CN103749289A - 一种养生保健枸杞叶茶新品种选育方法及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种养生保健枸杞叶茶专用新品种的选育方法及其茶叶制备方法，采用压片法进行细胞学观察；利用超亲优势法、超对照优势法测定突变体叶面积、叶厚、茎粗、可食部分长度、嫩茎叶鲜重的生长优势；大区生产试验法测定新品种产量表现；病情指数法进行抗病性鉴定；半微量凯氏法测定粗蛋白含量；索氏提取法测定粗脂肪含量；原子吸收法测定钙、钾、镁、钠、磷、铜、铁、等元素含量；荧光分光光度法测定硒含量；L-8500A氨基酸分析仪测定氨基酸含量；超声提取法测定枸杞多糖、黄酮的含量；分光光度计法测定甜菜碱含量，选育的多倍体新品种生长优势强大，遗传性稳定；超高产；高抗根腐病等，营养品质、药用品质优良，生产的枸杞叶茶品质优良。

Description

一种养生保健枸杞叶茶新品种选育方法及其制备方法

技术领域

本发明属于枸杞叶茶生产技术领域，尤其涉及一种养生保健枸杞叶茶新品种的选育方法及其制备方法。

背景技术

枸杞叶是滋补强身的中草药，中医称“天精草”，其药性凉，味苦、甘，能补虚生精、清热、止渴、扶风明目。《本草纲目》写道：“枸杞叶药性苦、甘、凉，去上焦心肺客热”。《药性论》中写道：枸杞叶“甘、平，能补益精诸不足，易颜色，变白，明目，安神”。《食疗本草》中写道：枸杞叶“坚精耐老，除风，补益精骨，能益人，去虚劳。”《中华本草》载枸杞叶“味苦；甘；性凉，补虚益精；清热明目。主虚劳发热；烦渴；目赤昏痛”。《药性论》记载枸杞叶“若渴可煮作饮，代茶饮之；发热诸毒烦闷，可单煮汁解之”。上述证明，由古人开始都证实了枸杞叶是地道中药材，具有悠久的应用历史。

近年来，随着我国枸杞产业化的发展，以果用枸杞和野生枸杞为资源，采收其嫩茎叶进行枸杞叶茶开发，如宁夏枸杞叶茶的加工主要采用果用枸杞宁杞一号的嫩芽、叶，经过制茶工艺加工而成。

枸杞茶的加工技术一般采用传统的茶叶加工技术，其工艺流程为：适时采摘→清洗→萎凋→杀青→揉捻→解块→制干→包装。根据这个工艺制成的茶，茶体清澈碧绿，风味独特，口感纯正，茶味清香，是夏季清暑之佳品。枸杞叶茶不含咖啡因，具有健体安神、通便利尿的作用，老少妇孺皆宜。

目前我国枸杞叶茶生产上没有适宜的超高产、优质的专用栽培品种，大多枸杞叶茶生产以果用枸杞和野生枸杞为加工原料。果用枸杞只能在春季适量采摘嫩茎梢，每年4月20日～5月20日为枸杞叶芽最佳采制时间，由于果用枸杞以生产果实为主，过多的采摘嫩茎叶会影响果实的产量，采摘时间也不宜超过5月20日，因此使用果用枸杞生产枸杞叶茶原料，采集时间和采集产量均受到限制。野生枸杞资源越来越少，以野生枸杞资源提供枸杞叶茶生产原料潜力很小。上述两种枸杞叶茶原料生产途径，产量难于保障，障碍枸杞叶茶的产业化开发。

发明内容

本发明实施例的目的在于提供一种养生保健枸杞叶茶专用新品种的选育方法、栽培技术及枸杞叶茶制备方法，旨在解决目前我国枸杞叶茶生产上没有适宜的超高产、优质的专用栽培品种以及产量难于保障，障碍枸杞叶茶的产业化开发的问题。

本发明实施例的养生保健枸杞叶茶专用新品种的选育方法为多次诱变选育法，并形成与新品种相应的快速丰产配套栽培技术，包括以下步骤：

步骤一，从燕山山麓、环渤海湾低平原区广泛收集野生枸杞种质资源，并进行产量、营养品质、药用品质、抗病性、抗瘿螨鉴定，鉴定出高产、优质、抗白粉病、抗瘿螨病的优异种质昌选1号、昌选2号、昌选3号，其中昌选1号尤为珍贵；

步骤二，第一次诱变：室温下用0.05％秋水仙素和2％的二甲基亚砜混合水溶液间歇浸泡昌选1号种子48h，即种子先在药液中浸泡24h，取出进行有氧呼吸24h，再放入药液中浸泡24h，然后将处理的种子裸播(促进有氧呼吸)在小拱棚内，15℃～16℃(有利于根细胞分化)条件下保湿培养，直至长成幼苗，根据育种目标对M1植株进行形态学鉴定及选择，选出的优异突变体自交，在自交群体中选择2n卵子与2n精子受精形成的新一代多倍体个体，减少细胞嵌合型，增加多倍体的遗传稳定性；

步骤三，第二次诱变：将第一次诱变获得的优异突变体的种子按第一次的诱变方法进行第二次诱变，进一步改良第一次诱变突变体的产量、抗病性及品质性状；

步骤四，第三次诱变：将第二次诱变获得的优异突变体的种子按第一次的诱变方法进行第三次诱变，进一步改良第二次诱变突变体的产量、抗病性及品质性状；

步骤五，经过多代诱变选择，选育出的突变体染色体倍性优势强大，产量、抗病性、营养品质、药用品质不断得到改良，由第二次诱变群体中，选育出超高产、优质、抗病的枸杞叶茶专用新品种天精3号，第三次诱变群体中选育出超高产、优质、抗病的枸杞叶茶专用新品种天精5号；

步骤六，采用压片法进行细胞学观察；超亲优势法、超对照优势法测定多倍体生长优势；病情指数法进行抗病性鉴定；半微量凯氏法测定粗蛋白含量；索氏提取法测定粗脂肪含量；原子吸收法测定钙、钾、镁、钠、磷、铜、铁、锰、锌、钼矿质元素含量；荧光分光光度法测定硒含量；L-8500A氨基酸分析仪测定氨基酸含量；超声提取法测定枸杞多糖、黄酮的含量；分光光度计法测定甜菜碱含量；研究证明GM-3-18的花粉母细胞具有48条染色体的细胞为63.2％，24条染色体的细胞占31.5％，还有其他非整倍体的细胞，为混倍体类型，具有强大的染色体倍性优势，超高产、比对照品种增产103.7，药用成分、营养成分含量高，高抗白粉病、根腐病，对瘿螨病免疫，达到育种目标要求，将GM-3-18定名为天精3号。此外，天精5号表现更为优异。

为了增加多倍突变体的遗传稳定性，将优异突变体自交，在自交群体中选择2n卵子与2n精子受精形成的新一代多倍体个体，减少嵌合型，增加多倍体的遗传稳定性，选育出的天精3号、天精5号无性繁殖6个世代，没有发现无性分离现象，遗传性稳定。

