CN103120648B - 一种异丙肌苷口服制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种异丙肌苷口服制剂，其所用原料包括：异丙肌苷、助崩剂、崩解剂、粘合剂，所述异丙肌苷、助崩剂和崩解剂的重量比依次为：1：0.1-0.2：0.08-0.2。该口服制剂崩解及溶出更快、稳定性更高。

Description

一种异丙肌苷口服制剂及其制备方法

本申请是针对母案申请（申请号：2009100818724，发明名称：一种异丙肌苷的制备方法及其口服制剂）提出的分案申请）

技术领域

本发明涉及一种异丙肌苷的制备方法。

本发明还涉及一种异丙肌苷的口服制剂。

背景技术

异丙肌苷（Isoprinosine）为肌苷与二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐(1:3)的复合物。

本品已在欧洲、意大利、加拿大、日本等五十多个国家和地区上市，临床疗效显著，毒副作用小，是一疗效确切的抗病毒及免疫功能调节剂。异丙肌苷原为一抗病毒药，对人体疱疹、流感及鼻病毒感染均有疗效。用于单纯疱疹病毒感染的患者疗效显著。据认为本品的抗病毒疗效，除由于其直接的抗病毒作用外，也与其免疫增强作用有关。现发现异丙肌苷具有增强机体免疫功能的作用。主要是增强细胞免疫功能，又作为一新的免疫调节剂。临床研究表明，异丙肌苷可增加致有丝分裂因子所致的淋巴细胞增殖，增加抗体的生成以及增加细胞因子，如白介素2(IL-2)等的生成。临床应用于多发性口角炎和局灶性生殖器炎，疗效显著。本品具有疗效高，毒副作用小等特点。进一步的研究证明，异丙肌苷能促进淋巴细胞分化及调节淋巴细胞的功能，具有抗艾滋病病毒的作用，可延缓艾滋病的病程进展。此外还具有抗衰老和增强记忆力作用。国外已将异丙肌苷用于各种病毒性感染、免疫系统低下、CMV、EBV、流感及上、下呼吸道感染、单纯疱疹、带状疱疹、麻疹、腮腺炎、病毒性结膜炎的治疗；同时也用于急、慢性B型肝炎，亚急性硬化性全脑炎(SSPE)、疲劳综合症等。异丙肌苷在斯堪的那维亚(Scandinavian)用于艾滋病的治疗。

综合国内外文献报道，异丙肌苷的合成可由所用原料的不同而有多条工艺路线，但这些工艺路线均存在收率低、使用的溶剂易燃易爆且毒性较大、后处理复杂等问题。异丙肌苷的合成据文献报道多采用对甲基苯胺氧化法，具体方法为：以对甲基苯胺为原料，在醋酐中反应，生成对乙酰胺基甲苯。经高锰酸钾氧化、再与二甲胺基异丙醇成盐、进而与肌苷复合，得异丙肌苷。其收率约为60%。该方法需用大量的高锰酸钾氧化，不利于工业化生产。目前，对甲基苯胺氧化中成盐反应采用乙醚进行后处理，也有文献报道采用四氢呋喃后处理，但收率均不理想。

目前，异丙肌苷的上市剂型主要为片剂和胶囊。但由于异丙肌苷有较强的吸湿性，因而片剂和胶囊均存在稳定性较差的缺点，而且现有异丙肌苷制剂均存在崩解慢、溶出度及生物利用度低，从而影响疗效的问题。

综上所述，本发明人认为有必要将现有异丙肌苷合成方法进一步优化，并研制一种更稳定、溶出度及生物利用度更高的异丙肌苷口服制剂，以满足国内市场需求。

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，一方面，本发明提供了一种更适于工业化生产的异丙肌苷的合成方法，进一步，本发明提供了一种收率更高的异丙肌苷的合成方法。

另一方面，本发明提供了一种崩解及溶出更快、稳定性更高的异丙肌苷口服制剂及其制备工艺。

根据本发明的一方面，本发明所述异丙肌苷的合成方法包括如下步骤：

1）对乙酰胺基苯甲酸与二甲胺基异丙醇反应，得到二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐；

2）二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐与肌苷按3：1的摩尔比反应，得到异丙肌苷。

优选地，在步骤1）中，采用乙酸乙酯对所得的二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐进行后处理。

