CN102861232A - 一种中药组合物在制备治疗高血压的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种中药组合物在制备治疗高血压的药物中的应用。本发明中药组合物由黄芪、人参、丹参等11味中药组成，可有效降低SHR大鼠(自发性高血压大鼠)血压，同时改善高血压血管重构，与阳性药物贝那普利作用相当，临床可用于高血压的防治。

Description

一种中药组合物在制备治疗高血压的药物中的应用

技术领域

本发明涉及一种中药组合物的新用途，具体地，涉及一种中药组合物在制备治疗高血压的药物中的应用。

背景技术

高血压（hypertensive disease）是一种以动脉血压持续升高为主要表现的慢性疾病，常引起心、脑、肾等重要器官的病变并出现相应的后果。 按照世界卫生组织(WHO)建议使用的血压标准是：凡正常成人收缩压应小于或等140mmHg(18.6kPa)，舒张压小于或等于90mmHg(12kPa)。

血管重构（vascular remodeling，VR）是指在高血压病理状态下发生的血管结构改变，主要包括血管壁增厚、腔径缩小、血管壁/管腔比值增大、基质增多等组织学异常以及随之产生的血管功能异常。血管重构是血管对刺激的复杂的动态反应过程，包括信号的感受、转导和调节因子的合成、释放，最后产生结构变化。血管重构是高血压发生、发展的基础也是其靶器官损害的表现之一，由于高血压病是一种全身性的疾病，其血管重构引起的动脉壁增厚所致的动脉顺应性减退和小动脉硬化与多种靶器官的损害密切相关【曾洒宇 秦旭平血管重构及其药物治疗 现代生物医学进展Progress in Modern Biomedicine 2007 Vol.7 No.5】。

近年研究证实,血管重构与高血压及其靶器官损害密切相关,肾素-血管紧张素系统(renin-angiotensin system,RAS)是引起血管重构的一个重要因素，它是由肾素、血管紧张素(an-giotension, Ang)、血管紧张素转化酶(angiotensin con-verting enzyme,ACE)组成，AngⅡ是强有力的平滑肌细胞促有丝分裂剂,可直接或通过刺激转化生长因子β(transforming growth factorbeta,TGF-β)和纤维蛋白的表达促进间质沉积损伤的内皮细胞和激活的白细胞分泌大量的细胞因子,如血小板衍生生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、类胰岛素生长因子和TGF-β表达增加的双功能生长因子、黏附分子、单核细胞趋化蛋白1及其他炎性反应的中介物,强烈刺激成纤维细胞的增殖迁移,刺激中膜平滑肌细胞迁移到内膜下增生并分泌含锌的基质金属蛋白酶2及其激活物膜型基质金属蛋白酶1、AngⅡ、TGF-β等活性物质,进一步诱导并促进内皮细胞功能失调、血管的炎性改变及血管的重塑【杨宇 陈灿 黄石安等 肾素-血管紧张素系统与高血压血管重构关系研究进展 医学综述 2008年7月第14卷第13期】。

目前常用于降压的药物主要有以下5类：即利尿剂、β-受体阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂﹙ACEI﹚、血管紧张素II受体阻滞剂﹙ARB﹚、钙拮抗剂。其中ACEI类是目前应用最广泛，疗效肯定，安全系数相对较高的药物。

本发明是在中国专利ZL 02146573.8的基础上进行的改进发明，在此全文引用该专利文件记载的内容。中国专利ZL 02146573.8未记载该中药组合物在制备治疗高血压的药物中的应用。

发明内容

本发明目的是提供一种中药组合物在制备治疗高血压的药物中的应用；

本发明药物是选用黄芪、人参、附子、丹参等11味药物组成，具有温阳化饮，益气活血的功效。

所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：

黄芪 150-450份、附子40-120份、人参或党参75-225份、 丹参75-225份、葶苈子50-150份、香加皮或南五加皮60-180份、泽泻75-225份、玉竹25-75份、桂枝30-90份、红花30-90份、陈皮25-75份；

优选地，所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：

黄芪450份、附子112.5份、人参或党参225份、丹参225份、葶苈子150份、香加皮或南五加皮180份、泽泻225份、玉竹75份、桂枝90份、红花90份、陈皮75份；

优选地，所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：

黄芪250份、附子112.5份、人参或党参200份、丹参120份、葶苈子135份、香加皮或南五加皮150份、泽泻200份、玉竹60份、桂枝75份、红花75份、陈皮60份。

本发明中药组合物的活性成分可以由常规的提取工艺[如范碧亭《中药药剂学》（上海科学出版社1997年12月第1版）]制得，更优选地，所述中药组合物的活性成分由下列步骤制得的有效成分组成：

