CN103550814B - 一种壳聚糖生物成膜胶及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种外用喷雾型抗菌液体敷料，具体涉及一种壳聚糖生物成膜胶及其制备方法，包括以下重量百分比的原料：改性壳聚糖0.5~6%、薄荷0.01~0.15%、酸化剂0.01~0.15%、黄芩0.2~0.4%、黄柏0.1~0.3%、去离子水余量。本发明的壳聚糖生物成膜胶采用改性壳聚糖制备成溶液，不但保持了壳聚糖本身所具有的物化特性和功能作用，而且具备了良好的溶解性能。不仅具有良好的生物相容性，而且具有一般壳聚糖所没有的较高溶解度和容易被生物体吸收等诸多独特的功能，更好的利用了壳聚糖的生物学活性。

Description

一种壳聚糖生物成膜胶及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种外用喷雾型抗菌液体敷料，具体涉及一种壳聚糖生物成膜胶及其制备方法。

背景技术

随着伤口湿性愈合理论的提出，各种新型敷料应运而生。据不完全统计，目前市面上已存在超过2400种伤口敷料。如何根据患者伤口情况及经济承受能力选择最安全、经济、有效的敷料，是临床工作中医护人员经常面临的问题。国内外学者做了大量关于敷料选择及应用的研究，但目前尚未形成一致意见。参考国内外敷料的临床效果研究和相关指南，阐述各类产品的特点及临床应用情况，以期为临床合理选择伤口敷料提供依据。

目前，国内外临床医护人员已经做了大量的伤口敷料成本效益的研究，但是研究涉及敷料的种类还不全面，部分研究缺乏有效对照或对照组处理方法未说明，尚不能提供全面、有效的循证依据。因此，还有待进行更多随机对照的成本效益研究，为临床伤口敷料的选择提供参考。

理想敷料应具备以下功能：防止水分和体液的过度散失；抵御细菌的入侵，防止感染；与创面帖合良好，但不应与创面粘合以免更换敷料带来二次损伤；透湿、透气并使创面处于湿润但又没有积液的环境；生物相容性好，并最好具有能促进伤口愈合的功能。

壳聚糖是一种天然高分子生物材料，具有良好的生理活性、生物相容性和生物可降解性，无有害降解物，具有止血和抑菌作用，可促进伤口愈合和组织修复再生，在医用敷料方面有广阔的应用前景。申请号为200810157984.9的中国发明专利公开了一种医用壳聚糖抗菌敷料，其以壳聚糖纤维为原料，壳聚糖纤维上喷涂附着有载银纳米二氧化钛颗粒，制成敷料制品，载银纳米二氧化钛颗粒重量占敷料总量的0.1-2％。

目前，以壳聚糖为基体的抗菌敷料已有多种，但壳聚糖在水中的溶解性极差，大大限制了其应用。

发明内容

为了克服现有技术中存在的缺点和不足，本发明的目的在于提供一种生物相容性好、生物安全性高、抗菌消炎止血效果好、价格低廉、使用方便的壳聚糖生物成膜胶。

本发明的另一目的在于提供一种壳聚糖生物成膜胶的制备方法，该制备方法可以充分发挥各原料的生物活性，工艺简单，操作控制方便，质量稳定，生产效率高，可大规模工业化生产。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种壳聚糖生物成膜胶，包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        0.5~6%

薄荷              0.01~0.15%

酸化剂            0.01~0.15%

黄芩              0.2~0.4%

黄柏              0.1~0.3%

去离子水          余量。

优选的，包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        2.5~4.5%

薄荷              0.04~0.12%

酸化剂            0.08~0.12%

黄芩              0.25~0.35%

黄柏              0.15~0.25%

去离子水          余量。

更为优选的，包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        3%

薄荷              0.08%

酸化剂            0.1%

黄芩              0.3%

黄柏              0.2%

去离子水          余量。

针对现有技术中壳聚糖水溶性较差的缺点，本发明的壳聚糖生物成膜胶采用改性壳聚糖为主要原料，喷洒在皮肤、黏膜患处及损伤表面，通过全新的物理及生物双重抗菌机制，隔离、杀灭病原微生物，同时促进组织修复与再生。

