42
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 2
tgactcagac tccggtggaa tgaaggaagt catttttttt tt 42
<210> 3
<211> 42
<212> DNA
<213> 人工序列
<400> 3
tgactctagt ggtcctaaac atttcacagt catttttttt tt 42
<210> 4
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<400> 4
uagcuuauca gacugauguu ga 22
<210> 5
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<400> 5
uccuucauuc caccggaguc ug 22
<210> 6
<211> 22
<212> RNA
<213> 人工序列
<400> 6
gugaaauguu uaggaccacu ag 22
Claims (5)
1.单个金纳米颗粒表面等离子共振探针，其特征在于：该探针是将球形金纳米颗粒固定在预处理过的玻璃表面，识别单链DNA通过功能基团连接到球形金纳米颗粒表面，所述识别单链DNA为发夹形结构。
2.根据权利要求1所述的单个金纳米颗粒表面等离子共振探针，其特征在于：所述识别单链DNA的序列为：5’-TGA CT -X- AGT CAT TTT TTT TTT-(CH2)6-SH-3’，其中X部分序列为T CAA CAT CAG TCT GAT AAG CTA，C AGA CTC CGG TGG AAT GAA GGA或者C TAG TGG TCC TAA ACA TTT CAC。
3.根据权利要求1所述的单个金纳米颗粒表面等离子共振探针，其特征在于：所述球形金纳米颗粒的粒径直径在40~90 nm之间，散射光谱峰位于540~600 nm。
4.权利要求1、2或3所述的单个金纳米颗粒表面等离子共振探针的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
1）金种子溶液的制备：将2~8 mL 40 mM柠檬酸钠溶液加入到沸腾的40~60 mL 0.01%wt HAuCl4溶液中，加热煮沸5~30 min；
2）球形金纳米颗粒的生长：在烧杯中加入10~30 mL水、0.5~5 mL步骤1）制备的金种子溶液和0.1~5 mL 0.2 M盐酸羟胺溶液，以0.06 mL/min的速度加入1~10 mL 0.1% HAuCl4溶液，得到金纳米溶液；
3）金纳米颗粒玻璃基底的制备：将ITO玻璃依次浸入洗洁精溶液、丙酮、无水乙醇、超纯水中超声清洗0.5~5 h，取出后用N2吹干备用；取步骤2）中的金纳米溶液0.2~2 mL，按比例1:1 ~ 1:50稀释后，放入ITO玻璃片，浸泡0.5~20 min后用超纯水冲洗并用N2吹干；
4）发夹形DNA分子的修饰：将步骤3）中制备的金纳米颗粒玻璃基底浸泡在1 μM的识别单链DNA溶液中，经摇床20~30℃摇匀5~20 h，取出玻璃基底用超纯水冲洗并用N2吹干，得到单个金纳米颗粒表面等离子共振探针。
5. 权利要求1-3中任意一项所述的单个金纳米颗粒表面等离子共振探针在动态检测肺癌标志物中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410259872.XA CN104032006B (zh) | 2014-06-12 | 2014-06-12 | 单个金纳米颗粒表面等离子共振探针及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410259872.XA CN104032006B (zh) | 2014-06-12 | 2014-06-12 | 单个金纳米颗粒表面等离子共振探针及其制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104032006A true CN104032006A (zh) | 2014-09-10 |
| CN104032006B CN104032006B (zh) | 2016-03-23 |
Family
ID=51463000
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410259872.XA Active CN104032006B (zh) | 2014-06-12 | 2014-06-12 | 单个金纳米颗粒表面等离子共振探针及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104032006B (zh) |
Cited By (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104458659A (zh) * | 2014-12-11 | 2015-03-25 | 重庆医科大学 | 一种表面等离子共振传感器及其制备与应用 |
| CN104614518A (zh) * | 2015-01-26 | 2015-05-13 | 珠海丽珠试剂股份有限公司 | 一种用于快速检测的胶体金共价标记方法 |
| CN104722773A (zh) * | 2015-02-12 | 2015-06-24 | 苏州大学 | 刺形金纳米粒子的制备方法及用该方法制备的刺形金纳米粒子 |
| CN105241845A (zh) * | 2015-09-22 | 2016-01-13 | 南京邮电大学 | 一种实时监测g-四联体形成的单颗粒spr探针的制备和应用 |
| CN105648070A (zh) * | 2016-02-25 | 2016-06-08 | 青岛科技大学 | 基于酶循环放大及纳米颗粒增强spr检测核酸或细胞的方法 |
| CN105665736A (zh) * | 2016-01-12 | 2016-06-15 | 东华大学 | 一种RGD修饰树状大分子稳定的功能化金纳米星/siRNA复合物的制备方法 |
