CN103392584B - 一种使用龙须菜孢子育苗的繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种龙须菜孢子育苗的繁殖方法；具体方法步骤如下：1)孢子采集，2)室内培养，3)海区挂养与时期控制。本发明所述的一种龙须菜孢子育苗的繁殖方法优势如下：1、有效解决大面积推广所需种源问题；2、解决渡夏过程中，龙须菜的室内保存问题；3、育苗的稳定性高、可控性强；4、有效降低因“南用北调”、“北用南调”所产生的费用及人力、物力消耗；5、较营养繁殖而言有性生殖育苗可大量繁育出不同遗传背景的种苗，也可有选择性的培育适应不同海区生长的苗种并在一定程度上缓解种质的退化问题；6、加速龙须菜育种工作中良种筛选的速度。
Description
技术领域
本发明涉及海洋藻类的繁殖方法，特别涉及一种龙须菜孢子育苗的繁殖方法。
背景技术
目前，龙须菜以营养繁殖的方式通过藻段夹苗进行栽培，在长期的栽培过程中，面临一些问题：1所育种苗单一，受海区恶劣环境的影响发生遗传变异、种质退化，不能保持母体优良的性状；2大面积推广所需良种来源问题。栽培所需苗种直接取自浮法加上采收的藻体，约占总产量的20-30％，而且降低栽培的利益；3长期面临着高温不能渡夏的问题，导致夏季以后种苗来源的限制与缺失，因而有人提出室内渡夏与冷库保存的策略，但是如此庞大的藻体所占用的室内空间以及人工费用，让人望而却步；4龙须菜的栽培主要分布在南方的福建、广州沿海，北方的山东荣成等地。待栽培季节来临时，只能采用“南用北调”、“北用南调”的传统方法，不完全统计运输费用占到种苗费用的15％，耗费大量人力、物力；5海上育苗易受环境的影响，育苗不稳定，可控性差。
20世50年代，我国开始进行江蓠的人工栽培试验；60年代初进行江蓠的采孢子育苗实验，但至目前为止有关龙须菜的室内采孢子育苗未见任何报道；70年代我国研究成功了江蓠半人工育苗技术。80年代提出龙须菜异地栽培的思路，并于1988年12月在福建连江进行南移实验初获成功；90年代培育出龙须菜耐高温新品系981，使得每亩龙须菜的产量达1000千克以上。03年开始中国渔业统计年鉴开始记载龙须菜产量，至06年渔业统计年鉴报道全国江蓠栽培规模已达5266公顷，年产量达98563t鲜品，位居世界前列，继海带、裙带菜和紫菜在中国海藻栽培业中位居第四。下图为历年江蓠产量(主要为龙须菜)：可知，总产量呈上升趋势，但近年来增幅缓慢，分析原因主要为大面积推广所需良种来源问题抑制栽培业蓬勃发展。
为促进龙须菜栽培能够健康、稳定、持续的发展，解决龙须菜栽培中得实际遇到的问题，应着手于两方面的工作，即：一建立遗传上稳定的纯系，实现良种化栽培，尤其是开发龙须菜耐高温新品系，从根本上解决龙须菜不能渡夏的实际问题；二探索龙须菜采孢子育苗途径，实现龙须菜由半人工向全人工育苗的转变，实现龙须菜多元化栽培，解决龙须菜推广所需大量苗种问题。其中，建立稳定纯系，良种从筛选到鉴定，从室内研究到生产应用，从种质审定到验收，并非一朝一夕之事，整个周期下来最快也要6-10年。单一的良种也不可能适应于所有栽培海区，并有退化的可能。而探索龙须菜新的育苗与栽培途径是行之有效的途径，且新技术一旦建立可长期使用，经久不衰！
目前，海带、裙带菜和紫菜三大栽培海藻都运用采孢子育苗的手段进行苗种的繁育，技术成熟、稳定性好、群众基础扎实、可参考性强。在整个过程中拟要解决的关键性问题为：附苗器的选择，孢子放散的规律及影响条件，采孢子的室内操作性及相关影响因素，采苗后室内培养时间，育苗期的选择，海区环境调查等等。
龙须菜为典型的同型世代交替生活史，有许多关于龙须菜孢子放散最佳条件的研究，研究表明龙须菜的四分孢子体(2n)可释放四分孢子(n)，果孢子体(2n)可释放果孢子(2n)；通过采孢子育苗的方法是可行的。
发明内容
针对现有技术中存在的缺陷，本发明的目的在于提供一种龙须菜孢子育苗的繁殖方法；
具体方法步骤如下：
1)孢子采集