本发明采用的改性壳聚糖的抗菌机制为：

“物理抗菌”机制：壳聚糖生物成膜胶在皮肤粘膜表面形成分子级隐型膜，此膜的活性基团带正电荷，正电荷能将细菌吸附粘连在一起，阻止其扩散，吸附细菌后，破坏细菌的细胞膜，致使细胞质内的DNA和RNA流出，从而达到杀灭细菌的效果。

“生物抗菌”机制：壳聚糖生物成膜胶属高聚阳离子，因而可以与细菌表面产生的酸性物质如脂多糖、磷壁质酸、糖醛酸磷壁质、荚膜多糖等相互作用，形成复杂的高分子电解质，从而使细菌的细胞膜功能发生紊乱、死亡。

薄荷对单纯性疱疹病毒、森林病毒、流行性腮腺炎病毒有抑制作用，对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、甲型链球菌、乙型链球菌、卡他球菌、肠炎球菌、福氏痢疾杆菌、炭疽杆菌、白喉杆菌、伤寒杆菌、绿脓杆菌、大肠杆菌等有抑菌作用；薄荷油外用，能刺激神经末梢的冷感受器而产生冷感，并反射性地造成深部组织血管的变化而起到消炎、止痛、止痒作用。

酸化剂的加入用于调节本发明的壳聚糖生物成膜胶的pH值，酸性条件有利于乳酸菌的繁殖生长，对大肠杆菌等有害微生物有抑制作用。

黄芩有清热燥湿，凉血安胎，解毒功效，主治温热病、上呼吸道感染、肺热咳嗽、湿热黄胆、肺炎、痢疾、咳血、目赤、胎动不安、高血压、痈肿疖疮等症。黄芩的临床应用抗菌比黄连还好，而且不产生抗药性。

黄柏为常用中药，其性寒、味苦，具清热燥湿、泻火解毒等功效，常用于湿热泻痢、黄疸、白带以及热痹、热淋等症。现代研究表明，黄柏含小蘖碱、黄柏酮等主要成分，有抗菌、收敛、消炎的作用，对各种皮肤湿毒、疮疡等症状，功效良好。

优选的，所述改性壳聚糖是脱乙酰度为70~95%的壳聚糖盐酸盐和/或羧化度≥80%的羧甲基壳聚糖。

本发明采用的壳聚糖盐酸盐和羧甲基壳聚糖均属于水溶性壳聚糖，克服了现有技术中壳聚糖水溶性较差的缺点，大大促进了壳聚糖抗菌敷料的应用。通过实验表明，脱乙酰度为70~95%的壳聚糖盐酸盐和/或羧化度≥80%的羧甲基壳聚糖的水溶性效果最佳，不但保持了壳聚糖本身所具有的物化特性和功能作用，而且具备了良好的溶解性能。

更为优选的，所述改性壳聚糖是由脱乙酰度为80~90%的壳聚糖盐酸盐和羧化度为85~95%的羧甲基壳聚糖组成的混合物，壳聚糖盐酸盐与羧甲基壳聚糖的重量比为2.5~3.5:1。

壳聚糖盐酸盐和羧甲基壳聚糖在一定程度上具有协同作用，两者复配使用具有更好的生物相容性。通过实验证明当壳聚糖盐酸盐和羧甲基壳聚糖以2.5~3.5:1的重量比复配使用时，成膜性极佳，且容易被生物体吸收。

优选的，所述酸化剂为相对密度在1.20~1.25、乳酸酐含量在5~15%的乳酸。

乳酸的加入用于调节本发明的壳聚糖生物成膜胶的pH值，酸性条件有利于乳酸菌的繁殖生长，对大肠杆菌等有害微生物有抑制作用。

优选的，所述壳聚糖生物成膜胶还包括金银花0.16~0.24%、穿心莲0.05~0.15%、黄连0.12~0.2%、大黄0.2~0.32%和连翘0.15~0.25%。

金银花具有抗病原微生物作用，对多种致病菌如金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠杆菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌等均有一定抑制作用；对肺炎球菌、脑膜炎双球菌、绿脓杆菌、结核杆菌、志贺氏痢疾杆菌、变形链球菌等有抑菌和杀菌作用，对流感病毒、孤儿病毒、疱疹病毒、钩端螺旋体均有抑制作用；还具有抗炎解毒作用，对痈肿疔疮、肠痈肺痈有较强的散痈消肿，清热解毒、消炎作用。

