CN103103061A - 一种添加中药材的纯种米曲的制备方法 - Google Patents

一种添加中药材的纯种米曲的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种添加中药材的纯种米曲的制备方法及其用途,其特点是将黄曲霉QJ接种于PDA斜面培养基上,于温度25~30℃培养7~10日,选取表面生长均匀,孢子层厚实的斜面菌落,再次移种至PDA斜面培养基上,于温度25~30℃培养5~7日,获得斜面菌种,在温度4℃条件下保存15~30日;经黄曲霉QJ的扩大培养,黄曲霉QJ孢子悬液的制备及中药材添加到摊凉的蒸米中,于温度35~40℃、湿度90~95%进行药曲的培养3~4天获得添加中药材的纯种米曲,其糖化力为979.348~1738.99U/g干曲,液化力为21.37~59.43 U/g干曲。与未加中药材的米曲相比较,药曲的糖化力的提高25.89~41.61%,液化力提高31.97~56.122%,具有极大的开发价值和广阔的市场前景。

Description

一种添加中药材的纯种米曲的制备方法
技术领域
本发明涉及一种添加中药材的纯种米曲的制备方法,属于酿造发酵领域。 
背景技术
药曲是酿造白酒以及黄酒的糖化剂、发酵剂。传统的药曲一般是用米粉或米糠为原料,拌入中草药,接种母曲,经制坯、裹粉、入室培养、出室干燥制成。其成曲呈白色或淡黄色,菌丝均匀一致,无黑色,具有特殊的芳香(张文学.中国酒文化概述[M].北京:中国轻工业出版社,2011)。药曲有着悠久历史,例如,四川邛崃小曲名噪西南,曲中添加了中药材共72味,所用药材碾碎烘干成细末供用。经数百年连续培养,根霉及酵母菌得到了纯化,不但有极强的糖化力,还有极强的发酵力。邛崃米曲的精湛工艺,代代相传已达到炉火纯青的地步。广东酒饼各厂用药材数量及种类各不相同,各有自家特色,用药4~28种不等。桂林三花小曲用药材约10种,其香草药均系本地所产。药材系干细粉,用量为曲坯粉的13%之多。董酒为大曲与小曲串香工艺,小曲药材用72种,大曲药材用40种。制曲工艺中添加中药材主要有两方面的作用,一是提高酒的香味,二是促进微生物生育代谢与驯化(周恒刚. 制曲入药[J]. 酿酒科技,1999,04:5-6)。 
传统药曲的制作方式类似于传统酿酒大曲和小曲的生产,药曲中的微生物来源于自然接种或原有曲粉传种,通过微生物的自然发酵对制曲原料的原有特性产生一定程度的转化而制成的一类传统中药或药食两用的保健食品原料。随着现代发酵技术与生物科学技术的发展,中国药曲的基础研究及其应用开发必将迅速发展,药用曲类正逐渐成为我国传统中医药及保健食品领域的一个重要分支(吴志勇.发酵中药-现代生物技术与传统中药配方的结合[J].现代中医药, 2003, 2: 22-27)。本发明涉及一种添加中药材的纯种米曲的制备方法,以及使用这种药曲制造的味道丰富的饮食品。本发明将日本的纯菌种米曲制备技术与我国传统的药曲概念相结合,目前在国内外还未见报道。 
发明内容
本发明的目的是针对现有技术的不足而提供一种添加中药材的纯种米曲的制备方法,其特点是将日本的纯菌种米曲制备技术与我国传统的药曲制备方法相结合,具体实施方式是在纯种米曲制备过程中添加中药材,以期提高米曲的糖化力液化力和理化指标,同时使 最终制成的米曲中含有中药材的活性成分,使得药曲及其发酵产品具有一定的保健功能。 