（1）将黄芪、葶苈子、泽泻、人参或党参、香加皮或南五加皮用70%乙醇提取，滤过，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30的清膏； 

（2）提取桂枝、陈皮的挥发油；提油后的水溶液滤过，收集水溶液滤液，再加水煎煮残渣1小时，滤过，合并水溶液，得提油后水提液；

（3）附子、丹参、玉竹、红花加水煎煮2次，合并提取液，滤过；与步骤（2）所得水提液合并，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30清膏，放冷，搅拌中加入乙醇，至醇浓度70%，静置，滤过，滤液浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30的清膏；

（4）将步骤（1）所得清膏与将步骤（3）所得清膏混合，烘干，粉碎，加入步骤（2）所得挥发油，即得。

本发明还提供了该中药组合物胶囊剂的制备方法：

（1）按比例称取黄芪、葶苈子、泽泻、人参或党参、香加皮或南五加皮，加入8倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30的清膏，备用；

（2）按比例称取桂枝、陈皮，提取挥发油；提油后的水溶液滤过，备用，残渣再加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并水溶液，得提油后水提液，备用；

（3）按比例称取附子、丹参、玉竹、红花，加水9倍量，煎煮2次，每次2小时，合并提取液，滤过，与步骤（2）所得水提液合并，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30 的清膏，放冷，搅拌中加入乙醇，至醇浓度70%，4℃以下静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30的清膏，备用；

（4）将步骤（1）所得清膏与将步骤（3）所得清膏混合，65-70℃烘干，粉碎成100目粉，加70%乙醇适量制粒，加入步骤（2）所得挥发油，混匀，装胶囊，即得。

本发明中药组合物中，作为活性组分的原料药的拉丁名及其加工方法来自《中药大辞典》（1977年7月，第一版，上海科学技术出版社）和《中国药典》（2010年版，中国医药科技出版社）。

本发明中药组合物还可以按常规的制剂工艺，例如，范碧亭《中药药剂学》（上海科学出版社1997年12月第1版）记载的制备工艺，制成药剂学可接受的任意常规剂型，例如胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂等。

本发明的应用中，所述中药组合物制剂剂型为胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂，为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的辅料，例如：填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂、基质等。填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等；崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等；润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等；助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等；粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等；甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等；矫味剂包括：甜味剂及各种香精；防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等；基质包括：PEG6000，PEG4000，虫蜡等。为使上述剂型能够实现中药药剂学，需在制备这些剂型时加入药学可接受的其它辅料（范碧亭《中药药剂学》，上海科学出版社1997年12月第1版中各剂型记载的辅料）。

本发明中药组合物的应用还优选为本发明中药组合物在制备治疗高血压血管重构药物中的应用。

本发明中药组合物的用量，按活性组分原料药总重量计，为4-20克/日，可每日服用一次，优选为分2-4次服用；还优选为6-12克/日，分2-4次服用；更优选为7.59克/日，分3次服用。

为阐明本发明中药组合物治疗高血压的活性，用按实施例1方法所制得的药物（以下称本发明药物）进行了下列试验。

1. 材料与方法

1.1建模分组：

WKY大鼠(与SHR源自同一种群中那些不具备高血压特征而且血压稳定的个体)，10只，雌雄各半，280-300g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司；

SHR大鼠(自发性高血压大鼠)，30只，雌雄各半，280-300g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司；

10只WKY大鼠作为正常对照组，将30只SHR大鼠适应性饲养5天后用BESN-II多通道动物无创测压系统测血压一次，按照收缩压将其分为3组，每组10只，分别为模型对照组，阳性对照组和本发明药物组；

1.2给药方法： 

本发明药物由石家庄以岭药业股份有限公司提供，按本发明药物临床用量的10倍，即0.6g/kg/d溶于0.5%的CMC-Na中，于实验动物分组后灌胃给药，连续6周。阳性对照组给予苯那普利，商品名：洛汀新，又名盐酸贝那普利，由北京诺华制药有限公司生产，给药剂量为3.33mg/kg，为临床剂量的10倍。正常对照组和模型对照组大鼠在相同时间点给予等量0.5%CMC-Na灌胃。

1.3指标检测

1．3.1收缩压的测量：

大鼠血压测量使用BESN-II多通道动物无创测压系统测量，给药后每周测量一次血压，测量过程固定人员操作，测量三次取均值，减少操作误差。

1.3.2血浆AngⅡ检测：取血，离心，放免法按试剂盒说明书操作。

1.3.3 血浆转化生长因子－β1（TGF－β1）的含量测定：采用双抗体夹心ABC－ELISA测定，方法按说明书进行。

1.3.4 主动脉组织羟脯氨酸（Hyp）测定：取胸主动脉组织100 mg 在冰浴下制成5% 组织匀浆，4 ℃ 4 000 r /min 离心15 min，取上清液比色法按试剂盒说明书操作。

