CN103110686A

CN103110686A - 一种治疗糖尿病性视网膜病变的药物及其制备方法

Info

Publication number: CN103110686A
Application number: CN2013100435422A
Authority: CN
Inventors: 吴智南; 梁福尧; 周丽娟
Original assignee: HUIZHOU CITY BAIJIRUI MEDICAL CO Ltd; GUANGZHOU HUAHAI PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: GUANGZHOU HUAHAI PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2013-02-04
Filing date: 2013-02-04
Publication date: 2013-05-22
Anticipated expiration: 2033-02-04
Also published as: CN103110686B

Abstract

本发明涉及一种治疗糖尿病性视网膜病变的药物及其制备方法，旨在提供一种疗效确切，药物的生物利用度和稳定性好的治疗糖尿病性视网膜病变的药物；其技术要点是：该药物包括囊壳和囊壳内的内容物，所述的内容物包括下述重量份的组分：90～110份越桔果提取物，4～6份β胡萝卜素，4～20份助悬剂，170～200份助溶剂、0.01～0.06份抗氧化剂；所述的囊壳包括下述重量份的组分：950～1050份明胶，950～1050份水，300～400份的增塑剂，45～55份崩解剂，2.5～125份防腐剂，3～15份色素；疗效确切，药物的生物利用度和稳定性好的治疗糖尿病性视网膜病变的药物；属于生物制药技术领域。

Description

一种治疗糖尿病性视网膜病变的药物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种药物，具体是一种治疗糖尿病性视网膜病变的药物及其制备方法；属于生物制药技术领域。

背景技术

糖尿病性视网膜病变（Diabetic Retinopathy，DR）是糖尿病（Diabetes Mellitus, DM）最常见、最严重且治疗最棘手的眼部并发症，是致盲的最常见原因之一，是一种因糖尿病而引起的微血管神经并发症，由于血—视网膜屏障的破坏，导致视网膜毛细血管闭塞，无灌注区形成，出现视网膜微血管瘤、出血、渗出，继而引起新生血管形成，玻璃体积血、纤维增殖和继发视网膜脱落，最终导致失明。本病早期可无明显的眼部症状，随着病情进展可出现视力减退，或视力骤降，视物变形等，治疗不及时可导致失明。

WHO资料表明，全球糖尿病患者已达1.25个亿，预测到2025年将猛增至2.99亿，而我国的DM患病总人数居世界前列。世界瞩目的WESDR（美国威斯康星糖尿病视网膜病变的流行病学研究）中，病程大于15年的患者中，97%的Ⅰ型糖尿病患者、80%使用胰岛素的Ⅱ型糖尿病患者和55%未使用胰岛素的Ⅱ型糖尿病患者伴有视网膜病变。其中30%Ⅰ型糖尿病患者、10%～15%使用胰岛素的Ⅱ型糖尿病患者和5%未使用胰岛素的Ⅱ型糖尿病患者已伴增殖期视网膜病变。经过4年的前瞻性观察，视网膜病变的发生率分别为20%、15%、10%。据国外报导，糖尿病性盲人每年死亡约14%，从盲到死亡的平均时间为5.8年，50%在5年内死亡。以DR平均发病率来计算，我国DR患者已超1500万，DR是DM最早出现的慢性微血管神经并发症。

治疗DR的基本原则是控制血糖，但并不能有效地阻止DR的发展。针对非增殖期DR治疗的化学药导升明（doxium）、醛糖还原酶抑制剂等药物疗效尚不理想；对于增殖期DR，目前较有疗效的手段是激光光凝和玻璃体切割，虽有一定的效果，但亦存在一定的局限性，还有并发视野损害、网膜脱落等严重后果。

发明内容

针对上述不足，本发明的目的在于提供一种疗效确切，药物的生物利用度和稳定性好的治疗糖尿病性视网膜病变的药物。

本发明的前一技术方案是这样的：该治疗糖尿病性视网膜病变的药物，包括囊壳和囊壳内的内容物，所述的内容物包括下述重量份的组分：90～110份越桔果提取物，4～6份β胡萝卜素，4～20份助悬剂，170～200份助溶剂、0.01～0.06份抗氧化剂；所述的囊壳包括下述重量份的组分：950～1050份明胶，950～1050份水，300～400份的增塑剂，45～55份崩解剂，2.5～125份防腐剂，3～15份色素。

上述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，包括囊壳和囊壳内的内容物，所述的内容物包括下述重量份的组分：100份越桔果提取物，5份β胡萝卜素，6~12份助悬剂，180～190份助溶剂、0.02～0.05份抗氧化剂；所述的囊壳包括下述重量份的组分：1000份明胶，1000份水，350份的增塑剂，50份崩解剂，20～50份防腐剂，10份色素。

