CN102525852B - 具有防晒作用的天然植物提取物及制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有防晒作用的天然植物提取物及其制备方法与应用。该天然植物提取物是以包含下列按质量份计的原料制备而成：卷柏50～100份和玉兰20～60份。还可以以雪莲花30～45份和茉莉10～20份为辅助剂添加到前述原料中进行提取。本发明利用超临界流体技术提取原料中的有效成分，得到的提取物中有效成分高，并且有很强的紫外线吸收能力，能清除紫外线产生的自由基，防止皮肤老化，减少黑色素的生成和修复晒伤的皮肤。本发明终端产品制备简单，质量稳定，安全性高，可广泛用于制备防晒化妆品。
Description
技术领域
本发明属于中药领域及化妆品技术领域，具体涉及一种具有防晒作用的天然植物提取物及制备方法与应用。
背景技术
太阳辐射到地球表面的光线中，其中紫外线中波(290～320nm)和紫外线长波(320～400nm)对人体皮肤作用很大。
UVA波段，波长320～420nm，又称为长波黑斑效应紫外线。它有很强的穿透力，可以穿透大部分透明的玻璃以及塑料。日光中含有的长波紫外线超过98％能穿透臭氧层和云层到达地球表面，UVA可以直达肌肤的真皮层，破坏胶原蛋白、弹性纤维组织等皮肤内部的微细结构，产生皱纹和幼纹，令皮肤松弛衰老。在阳光产生的紫外线中，UVA是UVB的15倍，是令皮肤晒黑的主要原因。它能使皮肤里结合水的透明质酸含量减少，令皮肤干燥，加速黑色素形成，使肤色变黑，同时也是引起皮肤癌的重要原因。
UVB波段，波长275～320nm，又称为中波红斑效应紫外线。中等穿透力，它的波长较短的部分会被透明玻璃吸收，日光中含有的中波紫外线大部分被臭氧层所吸收，只有不足2％能到达地球表面，在夏天和午后会特别强烈。UVB紫外线对人体具有红斑作用，能促进体内矿物质代谢和维生素D的形成，但长期或过量照射会令皮肤晒黑，并引起红肿脱皮。
因此，研究开发各种防晒化妆用品，已成为世界关注的课题。
目前防晒化妆品中的防晒剂一般可分为三类：
(1)物理防晒剂：即紫外线屏蔽剂，是通过反射及散射紫外线对皮肤起保护作用，主要为无机粒子，其典型代表为纳米级的二氧化钛、氧化锌粒子。但这类防晒剂具有用量大、防晒效果差等缺点，过多使用易堵塞毛孔，影响皮脂腺和汗腺的分泌，造成皮肤的新疾病等不良后果。
(2)化学吸收剂：这种防晒剂本身对紫外线有较强的吸收能力，可减少或完全吸收紫外线，使人体皮肤免受伤害，但这类防晒剂大多是刺激性和光敏性物质，用量大时易导致皮肤过敏，存在不安全因素和对UVA区紫外线的吸收防护不够完全等问题。
(3)天然防晒剂：这种防晒剂是从天然植物中提取的，天然防晒剂能有效吸收紫外线、清除自由基从而达到修复皮肤、延缓老化的作用，且安全性好。
中国有丰富的中草药资源，人们已发现一些中草药不仅具有吸收紫外线防晒能力，而且兼有抗菌、增白、消炎等作用，且对皮肤作用温和、刺激性小，如黄芩、芦荟、槐米等，是目前被公认的天然防晒剂。所以，开发以中国传统中草药为基础的天然植物防晒产品具有很好的应用前景。
发明内容
本发明的首要目的在于克服上述现有技术的缺点与不足，提供一种具有防晒作用的天然植物提取物。
本发明的另一目的在于提供所述具有防晒作用的天然植物提取物的制备方法。
本发明的另一目的在于提供所述具有防晒作用的天然植物提取物的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现：一种具有防晒作用的天然植物提取物，以包含下列按质量份计的原料制备而成：
卷柏 50～100份
玉兰 20～60份；
所述的原料，还包含10～50质量份雪莲花和5～25质量份茉莉；优选包含30～45质量份雪莲花和10～20质量份茉莉；
所述的具有防晒作用的天然植物提取物，更优选为以包含下列按质量份计的原料制备而成：