将采集箱内注满海水，下水层放置空白网帘，成熟的龙须菜通过水平夹苗的方式放于上水层且完全被海水覆盖，所述采集箱顶部用保鲜膜密封，对网帘上的孢子每隔4小时进行跟踪计数，在10*10放大倍率显微镜下，每个网帘上孢子密度达到40～50个/视野即可；
2)室内培养
将经过步骤1)的带有孢子的网帘在室内培养1周～一个月，培养的温度20～25℃；盐度30‰；光照强度1000～4500lx，直至孢子长成盘状体或刚开始直立生长；
3)海区挂养与时期控制
选择近海内湾，水质清澈，风浪较小，盐度28～33‰，温度18℃～28℃的海区，水平挂养水深0.5米，每周清洗一次网帘，在水中涮洗使大部分淤泥掉落，3～4周即可长成幼苗。
在上述方案的基础上，所述网帘采用在棉绳上涂树脂的方法制成。
在上述方案的基础上，所述网帘的制备方法为：
1)制作长方形网帘框2，在网帘框的四角各固定一个挂耳3；
2)用棉绳1在网帘框2上进行缠绕，制成网帘；
3)将树脂均匀的涂到网帘的正面上；
4)网帘正面的树脂凝固后，按照步骤3)在反面涂树脂并待其凝固；
5)海水浸泡：将经过步骤4)后的网帘在海水中浸泡4-6日。
在上述方案的基础上，所述树脂为将环氧树脂与聚酰胺树脂等质量混合，加入2～3倍体积的工业酒精稀释，混合均匀而成。
在上述方案的基础上，所述网帘用棉绳长度为3.2m。
在上述方案的基础上，成熟的龙须菜1g对应一个网帘。
在上述方案的基础上，所述采集箱底部设置潜水泵用于使采集箱内水循环。
在上述方案的基础上，所述成熟的龙须菜为成熟的四分孢子体或已受精且成熟的果孢子体。
本发明所述的一种龙须菜孢子育苗的繁殖方法优势如下：1、有效解决大面积推广所需种源问题；2、解决渡夏过程中，龙须菜的室内保存问题；3、育苗的稳定性高、可控性强；4、有效降低因“南用北调”、“北用南调”所产生的费用及人力、物力消耗；5、较营养繁殖而言有性生殖育苗可大量繁育出不同遗传背景的种苗，也可有选择性的培育适应不同海区生长的苗种并在一定程度上缓解种质的退化问题；6、加速龙须菜育种工作中良种筛选的速度。
附图说明：
图1成熟的果孢子体显微形态图；
图2成熟的果孢子体的内部照片；
图3成熟的四分孢子体；
图4成熟的果孢子体中的孢子日散放量；
图5成熟的四分孢子体中的孢子日散放量；
图6不同密度孢子的线性生长速率图；
图7不同密度孢子的萌发率图；
图8本发明所述的网帘结构示意图；
图9本发明所述包子采集箱结构示意图。
具体实施方式
实施例1
一种龙须菜的繁殖方法，包括如下步骤：
1)孢子采集
将采集箱6内注满海水，下水层放置空白网帘4，成熟的龙须菜7通过水平夹苗的方式放于上水层且完全被海水覆盖，所述采集箱6顶部用保鲜膜5密封，对网帘4上的孢子每隔4小时进行跟踪计数，在10*10放大倍率显微镜下，每个网帘上孢子密度达到40～50个/视野即可；
2)室内培养
将经过步骤1)的带有孢子的网帘在室内培养1周～一个月，培养的温度20～25℃；盐度30‰；光照强度1000～4500lx，直至孢子长成盘状体或刚开始直立生长，前一周培养条件为20℃，1000lx，30‰，12/12h/h；之后逐渐改为25℃，4500lx，30‰，12/12h/h；
3)海区挂养与时期控制
选择近海内湾，水质清澈，风浪较小，盐度28～33‰，温度18℃～28℃的海区，水平挂养水深0.5米，每周清洗一次网帘，在水中涮洗使大部分淤泥掉落，3～4周即可长成幼苗。
在上述方案的基础上，所述采集箱底部设置潜水泵用于使采集箱内水循环。
在上述方案的基础上，所述成熟的龙须菜为成熟的四分孢子体或已受精且成熟的果孢子体。
实施例2
网帘4的制备方法为：
1)制作长方形网帘框2，在网帘框2的四角各固定一个挂耳3；
2)用棉绳1在网帘框2上进行缠绕，制成网帘4；
3)将树脂均匀的涂到网帘4的正面上，60℃放置6小时或者常温下(20～25℃)放置24小时；
4)网帘4正面的树脂凝固后，按照步骤3)在反面涂树脂并待其凝固；
5)海水浸泡：将经过步骤4)后的网帘4在海水中浸泡4-6日。
在上述方案的基础上，所述树脂为将环氧树脂与聚酰胺树脂等质量混合，加入2～3倍体积的工业酒精稀释，混合均匀而成。
其中：
环氧树脂：中华集团济南树脂厂或中外合资济南恒泰聚合物有限公司生产；