进一步的，上述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，所述的助悬剂为蜂蜡。

进一步的，上述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，所述的助溶剂为大豆油或者玉米油或者橄榄油的其中之一。

进一步的，上述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，所述的抗氧化剂为叔丁基对苯二酚或者二丁基羟基甲苯或者丁基羟基茴香醚或者没食子酸丙酯的其中之一。

进一步的，上述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，所述的增塑剂为甘油。

进一步的，上述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，所述的崩解剂为聚乙二醇400或聚乙二醇600的其中之一。

进一步的，上述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，所述的防腐剂为羟苯乙酯、羟苯甲酯、羟苯丙酯、苯甲酸钠、苯甲酸钾、苯甲酸、苯扎溴铵、苯扎氯铵、三氯叔丁醇的其中之一或它们的组合。

进一步的，上述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，所述的着色剂为红氧化铁或者棕氧化铁、紫氧化铁其中之一。

本发明为了改善该品种的疗效，提高药物的生物利用度，对原工艺进行修改，通过实验研究筛选出更优的工艺，将其制成软胶囊，与片剂相比，具有如下优点：本发明制备时不需要加粘合剂和压力，又基本属于溶解或细微粉分散于内容物中，一旦崩解就一同释放，所以显效迅速，比片剂明显快并吸收得更好，所以药物的生物利用度高；β胡萝卜素是脂溶性物质，其只有溶解在油脂中，才能在人体转变进而被吸收，软胶囊的内容物多为油溶性，能提高药物的生物利用度；越桔果提取物花青苷对热、光敏感，软胶囊为冷配法，软胶囊囊壳可添加遮光剂，达到遮光效果，优于片剂；并提高了药物的稳定性。

附图说明

图1为本发明治疗糖尿病视网膜病变药物的制备工艺流程图。

具体实施方式

下面结合具有实施方式，对本发明的权利要求做进一步的详细说明，但不构成对本发明的任何限制，任何人在本发明权利要求范围内所做的有限次的修改，仍在本发明的权利要求范围内。

实施例1

内容物处方

囊壳处方

制备方法：

（1）取处方量的大豆油、蜂蜡与TBHQ混合均匀，加热熔化，放冷至40℃，加入重量比例的越桔果提取物和β胡萝卜素，缓慢搅拌至均匀，再通过胶体磨研磨3次，使成均匀而有一定流动性和切断性的混悬液，自然冷却到室温，备用；

（2）按重量比例称取明胶溶于水中，使其充分溶胀后加入甘油、聚乙二醇400，在真空下搅拌均匀后，加热至75℃使其完全熔化，缓缓放去锅内真空，在连续搅拌下加入以及羟苯乙酯、红氧化铁，混匀、抽真空脱气后保温、静置、待用；

（3）将步骤（2）中配制好的胶液注入设备中形成二层胶带，步骤（1）中药液注入二层胶带之间，使胶带包裹药液轧成胶丸，压出胶丸进行干燥，再用95%乙醇洗去胶丸外油质，沥干，胶丸干燥至干爽，硬度适中，取出，剔除不及格丸，包装，即得本发明软胶囊剂。

实施例2

内容物处方

囊壳处方

按照实施例1所述的制备方法制备。

实施例3

内容物处方

囊壳处方

按照实施例1所述的制备方法制备。

实施例4

内容物处方

囊壳处方

按照实施例1所述的制备方法制备。

实施例5

内容物处方

囊壳处方

按照实施例1所述的制备方法制备。

实施例6

内容物处方

囊壳处方

按照实施例1所述的制备方法制备。

实施例7

内容物处方

囊壳处方

按照实施例1所述的制备方法制备。

实验例1 稳定性试验研究（影响因素试验）

实验材料

①市售递法明片，法国乐康—美的澜制药厂提供，除去外包装。每片含没食子酸不得少于0.05mg,β-胡萝卜素应为标示量99.0~110.0%。

②本发明自制软胶囊。每粒含没食子酸不得少于0.05mg，β-胡萝卜素应为标示量99.0~110.0%。

实验方法（强光照射试验）

供试品（无包装片剂，软胶囊）置装有日光灯的光照箱或其它适宜的光照容器内，于照度为4500lx±500lx条件下放置10天，在0、5、10天取样检测。试验中应注意控制温度，与室温保持一致,并注意观察供试品的外观变化。