本发明的目的由以下技术措施实现。其中所述原料份数除特殊说明外,均为重量份数。 
添加中药材的纯种米曲的制备方法包括以下步骤: 
(1)斜面菌种培养 
将四川大学食品生态工程与生物技术研究室提供保存的菌种黄曲霉QJ取冻干管或砂土管或保藏斜面接种于PDA斜面培养基上,斜面培养基为马铃薯汁500ml/L,蔗糖20g/L,琼脂20g/L,pH自然,于温度25~30℃培养7~10日,选取表面生长均匀,孢子层厚实的斜面菌落,再次移种至PDA斜面培养基上,于温度25~30℃培养5~7日,获得斜面菌种,在温度4℃条件下保存15~30日; 
(2)黄曲霉QJ的扩大培养 
配制PDA培养基,分装于茄子瓶中,于温度118~122℃灭菌15~20min,灭菌完成后冷却摆斜面得到茄子瓶斜面,取上述黄曲霉QJ保藏斜面,选取保藏斜面上表面生长均匀,孢子层厚实的斜面菌落,移种至茄子瓶中的PDA培养基上,于温度25~30℃培养5~7日,获得经茄子瓶扩大培养后的黄曲霉QJ; 
(3)黄曲霉QJ孢子悬液的制备 
将50ml蒸馏水装于100ml锥形瓶中,于温度118~122℃灭菌15~20min,冷却后得到无菌水,在无菌条件下将50ml无菌水转移至上述扩大培养黄曲霉QJ的茄子瓶中,以灭菌后的接种铲轻轻洗脱茄子瓶斜面上的黄曲霉QJ孢子,得到黄曲霉QJ孢子悬液,收集备用; 
(4)中药材的预处理 
a、中药材药汁的熬制 
将药材切割至2×2cm大小,加水淹没过药面3~5cm,将药材浸泡30~45min,然后微沸熬煮50~60min,趁热以4~6层纱布过滤,收集滤液得到药汁,于温度2~8℃条件下保存备用; 
b、中药材药粉的制备 
用粉碎机将中药材粉碎,过30~50目筛子后于温度2~8℃条件下保存备用; 
(5)大米的蒸制 
选取东北地区产的珍珠米,颗粒饱满,色泽洁白,形似珍珠,淀粉含量为70~75%,将大米除杂、淘洗2~3遍,冷水浸泡30~45min,沥干后蒸煮40~50min,至米粒熟透、无白心、不烂为止,得到颗粒分明、有弹性、含水27~32%的蒸米,再将蒸米摊凉至30~ 35℃备用。 
(6)孢子悬液及中药材的添加 
向上述摊凉后的蒸米中接入孢子悬液1.0×105spores/g,加入0.05~1%的中药材药汁或药粉,手戴无菌聚乙烯手套对蒸米进行翻拌,翻拌时应使蒸米粒粒分散但不得使其破碎,再翻拌均匀的蒸米堆积,加盖八层纱布; 
(7)药曲的培养 
将上述添加孢子悬液和药材翻拌均匀的蒸米于温度35~40℃、湿度90~95%条件下堆积培养24-48h,这期间每隔20~24h翻曲1次,翻曲时应使米曲粒粒分散但不得使其破碎,每次翻曲后应重新堆积米曲;然后在温度28~32℃、湿度90~95%条件下堆积培养20~24h;经多次培养翻曲后,将曲平铺,在温度40~45℃、湿度50~55%条件下干燥10~12h后制得药曲。 
所述中药材为红景天、黄芪或西洋参中的任一种。 
所述添加中药材的纯种米曲的制备方法制备得到的添加中药材的纯种米曲。 
所述添加中药材的纯种米曲用于发酵食品酿酒、食醋、酱油制作过程中的糖化剂使用。 
性能测试: 
药曲测定指标参照:沈怡方.白酒生产技术全书 北京:中国轻工业出版社,2009 
本发明具有如下优点: 
1、将中药材添加到作为发酵剂的纯培养米曲中,使米曲的糖化力为979.348~1738.99U/g干曲,液化力为21.37~59.43 U/g干曲。与未加中药材的米曲相比较,药曲的糖化力的提高25.89~41.61%,液化力提高31.97~56.122%,具有极大的开发价值和广阔的市场前景。 