在本发明的合成路线中，以肌苷、二甲胺基异丙醇、对乙酰胺基苯甲酸为原料。对乙酰胺基苯甲酸与二甲胺基异丙醇在无水乙醇或甲醇，优选无水乙醇中反应，制得二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐，进而与肌苷按3：1的摩尔比反应制得异丙肌苷。

具体反应如下：

对乙酰胺基苯甲酸与二甲胺基异丙醇在无水乙醇中反应，其摩尔比为1：1.2，反应2～5小时，例如2小时，加乙酸乙酯，冷却、过滤、洗涤、干燥，得白色结晶性粉末，即二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐。收率约95％。

第二步复合反应：

取二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐、肌苷适量（肌苷与二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐摩尔比为1：3），分别用水、乙醇溶解后，搅拌下减压蒸干。加乙酸乙酯共沸脱水至无水蒸出，混悬、分离、洗涤、干燥，得白色固体粉末，即异丙肌苷。收率约98％。

异丙肌苷的合成据文献报道多采用对甲基苯胺氧化法，具体方法为：以对甲基苯胺为原料，在醋酐中反应，生成对乙酰胺基甲苯。经高锰酸钾氧化、再与二甲胺基异丙醇成盐、进而与肌苷复合，得异丙肌苷。其收率约为60%。

该方法需用大量的高锰酸钾氧化，不利于工业化生产，而目前国内可购得对乙酰胺基苯甲酸原料，因此本发明人采用二甲胺基异丙醇与对乙酰胺基苯甲酸成盐，再与肌苷复合反应制备。该制备方法简捷，后处理简单，较有利于工业化生产。

目前，对甲基苯胺氧化中成盐反应采用乙醚进行后处理，也有文献报道采用四氢呋喃后处理，但收率均不理想。本发明工艺的成盐反应采用乙酸乙酯后处理，使得二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐更容易结晶。较之现有文献的乙醚、四氢呋喃更安全，更容易获取目标产物。通过成盐反应比较实验（参见实施例5），可以看出，在成盐反应中采用乙酸乙酯进行后处理，可显著提高反应收率。

根据本发明的另一方面，本发明提供了一种异丙肌苷口服制剂，其所用原料包括：异丙肌苷、助崩剂、崩解剂、粘合剂，所述异丙肌苷、助崩剂和崩解剂的重量比依次为：1：0.1-0.2：0.08-0.2。

本发明所述的异丙肌苷口服制剂以异丙肌苷作为原料药，以交联聚乙烯吡咯烷酮、交联羧甲基纤维素钠、微粉硅胶等作为辅料，在每1重量份的异丙肌苷原料药中，配入0.1-0.2重量份的助崩剂、0.08-0.2重量份的崩解剂和适量粘合剂。

上述助崩剂优选为微粉硅胶，崩解剂优选为交联聚乙烯吡咯烷酮和/或交联羧甲基纤维素钠，粘合剂优选为3%～20%的聚维酮乙醇（75%）溶液或1%～15%羟丙基甲基纤维素乙醇（75%）溶液。上述所举出的助崩剂、崩解剂和粘合剂仅为示例性的，本发明并不限于此，其它本领域常规的助崩剂、崩解剂和粘合剂均可有选择地应用于本发明。

同时，为增加产品的稳定性，在制备工艺中加入有针对性的颗粒包衣工艺，以提高异丙肌苷的稳定性。

本发明的异丙肌苷口服制剂的制备工艺为取处方量的异丙肌苷和上述辅料加入适量的粘合剂，制粒，干燥，整粒，然后选择防潮的包衣粉对其进行包衣，干燥，过筛，得到的颗粒可用于胶囊、片、颗粒剂等口服制剂的制备。