穿心莲具有消炎解毒作用，临床上曾应用于多种感染性疾病，包括外伤感染、疖、痈、丹毒、上呼吸道感染、急慢性扁桃体炎、急慢性咽喉炎、急慢性支气管炎、急性菌痢、急性胃肠炎、尿路感染、子宫内膜炎、盆腔炎、中耳炎、牙周炎等，均有不同程度的疗效。

黄连具有抗病原微生物作用，对多种致病菌如金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎球菌、脑膜炎双球菌、痢疾杆菌、炭疽杆菌等均有一定抑制作用；还能抑制流感病毒、乙肝病毒等；在外可抑制阿米巴原虫、阴道滴虫和锥虫抗原虫。

大黄具有抗病原微生物作用，对萄球菌、溶血性链球菌、淋病球菌、白喉杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌等细菌均有一定抑制作用；对流感病毒、孤儿病毒、乙肝病毒、脊髓灰质炎病毒等病毒均有一定抑制作用；对米巴原虫、阴道滴虫、血吸虫及钩端螺旋体等其他敏感微生物均有一定抑制作用。其抗菌作用机理：影响叶酸的酶系统；抑制细菌核酸和蛋白质合成；抑制细菌生物氧化酶系统；诱生干扰素。

连翘有广谱抗菌作用，对金黄色葡萄球菌、贺氏痢疾杆菌有很强的抑制作用，对其他致病菌、流感病毒、真菌都有一定抑制作用。有抗炎作用。本品所含齐墩果酸有强心、利尿及降血压作用，维生素P可降低血管通透性及脆性，防止溶血。煎剂有镇吐作用、抗肝损伤作用。清热解毒，消肿散结，疏散风热。主治痈肿疮毒，痰核瘰疬，外感风热，温病初起，热淋涩痛等。

更为优选的，所述壳聚糖生物成膜胶还包括金银花0.18~0.22%、穿心莲0.08~0.12%、黄连0.14~0.18%、大黄0.23~0.29%和连翘0.18~0.22%。

更为优选的，所述壳聚糖生物成膜胶还包括金银花0.2%、穿心莲0.1%、黄连0.16%、大黄0.26%和连翘0.2%。

本发明的另一目的通过下述技术方案实现：一种壳聚糖生物成膜胶的制备方法，包括如下步骤：

A、在容器中加入去离子水总量1/2~2/3的去离子水，在搅拌状态下加入上述配比的改性壳聚糖，搅拌至完全溶解；

B、在搅拌状态下加入上述配比的改性壳聚糖、酸化剂以外的其它原料，继续搅拌5~10min后真空过滤，得到滤渣和滤液；

C、在滤渣中加入剩余的去离子水，继续搅拌5~10min后真空过滤，得到滤液；

D、合并两次滤液，在搅拌状态下加入酸化剂，调整pH至4.5~7.8，灌装。

本发明的有益效果在于：本发明的壳聚糖生物成膜胶采用改性壳聚糖制备成溶液，不但保持了壳聚糖本身所具有的物化特性和功能作用，而且具备了良好的溶解性能。不仅具有良好的生物相容性，而且具有一般壳聚糖所没有的较高溶解度和容易被生物体吸收等诸多独特的功能，更好的利用了壳聚糖的生物学活性。

本发明的壳聚糖生物成膜胶通过采用薄荷、黄芩、黄柏以及金银花、穿心莲、黄连、大黄和连翘多种抗菌中药复配使用，能增强本发明的抗菌消炎作用和促进伤口愈合的作用。

本发明的壳聚糖生物成膜胶喷雾后成膜，能防止水分和体液的过度散失；抵御细菌的入侵，防止感染；与创面帖合良好，不会造成更换敷料带来二次损伤；透湿、透气并使创面处于湿润但不会积液；生物相容性好，并具有能促进伤口愈合的功能。

本发明的壳聚糖生物成膜胶适用于小面积皮肤、口腔感染、烧烫伤、整形、伤口、阴道、生殖道、肛门、剖宫产、会阴切口、妇科炎症和黏膜创面感染等的防治和护理；适用于各种感染性皮肤病、湿疹、足癣、股癣、体癣、褥疮等；也适用于新生儿皮肤、脐部、臀部的防治和护理，促进创面的愈合，抑制瘀痕的形成，减少术后的感染。也可用于接触皮肤的组织物抗菌处理、手术者皮肤消毒及预防医院内感染等。