随着新品种选育成功，进一步研究其快速丰产配套栽培技术如下：

枸杞茶园选择：选择地势平坦，有排灌条件，土壤较肥沃的沙壤、轻壤或中壤土，活土层30cm以上的地块种植；

重施有机肥：枸杞叶茶专用品种为多年生木本植物，标准化栽培模式下，扦插密度大，定植后难于再补充有机肥料，要求耕地前667m²重施有机肥20000kg，复合肥50kg，然后深耕松土；

扦插方式与密度：将一年生枝条或半木质化嫩枝剪成15cm～20cm茎段，作为插条；平整土地做成平畦，畦宽1m，畦埂宽0.5m，兼做工作道；每畦扦插5行，行株距均0.2m，人工定线开沟，将插条下端轻轻斜插入沟内，封土踩实，地上部留1cm～2cm，外露1～2个饱满芽，667m²扦插11000株，栽植后立即灌水；

打顶尖及控制采收层：茎段扦插后，在日平均温度20℃条件下，40d地上部高度达35cm时，进入采收期，结合采嫩茎叶打顶尖，促进侧芽分生，增加单位面积枝条量，采收层高度控制在35cm，对于老化的高于35cm的枝条及时回头平茬至35cm；

肥水管理：枸杞叶茶新品种嫩茎叶，富含蛋白质、矿质元素，嫩茎叶采收后，消耗大量的营养，应立即补充肥料，667m²施水溶性复合肥15kg或灌溉沼液；

中耕除草及病虫害防治：温室大棚生产枸杞叶茶原料，及时拔除杂草，防治二十八星瓢虫、负泥虫、蚜虫害虫时，采用烟雾剂杀虫；

冬季低温条件下温室管理：华北地区半地下式温室大棚能够保证枸杞叶茶新品种正常生长，极端天气时，可增设电暖气增温，并喷洒0.006％农用赤霉素促进嫩茎叶生长；

采收及储藏：采下的枸杞嫩茎叶可用于制茶，收下的枸杞嫩茎叶放入塑料袋中，在3℃～8℃条件下可安全储藏10d～15d。

本发明的另一目的在于提供一种养生保健枸杞叶茶的制备方法，该养生保健枸杞叶茶的工艺路线科学合理，包括以下步骤：

步骤一，适时采摘；采集制茶用的嫩叶，叶宽不超过3.5cm、长不超过6.0cm、要求叶形整齐、色正柔软无病斑、虫斑、叶片完整、无断叶、残叶，采摘后加工不超过36h，在生长期内的上午10时前采摘；

步骤二，清洗；采回的枸杞叶用清水清洗，洗掉叶面上的尘土和其它污物，沥干表面的水分；

步骤三，萎凋；鲜叶于28℃±2℃的室温下室内摊放自然萎凋7h，自然萎凋期间翻动1次～2次；自然萎凋7h可明显减轻枸杞叶茶的青腥味；

步骤四，杀青；用蒸汽杀青机100℃杀青1min；杀青全程不与水直接接触，防止枸杞叶养分流失；

步骤五，揉捻；将杀青达到标准的叶冷却后放入揉捻机中进行揉捻，首先要均匀地将杀青叶装入揉捻桶，待开机揉捻的同时，可将杀青叶一把一把从揉捻盘加入，加量为揉捻桶的1/2，微揉10min，再加压轻捻7min～8min反复2次～3次，进行加压重揉2min～3min，反复2次，即可出机；

步骤六，解块；用揉捻机揉捻出来的茶叶80％结块，需解块处理；将茶叶倒入解块机中进行解块，解块机机解2～3遍，对于解块机机解不完全的结块，进行人工解块，将结块全部解开；

步骤七，过筛；经过解块出来的茶叶中有杂质、碎末，用孔径2mm～3mm的竹筛筛1遍，筛去杂质；

步骤八，制干；使用微波干燥法，最佳干燥功率540W，平铺厚度1.0cm，烘干时间6min；

步骤九，包装；烘干后的枸杞叶茶，按色、形、味进行分级包装，装人塑料袋密封，入库存放即为成品。

本发明提高枸杞叶茶加工品质的关键步骤，在步骤一中，采集制茶用的嫩叶，要求叶形整齐、色正柔软、叶宽不超过3.5cm、长不超过6.0cm、无病斑和虫斑；在步骤三中，鲜叶于(28±2)℃的室温下室内摊放自然萎凋7h，自然萎凋7h可明显减轻枸杞叶茶的青腥味，有利于改良枸杞叶茶的口感；在步骤四中，采用蒸汽杀青机100℃杀青1min。杀青全程不与水直接接触，因此防止了可溶性物质流失，有利于获得高品质的枸杞叶茶。在步骤八中，使用微波干燥法，其最佳干燥功率540W，平铺厚度1.0cm，烘干时间6min。微波干燥处理的枸杞叶茶色泽较绿，口感较好，营养成分较高。

综上所述，本发明关键内容概括：①从燕山山麓、环渤海湾低平原区广泛收集野生枸杞种质资源，通过资源鉴定，获得了高产、优质、抗白粉病、抗瘿螨病的优异种质昌选1号、昌选2号、昌选3号，其中昌选1号尤为珍贵，实现了种质资源创新。②对珍贵种质资源昌选1号进行连续诱变，不断地丰富其染色体数量变异和结构变异，通过相应的多次选择，即优中选优的过程，实现染色体倍性优势及优异的结构变异的综合利用，使突变体的产量、抗病性及品质性状不断地提高，其综合性状水平不断提高。③本发明证明连续诱变及选择的有效性，通过对昌选1号连续诱变及选择，连续选育出超高产、优质、抗病的枸杞叶茶专用新品种天精3号、天精5号，填补了国内外没有优质枸杞叶茶专用品种的空白。④随着枸杞叶茶新品种的选育成功，研发了相应的快速丰产栽培技术，该技术扦插后40d即可进入采摘期，通过控制采菜层等技术，实现快速丰产。⑤选育出的枸杞叶茶新品种营养品质、药用品质优良，加之改良的枸杞叶茶加工工艺，生产出的枸杞叶茶品质优良。

附图说明

图1是本发明实施例提供的养生保健枸杞叶茶的选育方法流程图；

图2是本发明实施例提供的养生保健枸杞叶茶的制备方法流程图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

下面结合附图及具体实施例对本发明的应用原理作进一步描述。

如图1所示，本发明实施例的养生保健枸杞叶茶的选育方法包括以下步骤：

S101：首先从燕山山麓、环渤海湾低平原区广泛收集野生枸杞种质资源，并进行产量、质量、抗病性、抗瘿螨鉴定，获得了高产、优质、抗白粉病、抗瘿螨病的优异种质昌选1号、昌选2号、昌选3号，其中昌选1号尤为珍贵，为新品种诱变成功奠定了扎实的遗传物质基础；