含量测定

片剂依据递法明片质量标准【含量测定】项下方法测定，本发明软胶囊参考片剂含量测定方法测定软胶囊中没食子酸及β-胡萝卜素的含量。

实验结果

从实验结果分析可知，本发明组合物软胶囊稳定性优于片剂。

实验例2 本发明药物对糖尿病大鼠视网膜病变的影响

动物来源

SD大鼠，SPF级，购自广东省医学实验动物中心，实验动物许可证号：SCXK（粤）2008-0002。

试验方法

SD大鼠45只，雌雄各半，SPF级，体重250g左右。取其中10只大鼠为正常对照组，其余用于造模。造模大鼠禁食12小时，按50mg/kg进行大鼠腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)（链脲佐菌素用时配制，将其溶于0.1mol/L、pH4.6的枸橼酸－枸橼酸钠缓冲液中进行灭菌，使用）。1周后动物禁食12小时，尾静脉取血，测定血糖，若动物空腹血糖≥16.7mmol/ L，表示DM造模成功。于STZ注射3个月后进行视觉电生理检测，大鼠暗适应20分钟，戊巴比妥钠按50mg/kg进行腹腔注射麻醉，托品卡胺充分散瞳，挑选出视功能损害的DR模型大鼠30只，将其随机分成3组：模型对照组B、本发明用药组C、阳性药物（递法明片）对照组D。正常对照组腹腔注射5ml/kg无菌枸橼酸-枸橼酸钠缓冲液，血糖<9.9mmol/L，作为空白对照组A。C组给予灌胃本发明药物0.4g/kg，D组给予灌胃递法明片0.4g/kg，空白对照组及模型组给予灌胃等量的生理盐水，每月20天，连续3个月。

12周后处死大鼠，每组大鼠取右侧眼球，置于4%多聚甲醛溶液内固定48小时，然后分离出视网膜，蒸馏水中漂洗。以视盘为中心呈桔瓣样将其平分成3块，放入3%胰蛋白酶溶液内，37℃恒温箱内孵育2～3小时。将视网膜移入蒸馏水中，用吸管轻轻吹打，脱去神经成分，仅留下薄薄的一层血管网。将血管网平铺于载玻片上，自然干燥后，PAS加苏木精染色，二甲苯透明中性树胶封固。显微镜下观察血管形态，随机取5个视野，内皮细胞与周细胞计数，计算二者比值(E/P)的平均值。

观察结果

1.行为体征

空白对照组(A组)：各大鼠行为状态、精神状态良好，其摄食粮、饮水量正常, 体重增长正常，未见有出现白内障；模型组(B组)：大鼠表现多饮、多食、多尿及严重消瘦, 精神萎靡, 易感染，不同程度出现白内障, 肉眼可直接观察到；本发明用药组(C组)：大鼠表现出多饮、多食、多尿及增长缓慢，精神不振，易感染。出现白内障, 但大多数需要在显微镜下才能观察到有后囊的混浊；阳性对照组（D组）：大鼠表现出多饮、多食、多尿及消瘦，精神不振。出现白内障,在显微镜可观察到有后囊的混浊。症状较C组稍微严重。

2.光镜结果

光镜下检查4组大鼠视网膜结构: 各层细胞排列整齐，无结构异常。视网膜血管铺片: 空白对照组（A组）、本发明用药组（C组）与阳性对照组三组大鼠视网膜血管走形规则，管径均匀一致。模型组（B组）部分视网膜毛细血管出现管径变细，无细胞结构。B组E/P与空白对照组比较，显著上升（P﹤0.01）， C、D 组E/P与模型组比较，显著降低（P﹤0.01），C组降低较为明显。表明用药组周细胞减少得到改善。结果见表1。

表1 各组大鼠E/P比值平均值比较（

）

组别	动物数	E/P比值
			A组	10	1.25±0.01
B组	10	2.41±0.12^**
			C组	10	1.68±0.07^##
D组	10	1.86±0.11^##

注：与空白对照组相比，^**P﹤0.01；与模型组比较，^##P﹤0.01。

实验例3 本发明药物对大鼠视网膜缺血再灌注损伤模型的影响

视网膜缺血再灌注损伤是目前临床上常见的眼病，可由糖尿病性视网膜血管阻塞所引起的缺血性眼病。表现为许多缺血性眼病患者在血液再通后，视网膜损伤严重，视功能反而进一步下降。视网膜缺血再灌注损伤是多因素综合作用的结果，主要包括氧自由基的损伤作用，细胞内的钙超载现象,白细胞作用以及细胞凋亡等，其中自由基又被认为是最主要的原因。

动物来源

大鼠，SPF级，购自广东省医学实验动物中心，实验动物许可证号：SCXK（粤）2008-0002。

试验方法

大鼠40只，雌雄各半，体重250g左右。随机分组，分别为空白对照组A，模型对照组B，本发明用药组C，阳性药物（递法明片）对照组D。C组给予灌胃本发明药物0.4g/kg，D组给予灌胃递法明片0.4g/kg，A组、B组给予灌胃等量的生理盐水，每天1次，共给药3天。给药后将B组、C组、D组采用前房穿刺法升高眼内压至110mmHg造成视网膜缺血，1h后再通过逐渐放低输液瓶高度，缓慢减低眼内压直至达到正常眼内压使视网膜血供恢复，从而造成视网膜缺血-再灌注损伤，造模完成。