1.3.5 病理光镜观察

    给药结束后，将动物麻醉固定取新鲜的腹主动脉,以中性固定液固定后进行天狼星红染色。偏振光显微镜下观察主动脉血管壁胶原类型和分布,黄红纤维主要是Ⅰ型胶原,绿色纤维主要是Ⅲ型胶原。

 1.4 统计方法

所有数据用均数±标准差（                                                

±s）表示。采用SPSS统计软件包，进行T检验。

2 结果

2.1  收缩压的变化：与正常对照组比较，模型组收缩压明显高于正常组，阳性对照组与模型对照组比较，收缩压明显下降，（P<0.01），发明药物组与模型对照组比较，收缩压明显下降（P<0.01），本发明药组与阳性对照组比较无明显差异（P>0.05）。见表1。

表1 各实验组收缩压的比较

注：与正常对照组比较：*P<0.05；**P<0.01；与模型组比较：△P<0.05，△△P<0.01

2.2  血液AngⅡ、TGF－β1和血管组织Hyp含量的变化：与正常对照组比较，模型组血液AngⅡ、TGF－β1和血管组织Hyp含量明显升高（P<0.01），阳性药组与模型组比较，AngⅡ、TGF－β1、Hyp含量明显下降（P<0.01），发明药组与模型组比较，AngⅡ、TGF－β1、Hyp含量明显下降（P<0.01），发明药组与阳性药组比较上述指标无明显差异（P>0.05）。见表2。

表2  各实验组指标的比较

组别	AngⅡ( ng/L)	TGF－β1( ng/L)	Hyp(μg/mg)
				正常对照组	28.57±9.25	1194.1±335.5	4·88±0·95
模型对照组	94.39±12.43**	3231.6±546.4**	8·10±0·48**
				阳性对照药	34.5±11.3△△	1551.9±358.9△△	5.14±0.63△△
发明药物组	42.2±10.5△△	1965.4±397.3△△	5.81±0.74△△

注：与正常对照组比较：*P<0.05；**P<0.01；与模型组比较：△P<0.05，△△P<0.01；

2.3 病理变化：

偏振光显微镜镜下观察,天狼星红染色结果显示:各组大鼠主动脉胶原主要分布于血管外膜,以粗大的红黄纤维为主。低倍镜下可见:正常对照组管壁薄,管壁外膜可见紧密排列的粗大红色纤维(Ⅰ型胶原);模型对照组管壁增厚,外膜Ⅰ型胶原明显增多;发明药物组管壁增厚不明显,外膜胶原较模型对照组减少。高倍镜下可见:正常对照组中层平滑肌细胞排列整齐,壁较薄,可见红黄纤维主要分布于外膜;模型对照主动脉管壁较正常对照组大鼠显著增厚,中层显著增厚;发明药物组主动脉管壁较SHR组明显变薄。

3 结论  

     以SHR大鼠作为高血压模型研究发现： 发明药物组大鼠收缩压明显降低（P<0.01）,血液中AngⅡ、TGF-β浓度也都有明显的降低（P<0.01），病理切片观察发现与模型对照组比较，本发明药物组管壁增厚不明显,外膜胶原较模型对照组减少。以上结果表明本发明药物对高血压及高血压引起的血管重构有明显的治疗作用，其效果与阳性药无明显区别。

具体实施方式

实施例1：本发明药物胶囊剂的制备

处方：

黄芪450g    附子112.5g  人参225g  丹参225g  葶苈子150g

香加皮180g  泽泻225g    红花90g   玉竹75g   陈皮75g  桂枝90g

制备方法：

（1）按照处方比例称取黄芪、葶苈子、泽泻、人参、香加皮，加8倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30的清膏，备用；

（2）按照处方比例称取桂枝、陈皮，提取挥发油；提油后的水溶液滤过，备用，残渣再加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并水煎液，备用；

（3）按照处方比例称取附子、丹参、玉竹、红花，加水9倍量，煎煮2次，每次2小时，合并提取液，滤过，与步骤（2）中桂枝、陈皮水煎液合并，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30 的清膏，放冷，搅拌中加入乙醇，至醇浓度70%，4℃以下静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30 的清膏，与步骤（1）的醇提清膏混合，65℃烘干；