S102：第一次诱变：室温下用0.05％秋水仙素和2％的二甲基亚砜混合水溶液间歇浸泡昌选1号种子48h；即种子先在药液中浸泡24h，取出进行有氧呼吸24h，再放入药液中浸泡24h，然后将处理的种子裸播(促进有氧呼吸)在小拱棚内，15℃～16℃条件下(有利于根细胞的分化)保湿培养，直至长成幼苗；根据育种目标对M1植株进行形态学鉴定；选出的优异突变体自交，在自交群体中选择2n卵子与2n精子受精形成的新一代多倍体，减少嵌合型，增加多倍体的遗传稳定性；

S103：第二次诱变：对第一次诱变获得的优异突变体的种子按第一次的诱变方法进行第二次诱变，进一步改良第一次诱变突变体的产量、抗病性及品质性状，由第二次诱变中，选育出超高产、优质、抗病的枸杞叶茶专用新品种天精3号；

S104：第三次诱变：将第二次诱变获得的优异突变体的种子按第一次的诱变方法进行第三次诱变，进一步改良第二次诱变的突变体的产量、抗病性及品质。第三次诱变中选育出超高产、优质、抗病的枸杞叶茶专用新品种天精5号；

S105：经过多代诱变选育，突变体的产量、抗病性、品质性状得到明显提高。

S106：采用压片法进行细胞学观察；超亲优势法、超对照优势法测定突变体叶面积、叶厚、茎粗、可食部分长度、嫩茎叶鲜重等性状的生长优势；大区生产试验法测定GM-3-18的产量表现；病情指数法进行抗病性鉴定；半微量凯氏法测定粗蛋白含量；索氏提取法测定粗脂肪含量；

S107：原子吸收法测定钙、钾、镁、钠、磷、铜、铁、锰、锌、钼矿质元素含量；荧光分光光度法测定硒含量；L-8500A氨基酸分析仪测定氨基酸含量；超声提取法测定枸杞多糖、黄酮的含量；分光光度计法测定甜菜碱含量。

如图2所示，本发明实施例的养生保健枸杞叶茶的制备方法包括以下步骤：

S201：适时采摘；

S202：清洗；

S203：萎凋；

S204：杀青；

S205：揉捻；

S206：解块；

S207：制干；

S208：包装。

本发明养生保健枸杞叶茶的制备工艺流程：适时采摘→清洗→萎凋→杀青→揉捻→解块→制干→包装。根据这个工艺制成的枸杞叶茶，茶体清澈碧绿，口感纯正，茶味清香，茶品质优异，为枸杞叶茶中的上品。

本发明的具体步骤为：

本发明的养生保健枸杞叶茶专用新品种的选育方法及栽培技术，包括以下步骤：①从燕山山麓、环渤海湾低平原区广泛收集野生枸杞种质资源，并进行产量、营养品质、药用品质、抗病性、抗瘿螨鉴定，鉴定出高产、优质、抗白粉病、抗瘿螨病的优异种质昌选1号、昌选2号、昌选3号。其中昌选1号尤为珍贵，是本发明中养生保健枸杞叶茶专用新品种选育成功的关键因素之一，该种质资源不仅在产量、营养品质、药用品质、抗病性、抗瘿螨等性状表现优良，而且遗传力强。

②第一次诱变：室温下用0.05％秋水仙素和2％的二甲基亚砜混合水溶液间歇浸泡昌选1号种子48h，即种子先在药液中浸泡24h，取出进行有氧呼吸24h，再放入药液中浸泡24h，然后将处理的种子裸播(促进有氧呼吸)在小拱棚内，15℃～16℃(有利于根细胞分化)条件下保湿培养，直至长成幼苗。根据育种目标对M1植株进行形态学鉴定及选择，选出的优异突变体自交，在自交群体中选择2n卵子与2n精子受精形成的新一代多倍体个体，减少细胞嵌合型，增加多倍体的遗传稳定性。③第二次诱变：将第一次诱变获得的优异突变体的种子按第一次的诱变方法进行第二次诱变，进一步改良第一次诱变突变体的产量、抗病性及品质性状。④第三次诱变：将第二次诱变获得的优异突变体的种子按第一次的诱变方法进行第三次诱变，进一步改良第二次诱变突变体的产量、抗病性及品质性状。

经过多代诱变选择，选育出的突变体染色体倍性优势强大，产量、抗病性、营养品质、药用品质均明显提高。本发明由第二次诱变群体中，选育出超高产、优质、抗病的枸杞叶茶专用新品种天精3号，第三次诱变群体中选育出超高产、优质、抗病的枸杞叶茶专用新品种天精5号。

本发明采用的具体测试方法：压片法进行细胞学观察；超亲优势法、超对照优势法测定多倍体生长优势；病情指数法进行抗病性鉴定；半微量凯氏法测定粗蛋白含量；索氏提取法测定粗脂肪含量；原子吸收法测定钙、钾、镁、钠、磷、铜、铁、锰、锌、钼矿质元素含量；荧光分光光度法测定硒含量；L-8500A氨基酸分析仪测定氨基酸含量；超声提取法测定枸杞多糖、黄酮的含量；分光光度计法测定甜菜碱含量；研究证明GM-3-18花粉母细胞具有48条染色体的细胞为63.2％，24条染色体的细胞占31.5％，还有其他非整倍体的细胞，为混倍体类型；GM-3-18具有强大的染色体倍性优势，超高产、比对照品种增产103.7，药用成分、营养成分含量高，高抗白粉病、根腐病，对瘿螨病免疫，将GM-3-18定名为天精3号。此外，多倍体天精5号表现更为优异。

为了增加多倍突变体的遗传稳定性，将优异突变体自交，在自交群体中选择2n卵子与2n精子受精形成的新一代多倍体个体，减少嵌合型，增加多倍体的遗传稳定性，研究证实，选育出的天精3号、天精5号无性繁殖6个世代，没有发现无性分离现象，遗传性稳定。

良种良法配套是新品种推广的重要步骤，枸杞叶茶专用新品种栽培技术不同于生产果实的品种，快速丰产技术主要特征如下：

枸杞茶园选择：选择地势平坦，有排灌条件，土壤较肥沃的沙壤、轻壤或中壤土，活土层30cm以上的地块种植。

重施有机肥：枸杞叶茶专用品种为多年生木本植物，标准化栽培模式下，扦插密度大，定植后难于再补充有机肥料，定植前施足有机肥料是枸杞嫩茎叶持续高产的关键技术，要求耕地前667m2重施有机肥20000kg，复合肥50kg，然后深耕松土。

扦插方式与密度：将一年生枝条或半木质化嫩枝剪成15cm～20cm茎段，作为插条；平整土地做成平畦，畦宽1m，畦埂宽0.5m，兼做工作道；每畦扦插5行，行株距均0.2m，人工定线开沟，将插条下端轻轻斜插入沟内，封土踩实，地上部留1cm～2cm，外露1～2个饱满芽，667m2扦插11000株，栽植后立即灌水。

打顶尖及控制采收层：茎段扦插后，在日平均温度20℃条件下，40d地上部高度达35cm时，进入采收期，结合采嫩茎叶打顶尖，促进侧芽分生，增加单位面积枝条量，采收层高度一直控制在35cm左右，对于老化的高于35cm的枝条及时回头平茬至35cm。