本发明的壳聚糖生物成膜胶具有以下优点：1、生物相容性好，生物安全性高，2、抗菌消炎止血效果好，3、产品品质优良，价格适中，使用方便。

具体实施方式：

为了便于本领域技术人员的理解，下面结合实施例对本发明作进一步的说明，实施方式提及的内容并非对本发明的限定。

实施例1

一种壳聚糖生物成膜胶，包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        0.5%

薄荷              0.01%

酸化剂            0.05%

黄芩              0.2%

黄柏              0.1%

去离子水          余量。

所述改性壳聚糖是脱乙酰度为70%的壳聚糖盐酸盐。

所述酸化剂为相对密度在1.20、乳酸酐含量在5%的乳酸。

一种壳聚糖生物成膜胶的制备方法，包括如下步骤：

A、在容器中加入去离子水总量1/2的去离子水，在搅拌状态下加入上述配比的改性壳聚糖，搅拌至完全溶解；

B、在搅拌状态下加入上述配比的改性壳聚糖、酸化剂以外的其它原料，继续搅拌5min后真空过滤，得到滤渣和滤液；

C、在滤渣中加入剩余的去离子水，继续搅拌5min后真空过滤，得到滤液；

D、合并两次滤液，在搅拌状态下加入酸化剂，调整pH至4.5，灌装。

临床应用例1：张先生，45岁，症状为皮肤烧伤，采用本发明实施例1的壳聚糖生物成膜胶，每日喷雾伤口三次，连续使用15天后，没出现感染，创面愈合良好。

实施例2

一种壳聚糖生物成膜胶，包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        2.5%

薄荷              0.04%

酸化剂            0.08%

黄芩              0.25%

黄柏              0.15%

去离子水          余量。

所述改性壳聚糖是羧化度为90%的羧甲基壳聚糖。

所述酸化剂为相对密度在1.21、乳酸酐含量在10%的乳酸。

一种壳聚糖生物成膜胶的制备方法，包括如下步骤：

A、在容器中加入去离子水总量2/3的去离子水，在搅拌状态下加入上述配比的改性壳聚糖，搅拌至完全溶解；

B、在搅拌状态下加入上述配比的改性壳聚糖、酸化剂以外的其它原料，继续搅拌6min后真空过滤，得到滤渣和滤液；

C、在滤渣中加入剩余的去离子水，继续搅拌6min后真空过滤，得到滤液；

D、合并两次滤液，在搅拌状态下加入酸化剂，调整pH至5.4，灌装。

临床应用例2：曾女士，26岁，症状为整形伤口，采用本发明实施例2的壳聚糖生物成膜胶，每日喷雾伤口三次，连续使用15天后，没出现感染，创面愈合良好。

实施例3

一种壳聚糖生物成膜胶，包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        3%

薄荷              0.08%

酸化剂            0.1%

黄芩              0.3%

黄柏              0.2%

去离子水          余量。

所述改性壳聚糖是由脱乙酰度为80%的壳聚糖盐酸盐和羧化度为85%的羧甲基壳聚糖组成的混合物，壳聚糖盐酸盐与羧甲基壳聚糖的重量比为2.5:1。

所述酸化剂为相对密度在1.22、乳酸酐含量在15%的乳酸。

一种壳聚糖生物成膜胶的制备方法，包括如下步骤：

A、在容器中加入去离子水总量1/2的去离子水，在搅拌状态下加入上述配比的改性壳聚糖，搅拌至完全溶解；

B、在搅拌状态下加入上述配比的改性壳聚糖、酸化剂以外的其它原料，继续搅拌7min后真空过滤，得到滤渣和滤液；

C、在滤渣中加入剩余的去离子水，继续搅拌7min后真空过滤，得到滤液；

D、合并两次滤液，在搅拌状态下加入酸化剂，调整pH至6.2，灌装。

临床应用例3：杨先生，37岁，症状为湿疹，采用本发明实施例3的壳聚糖生物成膜胶，每日喷雾伤口三次，连续使用15天后，湿疹减少80%。

实施例4

一种壳聚糖生物成膜胶，包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        4.5%

薄荷              0.12%

酸化剂            0.12%

黄芩              0.35%

黄柏              0.25%

去离子水          余量。

所述改性壳聚糖是脱乙酰度为75%的壳聚糖盐酸盐。