24小时后处死大鼠，立即摘除双眼球，于0℃生理盐水中分离视网膜，用滤纸吸干水分，称重，以15ml/g组织加入生理盐水，于玻璃匀浆器研磨匀浆，再以超声波粉碎30s，零下30℃保存，测量前3000r/min离心15min，取上清液供检测。使用试剂盒测定丙二醛（MDA），超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽（GSH）。结果见表2。

表2 各组大鼠视网膜组织中MDA,GSH含量及SOD活性比较（

）

组别	动物数	MDA(nmol/mgprot)	GSH(nmol/gprot)	SOD（NU/mgprot）
					A组	10	3.61±0.37	99.20±9.26	105.86±8.64
B组	10	10.99±0.65^**	54.13±5.89^**	50.37±6.42^**
					C组	10	9.33±0.41^##	76.39±6.13^##	89.03±7.11^##
D组	10	9.46±0.52^##	70.88±6.35^##	86.53±6.97^##

结果可见：模型组（B组）MDA明显升高，SOD、GSH明显降低，表明造模成功。本发明用药组（C组）及阳性对照组（D组）MDA含量均低于模型组（B组）（P<0.01）,而SOD、GSH含量与之相反，明显高于模型组（B组）（P<0.01）。其中发明用药组（C组）抗氧化效果稍优于阳性对照组（D组），显示出发明用药组（C组）具有明显的抗氧化作用，对视网膜缺血再灌注损伤有一定的治疗作用。

Claims

1.一种治疗糖尿病性视网膜病变的药物，包括囊壳和囊壳内的内容物，其特征在于，所述的内容物包括下述重量份的组分：90～110份越桔果提取物，4～6份β胡萝卜素，4～20份助悬剂，170～200份助溶剂、0.01～0.06份抗氧化剂；所述的囊壳包括下述重量份的组分：950～1050份明胶，950～1050份水，300～400份的增塑剂，45～55份崩解剂，2.5～125份防腐剂，3～15份色素。

2.根据权利要求1所述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，包括囊壳和囊壳内的内容物，其特征在于，所述的内容物包括下述重量份的组分：100份越桔果提取物，5份β胡萝卜素，6~12份助悬剂，180~190份助溶剂、0.02～0.05份抗氧化剂；所述的囊壳包括下述重量份的组分：1000份明胶，1000份水，350份的增塑剂，50份崩解剂，20～50份防腐剂，10份色素。

3.根据权利要求1或者2所述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，其特征在于，所述的助悬剂为蜂蜡。

4.根据权利要求1或者2所述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，其特征在于，所述的助溶剂为大豆油或者玉米油或者橄榄油的其中之一。

5.根据权利要求1或者2所述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，其特征在于，所述的抗氧化剂为叔丁基对苯二酚或者二丁基羟基甲苯或者丁基羟基茴香醚或者没食子酸丙酯的其中之一。

6.根据权利要求1或者2所述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，其特征在于，所述的增塑剂为甘油。

7.根据权利要求1或者2所述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，其特征在于，所述的崩解剂为聚乙二醇400或聚乙二醇600的其中之一。

8.根据权利要求1或者2所述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，其特征在于，所述的防腐剂为羟苯乙酯、羟苯甲酯、羟苯丙酯、苯甲酸钠、苯甲酸钾、苯甲酸、苯扎溴铵、苯扎氯铵、三氯叔丁醇的其中之一或它们的组合。

9.根据权利要求1或者2所述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物，其特征在于，所述的着色剂为红氧化铁或者棕氧化铁、紫氧化铁其中之一。

10.权利要求1所述的治疗糖尿病性视网膜病变的药物的制备方法，其特征在于，依次包括步骤：

1）药液配制

按权利要求1或者2所述的重量份称取内容物组分，助悬剂、助溶剂、抗氧化剂混合均匀，加热融化，放冷至35-45℃，加入重量比例的越桔果提取物和β胡萝卜素，缓慢搅拌至均匀，再通过胶体磨研磨3次得混悬液，自然冷却到室温，备用；

2）胶液配制：

按权利要求1或者2重量份称取囊壳组分，将明胶溶于水，使其充分溶胀后加入增塑剂、崩解剂，在真空下搅拌混匀后，加热至70-80℃使其完全熔化，缓缓放去锅内真空，在连续搅拌下加入防腐剂、色素，待各个组分混匀后减压浓缩至水分的约30%，取出，滤过，保温静置待用；

3）制丸

将步骤2）中配制好的胶液注入设备中形成二层胶带，步骤1）中药液注入二层胶带之间，使胶带包裹药液轧成胶丸，压出胶丸进行干燥，再用95%乙醇洗去胶丸外油质，沥干，胶丸干燥至干爽，取出即得。