肥水管理：枸杞叶茶专用品种的嫩茎叶，富含蛋白质、矿质元素，嫩茎叶采收后，消耗大量的营养，应立即补充肥料，667m2施水溶性复合肥15kg或灌溉沼液。枸杞叶茶专用品种具有良好的耐湿性，生长迅速，需水量大，采收期间保持土壤湿润。

中耕除草及病虫害防治：温室大棚生产枸杞叶茶原料，应及时拔除杂草，防治二十八星瓢虫、负泥虫、蚜虫等害虫时，要求采用烟雾剂杀虫，不提倡叶面喷洒药剂的方法。

冬季低温条件下温室管理：华北地区半地下式温室大棚基本能够保证枸杞叶茶专用品种的正常生长，极端天气时，可增设电暖气增温，并喷洒0.006％农用赤霉素促进嫩茎叶生长。

采收及储藏：采下的枸杞嫩茎叶可用于制茶，收下的枸杞嫩茎叶放入塑料袋中，在3℃～8℃条件下可安全储藏10d～15d。

本发明的养生保健枸杞叶茶的制备方法，包括以下步骤：

步骤一，适时采摘；采集制茶用的嫩叶，叶宽不超过3.5cm、长不超过6.0cm、要求叶形整齐、色正柔软无病斑、虫斑、叶片完整、无断叶、残叶，采摘后加工不超过36h。一般在生长期内的上午10时前采摘。

步骤二，清洗；采回的枸杞叶用清水清洗，洗掉叶面上的尘土和其它污物，沥干其表面的水分。

步骤三，萎凋；鲜叶于(28±2)℃的室温下室内摊放自然萎凋7h，自然萎凋期间翻动1～2次。自然萎凋7h可明显减轻枸杞叶茶的青腥味，有利于改良枸杞叶茶的口感。

步骤四，杀青；用蒸汽杀青机100℃杀青1min。杀青全程不与水直接接触，因此防止了可溶性物质流失，有利于获得高品质的枸杞叶茶。

步骤五，揉捻；将杀青达到标准的叶冷却后放入揉捻机中进行揉捻，首先要均匀地将杀青叶装入揉捻桶，以轻松装满为宜，待开机揉捻的同时，可将杀青叶一把一把从揉捻盘加入，加量为揉捻桶的1/2为宜。微揉10min左右，再加压轻捻7～8min反复2～3次，进行加压重揉2～3min，反复2次为宜，即可出机。

步骤六，解块；用揉捻机揉捻出来的茶叶80％左右结块，需解块处理。方法是将茶叶倒入解块机中进行解块，解块机机解2～3遍为宜，对于解块机机解不完全的结块，进行人工解块，将结块全部解开。

步骤七，过筛；经过解块出来的茶叶中有少量杂质、碎末，用孔径2～3mm的竹筛筛1遍，筛去杂质。

步骤八，制干；使用微波干燥法，其最佳干燥功率540W，平铺厚度1.0cm，烘干时间6min。微波干燥处理的枸杞叶茶色泽较绿，口感较好，营养成分较高。

步骤九，包装；烘干后的枸杞叶茶，按色、形、味进行分级包装，装人塑料袋密封，入库存放即为成品。

本发明提高枸杞叶茶加工品质的关键步骤：在步骤一中，采集制茶用的嫩叶，要求叶形整齐、色正柔软、叶宽不超过3.5cm、长不超过6.0cm、无病斑和虫斑；在步骤三中，鲜叶于(28±2)℃的室温下室内摊放自然萎凋7h，自然萎凋7h可明显减轻枸杞叶茶的青腥味，有利于改良枸杞叶茶的口感；在步骤四中，采用蒸汽杀青机100℃杀青1min。杀青全程不与水直接接触，因此防止了可溶性物质流失，有利于获得高品质的枸杞叶茶。在步骤八中，使用微波干燥法，其最佳干燥功率540W，平铺厚度1.0cm，烘干时间6min。微波干燥处理的枸杞叶茶色泽较绿，口感较好，营养成分较高。

结合具体实施例对本发明的养生保健枸杞叶茶新品种的选育方法做进一步的说明：

秋水仙素作用机理：秋水仙素是一种剧毒生物碱，最初萃取于秋水仙，秋水仙素最先由法国化学家PS·波列特和卡文顿1820年提取出来(Pelletier PS，Caventon J.Ann.Chim.Phys.1820；14：69)，此后研究表明，该物质为三环类的生物碱，分子式为C₂₂H₂₅O₆N，呈白色或黄色粉末或针状结晶，有剧毒，易溶于冷水、酒精和氯仿，难溶于热水、乙醚等，有效诱导浓度为0.0006％～1.6％，常被用作多倍体诱导剂，经处理的萌发种子或幼苗细胞染色体数量会发生加倍，其诱导加倍的机理与微管、着丝粒的结构和特性有密切关系；

微管是广泛存在于真核细胞中的一种重要细胞结构，细胞分裂中纺锤体就是由微管组成的，微管管壁由13条原丝纵向平行排列构成，主要成分为微管蛋白，而微管蛋白分α微管蛋白和β微管蛋白两种，α微管蛋白和β微管蛋白组成的异二聚体构成微管亚单位，若干个异二聚体相接连成原丝，α微管蛋白与β微管蛋白在化学结构上极为相似，两者相对分子质量均为50000，氨基酸数目分别为450和445个，两者42％序列相同，其中β微管蛋白肽链中第201位为半胱氨酸，为秋水仙素结合部位，α微管蛋白和β微管蛋白彼此间具有很强的亲和力，常呈二聚体形式存在，每一微管蛋白异二聚体上有与秋水仙素结合部位，如果结合的部位被其结合，微管不仅不能继续聚合，而且会引起原有微管解聚，故秋水仙素具有干扰微管装配，破坏纺锤体形成和终止细胞分裂的作用。

秋水仙素引起植物的变异，不一定为多倍体，还存在大量的非倍性变异，早在1945～1948年，K.捷列什克维丘克利用秋水仙素诱变番茄多倍体时就已经发现大量非倍性突变体的存在，之后，有许多科研工作者也从不同角度提出利用秋水仙素诱变多倍体时部分染色体在臂比、着丝粒位置等方面有明显的差异，近年研究证明，秋水仙素也能引起细胞核及亚显微结构的变化，使细胞形态发生不可逆变化，导致分生细胞从胚性转向分化，引起胚胎发生能力丧失，具有分化细胞特征，Ayashi用秋水仙素诱导胡萝卜的单细胞胚胎发生率低于无秋水仙素处理的团聚细胞。本发明的多次诱变方法，旨在获取染色体多倍化变异及染色体的结构变异。