2、.本发明的药曲用于清酒、食醋、酱油酿造食品中的酿制,使成品中含有中药材的活性成分,具有保健功能。 
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行具体的描述,有必要在此指出的是本实施例只用于对本发明进行进一步说明,但不能理解为对本发明保护范围的限制,该领域的技术熟练人员可以根据上述本发明的内容作出一些非本质的改进和调整。 
施例1添加红景天药曲的纯种米曲的制备        
(1)斜面菌种培养 
将四川大学食品生态工程与生物技术研究室提供保存菌种黄曲霉QJ取冻干管或砂土 管或保藏斜面接种于PDA斜面培养基,斜面培养基为马铃薯汁500ml/L,蔗糖20g/L,琼脂20g/L, pH自然)上,于温度25℃培养7日,选取表面生长均匀,孢子层厚实的斜面菌落,再次移种PDA培养基,于温度25℃培养7日,获得斜面菌种。 
(2)黄曲霉QJ的扩大培养 
配制PDA培养基,50ml/瓶分装于250ml的茄子瓶中,于温度121℃灭菌15分钟,灭菌完成后冷却摆斜面得到茄子瓶斜面。取上述黄曲霉QJ保藏斜面,选取保藏斜面上表面生长均匀,孢子层厚实的斜面菌落,移种至茄子瓶中的PDA培养基上,于温度25℃条件下培养7日,获得经茄子瓶扩大培养后的黄曲霉QJ。 
(3)黄曲霉QJ孢子悬液的制备 
取50ml蒸馏水装于100ml锥形瓶中,于温度121℃灭菌15分钟,冷却后得到无菌水。在无菌条件下将50ml无菌水转移至上述扩大培养黄曲霉QJ的茄子瓶中,以灭菌后的接种铲轻轻洗脱茄子瓶斜面上的黄曲霉QJ孢子,得到黄曲霉QJ孢子悬液,收集备用。 
(4)药材的预处理 
a.红景天汁的熬制 
将红景天切割至2×2cm大小,称取10.52g于150ml烧杯中,加蒸馏水至水淹没过药面3cm,浸泡45min,微沸熬煮60min,趁热以6层纱布过滤,收集滤液得到药汁,收集滤液得到药汁50ml。 
b.红景天粉的制备 
用粉碎机将红景天粉碎,过50目筛子后于2℃条件下保存备用。 
(5)大米的蒸制 
选取东北地区产的珍珠米,米颗粒饱满,色泽洁白,形似珍珠,淀粉含量为70%。将大米除杂、淘洗2遍,冷水浸泡30min,沥干后蒸煮45min,至米粒熟透、无白心、不烂为止,得到颗粒分明、有弹性、还能、含水27%的蒸米538g,将蒸米分为两份,一份为263g,另一份为275g,将蒸米摊凉至30℃左右备用。 
(6)孢子悬液及红景天药材的添加 
向上述摊凉后的蒸米中接入孢子悬液,263g的蒸米中加入2.6ml,275g的蒸米中加入2.7ml(1.0×105spores/g),然后分别按实际药材添加量为蒸米重量的0.05%加入红景天药汁和红景天药粉。接入孢子悬液和药材后,手戴无菌PE手套对蒸米进行翻拌,翻拌时应使蒸米粒粒分散但不得使其破碎,并使药汁和孢子悬液均匀分布于蒸米中。将翻拌均匀的蒸米堆积,加盖八层纱布。 
(7)药曲的培养 
将上述添加孢子悬液和药材翻拌均匀的蒸米,于温度35℃、湿度90%条件下堆积培养48h,期间每隔24h翻曲1次,翻曲时应使米曲粒粒分散但不得使其破碎,每次翻曲后应重新堆积米曲;然后在28℃、湿度90%条件下堆积培养24h,培养完成后进行翻曲,将曲平铺,在温度40℃、湿度50%条件下干燥12h后制得药曲。 
(8)将得到的红景天药汁曲与药粉曲进行糖化力、液化力、总酸的测定,测定结果表示于表1之中。 