由于异丙肌苷具有吸湿性，在空气中易受潮，因此加入包衣工序，可以起到防潮作用。

通过包衣用量筛选试验（参见实施例6），可以确定，颗粒包衣时，控制颗粒增重10%～12%，颗粒外观较好，色泽均一，含量较稳定，颗粒包衣完全，防潮效果显著。

本发明的异丙肌苷口服制剂的制备方法，包括下述步骤：

1）将异丙肌苷、助崩剂和崩解剂充分混合均匀；

2）加入粘合剂制成软材，制粒，干燥，整粒；

3）用包衣粉对颗粒进行包衣，得包衣颗粒。

本发明的口服制剂在保证主药剂量适宜的前提下，通过加入适量的助崩剂、崩解剂、表面活性剂，其崩解及分散速度加快，有利于提高生物利用度。而且在工艺中加入胶颗粒包衣后药物与外界隔绝，可防潮，防氧化，大大提高了本品的稳定性。试验结果（参见实施例7）表明，本发明的口服制剂具有快速崩解、溶出、稳定性高的优点。

为了更好地理解本发明的本质，下面通过对本发明较佳实施方式的描述，详细说明但不限制本发明。

附图说明

图1：本发明制备的异丙肌苷的红外吸收光谱图；

图2～6：本发明制备的异丙肌苷的核磁共振图谱，其中，图2为1H-1HCOSY谱，图3为1H NMR谱，图4为13C NMR谱，图5为DEPT-135谱，图6为HSQC1H NMR谱；

图7A：本发明异丙肌苷的纯度检测中，异丙肌苷对照品溶液的高效液相色谱图；

图7B：本发明异丙肌苷的纯度检测中，异丙肌苷供试品溶液的高效液相色谱图。

具体实施方式

本发明所用试验材料，如无特别说明，均为市售购买产品。

主要原料的来源如下：肌苷，购于河南新乡华星制药厂；对乙酰胺基苯甲酸，购于荣昌化工技术有限公司；二甲胺基异丙醇，购于上海西域机电系统有限公司。

实施例1

合成异丙肌苷，具体操作如下：

1、在100L的反应釜中，加入对乙酰胺基苯甲酸25.65kg，加无水乙醇39.6L溶解，滴加二甲胺基异丙醇16.35kg，反应放热。40℃～50℃反应2小时。冷却、分离、乙酸乙酯洗涤、干燥，得白色结晶性粉末。用混合溶剂重结晶。得37.5kg，收率92.6%。即二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐，熔点146～148℃。

2、.在100L的反应釜中，加入步骤1中制得的二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐12.3kg，加乙醇24.0L溶解。取肌苷3.9kg，用水7.8L溶解后加入。搅拌下减压蒸干。加乙酸乙酯共沸脱水至无水蒸出，混悬、分离、洗涤、干燥，得白色固体粉末16.1kg，反应收率为99.4%。该粉末经红外吸收光谱、核磁共振检测，证实为异丙肌苷，经检验其肌苷含量为23.7%，二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐含量为76.5%。以上检测红外吸收光谱、核磁共振由河南省分析测试中心完成，纯度检测为本公司完成。各项检验所用仪器及图谱如下：1.红外吸收光谱

仪器：岛津8700型傅立叶变换红外光谱，KBr压片法。见图1。

2.核磁共振

仪器：Bruker Avance300核磁共振波谱仪，溶剂D2O.室温测定HNMR,CNMR,DEPT-135,H-HCOSY\HSQC和HMBC谱，H和CNMR的化学位移有仪器自动定标。见图2～6。

3.纯度检测

仪器：UltiMate3000Pump

UltiMate3000Variable Wavelength Detector

色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（5um,φ4.6×150mm）；以0.05mol/L醋酸钠缓冲溶液（取无水醋酸钠4.1g,加水1000ml使溶解，用1mol/L醋酸调节PH至5.0）-甲醇（92：8）为流动相；检测波长为248nm；流速1.0ml/min；柱温25℃。

对照品溶液（1）精密称取肌苷对照品（自制）约17.5mg，置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为肌苷贮备液，精密量取该溶液5ml置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

对照品溶液（2）精密称取二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐对照品（自制）约57.5mg置25ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐贮备液，精密量取该溶液5ml置50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

对照品溶液（3）分别精密量取肌苷贮备液及二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐贮备液各5ml置同一50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，即得。