| CN108085370A (zh) * | 2017-10-27 | 2018-05-29 | 南京邮电大学 | 一种单颗粒生物探针的构建方法及其用途 |
| CN110029144A (zh) * | 2019-04-16 | 2019-07-19 | 南京邮电大学 | 一种生物传感器及制备方法和使用方法 |
| CN110133246A (zh) * | 2019-05-14 | 2019-08-16 | 江苏师范大学 | 一种单颗粒水平上的均相免疫分析方法 |
| CN110231473A (zh) * | 2019-06-17 | 2019-09-13 | 华东理工大学 | 一种基于金纳米微球等离子共振的生物标志物检测方法及其应用 |
| CN110346334A (zh) * | 2018-12-27 | 2019-10-18 | 华东理工大学 | 基于dna编码循环程序的纳米金双探针体系 |
| JP2019215314A (ja) * | 2018-06-12 | 2019-12-19 | 国立大学法人愛媛大学 | ナノ粒子の判別方法 |
| CN110646382A (zh) * | 2019-11-05 | 2020-01-03 | 上海大学 | 一种高灵敏和双选择性的ctc检测spr传感器及其制备方法 |
| CN110779884A (zh) * | 2019-11-21 | 2020-02-11 | 福建农林大学 | 一种基于dna调控金-汞合金生长的甲基汞可视化检测方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102230032A (zh) * | 2011-06-27 | 2011-11-02 | 广州弗赛生物科技有限公司 | 一种病原体核酸的等温链多重检测卡 |
| WO2012022482A1 (en) * | 2010-08-20 | 2012-02-23 | Eth Zurich | Microwell arrays for direct quantification of analytes on a flat sample |
| CN103308462A (zh) * | 2013-06-26 | 2013-09-18 | 南京邮电大学 | 银金核-卫星结构表面等离子体共振探针及其制备方法 |
| CN103344616A (zh) * | 2013-06-26 | 2013-10-09 | 南京邮电大学 | 单颗粒银纳米立方体表面等离子体共振探针及其制备方法 |
-
2014
- 2014-06-12 CN CN201410259872.XA patent/CN104032006B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012022482A1 (en) * | 2010-08-20 | 2012-02-23 | Eth Zurich | Microwell arrays for direct quantification of analytes on a flat sample |
| CN102230032A (zh) * | 2011-06-27 | 2011-11-02 | 广州弗赛生物科技有限公司 | 一种病原体核酸的等温链多重检测卡 |
| CN103308462A (zh) * | 2013-06-26 | 2013-09-18 | 南京邮电大学 | 银金核-卫星结构表面等离子体共振探针及其制备方法 |
| CN103344616A (zh) * | 2013-06-26 | 2013-10-09 | 南京邮电大学 | 单颗粒银纳米立方体表面等离子体共振探针及其制备方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| LEI SHI ET AL: "Plasmon Resonance Scattering Spectroscopy at the Single Nanoparticle Level: Real-Time Monitoring of a Click Reaction", 《ANGEW.CHEM.INT.ED》 * |
| LEI SHI ET AL: "Plasmon Resonance Scattering Spectroscopy at the Single Nanoparticle Level: Real-Time Monitoring of a Click Reaction", 《ANGEW.CHEM.INT.ED》, vol. 52, 31 December 2013 (2013-12-31) * |
| WILLIAM KONG ET AL: "Strategies for Profiling MicroRNA Expression", 《J. CELL.PHYSIOL》 * |
| YANLING HU ET AL: "Plasmonic Nanobiosensor Based on Hairpin DNA for Detection of Trace Oligonucleotides Biomarker in Cancers", 《AMERICAN CHEMICAL SOCIETY》 * |
Cited By (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104458659A (zh) * | 2014-12-11 | 2015-03-25 | 重庆医科大学 | 一种表面等离子共振传感器及其制备与应用 |
| CN104614518B (zh) * | 2015-01-26 | 2016-06-15 | 珠海丽珠试剂股份有限公司 | 一种用于快速检测的胶体金共价标记方法 |
| CN104614518A (zh) * | 2015-01-26 | 2015-05-13 | 珠海丽珠试剂股份有限公司 | 一种用于快速检测的胶体金共价标记方法 |