通过以下分析对本发明的实施例使用效果做补充说明：

1、连续诱变及选择对单叶面积、叶厚、茎粗、可食部分长度、茎梢鲜重的影响：

室温下用0.05％秋水仙素和2％的二甲基亚砜混合水溶液间歇浸泡昌选1号种子48h，通过形态鉴定、细胞学鉴定、产量因素选择，选育出多倍混倍体枸杞新品种天精1号；以天精1号种子为试验材料，以相同的方法进行第二轮诱变处理，通过形态鉴定、细胞学鉴定、产量因素选择，选育出枸杞叶茶专用新品种天精3号；进而以天精3号种子为试验材料，选育出多倍体枸杞叶茶专用品种天精5号，昌选1号→天精1号→天精3号→天精5号的叶面积、叶厚、茎粗、可食部分长度、茎梢鲜重的比较试验结果见表1，由表1可见，连续诱变除对叶厚影响较小外，单叶面积、嫩梢茎粗、采食嫩梢长度、茎稍鲜重均有显著的连续选择效应，如昌选1号单叶面积8.93cm²，一次诱变处理后，选育出的天精1号的单叶面积32.21cm²，与昌选1比较，生长优势达260.7％；以天精1号为试验材料，继续诱变处理，选育出的枸杞茶专用新品种天精3号叶面积达36.92cm²，与天精1号比较，生长优势达14.6％；以天精3号为诱变材料继续诱变及选择，选育出的枸杞叶茶专用品种天精5号单叶面积达到38.37cm²，与天精3号比较，生长优势达3.9％，表现出连续诱变及选择对单叶面积有不断增大的趋势，此外茎粗、嫩梢长度、茎梢鲜重都表现出随连续诱变及选择不断增大的趋势，说明连续诱变可引起连续变异，并且选择有效，因此使化学诱变育种具有了累加性效应，即方向性效应，对枸杞叶茶新品种选育十分有利。

表1连续诱变对叶面积、叶厚、茎粗、可食部分长度、茎梢鲜重的影响

2、连续诱变及选择对果实长度、果实直径、单果重量的影响：

秋水仙素连续诱变枸杞育种技术，出现的突变性状是多方面的，不仅单叶面积、叶厚、茎粗、可食部分长度、茎梢鲜重发生明显的影响，而且对果实大小及重量也产生明显的影响，对于选育枸杞叶茶和枸杞果兼用的新品种有参考价值。本发明通过形态学鉴定、细胞学鉴定、产量因素选择，选育出大果型枸杞品系M-1；为研究连续诱变对果实变异影响，采收M-1种子，以相同的方法对M-1种子进行诱变处理，从其诱变群体中选育出大果型突变体品系M-2；进而采收M-2种子进行第三轮处理，选育出大果型突变体品系M-3。M-1、M-2、M-3果实长度、果实横切直径、单果重量试验结果见表2。由表2可以看出，果实长度、果实直径、单果重量三个性状，均随诱变次数的增加及选择出现增加的趋势。如昌选1号单果重0.39g，通过诱变及选择，选育出的大果品系M-1的单果重达0.75g，比昌选1号单果重增加92.3％；将M-1优系继续用相同的方法诱变处理，选育出的大果优系M-2的单果重达1.25g，比M-1优系单果重增加66.7％；对M-2优系继续用相同的处理方法处理，选育出的大果优系M-3的单果重达1.51g，比M-2优系单果重又增加20.8％。

表2连续诱变对果实长度、果实直径、单果重的影响

3、连续诱变及选择对氨基酸含量的影响影响：

由于叶片中的氨基酸含量非外观性状，难于外观选择，也不可能对诱变群体的每一个个体都进行氨基酸含量测定分析。本发明只是对外观性状优异的突变体进行氨基酸含量分析，由昌选1号(诱变亲本)→天精1号→天精3号→天精5号叶片中的氨基酸化验结果见表3，由表3可见，天精1号比诱变亲本昌选1号必需氨基酸、非必需氨基酸和氨基酸总量均有所增加，说明诱变效果是显著的；将天精1号继续诱变处理，选育到的天精3号的氨基酸含量低于天精1号，但仍高于昌选1好亲本；将天精3号继续诱变处理，选育出的天精5号氨基酸含量高于昌选1号、天精1号、天精3号，说明诱变效果良好。

表3连续诱变及选择对氨基酸含量的影响影响  /％

4、连续诱变及选择对生育期的影响：

连续诱变的第三次诱变群体中出现极早熟和极晚熟的变异体，选育出的极早熟变异体M-4，当年实生苗结果实0.75kg，极晚熟当年生苗单株产量为0，中熟的个体0.05kg。极早熟变异体的高产特点，是枸杞育种及其宝贵种质资源。

5、连续诱变出现的耐湿性变异：

枸杞属抗旱植物，不耐湿。菜用枸杞主要栽培于温室中，温室内往往高温高湿，所以菜用枸杞必须具备良好的耐湿性。本发明采用连续诱变及水淹法鉴定耐湿的突变体，选育到良好的耐湿性突变体，完全改变了其亲本具有的不耐湿的特性。如蒙杞1号品种极不耐湿，但连续诱变获得了耐湿的突变体。

6、连续诱变出现的矮丛生变异：

矮丛生变异发生在连续诱变处理的第三代，大约0.9％的出现几率，植株高度矮化，叶片密集。核型分析认为是染色体结构变异，该类型突变体是良好的枸杞叶茶专用品种特性，也是盆栽室内观赏类型。

7、连续诱变出现的簇生果数量变异：

簇生果数量变异发生在连续诱变第三代，亲本每簇着果2-4个，平均2.6个；突变体每簇着果6-10个，平均8.1个，此性状的变异实为珍贵，为枸杞叶茶、枸杞果兼用的高产育种提供了优异的的种质资源，同时也可以直接开发利用。上述变异类型，是随着诱变次数的提高而出现的，基本上是属于对人类有益的变异，没有发现有害的致死突变，如白化苗等。这是诱变育种难得的是试验效果。

结合对本发明的天精3号的特征特性及栽培技术做进一步的说明：

1、适应性广泛：

2010-2012年在全国范围内建立28个天精3号中试与示范基地，探讨其在不同自然条件下的适应性及新的栽培模式，取得了良好的中试与示范效果，确定了南至浙江、西南至重庆，西至山西，北至内蒙，东北至辽宁的适宜推广区域；建立了温室生产、露地防虫网保护的两大栽培模式。

2、染色体倍性优势强大：

天精3号产量因素的超亲优势、超对照优势的试验结果列于表4。除叶片厚度与3个对照品种差异不显著和可食部分长度短于昌选1号(亲本)外，叶面积、茎粗和嫩茎梢鲜重均不同程度高于昌选1号(亲本)、宁杞菜1号(二倍体对照)、大叶枸杞(多倍体对照)3个品种，平均生长优势分别为176.1％、30.4％、96.9％；可食部分长度生长优势比宁杞菜1号增加20.4％，比大叶枸杞增加138.6％。可见天精3号产量因素表现突出，染色体倍性优势显著。此外，天精5号表现更为优异。

表4天精3号产量因素及生长优势表现

3、超高产：

河北省科技厅组织同行专家对石家庄绿罗果蔬种植有限公司中试园、河北省唐山市跻强水果种植有限公司中试园、河北省抚宁县鹏飞苗木种植专业合作社中试园、秦皇岛福电公司中试园的天精3号生产试验进行田间检测，大区面积667m²，对照品种为昌选1号，不设重复。测试结果表明，天精3号温室生产667m²鲜菜平均产量达5375.4kg，比昌选1号平均增产103.7％。增产的主要因素是叶面积、茎粗、样点可采嫩梢数、嫩梢重显著增加(表5)。