所述酸化剂为相对密度在1.23、乳酸酐含量在5%的乳酸。

一种壳聚糖生物成膜胶的制备方法，包括如下步骤：

A、在容器中加入去离子水总量2/3的去离子水，在搅拌状态下加入上述配比的改性壳聚糖，搅拌至完全溶解；

B、在搅拌状态下加入上述配比的改性壳聚糖、酸化剂以外的其它原料，继续搅拌8min后真空过滤，得到滤渣和滤液；

C、在滤渣中加入剩余的去离子水，继续搅拌8min后真空过滤，得到滤液；

D、合并两次滤液，在搅拌状态下加入酸化剂，调整pH至7，灌装。

临床应用例4：何女士，52岁，症状为阴道炎，采用本发明实施例4的壳聚糖生物成膜胶，每日喷雾伤口三次，连续使用15天后，炎症消失。

实施例5

一种壳聚糖生物成膜胶，包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        6%

薄荷              0.15%

酸化剂            0.15%

黄芩              0.4%

黄柏              0.3%

去离子水          余量。

所述改性壳聚糖是羧化度为85%的羧甲基壳聚糖。

所述酸化剂为相对密度在1.24、乳酸酐含量在10%的乳酸。

一种壳聚糖生物成膜胶的制备方法，包括如下步骤：

A、在容器中加入去离子水总量1/2的去离子水，在搅拌状态下加入上述配比的改性壳聚糖，搅拌至完全溶解；

B、在搅拌状态下加入上述配比的改性壳聚糖、酸化剂以外的其它原料，继续搅拌10min后真空过滤，得到滤渣和滤液；

C、在滤渣中加入剩余的去离子水，继续搅拌10min后真空过滤，得到滤液；

D、合并两次滤液，在搅拌状态下加入酸化剂，调整pH至7.8，灌装。

临床应用例5：赵先生，41岁，症状为股癣，采用本发明实施例5的壳聚糖生物成膜胶，每日喷雾伤口三次，连续使用15天后，股癣症状消失。

实施例6

一种壳聚糖生物成膜胶，包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        0.5%

薄荷              0.04%

酸化剂            0.1%

黄芩              0.35%

黄柏              0.3%

去离子水          余量。

所述改性壳聚糖是由脱乙酰度为85%的壳聚糖盐酸盐和羧化度为90%的羧甲基壳聚糖组成的混合物，壳聚糖盐酸盐与羧甲基壳聚糖的重量比为3:1。

所述酸化剂为相对密度在1.25、乳酸酐含量在15%的乳酸。

所述壳聚糖生物成膜胶还包括金银花0.16%、穿心莲0.05%、黄连0.12%、大黄0.2%和连翘0.15%。

本实施例的制备方法与实施例1相同，在此不做赘述。

临床应用例6：钟女士，28岁，症状为刨宫产创伤，采用本发明实施例6的壳聚糖生物成膜胶，每日喷雾伤口三次，连续使用15天后，没有感染，创面愈合良好。

实施例7

一种壳聚糖生物成膜胶，包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        2.5%

薄荷              0.08%

酸化剂            0.12%

黄芩              0.4%

黄柏              0.1%

去离子水          余量。

所述改性壳聚糖是脱乙酰度为95%的壳聚糖盐酸盐。

所述酸化剂为相对密度在1.20、乳酸酐含量在5%的乳酸。

所述壳聚糖生物成膜胶还包括金银花0.18%、穿心莲0.08%、黄连0.14%、大黄0.23%和连翘0.18%。

本实施例的制备方法与实施例2相同，在此不做赘述。

临床应用例7：徐先生，33岁，症状为褥疮，采用本发明实施例7的壳聚糖生物成膜胶，每日喷雾伤口三次，连续使用15天后，褥疮症状消失。

实施例8

一种壳聚糖生物成膜胶，包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        3%

薄荷              0.12%

酸化剂            0.15%

黄芩              0.2%

黄柏              0.15%

去离子水          余量。

所述改性壳聚糖是羧化度为98%的羧甲基壳聚糖。

所述酸化剂为相对密度在1.21、乳酸酐含量在10%的乳酸。

所述壳聚糖生物成膜胶还包括金银花0.2%、穿心莲0.1%、黄连0.16%、大黄0.26%和连翘0.2%。