| CN104722773A (zh) * | 2015-02-12 | 2015-06-24 | 苏州大学 | 刺形金纳米粒子的制备方法及用该方法制备的刺形金纳米粒子 |
| CN104722773B (zh) * | 2015-02-12 | 2016-08-17 | 苏州大学 | 刺形金纳米粒子的制备方法及用该方法制备的刺形金纳米粒子 |
| CN105241845A (zh) * | 2015-09-22 | 2016-01-13 | 南京邮电大学 | 一种实时监测g-四联体形成的单颗粒spr探针的制备和应用 |
| CN105241845B (zh) * | 2015-09-22 | 2019-05-07 | 南京邮电大学 | 一种实时监测g-四联体形成的单颗粒spr钾离子探针的方法 |
| CN105665736A (zh) * | 2016-01-12 | 2016-06-15 | 东华大学 | 一种RGD修饰树状大分子稳定的功能化金纳米星/siRNA复合物的制备方法 |
| CN105648070A (zh) * | 2016-02-25 | 2016-06-08 | 青岛科技大学 | 基于酶循环放大及纳米颗粒增强spr检测核酸或细胞的方法 |
| CN108085370A (zh) * | 2017-10-27 | 2018-05-29 | 南京邮电大学 | 一种单颗粒生物探针的构建方法及其用途 |
| JP2019215314A (ja) * | 2018-06-12 | 2019-12-19 | 国立大学法人愛媛大学 | ナノ粒子の判別方法 |
| JP7209287B2 (ja) | 2018-06-12 | 2023-01-20 | 国立大学法人愛媛大学 | ナノ粒子の判別方法 |
| CN110346334B (zh) * | 2018-12-27 | 2022-02-11 | 华东理工大学 | 基于dna编码循环程序的纳米金双探针体系 |
| CN110346334A (zh) * | 2018-12-27 | 2019-10-18 | 华东理工大学 | 基于dna编码循环程序的纳米金双探针体系 |
| CN110029144A (zh) * | 2019-04-16 | 2019-07-19 | 南京邮电大学 | 一种生物传感器及制备方法和使用方法 |
| CN110133246A (zh) * | 2019-05-14 | 2019-08-16 | 江苏师范大学 | 一种单颗粒水平上的均相免疫分析方法 |
| CN110231473A (zh) * | 2019-06-17 | 2019-09-13 | 华东理工大学 | 一种基于金纳米微球等离子共振的生物标志物检测方法及其应用 |
| CN110646382A (zh) * | 2019-11-05 | 2020-01-03 | 上海大学 | 一种高灵敏和双选择性的ctc检测spr传感器及其制备方法 |
| CN110779884A (zh) * | 2019-11-21 | 2020-02-11 | 福建农林大学 | 一种基于dna调控金-汞合金生长的甲基汞可视化检测方法 |
| CN110779884B (zh) * | 2019-11-21 | 2020-12-29 | 福建农林大学 | 一种基于dna调控金-汞合金生长的甲基汞可视化检测方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104032006B (zh) | 2016-03-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104032006A (zh) | 单个金纳米颗粒表面等离子共振探针及其制备方法 | |
| Wu et al. | Ultrasensitive and simultaneous SERS detection of multiplex microRNA using fractal gold nanotags for early diagnosis and prognosis of hepatocellular carcinoma | |
| Wang et al. | An enzyme-free electrochemical biosensor based on well monodisperse Au nanorods for ultra-sensitive detection of telomerase activity | |
| Zhang et al. | Electrochemical sensors based on carbon nanomaterial used in diagnosing metabolic disease | |
| Pothipor et al. | A gold nanoparticle-dye/poly (3-aminobenzylamine)/two dimensional MoSe2/graphene oxide electrode towards label-free electrochemical biosensor for simultaneous dual-mode detection of cancer antigen 15-3 and microRNA-21 | |
| Peng et al. | Fluorescent-magnetic-catalytic nanospheres for dual-modality detection of H9N2 avian influenza virus | |
| CN108535236B (zh) | 一种基于双重放大SERS信号系统超灵敏检测miRNA的方法 | |
| CN106568936B (zh) | 基于多功能化二硫化钼的miRNA-21电化学发光免疫传感器的制备方法及其应用 | |
| CN109837326A (zh) | 基于多价捕获并放大输出信号的生物靶标分子检测方法 | |