聚酰胺树脂为低分子-650-聚酰胺树脂，镇江丹宝树脂有限公司)。
在上述方案的基础上，所述网帘4用棉绳长度为3.2m。
在上述方案的基础上，成熟的龙须菜1g对应一个网帘。
实施例3
成熟的龙须菜选取和孢子日放散规律：
选取成熟的四分孢子体或已受精且成熟的果孢子体。藻体成熟时可根据其在显微镜下的形态进行判断，如下图1所示，发育成熟的果孢子体寄生在雌配子体之上，突出于藻体表面；如图2所示，发育成熟的果孢子体的内部照片，圆形为成熟的果孢子；如图3所示，成熟的四分孢子体，表面鲜红色为四分孢子囊。
孢子的日放散规律：如图4所示，成熟的果孢子从开始放散到放散结束经历7天，第四天时大量放散，放散量约为每个囊果2000个孢子，一个果孢子体总共放散量可高约4300～4500个；如图5所示，四分孢子体放散可持续大约10天，第三天起开始大量放散，第6天达到高峰，继而突然下降，10天以后基本放散完毕，总放散量可达每克鲜重藻体1.9-2.3×106个。
孢子的附着密度显著影响孢子的萌发率与生长速度
我们定义低、中和高密度如表1。
结果如图6和图7所示，中密度在萌发率与线性生长速度上都显著高于低密度和高密度(P＜0.05)，因而采取中密度作为采孢子的适宜附着量。
表1低、中和高密度值
| 密度类型 | 显微镜(10×10)视野 | 换算成每米网帘所需个数 |
| 低 | 10～20个/视野 | 1～2×104 |
| 中 | 40～50个/视野 | 4～5×104 |
| 高 | 70～80个/视野 | 7～10×104 |
Claims (7)
1.一种使用龙须菜孢子育苗的繁殖方法，其特征在于包括如下步骤：
1)孢子采集
将采集箱内注满海水，下水层放置空白网帘，成熟的龙须菜通过水平夹苗的方式放于上水层且完全被海水覆盖，所述采集箱顶部用保鲜膜密封，对网帘上的孢子每隔4小时进行跟踪计数，在10*10放大倍率显微镜下，每个网帘上孢子密度达到40～50个/视野即可；
2)室内培养
将经过步骤1)的带有孢子的网帘在室内培养1周～一个月，培养的温度20～25℃；盐度30‰；光照强度1000～4500lx，直至孢子长成盘状体或刚开始直立生长；
3)海区挂养与时期控制
选择近海内湾，水质清澈，风浪较小，盐度28～33‰，温度18℃～28℃的海区，水平挂养水深0.5米，每周清洗一次网帘，在水中涮洗使大部分淤泥掉落，3～4周即可长成幼苗；
所述网帘采用在棉绳上涂树脂的方法制成。
2.根据权利要求1所述的使用龙须菜孢子育苗的繁殖方法，其特征在于所述网帘的制备方法为：
1)制作长方形网帘框，在网帘框的四角各固定一个挂耳；
2)用棉绳在网帘框上进行缠绕，制成网帘；
3)将树脂均匀的涂到网帘的正面上；
4)网帘正面的树脂凝固后，按照步骤3)在反面涂树脂并待其凝固；
5)海水浸泡：将经过步骤4)后的网帘在海水中浸泡4-6日。
3.根据权利要求2所述的使用龙须菜孢子育苗的繁殖方法，其特征在于所述树脂为将环氧树脂与聚酰胺树脂等质量混合，加入2～3倍体积的工业酒精稀释，混合均匀而成。
4.根据权利要求2所述的使用龙须菜孢子育苗的繁殖方法，其特征在于所述网帘用棉绳长度为3.2m。
5.根据权利要求4所述的使用龙须菜孢子育苗的繁殖方法，其特征在于成熟的龙须菜1g对应一个网帘。
6.根据权利要求1所述的使用龙须菜孢子育苗的繁殖方法，其特征在于所述采集箱底部设置潜水泵用于使采集箱内水循环。
7.根据权利要求1所述的使用龙须菜孢子育苗的繁殖方法，其特征在于所述成熟的龙须菜为成熟的四分孢子体或已受精且成熟的果孢子体。
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Non-Patent Citations (3)
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| Publication number | Publication date |
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