供试品溶液取本品适量，精密称定，加流动相溶解并稀释制成每1ml含0.3mg的溶液，作为供试品溶液。

测定法分别精密量取供试品溶液及对照品溶液（3）各20ul，注入液相色谱仪，记录色谱图，量取峰面积，按外标法分别计算肌苷与二甲胺基异丙醇-对乙酰胺基苯甲酸盐的含量，即得。图谱为图7A～图7B。

实施例1为实施例2-7提供原料。

实施例2

1.处方

2.制备工艺

将原、辅料分别粉碎过120目筛，取处方量原辅料，充分混合均匀。加入粘合剂制成软材，用20目筛网制粒，60℃通风干燥，16目筛网整粒，用防潮型包衣粉对颗粒进行包衣，锅温控制在45-55℃，锅的转速控制在40-50rpm，按颗粒增重11%，配成浓度为15%醇溶包衣液，以适当的流速喷液包衣，包衣结束后，晾干，所得的颗粒可直接装胶囊或装袋制成颗粒剂，也可加适量润滑剂压片。

实施例3

1.处方

2.制备工艺同实施例2。

实施例4

1.处方

2.制备工艺同实施例2。

实施例5

1.处方

2.制备工艺对颗粒包衣，按颗粒增重12%，其它同实施例2。

实施例6

1.处方

2.制备工艺对颗粒包衣，按颗粒增重11%，其它同实施例2。

实施例7

1.处方

2.制备工艺对颗粒包衣，按颗粒增重10%，其它同实施例2。

实施例8成盐反应比较实验

为证明乙酸乙酯更适于作为本发明成盐反应的后处理试剂，做了以下实验：

在100ml的反应瓶中，加入对乙酰胺基苯甲酸9g，加无水乙醇15ml溶解,分批加入二甲胺基异丙醇6.2g，反应2小时。加一定溶剂析出，冷却、过滤、洗涤、干燥，得白色结晶性粉末。用乙醇/乙酸乙酯混合溶剂重结晶。称重，计算收率。结果见下表：

表1成盐反应试验结果

由以上结果可知，在成盐反应中采用乙酸乙酯进行后处理，可显著提高反应收率。

实施例9包衣用量筛选试验

选用防潮型包衣粉配制包衣液，使颗粒按不同比例增重，结果表明颗粒增重10～12%时，颗粒外观较好，色泽均一，含量较稳定。

表2颗粒增重不同比例时颗粒的性状及含量结果

增重（%）	6	7	9	10	12	15
							颗粒外观	差	差	较好	好	好	较好
含量	98.1	98.5	99.1	99.5	99.8	99.0

通过以下实验确定在颗粒增重10～12%时包衣是否完全：

将样品置于相对湿度（RH）90%的环境中（饱和KNO₃溶液置于干燥器底部，样品置具孔隔板上）放置，于25℃下放置10天，于第0、10天取样，进行增重检查，结果见表1：

表3不同工艺的胶囊内容物吸湿性比较

结论：通过表3可以看出，颗粒包衣时，控制颗粒增重10%～12%，颗粒包衣完全，防潮效果显著。

实施例10异丙肌苷口服制剂的检测

1.检测指标及方法：

1.1崩解时限

照中国药典2005年版二部附录XA崩解时限检查法检测。

1.2溶出速率

照中国药典2005年版附录XC第二法溶出度测定法检测。

以水1000ml为溶剂，转速为每分钟100转，依法操作，经5、10、20、30、45分钟时，取溶液适量，滤过，精密量取续滤液1ml至50ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，做为供试液。另精密称取异丙肌苷对照品适量，加水使溶解并稀释制成每1ml中约含异丙肌苷10μg的溶液作为对照品溶液。照紫外分分光光度法（中国药典2005年版二部附录ⅣA）测定，在259nm的波长处测定吸收度。按两者吸收度的比值计算出溶出量。

1.3.光照试验

取本品，置于光照箱内,光照强度为4500±500Lx的强度下放置10天,于第0、5、10天取样检查,结果与0天样品比较。

1.4.高温试验

取本品，置于60℃的恒温箱内放置10天,于第0、5、10天取样检查，结果与0天样品比较。

1.5.高湿试验

取本品，置于RH75%条件下,于室温放置10天，于第0、5、10天取样检查，结果与0天样品比较。

2实施例2样品检测结果

2.1.崩解时间

	实例1样品	市售异丙肌苷胶囊
			崩解时间（分钟）	5.3	15.6

2.2.溶出速率

时间（分钟）	5	10	20	30	45
						市售胶囊	42.5	50.8	66.1	84.3	95.8.
实例1样品	80.4	93.7	97.8	98.9	99.1