| Shariati et al. | Ultrasensitive and easily reproducible biosensor based on novel doped MoS2 nanowires field-effect transistor in label-free approach for detection of hepatitis B virus in blood serum | |
| Shen et al. | Ultrasensitive aptasensor for isolation and detection of circulating tumor cells based on CeO2@ Ir nanorods and DNA walker | |
| CN106148315B (zh) | 一种基于壳聚糖纳米粒子的ctc捕获与纯化基底及其制备方法 | |
| CN103308462A (zh) | 银金核-卫星结构表面等离子体共振探针及其制备方法 | |
| Zhang et al. | A magnetically induced self-assembled and label-free electrochemical aptasensor based on magnetic Fe3O4/Fe2O3@ Au nanoparticles for VEGF165 protein detection | |
| CN103451182B (zh) | 裂开型核酸适配体探针及其在肿瘤细胞检测、捕获与释放中的应用方法 | |
| CN104152449B (zh) | miRNA捕获探针及其修饰电极与捕获探针互补链及其修饰碳纳米管‑金磁纳米粒复合物 | |
| Xie et al. | Stem-loop DNA-assisted silicon nanowires-based biochemical sensors with ultra-high sensitivity, specificity, and multiplexing capability | |
| Li et al. | A simple assay to amplify the electrochemical signal by the aptamer based biosensor modified with CdS hollow nanospheres | |
| CN103344616A (zh) | 单颗粒银纳米立方体表面等离子体共振探针及其制备方法 | |
| Yan et al. | Improvement of surface-enhanced Raman scattering method for single bacterial cell analysis | |
| CN107831208B (zh) | 纳米复合材料、sdm电化学适体传感器的制备方法及检测方法 | |
| CN107037221B (zh) | 一种电化学免疫传感器及其制备方法和应用 | |
| CN109536583B (zh) | 一种基于金-碳纳米球构建的microRNA检测探针及其制备方法和应用 | |
| Ding et al. | Electrochemiluminescence immunosensor for 5-hydroxymethylcytosine detection based on PAMAM-nanosilver‑nitrogen doped graphene nanocomposite | |
| Su et al. | Signal-on electrochemical aptasensor based on RGO-AuNPs and exonuclease-III with assistance of external probe for Hg2+ determination in shellfish |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| EE01 | Entry into force of recordation of patent licensing contract |
Application publication date: 20140910 Assignee: Jiangsu Nanyou IOT Technology Park Ltd. Assignor: Nanjing Post & Telecommunication Univ. Contract record no.: 2016320000209 Denomination of invention: Single gold nanoparticle surface plasmon resonance probe and preparation method thereof Granted publication date: 20160323 License type: Common License Record date: 20161111 |
|
| LICC | Enforcement, change and cancellation of record of contracts on the licence for exploitation of a patent or utility model | ||
| EC01 | Cancellation of recordation of patent licensing contract |
Assignee: Jiangsu Nanyou IOT Technology Park Ltd. Assignor: Nanjing Post & Telecommunication Univ. Contract record no.: 2016320000209 Date of cancellation: 20180116 |
|
| EC01 | Cancellation of recordation of patent licensing contract |