（4）干膏混合粉碎成100目粉，加70%乙醇适量制粒，喷入桂枝、陈皮挥发油，混匀，装胶囊，制成1000粒，即得。

实施例2：本发明药物片剂的制备

处方：

黄芪150g  附子40g  人参225g  丹参225g  葶苈子50g 香加皮180g  泽泻75g  玉竹75g  桂枝30g  红花90g  陈皮25g

制备方法：

（1）按照处方比例称取黄芪、葶苈子、泽泻、人参、香加皮，加8倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30的清膏，备用；

（2）桂枝、陈皮按照处方量蒸馏提取挥发油；提油后的水溶液滤过，备用，残渣再加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并水煎液，备用；

（3）附子、丹参、玉竹、红花加水9倍量煎煮2次，每次2小时，合并提取液，滤过，与步骤（2）中桂枝、陈皮水煎液合并，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30 的清膏，放冷，搅拌中加入乙醇，至醇浓度70%，4℃以下静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30的清膏，与步骤（1）的醇提清膏混合，70℃烘干；

（4）干膏混合粉碎成100目粉，加70%乙醇适量制粒，喷入桂枝、陈皮挥发油，混匀，按常规制剂方法制成片剂。

实施例3：本发明药物口服液的制备

处方：

黄芪250g  附子112.5g  党参200g   丹参120g   葶苈子135g 南五加皮150g  泽泻200g  玉竹60g  桂枝75g  红花75g  陈皮60g

制备方法：按常规制剂方法制成口服液。

Claims (8)

1.一种中药组合物在制备治疗高血压的药物中的应用，其特征在于所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：

黄芪 150-450份、附子40-120份、人参或党参75-225份、丹参75-225份、葶苈子50-150份、香加皮或南五加皮60-180份、泽泻75-225份、玉竹25-75份、桂枝30-90份、红花30-90份、陈皮25-75份。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：

黄芪450份、附子112.5份、人参或党参225份、丹参225份、葶苈子150份、香加皮或南五加皮180份、泽泻225份、玉竹75份、桂枝90份、红花90份、陈皮75份。

3.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：

黄芪150份、附子40份、人参或党参225份、丹参225份、葶苈子50份、香加皮或南五加皮180份、泽泻75份、玉竹75份、桂枝30份、红花90份、陈皮25份。

4.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述中药组合物由如下重量份的原料药制成：

黄芪250份、附子112.5份、人参或党参200份、丹参120份、葶苈子135份、香加皮或南五加皮150份、泽泻200份、玉竹60份、桂枝75份、红花75份、陈皮60份。

5.如权利要求1-4任一项所述的应用，其特征在于所述中药组合物的活性成分由下列步骤制成：

（1）将黄芪、葶苈子、泽泻、人参或党参、香加皮或南五加皮用70%乙醇提取，滤过，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30的清膏； 

（2）提取桂枝、陈皮的挥发油；提油后的水溶液滤过，收集水溶液滤液，再加水煎煮残渣1小时，滤过，合并水溶液，得提油后水提液；

（3）附子、丹参、玉竹、红花加水煎煮2次，合并提取液，滤过；与步骤（2）所得水提液合并，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30清膏，放冷，搅拌中加入乙醇，至醇浓度70%，静置，滤过，滤液浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30的清膏；

（4）将步骤（1）所得清膏与将步骤（3）所得清膏混合，烘干，粉碎，加入步骤（2）所得挥发油，即得。

6.如权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于所述中药组合物的药物制剂为胶囊剂、片剂、颗粒剂、散剂、口服液或丸剂。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于所述中药组合物胶囊剂是由以下步骤制成：

（1）按比例称取黄芪、葶苈子、泽泻、人参或党参、香加皮或南五加皮，加入8倍量70%乙醇回流提取2次，第一次3小时，第二次2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30的清膏，备用；

（2）按比例称取桂枝、陈皮，提取挥发油；提油后的水溶液滤过，备用，残渣再加8倍量水煎煮1小时，滤过，合并水溶液，得提油后水提液，备用；

（3）按比例称取附子、丹参、玉竹、红花，加水9倍量，煎煮2次，每次2小时，合并提取液，滤过，与步骤（2）所得水提液合并，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30 的清膏，放冷，搅拌中加入乙醇，至醇浓度70%，4℃以下静置24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至在60℃热测时相对密度为1.25-1.30的清膏，备用；

（4）将步骤（1）所得清膏与将步骤（3）所得清膏混合，65-70℃烘干，粉碎成100目粉，加70%乙醇适量制粒，加入步骤（2）所得挥发油，混匀，装胶囊，即得。

8.如权利要求1-4中任一项所述的应用，其特征在于所述中药组合物在制备治疗高血压血管重构药物中的应用。