本实施例的制备方法与实施例3相同，在此不做赘述。

临床应用例8：陈女士，60岁，症状为脚部摔伤，采用本发明实施例8的壳聚糖生物成膜胶，每日喷雾伤口三次，连续使用15天后，没有感染，伤口愈合良好。

实施例9

一种壳聚糖生物成膜胶，包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        4.5%

薄荷              0.15%

酸化剂            0.05%

黄芩              0.25%

黄柏              0.2%

去离子水          余量。

所述改性壳聚糖是由脱乙酰度为90%的壳聚糖盐酸盐和羧化度为95%的羧甲基壳聚糖组成的混合物，壳聚糖盐酸盐与羧甲基壳聚糖的重量比为3.5:1。

所述酸化剂为相对密度在1.23、乳酸酐含量在15%的乳酸。

所述壳聚糖生物成膜胶还包括金银花0.22%、穿心莲0.12%、黄连0.18%、大黄0.29%和连翘0.22%。

本实施例的制备方法与实施例4相同，在此不做赘述。

临床应用例9：马先生，48岁，症状为生殖器感染，采用本发明实施例9的壳聚糖生物成膜胶，每日喷雾伤口三次，连续使用15天后，感染症状消失。

实施例10

一种壳聚糖生物成膜胶，包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        6%

薄荷              0.01%

酸化剂            0.08%

黄芩              0.3%

黄柏              0.25%

去离子水          余量。

所述改性壳聚糖是由脱乙酰度为85%的壳聚糖盐酸盐和羧化度为90%的羧甲基壳聚糖组成的混合物，壳聚糖盐酸盐与羧甲基壳聚糖的重量比为3:1。

所述酸化剂为相对密度在1.24、乳酸酐含量在10%的乳酸。

所述壳聚糖生物成膜胶还包括金银花0.24%、穿心莲0.15%、黄连0.2%、大黄0.32%和连翘0.25%。

本实施例的制备方法与实施例5相同，在此不做赘述。

临床应用例10：黄女士，30岁，症状为痔疮手术感染，采用本发明实施例10的壳聚糖生物成膜胶，每日喷雾伤口三次，连续使用15天后，感染症状消失。

临床疗效观察结果显示，本发明的壳聚糖生物成膜胶喷雾后成膜，能防止水分和体液的过度散失；抵御细菌的入侵，防止感染；与创面帖合良好，不会造成更换敷料带来二次损伤；透湿、透气并使创面处于湿润但不会积液；生物相容性好，并具有能促进伤口愈合的功能。

    对实施例1~10得到的壳聚糖生物成膜胶分别进行了药理测试，实验结果如下：

测试1：产品性能参数检测

对本发明制备的液体敷料性能参数进行检测，实施例1~10的产品均符合以下要求：

1、性状：为微黄色，透明液体，质地均匀。

2、pH：取实施例1~10的样品各少许，用pH计测得pH都在4.5~7.8之间。

测试2：伤口液体敷料样品抑菌效果

按《药品微生物检验手册》第18章第1节管碟法进行试验，结果显示本发明的产品均有明显抑菌圈，说明对金色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、绿脓杆菌的生长有明显抑制作用，测定结果参见表1。

表1 各个试验组的抑菌圈直径（mm）

抑菌直径	实施例1	实施例2	实施例3	实施例4	实施例5
						金黄色葡萄球菌	21.6±0.9	22.4±0.7	22.1±0.8	23.2±0.9	21.7±0.6
大肠杆菌	18.1±0.7	19.2±0.6	18.5±0.9	19.6±1.0	20.3±0.8
						白色念珠菌	23.5±0.9	24.1±0.7	23.2±0.8	24.4±0.7	25.2±0.6
绿脓杆菌	13.8±1.0	14.2±0.9	13.6±0.6	14.5±0.9	15.2±0.8
						抑菌直径	实施例6	实施例7	实施例8	实施例9	实施例10
金黄色葡萄球菌	22.5±0.7	21.8±0.9	21.2±1.0	22.3±0.6	22.8±0.8
						大肠杆菌	19.4±0.8	18.7±0.7	20.6±0.6	19.8±0.9	18.9±1.0
白色念珠菌	23.7±0.9	24.8±0.8	25.4±0.9	23.9±1.0	24.6±0.7
						绿脓杆菌	13.2±0.6	14.8±0.9	13.5±0.8	15.7±0.7	14.9±0.9