表1 红景天汁药曲与红景天粉药曲各理化指标对比 
Figure 2013100207888100002DEST_PATH_IMAGE001
由表1可以看出,按照本发明提供的方法制得的红景天汁药曲的理化指标与红景天粉药曲相比,使用药汁制得的药曲其糖化力和液化力优于使用药粉制得的药曲,因此,针对红景天这种特定药材,在使用本发明的方法制备药曲时,使用添加药汁的方式更优。 
实施例2添加西洋参药曲的纯种米曲的制备 
(1)斜面菌种培养 
将四川大学食品生态工程与生物技术研究室提供保存菌种黄曲霉QJ取冻干管或砂土管或保藏斜面接种于PDA斜面培养基,斜面培养基为马铃薯汁500ml/L,蔗糖20g/L,琼脂20g/L, pH自然,于温度30℃培养5日,选取表面生长均匀,孢子层厚实的斜面菌落,再次移种PDA培养基,于温度30℃培养5日,获得斜面菌种。 
(2)黄曲霉QJ的扩大培养 
配制PDA培养基,50ml/瓶分装于250ml的茄子瓶中,于温度118℃灭菌20分钟,灭菌完成后冷却摆斜面得到茄子瓶斜面。取上述黄曲霉QJ保藏斜面,选取保藏斜面上表面生长均匀,孢子层厚实的斜面菌落,移种至茄子瓶中的PDA培养基上,于温度30℃条件下培养5日,获得经茄子瓶扩大培养后的黄曲霉QJ。 
(3)黄曲霉QJ孢子悬液的制备 
取50ml蒸馏水装于100ml锥形瓶中,于温度118℃灭菌20分钟,冷却后得到无菌水。 在无菌条件下将50ml无菌水转移至上述扩大培养黄曲霉QJ的茄子瓶中,以灭菌后的接种铲轻轻洗脱茄子瓶斜面上的黄曲霉QJ孢子,得到黄曲霉QJ孢子悬液,收集备用。 
(4)药材的预处理 
a.西洋参药汁的熬制 
称取10.40g西洋参于150ml烧杯中,加蒸馏水至水淹没过药面5cm,浸泡30min,微沸熬煮50min,趁热以4层纱布过滤,收集滤液得到药汁收集滤液得到药汁53.2ml。 
b.西洋参粉的制备 
用粉碎机将西洋参粉碎,过30目筛子后于8℃条件下保存备用。 
(5)制曲原料选取东北地区产的珍珠米,米颗粒饱满,色泽洁白,形似珍珠,淀粉含量为75%。称取大米382g,将大米除杂、淘洗3遍,冷水浸泡45min,沥干后蒸煮40min,至米粒熟透、无白心、不烂为止,得到颗粒分明、有弹性的水分32%的蒸米530g,将蒸米分为两份,一份为260g,另一份为270g,将蒸米摊凉至35℃左右备用。 
(6)孢子悬液及西洋参药材的添加 
向上述摊凉后的蒸米中接入孢子悬液,260g的蒸米中加入2.6ml,270g的蒸米中加入2.7ml(1.0×105spores/g),然后分别按实际药材添加量为蒸米重量的1%加入西洋参药汁西洋参药粉。接入孢子悬液和药材后,手戴无菌PE手套对蒸米进行翻拌,翻拌时应使蒸米粒粒分散但不得使其破碎,并使药汁和孢子悬液均匀分布于蒸米中。将翻拌均匀的蒸米堆积,加盖八层纱布。 
(7)药曲的培养 
将上述添加孢子悬液和药材翻拌均匀的蒸米,于温度40℃、湿度95%条件下堆积培养24h,期间每隔20h翻曲1次,翻曲时应使米曲粒粒分散但不得使其破碎,每次翻曲后应重新堆积米曲;然后在32℃、湿度95%条件下堆积培养20h,培养完成后进行翻曲,将曲平铺,在温度45℃、湿度55%条件下干燥10h后制得药曲。 
(8)将得到的西洋参粉药曲与西洋参汁药曲进行糖化力、液化力、总酸的测定,测定结果表示于表2之中。 
表2 西洋参粉药曲与空白米曲各理化指标对比 
