CN103858765A - 一种泰半夏的简单快速成苗方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种泰半夏的简易、快速成苗的方法。本发明以泰半夏的块茎为外植体，直接诱导块茎分化丛生芽，然后转移生根，待根长至1-2cm时即可进行炼苗移栽。整个成苗过程简单快速，只需55-65天左右。对所得丛生芽进行继代培养，叶片、叶柄、块茎皆可作为外植体。本发明的方法操作程序简单、培养周期短，繁殖系数高，并能彻底解决用一次成苗培养方法中不可避免的分化小块茎的玻璃化问题。
Description
技术领域
本方法属于生物技术组织培养领域，涉及一种用组织培养方式快速繁殖泰半夏的方法。
背景技术
泰半夏，又称泰兴半夏，为天南星科多年生草本植物，别名野芋头，以块茎入药。其干燥块茎为我国传统常用中药，具有燥湿化痰、降逆止呕、消痞散结的功能，近年来，也有学者研究发现，半夏还具有抗肿瘤、降血脂、抗早孕等功效。由于泰半夏属于杂草性植物，连年采挖，半夏野生资源日趋枯竭。目前，我国半夏年需求量在500-600万吨左右，而目前野生资源和人工栽培量仅能满足1/3，市场缺口很大。人工栽培种源缺乏、繁殖系数低，且病虫害感染严重，致使药材质量不稳定。而通过组织培养技术培养的半夏组培苗具有生长速度快、繁殖系数高的特点。目前已有较多应用组织培养技术繁殖半夏的报道，相关技术也较为成熟。但是以往的半夏组织培养方法中，操作程序繁多且复杂，不易进行规模推广；且使用生长调节剂种类繁多，特别是一次成苗的过程虽然简单,但是容易造成严重的玻璃化问题，大大提高了生产成本。实现泰半夏的规模化工厂化育苗生产，急需要简单易行且不易产生玻璃化的有效方法。
发明内容
本发明要解决的问题是发明一种泰半夏简单、快速成苗的方法，克服以上提到的缺点。为了实现本发明的目的，拟采用如下技术方案：
本发明涉及一种泰半夏的简单快速成苗方法，其特征在于包括如下步骤：挖取野生半夏的块茎作为外植体，对其进行清洗、消毒，接种在诱导分化培养基上培养，诱导分化培养基配方为：MS+0.5-2.0mg/L6-BA+蔗糖20-40g/L+0.6-0.9%琼脂，pH=5.6-6.0；培养条件：25（±1～2）℃，光照强度：2000-3000μmol·m-2·s-1，光照时间10-12h，诱导分化培养约45-50天左右；待小块茎苗长至2-5cm时，分离小块茎苗转接于生根培养基上，生根培养基配方为：MS+0.4-0.6mg/LNAA+蔗糖20-40g/L+0.05-0.3%AC（活性炭）+0.6-0.9%琼脂，pH=5.6-6.0；在生根培养基上培养10-15天，待根长达1-2cm时即可进行炼苗移栽。
在本发明的一个优选实施方式中，所述的清洗、消毒步骤是将块茎在超净工作台上用75%乙醇表面消毒40-60秒，然后无菌水漂洗2-4遍；再将块茎投入0.1%的HgCl2中处理10-16分钟，后无菌水漂洗5-8遍，切成0.5-0.8mm见方的小块。
在本发明的一个优选实施方式中，本发明的方法仅使用两种常规生长调节剂，从块茎外植体接种到完整的可移栽小苗周期为55-65天左右。
本发明有益效果：
应用本发明形成的方法进行泰半夏的繁殖，有4个特点：1、繁殖系数高。繁殖系数可达20-30。2、操作程序简单。本方法仅需使用两种常规生长调节剂，即可完成整个培养过程；3、培养周期短。应用本发明从块茎外植体接种到完整的可移栽小苗只需要55-65天左右。4、应用本发明能彻底解决用一次成苗培养方法中不可避免的分化小块茎的玻璃化问题。
具体实施方式：
下面通过实施例对本发明作进一步描述。
实施例1
挖取半夏地下块茎，自来水冲洗、去皮，置于洗涤剂中彻底清洗，后自来水漂洗干净，流水冲洗30min以上，预备接种。将块茎在超净工作台上用75%乙醇表面消毒50秒，然后无菌水漂洗3遍；再将块茎投入0.1%的HgCl2中处理14分钟，后无菌水漂洗5-6遍，切成0.5-0.8mm见方的小块，接种于诱导分化培养基上。诱导分化培养基配方为：MS+1.0mg/L6-BA+蔗糖30g/L+0.7%琼脂，pH=5.8；培养条件：25（±1～2）℃，光照强度：2000-3000μmol·m-2·s-1，光照时间10-12h，诱导分化培养约需45-50天左右，诱导分化率100%，
无玻璃化现象。待小块茎苗长至2-5cm时，分离小块茎苗转接于生根培养基上，生根培养基配方为：MS+0.5mg/LNAA+蔗糖30g/L+0.2%AC+0.7%琼脂，pH=5.8。在生根培养基上培养10-15天，待根长达1-2cm时即可进行炼苗移栽。
以上所述是本发明的优选实施例，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明所述原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (3)
1.一种泰半夏的简单快速成苗方法，其特征在于包括如下步骤：挖取野生半夏的块茎作为外植体，对其进行清洗、消毒，接种在诱导分化培养基上培养，诱导分化培养基配方为：MS+0.5-2.0mg/L6-BA+蔗糖20-40g/L+0.6-0.9%琼脂，pH=5.6-6.0；培养条件：25（±1～2）℃，光照强度：2000-3000μmol·m-2·s-1，光照时间10-12h，诱导分化培养约45-50天左右；待小块茎苗长至2-5cm时，分离小块茎苗转接于生根培养基上，生根培养基配方为：MS+0.2-0.6mg/LNAA+蔗糖20-40g/L+0.05-0.3%AC+0.6-0.9%琼脂，pH=5.6-6.0；在生根培养基上培养10-15天，待根长达1-2cm时即可进行炼苗移栽。
2.根据权利要求1所述的方法，所述的清洗、消毒步骤是将块茎在超净工作台上用75%乙醇表面消毒40-60秒，然后无菌水漂洗2-4遍；再将块茎投入0.1%的HgCl2中处理10-16分钟，后无菌水漂洗5-8遍，切成0.5-0.8mm见方的小块。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于所述的方法仅使用两种常规生长调节剂，从块茎外植体接种到完整的可移栽小苗周期为55-65天左右。
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