测试3：液体敷料样品本身细菌测定

分别按GB/T14233.2-1993有关规定和GB15980-1995规定的方法进行试验，测定实施例1~10制备的液体敷料，结果表明样品本身均无菌。

测试4：液体敷料样品皮肤刺激指数（PII）测定

按GB/T16886.10-2000规定的封闭式致敏试验方法进行测定，结果表明本发明制备的液体敷料均无皮肤致敏反应。检测结果参见表2。

表2 封闭式致敏试验

测试项目	实施例1	实施例2	实施例3	实施例4	实施例5
						皮肤刺激指数	0	0	0	0	0
皮肤致敏	无	无	无	无	无
						测试项目	实施例6	实施例7	实施例8	实施例9	实施例10
皮肤刺激指数	0	0	0	0	0
						皮肤致敏	无	无	无	无	无

测试5：生物相容性实验

将实施例1~10的液体敷料分别注入白兔体内，定时观察，连续8天体重、进食、体温、活动无异常。说明本发明的液体敷料具有良好的生物相容性。

测试6：对创伤伤口愈合的对比试验

供试品：实施例1~10制备的液体敷料，对照品云南白药。

1、促凝血作用

凝血时间测定方法：分别按下表取10mg各组合供试品，加入新鲜血液1ml，摇匀，记录血液凝固时间。本发明的羧甲基壳聚糖液体敷料显示出抗凝血作用，与正常凝血时间比较，羧甲基壳聚糖液体敷料凝血时间平均提前25.65％，明显优于云南白药，结果见表3。

表3 凝血时间测定结果（min）

凝血时间（min）	正常凝血	实施例1	实施例2	实施例3	实施例4	实施例5
							1	9.36	6.54	6.89	6.75	6.92	6.64
2	9.17	6.90	6.69	7.04	6.56	7.06
							3	8.95	6.57	6.93	6.85	6.91	6.78
平均值	9.16	6.67	6.84	6.88	6.80	6.83
							提前	0.00	27.18	25.32	24.89	25.76	25.43
凝血时间（min）	实施例6	实施例7	实施例8	实施例9	实施例10	云南白药
							1	6.65	7.03	6.82	6.87	6.67	8.65
2	6.73	6.84	6.55	7.07	7.01	8.34
							3	6.83	6.59	7.02	6.88	6.62	8.91
平均值	6.74	6.82	6.92	6.83	6.77	8.63
							提前	26.42	25.55	24.45	25.44	26.09	5.79

2、促进伤口愈合作用

实验动物采用雄性Wister大鼠，每组10只动物。分别于伤后3、6、10、15、21d观察。大鼠背部用8％硫化钠液脱毛，24h后经腹腔给予戊巴比妥钠，麻醉成功后用手术剪剪出直径约为1.0cm的圆形全皮切口，用70％酒精溶液消毒，分别将实施例1~10所得供试敷料涂布在伤口处，用石蜡脱脂纱布覆盖，再用绷带包扎。伤后经腹腔给予生理盐水。分别将实施例1~10所得的敷料覆盖创面，作为试验组1~10；对照组用0.2％依沙丫啶溶液处理，包扎，于各取样时间点计算创面愈合率。