4、营养品质和药用品质优良

4.1、氨基酸含量：天精3号与昌选1号、宁杞菜1号和大叶枸杞的氨基酸含量比较结果见表6。天精3号氨基酸总含量比昌选1号、宁杞菜1号和大叶枸杞分别高1.9％、7.7％和33.8％；人体必需氨基酸苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸和组氨酸比大叶枸杞分别高18.5％、77.9％、11.8％、26.1％、25.7％、68.5％、19％和22％；苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、赖氨酸和组氨酸比宁杞菜1号分别高2.1％、55.0％、5.6％、3.6％、8.7％和4.2％。天精3号含丰富的人体必需氨基酸和其他氨基酸，营养价值优异。

表5天精3号温室多点生产试验结果

表6天精3号氨基酸含量与3个对照品种的比较  /％

4.2、天精3号粗蛋白质、粗脂肪含量：天精3粗蛋白和粗脂肪与3个对照品种比较结果见表7。天精3号嫩茎梢粗蛋白含量为40.76％，高于昌选1号5.73％，高于大叶枸杞18.9％；天精3号粗脂肪6.12％，高于昌选1号16.6％。

4.3、天精3号矿质元素含量：天精3号矿质元素含量与昌选1号和宁杞菜1号的比较结果见表8。由表8可见，天精3号钾、磷、铜、铁、锰、锌、硒含量分别比对照品种宁杞菜1号增加41.9％、30.2％、67.7％、83.3％、278.5％、367.0％和105.8％，尤其防癌元素硒、铁、锌含量丰富，有重要的养生保健价值。

表7天精3号粗蛋白、粗脂肪含量与对照品种的比较  /％

表8天精3号矿质元素含量与2个对照品种的比较

4.4、天精3号枸杞多糖、甜菜碱、黄酮含量：枸杞多糖、甜菜碱、黄酮是重要的药用成分。天精3号枸杞多糖含量为3.35％，比昌选1号、宁杞菜1号和大叶枸杞分别增加27.08％、0.45％和12.21％；甜菜碱含量为3.10％，比大叶枸杞增加11.51％；黄酮含量为3.82％，比昌选1号、宁杞菜1号和大叶枸杞分别增加10.71％、34.21％和68.50％；证明天精3号具有良好的药用品质(表9)。

表9天精3号枸杞多糖、甜菜碱、黄酮含量与对照品种的比较

5、天精3号抗病性：

天精3号高抗白粉病、根腐病、对瘿螨病免疫。枸杞叶属叶药类，要求叶片鲜嫩美观。感染病虫害的叶片，尤其瘿螨病造成的叶瘤，严重影响感官品质和药用品质。因此，作为叶片类药材品种必须对瘿螨病免疫，这也是育种的关键技术要求。天精3号新品种及3个对照品种抗病性鉴定结果见表10。天精3号对瘿螨病免疫；白粉病病情指数低于大叶枸杞；根腐病病指低于对照大叶枸杞和宁杞菜1号，天精3号良好的抗病性导致该品种叶片碧绿脆嫩，无病斑，外观品质好。

表10抗病鉴定结果

6、自交后代的遗传稳定性

突变体自交后代群体和其非自交后代群体进行了遗传稳定性比较(表11)。当代突变体自交后代群体在株高、叶绿素含量、叶片大小、可食茎梢长度、嫩茎粗等方面稳定性良好，而非自交后代茎段扦插则出现了明显的无性分离现象，变异系数增大。本发明证明，对形态学鉴定后的优异突变体进行自交处理及选择，具有良好的促进遗传稳定作用，天精3号、天精5号无性繁殖6个世代，未见无性分离现象，遗传性稳定。

表11突变体自交与非自交后代的遗传稳定性比较

7、枸杞叶茶专用品种快速丰产栽培技术：

枸杞叶茶专用品种属于木本药材种类，无公害栽培技术主要有温室大棚、露地防虫网栽培两大体系，其快速丰产栽培技术如下：

7.1枸杞菜园选择：选择地势平坦，有排灌条件，土壤较肥沃的沙壤、轻壤或中壤土，活土层30cm以上的地块种植为宜。

7.2重施有机肥：枸杞叶茶专用品种为多年生木本植物，标准化栽培扦插密度大，定植后难于再补充有机肥料，施足有机肥料是枸杞嫩茎叶持续高产的关键技术，要求耕地前667m²重施有机肥20000kg，复合肥50kg，然后深耕松土。

7.3扦插方式与密度：将一年生硬枝或半木质化嫩枝剪成15～20cm茎段，作为插条；平整土地做成平畦，畦宽1m，畦埂宽0.5m，兼做工作道；每畦扦插5行，行株距均0.2m；人工定线开沟，将插条下端轻轻斜插入沟内，封土踩实，地上部留1cm～2cm，外露1～2个饱满芽，667m²扦插11000株，栽植后立即灌水。此密度和扦插方式是当年扦插当年丰产的最佳密度和方式。

7.4适时打顶尖及控制采收层：扦插后，在日平均温度20℃条件下，40d左右地上部高度达35cm时，结合采嫩茎叶打顶尖，促进侧芽分生，增加单位面积枝条量。以后注意采收层高度一直控制控制在35cm左右。对于老化高于35cm的枝条及时平茬至35cm，以便集中营养促使嫩枝的孳生。

7.5肥水管理：枸杞叶茶专用品种嫩茎叶，富含蛋白质、矿质元素，嫩菜采收后，应立即补充肥料，667m²施水溶性复合肥15kg，或灌溉沼液，以促进腋芽萌生。枸杞叶茶专用品种具有良好的耐湿性，生长迅速，需水量大，采收期间宜保持土壤湿润。

7.6中耕除草及病虫害防治：温室大棚生产枸杞茶原料，应及时拔除杂草。防治二十八星瓢虫、负泥虫、蚜虫等害虫时，要求采用烟雾剂杀虫，不提倡叶面喷洒的方法，以便实现无公害生产。

7.7冬季低温条件下温室管理：华北地区半地下式温室大棚基本能够保证枸杞叶茶专用品种正常生长，极端天气时，可增设电暖气增温。冬季喷洒0.006％农用赤霉素，可促进枸嫩茎梢生长，效果良好。

7.8采收及储藏：采下的枸杞嫩茎梢可用于制茶。采收下的枸杞嫩茎梢放入塑料袋中，在3℃～8℃条件下可安全储藏10d～15d，具有良好的耐储性，对枸杞茶加工的持续性有利。