Figure 2013100207888100002DEST_PATH_IMAGE002
由表2可以看出,按照本发明提供的方法制得的西洋参粉药曲的理化指标与西洋参汁药曲相比,使用药粉制得的药曲其糖化力明显优于使用药粉制得的药曲,而两种不同添加方式制得的药曲的液化力相差不大,因此,针对西洋参这种特定药材,在使用本发明的方法制备药曲时,使用添加药粉的方式更优。 
实施例3添加黄芪药曲的纯种米曲的制备 
(1)斜面菌种培养 
将四川大学食品生态工程与生物技术研究室提供保存菌种黄曲霉QJ取冻干管或砂土管或保藏斜面接种于PDA斜面培养基,斜面培养基为马铃薯汁500ml/L,蔗糖20g/L,琼脂20g/L, pH自然,于温度27℃培养6日,选取表面生长均匀,孢子层厚实的斜面菌落,再次移种PDA培养基,于温度27℃培养6日,获得斜面菌种。 
(2)黄曲霉QJ的扩大培养 
配制PDA培养基,50ml/瓶分装于250ml的茄子瓶中,于温度120℃灭菌18分钟,灭菌完成后冷却摆斜面得到茄子瓶斜面。取上述黄曲霉QJ保藏斜面,选取保藏斜面上表面生长均匀,孢子层厚实的斜面菌落,移种至茄子瓶中的PDA培养基上,于温度27℃条件下培养6日,获得经茄子瓶扩大培养后的黄曲霉QJ。 
(3)黄曲霉QJ孢子悬液的制备 
取50ml蒸馏水装于100ml锥形瓶中,于温度120℃灭菌18分钟,冷却后得到无菌水。在无菌条件下将50ml无菌水转移至上述扩大培养黄曲霉QJ的茄子瓶中,以灭菌后的接种铲轻轻洗脱茄子瓶斜面上的黄曲霉QJ孢子,得到黄曲霉QJ孢子悬液,收集备用。 
(4)药材的预处理 
a.黄芪药汁的熬制 
称取10.84g黄芪于150ml烧杯中,加蒸馏水至水淹没过药面4cm,浸泡40min,微沸熬煮55min,趁热以5层纱布过滤,收集滤液得到药汁收集滤液得到药汁79.0ml。 
b.黄芪粉的制备 
用粉碎机将黄芪粉碎,过40目筛子后于6℃条件下保存备用。 
(5)制曲原料选取东北地区产的珍珠米,米颗粒饱满,色泽洁白,形似珍珠,淀粉含量为73%。称取大米482g,将大米除杂、淘洗3遍,冷水浸泡35min,沥干后蒸煮50min,至米粒熟透、无白心、不烂为止,得到颗粒分明、有弹性的水分30%的蒸米669g,将蒸米分为两份,一份为271g,另一份为398g,将蒸米摊凉至33℃左右备用。 
(6)孢子悬液及黄芪药材的添加 
向上述摊凉后的蒸米中接入孢子悬液,271g的蒸米中加入2.7ml,398g的蒸米中加入3.9ml(1.0×105spores/g),然后分别按实际药材添加量为蒸米重量的0.5%加入黄芪药汁和黄芪药粉。接入孢子悬液和药材后,手戴无菌PE手套对蒸米进行翻拌,翻拌时应使蒸米粒粒分散但不得使其破碎,并使药汁和孢子悬液均匀分布于蒸米中。将翻拌均匀的蒸米堆积,加盖八层纱布。 
(7)药曲的培养 
将上述添加孢子悬液和药材翻拌均匀的蒸米,于温度37℃、湿度93%条件下堆积培养36h,期间每隔22h翻曲1次,翻曲时应使米曲粒粒分散但不得使其破碎,每次翻曲后应重新堆积米曲;然后在30℃、湿度93%条件下堆积培养22h,培养完成后进行翻曲,将曲平铺,在温度43℃、湿度52%条件下干燥10.5h后制得药曲。 
(8)将得到的黄芪粉药曲与黄芪汁药曲进行糖化力、液化力、总酸的测定,测定结果表示于表3之中。 
表3 黄芪粉药曲与黄芪汁药曲各理化指标对比 
Figure 2013100207888100002DEST_PATH_IMAGE003