2.3.光照试验：

时间(天)	溶出度	崩解时限	有关物质(%)	含量(%)
					0	98.6%	5′10〞	0.05	99.5
5	98.7%	5′05〞	0.04	99.8
					10	98.1%	6′52〞	0.04	99.2

2.4.高温试验：

时间(天)	溶出度	崩解时限	有关物质(%)	含量(%)
					0	97.2%	5′11〞	0.06	99.4
5	97.9%	5′25〞	0.05	98.7
					10	98.5%	5′42〞	0.04	99.1

2.5.高湿试验：

时间(天)	溶出度	崩解时限	有关物质(%)	含量(%)
					0	98.5%	5′31〞	0.06	99.6
5	99.0%	5′45〞	0.03	98.9
					10	98.1%	6′12〞	0.05	98.1

3实施例3样品检测结果

3.1.崩解时间

	实例2样品	市售异丙肌苷片
			崩解时间（分钟）	6.4	18.9

3.2.溶出速率

时间（分钟）	5	10	20	30	45
						市售片	45.9	58.7	69.1	88.7	98.6.
实例2样品	82.7	92.9	98.4	99.1	99.9

3.3.光照试验：

时间(天)

溶出度

崩解时限

有关物质(%)

含量(%)

0	99.6%	6′10〞	0.04	99.7
					5	99.7%	7′05〞	0.03	99.6
10	99.1%	7′52〞	0.03	99.3

3.4.高温试验：

时间(天)	溶出度	崩解时限	有关物质(%)	含量(%)
					0	98.2%	6′11〞	0.06	99.3
5	99.9%	5′25〞	0.05	98.9
					10	98.9%	5′42〞	0.04	99.0

3.5.高湿试验：

时间(天)	溶出度	崩解时限	有关物质(%)	含量(%)
					0	98.4%	5′31〞	0.06	99.1
5	99.5%	5′45〞	0.03	98.6
					10	99.1%	6′12〞	0.05	98.1

对实施例4-7样品的检测结果与上述结果相似。

结论：以上检测结果说明，本品具有快速崩解、溶出、稳定性高的优点。

以上对本发明较佳实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明所附权利要求的范围。

Claims (5)

1.一种异丙肌苷口服制剂，其特征在于，其所用原料包括：助崩剂、崩解剂、粘合剂以及异丙肌苷，所述异丙肌苷、助崩剂和崩解剂的重量比依次为：1：0.1-0.2：0.08-0.2，所述助崩剂为微粉硅胶，所述崩解剂为交联聚乙烯吡咯烷酮和/或交联羧甲基纤维素钠。

2.权利要求1所述的异丙肌苷口服制剂，其特征在于，所用原料进一步包括包衣粉，所述口服制剂为采用包括下述步骤的方法制备得到：

1)将异丙肌苷、助崩剂和崩解剂充分混合均匀；

2)加入粘合剂制成软材，制粒，干燥，整粒；

3)用包衣粉对颗粒进行包衣，得包衣颗粒。

3.权利要求2所述的异丙肌苷口服制剂，其特征在于，在步骤3)中，对颗粒包衣时，控制颗粒增重10％～12％。

4.权利要求2所述的异丙肌苷口服制剂，其特征在于，所述方法进一步包括下述步骤：将所述包衣颗粒制成胶囊剂、颗粒剂或者片剂。

5.权利要求1所述的异丙肌苷口服制剂的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：

1)将异丙肌苷、助崩剂和崩解剂充分混合均匀，所述异丙肌苷、助崩剂和崩解剂的重量比依次为：1：0.1-0.2：0.08-0.2，所述助崩剂为微粉硅胶，所述崩解剂为交联聚乙烯吡咯烷酮和/或交联羧甲基纤维素钠；

2)加入粘合剂制成软材，制粒，干燥，整粒；

3)用包衣粉对颗粒进行包衣，得包衣颗粒。