结合以下分析对本发明的天精3号枸杞叶茶做进一步的说明：

1、天精3号枸杞叶茶钙、铁、锌、镁、硒含量测定：

天精3号枸杞叶茶富含硒、锌、铁。大量研究表明，硒不仅可直接抑制某些肿瘤的生长，而且硒具有拮抗和减轻诱变剂、致癌剂的致癌作用，对癌前病变也有阻断作用，因而不仅在一些肿瘤高发区人群中开展了补硒的防治措施，并已开始作为辅助治疗剂试用于肿瘤临床治疗中(陈如松等，2000)。Manning等(1988)在研究乳腺癌细胞系ZR-75-1和MCF-7时，发现一种大小为414kb的可受雌激素诱导的新基因，命名为LIV-1，属于锌转运体ZIP家族。LIV-1最早被证实与乳腺癌的局部淋巴结转移密切相关，越来越多的报道显示，LIV-1表达异常与多种疾病及肿瘤的发生发展有着密切关系。国内外研究指出，乳铁蛋白对结肠癌、膀胱癌、胃癌、肝癌、胰腺癌以及食道癌等多种恶性肿瘤都有显著的预防和抑制作用(Dial，E.J et al，2002)。

采用原子吸收法测定天精3号枸杞茶、宁夏枸杞茶、龙井茶、观音王微量元素钙、铁、锌、镁含量，荧光分光光度法测定硒含量，测定结果见表12，由表12可见，不同品种茶叶钙含量的变化趋势是天精3号枸杞茶1180.1mg/100g＞观音王538.8mg/100g＞龙井茶291.3mg/100g＞宁夏枸杞茶221.5mg/100g。铁含量的变化趋势是宁夏枸杞茶58.2mg/100g＞天精3号枸杞茶46.6mg/100g＞观音王45.1mg/100g＞龙井茶26.4mg/100g。锌含量的变化趋势是天精3号枸杞茶20.89mg/100g＞宁夏枸杞茶12..1mg/100g＞龙井茶10.1mg/100g＞观音王6.76mg/100g。镁含量的变化趋势是天精3号枸杞茶580.1mg/100g＞观音王213.1mg/100g＞龙井茶191.2mg/100g＞宁夏枸杞茶165.3mg/100g。硒含量的变化趋势是天精3号枸杞茶26.20μg/100g＞观音王7.10μg/100g＞龙井茶6.31μg/100g＞宁夏枸杞茶2.18μg/100g。综上所述，天精3号除铁含量低于宁夏枸杞茶外，其他元素均高于其他茶种，尤其需要指出的是硒、锌、铁为抗癌元素，天精3号富含这三种元素，其茶叶价值明显提高。

表12天精3号枸杞茶与宁夏枸杞茶、龙井茶、观音王微量元素比较

2、天精3号枸杞叶茶的黄酮、枸杞多糖、甜菜碱含量测定：

天精3号枸杞叶茶富含黄酮、枸杞多糖、甜菜碱。医学研究表明，黄酮类化合物在抗氧化反应中既能清除链引发阶段的自由基，也可直接捕获自由基反应链中的自由基，阻断其链反应，起到预防和免断链双重作用(向丽等，2009)。黄酮类化合物能够调节体内酶系统，减小甚至消除一些化学致癌物的毒性，抑制肿瘤细胞增长(Hertog M.et al.1992)。白凤梅等(1999)研究表明天然黄酮对小鼠急性溃疡有明显的消退作用，肯定了高剂量的黄酮提取物(200mg/ml)能使胃粘液增加并且减轻胃的损伤；此外研究还表明黄酮类化合物具有抗流感病毒、脊髓灰质炎病毒的感染。枸杞多糖具有抗老化、保护神经、抗疲劳、增强耐力、控制血糖、防治青光眼、抗氧化、抗肿瘤等作用(孙桂菊等，2010)。枸杞多糖可以增强免疫力，对机体非特异性免疫功能及细胞免疫和体液免疫均具有显著的调节作用(宋宪铭等，2011)。甜菜碱能降低血脂，改善肝脏内脂质和氧自由基含量，对酒精性肝损伤有保护作用。Abdelmalek等(2009)随机对照研究了55例非酒精性脂肪肝患者，34例患者治疗后行肝组织活检，发现口服甜菜碱组患者(20g/d)肝脂肪变性程度较对照组有改善。

超声提取法测定天精3号枸杞茶、宁夏枸杞茶、龙井茶、观音王的黄酮的含量，测定结果见表13。由表13可以看出，天精三号枸杞茶黄酮含量最高达2.89％，黄酮含量的变化趋势是天精3号枸杞茶2.89％＞宁夏枸杞茶2.51％＞龙井茶1.43％＞观音王1.27％。天精三号枸杞茶枸杞多糖含量为3.01％，高于宁夏枸杞茶的2.83％。天精三号枸杞茶甜菜碱含量为2.93％，低于于宁夏枸杞茶。

表13天精3号枸杞茶与宁夏枸杞茶、龙井茶、观音王黄酮、枸杞多糖、甜菜碱含量比较

综上所述，本发明采用连续诱变技术选育的多倍体天精3号枸杞茶专用品种，具有超高产特性，比对照品种增产103.7％；该品种对瘿螨病免疫，高抗白粉病、根腐病；适应性广泛，南至浙江、西南至重庆，西至山西，北至内蒙，东北至辽宁均是适宜推广区域；粗白质、粗脂肪、氨基酸含量高；天精3号枸杞茶富含抗癌的硒、锌、镁、钙元素，高于其他茶种，铁元素也高于观音王和龙井茶；枸杞黄酮、枸杞多糖含量均高于其他茶种，是发明的理想枸杞茶专用品种。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种养生保健枸杞叶茶专用新品种的选育方法，其特征在于，该选育方法采用压片法进行细胞学观察；超亲优势法、超对照优势法测定多倍体生长优势；病情指数法进行抗病性鉴定；半微量凯氏法测定粗蛋白含量；索氏提取法测定粗脂肪含量；原子吸收法测定钙、钾、镁、钠、磷、铜、铁、锰、锌、钼矿质元素含量；荧光分光光度法测定硒含量；L-8500A氨基酸分析仪测定氨基酸含量；超声提取法测定枸杞多糖、黄酮的含量；分光光度计法测定甜菜碱含量。

2.如权利要求1所述的养生保健枸杞叶茶的选育方法，其特征在于，该养生保健枸杞叶茶新品种的选育方法为多次诱变选育法，并形成新品种相应的配套栽培技术，包括以下步骤：

步骤一，收集野生枸杞种质资源，并进行产量、营养品质、药用品质、抗病性、抗瘿螨鉴定，鉴定出高产、优质、抗白粉病、抗瘿螨病的优异种质；

步骤二，第一次诱变：室温下用0.05％秋水仙素和2％的二甲基亚砜混合水溶液间歇浸泡种子48h，即种子先在药液中浸泡24h，取出进行有氧呼吸24h，再放入药液中浸泡24h，然后将处理的种子裸播，促进有氧呼吸，在小拱棚内，15℃～16℃的饱和湿度条件下培养，直至长成幼苗，根据育种目标对M1植株进行形态学鉴定及选择，选出的优异突变体自交，在自交群体中选择2n卵子与2n精子受精形成的新一代多倍体个体，减少细胞嵌合型，增加多倍体的遗传稳定性；