由表3可以看出,按照本发明提供的方法制得的黄芪粉药曲的理化指标与黄芪汁药曲相比,使用药粉制得的药曲其糖化力明显优于使用药粉制得的药曲,而使用药汁制得的药曲其液化力略优于使用药粉制得的药曲,考虑到在使用米曲作为糖化剂的酿造过程中,提高米曲的糖化力对酿造产品产率和品质的提高更为重要,因此,针对黄芪这种特定药材, 在使用本发明的方法制备药曲时,使用添加药粉的方式更优。 
考查红景天、黄芪、西洋参在制备药曲时的最佳添加方式(药汁或药粉),具体实施方法为制作添加同种药材、相同药材添加量的药曲,对比其糖化酶活力、液化酶活力、总酸三个理化指标,根据理化指标数据选取更优的添加方式。根据理化指标数据得出结论:红景天、黄芪、西洋参的糖化力分别为979.348~1738.99 U/g干曲、1069.6~1679.47 U/g干曲、1013.17~1676.29 U/g干曲,相对于空白米曲糖化力的提高率分别为31.48~41.61%、25.89~36.76%、26.52~36.50%;液化力分别为22.62~54.41 U/g干曲、21.37~59.43 U/g干曲、23.44~56.61 U/g干曲,提高率分别为31.97~42.92%、46.18~56.12%、38.64~48.70%。西洋参和黄芪适用于药粉曲,而红景天适用于药汁曲。 
应用实例1 西洋参药曲清酒的酿制 
使用实施例2的西洋参粉药曲(本发明),制造了药曲玉米清酒,同时使用不添加西洋参的空白纯种米曲按相同的工艺酿造了玉米清酒作为对照。具体实施步骤如下: 
酵母→扩大培养→酒母 
                                                                    ↓ 
大米→清洗、浸泡→ 蒸煮→接种黄曲霉→ 添加西洋参粉末→ 中药曲→  前培养 ←水 
                                                                     ↓ 
                        玉米碴、大米→ 清洗、浸泡 → 蒸煮→ 投料→糖化发酵→过滤 → 灌装 →灭菌 → 贮存 
(1)酒母的制备 
产香酵母:250mL锥形瓶装适量米曲汁,接种产香酵母,气浴摇床28℃震荡培养24h。 
产酒酵母:在10%葡萄糖溶液中28℃静置培养2h。 
产香酵母LⅡ1-1由四川大学食品生态工程与生物技术研究室提供,产酒酵母为市售安琪酵母。 
(2)前培养 
将140g西洋参药曲(空白米曲)及165ml冷开水加入到发酵瓶中,接入产香酵母(LⅡ1-1)种子液7ml和产酒酵母(安琪酵母)种子液7ml,置于28℃条件下培养3d。 
(3)投料和发酵 
原料蒸制:按5:5的比例称取玉米和大米,加水淘洗3遍,浸泡1h后,蒸制到原料无白心,摊冷至30℃左右待用。 
发酵:按照分批投料的工艺进行发酵,投料时曲的添加总量为原料总量的50%,加入 的无菌水总量为原料总量的2倍,具体投料量如表4所示。发酵期间每天记录发酵体系的重量变化,计算其每日产气量,待发酵产气量不再增加时,表示发酵基本结束。 
表4 三次投料的配比 
Figure BDA0000275669264
清酒理化指标的分析[9]包括酒精浓度、产酒率、pH值、总酸、氨基酸态氮和总糖。测定结果如表5所示。 
[9] GB/T 13662—2008,黄酒[S]. 