计算创面愈合率的方法如下：先将创面标记在半透明纸上，再以此为模板，将质地均匀的硬纸片剪成同样大小，然后用天平称重，以硬纸片重量间接地表示创面大小。

按下试计算创面愈合率：

创面愈合率（％）＝（原始创面面积-未愈合创面面积）/原始创面面积。

病理检查，了解创面愈合质量，并根据创面愈合情况确定愈合时间。实验结果如表4所示：

表4 各个试验组的创伤愈合率（％）

取样天数	3d	6 d	10 d	15 d	21 d
						对照组	4.6±0.9	10.5±1.1	30.7±1.2	51.2±0.9	76.5±1.0
实施例1	21.1±1.3	33.6±1.1	66.2±1.2	87.4±1.0	96.3±1.3
						实施例2	23.3±1.1	36.9±0.9	60.5±1.3	86.7±1.1	98.2±1.2
实施例3	22.7±0.9	38.3±1.1	63.1±1.0	87.4±1.2	96.8±1.3
						实施例4	24.5±1.0	39.6±1.3	67.8±0.9	85.6±1.4	97.5±1.1
实施例5	23.2±1.2	35.4±1.0	65.5±1.2	86.2±1.2	98.9±0.9
						实施例6	25.9±0.9	33.1±1.1	61.6±1.3	87.4±1.2	96.7±1.3
实施例7	24.8±1.1	35.7±1.3	66.3±1.2	88.5±0.9	98.3±1.3
						实施例8	22.4±1.0	34.9±1.3	64.1±0.9	85.7±1.0	97.6±1.1
实施例9	26.7±0.9	36.2±1.2	62.6±1.3	87.8±1.1	96.4±1.2
						实施例10	25.2±0.9	37.8±1.0	65.3±1.1	86.5±1.3	98.1±1.2

由表4可知，本发明的液体敷料施用后，各取样点的创面平均愈合率均高于对照组，且21天时创面平均愈合率为97％左右，高于对照组约20％，说明本发明的液体敷料促进伤口愈合作用非常好。

上述实施例为本发明较佳的实现方案，除此之外，本发明还可以其它方式实现，在不脱离本发明构思的前提下任何显而易见的替换均在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种壳聚糖生物成膜胶，其特征在于：包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        0.5~6%

薄荷              0.01~0.15%

酸化剂            0.01~0.15%

黄芩              0.2~0.4%

黄柏              0.1~0.3%

去离子水          余量；

所述壳聚糖生物成膜胶的制备方法包括如下步骤：

A、在容器中加入去离子水总量1/2~2/3的去离子水，在搅拌状态下加入上述配比的改性壳聚糖，搅拌至完全溶解；

B、在搅拌状态下加入上述配比的改性壳聚糖、酸化剂以外的其它原料，继续搅拌5~10min后真空过滤，得到滤渣和滤液；

C、在滤渣中加入剩余的去离子水，继续搅拌5~10min后真空过滤，得到滤液；

D、合并两次滤液，在搅拌状态下加入酸化剂，调整pH至4.5~7.8，灌装。

2.根据权利要求1所述的一种壳聚糖生物成膜胶，其特征在于：包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        2.5~4.5%

薄荷              0.04~0.12%

酸化剂            0.08~0.12%

黄芩              0.25~0.35%

黄柏              0.15~0.25%

去离子水          余量。

3.根据权利要求1所述的一种壳聚糖生物成膜胶，其特征在于：包括以下重量百分比的原料：

改性壳聚糖        3%

薄荷              0.08%

酸化剂            0.1%

黄芩              0.3%

黄柏              0.2%

去离子水          余量。

4.根据权利要求1所述的一种壳聚糖生物成膜胶，其特征在于：所述改性壳聚糖是脱乙酰度为70~95%的壳聚糖盐酸盐和/或羧化度≥80%的羧甲基壳聚糖。

5.根据权利要求4所述的一种壳聚糖生物成膜胶，其特征在于：所述改性壳聚糖是由脱乙酰度为80~90%的壳聚糖盐酸盐和羧化度为85~95%的羧甲基壳聚糖组成的混合物，壳聚糖盐酸盐与羧甲基壳聚糖的重量比为2.5~3.5:1。

6.根据权利要求1所述的一种壳聚糖生物成膜胶，其特征在于：所述酸化剂为相对密度在1.20~1.25、乳酸酐含量在5~15%的乳酸。

7.根据权利要求1所述的一种壳聚糖生物成膜胶，其特征在于：所述壳聚糖生物成膜胶还包括金银花0.16~0.24%、穿心莲0.05~0.15%、黄连0.12~0.2%、大黄0.2~0.32%和连翘0.15~0.25%。

8.根据权利要求1所述的一种壳聚糖生物成膜胶，其特征在于：所述壳聚糖生物成膜胶还包括金银花0.18~0.22%、穿心莲0.08~0.12%、黄连0.14~0.18%、大黄0.23~0.29%和连翘0.18~0.22%。

9. 根据权利要求1所述的一种壳聚糖生物成膜胶，其特征在于：所述壳聚糖生物成膜胶还包括金银花0.2%、穿心莲0.1%、黄连0.16%、大黄0.26%和连翘0.2%。