步骤三，第二次诱变：将第一次诱变获得的优异突变体的种子按第一次的诱变方法进行第二次诱变，进一步改良第一次诱变突变体的产量、抗病性及品质性状；

步骤四，第三次诱变：将第二次诱变获得的优异突变体的种子按第一次的诱变方法进行第三次诱变，进一步改良第二次诱变突变体的产量、抗病性及品质性状；

步骤五，经过多代诱变选择，选育出的多倍体染色体倍性优势强大，产量、抗病性、营养品质、药用品质不断得到改良，由第二次诱变群体中，选育出超高产、优质、抗病的枸杞叶茶专用新品种，第三次诱变群体中选育出超高产、优质、抗病的枸杞叶茶专用新品种；

步骤六，采用压片法进行细胞学观察；超亲优势法、超对照优势法测定多倍体生长优势；病情指数法进行抗病性鉴定；半微量凯氏法测定粗蛋白含量；索氏提取法测定粗脂肪含量；原子吸收法测定钙、钾、镁、钠、磷、铜、铁、锰、锌、钼矿质元素含量；荧光分光光度法测定硒含量；L-8500A氨基酸分析仪测定氨基酸含量；超声提取法测定枸杞多糖、黄酮的含量；分光光度计法测定甜菜碱含量；研究证明，GM-3-18生长优势强大，超高产，比对照品种增产103.7；药用成分、营养成分含量高；高抗白粉病、根腐病，对瘿螨病免疫。

3.如权利要求1所述的养生保健枸杞叶茶的选育方法，其特征在于，利用了强大的染色体倍性优势及自交法稳定多倍体的育种技术。采用压片法对GM-3-18的花粉母细胞进行染色体数量鉴定，具有48条染色体的细胞为63.2％，24条染色体的细胞占31.5％，还有其他非整倍体的细胞，为混倍体类型，并表现强大生长优势。将优异突变体自交，在自交群体中选择2n卵子与2n精子受精形成的新一代多倍体个体，减少嵌合型，增加多倍体的遗传稳定性，选育出的GM-3-18无性繁殖6个世代，没有发现无性分离现象，遗传性稳定。

4.如权利要求1所述的养生保健枸杞叶茶新品种的栽培技术，其特征在于，快速丰产栽培技术：

枸杞茶园选择：选择地势平坦，有排灌条件，土壤较肥沃的沙壤、轻壤或中壤土，活土层30cm以上的地块种植；

重施有机肥：枸杞叶茶专用品种为多年生木本植物，标准化栽培模式下，扦插密度大，定植后难于再补充有机肥料，要求耕地前667m²重施有机肥20000kg，复合肥50kg，然后深耕松土；

扦插方式与密度：将一年生枝条或半木质化嫩枝剪成15cm～20cm茎段，作为插条；平整土地做成平畦，畦宽1m，畦埂宽0.5m，兼做工作道；每畦扦插5行，行株距均0.2m，人工定线开沟，将插条下端轻轻斜插入沟内，封土踩实，地上部留1cm～2cm，外露1～2个饱满芽，667m²扦插11000株，栽植后立即灌水；

打顶尖及控制采收层：茎段扦插后，在日平均温度20℃条件下，40d地上部高度达35cm时，进入采收期，此时结合采嫩茎叶打顶尖，促进侧芽分生，增加单位面积枝条量，采收层高度控制在35cm，对于老化的高于35cm的枝条及时回头平茬至35cm；

肥水管理：枸杞叶茶专用品种的嫩茎叶，富含蛋白质、矿质元素，嫩茎叶采收后，消耗大量的营养，应立即补充肥料，667m²施水溶性复合肥15kg或灌溉沼液；

中耕除草及病虫害防治：温室大棚生产枸杞叶茶原料，及时拔除杂草，防治二十八星瓢虫、负泥虫、蚜虫害虫时，采用烟雾剂杀虫；

冬季低温条件下温室管理：华北地区半地下式温室大棚能够保证枸杞叶茶专用新品种正常生长，极端天气时，可增设电暖气增温，并喷洒0.006％农用赤霉素促进嫩茎叶生长；

采收及储藏：采下的枸杞嫩茎叶可用于制茶，收下的枸杞嫩茎叶放入塑料袋中，在3℃～8℃条件下可安全储藏10d～15d。

5.一种养生保健枸杞叶茶的制备方法，其特征在于，该养生保健枸杞叶茶的工艺路线科学合理，包括以下步骤：

步骤一，适时采摘；采集制茶用的嫩叶，叶宽不超过3.5cm、长不超过6.0cm、要求叶形整齐、色正柔软无病斑、虫斑、叶片完整、无断叶、残叶，采摘后加工不超过36h，在生长期内的上午10时前采摘；

步骤二，清洗；采回的枸杞叶用清水清洗，洗掉叶面上的尘土和其它污物，沥干表面的水分；

步骤三，萎凋；鲜叶于28℃±2℃的室温下室内摊放自然萎凋7h，自然萎凋期间翻动1次～2次；自然萎凋7h可明显减轻枸杞叶茶的青腥味；

步骤四，杀青；用蒸汽杀青机100℃杀青1min；杀青全程不与水直接接触，防止枸杞叶养分流失；

步骤五，揉捻；将杀青达到标准的叶冷却后放入揉捻机中进行揉捻，首先要均匀地将杀青叶装入揉捻桶，待开机揉捻的同时，可将杀青叶一把一把从揉捻盘加入，加量为揉捻桶的1/2，微揉10min，再加压轻捻7min～8min反复2次～3次，进行加压重揉2min～3min，反复2次，即可出机；

步骤六，解块；用揉捻机揉捻出来的茶叶80％结块，需解块处理；将茶叶倒入解块机中进行解块，解块机机解2～3遍，对于解块机机解不完全的结块，进行人工解块，将结块全部解开；

步骤七，过筛；经过解块出来的茶叶中有杂质、碎末，用孔径2mm～3mm的竹筛筛1遍，筛去杂质；

步骤八，制干；使用微波干燥法，最佳干燥功率540W，平铺厚度1.0cm，烘干时间6min；

步骤九，包装；烘干后的枸杞叶茶，按色、形、味进行分级包装，装人塑料袋密封，入库存放即为成品；

本发明提高枸杞叶茶加工品质的关键步骤，在步骤一中，采集制茶用的嫩叶，要求叶形整齐、色正柔软、叶宽不超过3.5cm、长不超过6.0cm、无病斑和虫斑；在步骤三中，鲜叶于(28±2)℃的室温下室内摊放自然萎凋7h，自然萎凋7h可明显减轻枸杞叶茶的青腥味，有利于改良枸杞叶茶的口感；在步骤四中，采用蒸汽杀青机100℃杀青1min。杀青全程不与水直接接触，因此防止了可溶性物质流失，有利于获得高品质的枸杞叶茶。在步骤八中，使用微波干燥法，其最佳干燥功率540W，平铺厚度1.0cm，烘干时间6min。微波干燥处理的枸杞叶茶色泽较绿，口感较好，营养成分较高。

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