表5西洋参中药曲清酒及空白纯种米曲清酒的理化指标对比 
Figure BDA0000275669265
由表5可以看出,西洋参中药曲清酒的酒精度为13.6 %vol,总糖为 85 g/L,总酸为3.23 g/L,氨基酸态氮为0.56g/L,已经达到了国标GBT 13662-2008中清爽型半甜黄酒一级的标准。与使用空白米曲酿造的清酒相比较,药曲清酒的氨基酸态氮和糖度明显更高,即药曲清酒的营养价值和品质更优,说明使用本发明制作的药曲作为酿造清酒的糖化剂,与传统的不添加中药材的纯米曲相比,具有明显的优势。 

Claims (4)

1.一种添加中药材的纯种米曲的制备方法,其特征在于该方法包括以下步骤,按重量计为:
(1)斜面菌种培养
将四川大学食品生态工程与生物技术研究室提供保存的菌种黄曲霉QJ取冻干管或砂土管或保藏斜面接种于PDA斜面培养基上,斜面培养基为马铃薯汁500ml/L,蔗糖20g/L,琼脂20g/L,pH自然,于温度25~30℃培养7~10日,选取表面生长均匀,孢子层厚实的斜面菌落,再次移种至PDA斜面培养基上,于温度25~30℃培养5~7日,获得斜面菌种,在温度4℃条件下保存15~30日;
(2)黄曲霉QJ的扩大培养
配制PDA培养基,分装于茄子瓶中,于温度118~122℃灭菌15~20min,灭菌完成后冷却摆斜面得到茄子瓶斜面,取上述黄曲霉QJ保藏斜面,选取保藏斜面上表面生长均匀,孢子层厚实的斜面菌落,移种至茄子瓶中的PDA培养基上,于温度25~30℃培养5~7日,获得经茄子瓶扩大培养后的黄曲霉QJ;
(3)黄曲霉QJ孢子悬液的制备
将50ml蒸馏水装于100ml锥形瓶中,于温度118~122℃灭菌15~20min,冷却后得到无菌水,在无菌条件下将50ml无菌水转移至上述扩大培养黄曲霉QJ的茄子瓶中,以灭菌后的接种铲轻轻洗脱茄子瓶斜面上的黄曲霉QJ孢子,得到黄曲霉QJ孢子悬液,收集备用;
(4)中药材的预处理
a.中药材药汁的熬制
将药材切割至2×2cm大小,加水淹没过药面3~5cm,将药材浸泡30~45min,然后微沸熬煮50~60min,趁热以4~6层纱布过滤,收集滤液得到药汁,于温度2~8℃条件下保存备用;
b.中药材药粉的制备
用粉碎机将中药材粉碎,过30~50目筛子后于温度2~8℃条件下保存备用;
(5)大米的蒸制
选取东北地区产的珍珠米,颗粒饱满,色泽洁白,形似珍珠,淀粉含量为70~75%,将大米除杂、淘洗2~3遍,冷水浸泡30~45min,沥干后蒸煮40~50min,至米粒熟透、无白心、不烂为止,得到颗粒分明、有弹性、含水27~32%的蒸米,再将蒸米摊凉至30~35℃备用。
(6)孢子悬液及中药材的添加
向上述摊凉后的蒸米中接入孢子悬液1.0×105spores/g,加入0.05~1%的中药材药汁或药粉,手戴无菌聚乙烯手套对蒸米进行翻拌,翻拌时应使蒸米粒粒分散但不得使其破碎,再翻拌均匀的蒸米堆积,加盖八层纱布;
(7)药曲的培养
将上述添加孢子悬液和药材翻拌均匀的蒸米于温度35~40℃、湿度90~95%条件下堆积培养24~48h,这期间每隔20~24h翻曲1次,翻曲时应使米曲粒粒分散但不得使其破碎,每次翻曲后应重新堆积米曲;然后在温度28~32℃、湿度90~95%条件下堆积培养20~24h;经多次培养翻曲后,将曲平铺,在温度40~45℃、湿度50~55%条件下干燥10~12h后制得药曲。
2.如权利要求1所述添加中药材的纯种米曲的制备方法,其特征在于中药材为红景天、黄芪或西洋参中的任一种。
3.如权利要求1或2所述添加中药材的纯种米曲的制备方法制备得到的添加中药材的纯种米曲。
4.如权利要求3所述添加中药材的纯种米曲用于发酵食品酿酒、食醋、酱油制作过程中的糖化剂使用。
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