上述植物提取物的提取方法、提取过程均没有限定，例如可采用溶剂提取法，溶剂为水或乙醇、超声波提取、超临界提取等。
本发明所述的具有防晒作用的复方天然植物提取物的制备方法，优选包括如下步骤：
(1)将50～100质量份卷柏和20～60质量份玉兰分别干燥、粉碎过筛，得到粗粉；
(2)首先将粉碎后的玉兰加入萃取釜，采用CO2超临界流体萃取，提取温度35～55℃，提取压力20～50Mpa，提取时间为1～3h，CO2流速为10～25L/h；分离温度35～55℃，分离压力为3～10Mpa下收集挥发油及油脂提取物；
(3)接着在步骤(2)经超临界提取后的药渣中加入步骤(1)粉碎后的卷柏和作为夹带剂的乙醇，乙醇的用量相当于萃取釜中物料质量10％；接着于提取温度35～55℃，提取压力20～40Mpa，提取时间1～3h，CO2流速10～25L/h，再次进行CO2超临界流体萃取；分离温度35～55℃，分离压力6～13Mpa；
(4)将步骤(3)经提取后的药渣，加水煎煮两次，合并滤液，浓缩，冷却至40℃以下；接着，在搅拌状态下，加入乙醇，使最终得到的混合液中乙醇含量达质量百分比60％～65％；
(5)密闭放置至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清减压回收乙醇，得到浓缩液；
(6)将步骤(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均匀，为具有防晒作用的复方天然植物提取物；
本发明所述的具有防晒作用的复方天然植物提取物的制备方法，更优选包括如下步骤：
(1)将50～100质量份卷柏、20～60质量份玉兰、10～50质量份雪莲花和5～25质量份茉莉分别干燥、粉碎过筛，得到粗粉；
(2)首先将粉碎后的玉兰和茉莉放入萃取釜，采用CO2超临界流体萃取，提取温度35～55℃，提取压力20～50Mpa，提取时间为1～3h，CO2流速为10～25L/h；分离温度35～55℃，分离压力为3～10Mpa下收集挥发油及油脂提取物；
(3)接着在步骤(2)经超临界提取后的药渣中加入步骤(1)粉碎后的卷柏、雪莲花和作为夹带剂的乙醇，乙醇的用量相当于萃取釜中物料质量10％；接着于提取温度35～55℃，提取压力20～40Mpa，提取时间1～3h，CO2流速10～25L/h，再次进行CO2超临界流体萃取；分离温度35～55℃，分离压力6～13Mpa；
(4)将步骤(3)经提取后的药渣，加水煎煮两次，合并滤液，滤液浓缩至原体积的1/3，冷却至40℃以下；接着，在搅拌状态下，加入无水乙醇，使最终得到的混合液中乙醇含量达60～65％；
(5)密闭放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清减压回收乙醇，得到浓缩液；
(6)将步骤(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均匀，为具有防晒作用的复方天然植物提取物；
步骤(1)中所述的颗粒的粒度优选为能过10目筛；
步骤(2)中所述的提取的条件优选为提取温度45℃，提取压力30Mpa，提取时间150min，CO2流速18L/h，分离温度45℃，分离压力为6Mpa；
步骤(3)中所述的乙醇的浓度优选为体积百分比95％的乙醇；
步骤(3)中所述的提取的条件优选为提取温度50℃，提取压力30Mpa，提取时间150min，CO2流速18L/h，分离温度50℃，分离压力8Mpa；
步骤(4)中所述的水煮提取的条件优选为水的质量用量相当于所述的药渣质量的5倍；提取两次，每次1小时；
步骤(5)中所述浓缩液的浓缩程度优选为于70℃检测，以水的密度为基准，相对密度为1.10～1.20；
步骤(6)中所述的天然植物提取物为黄棕色的澄清液体，不浑浊、无沉淀物、无悬浮物，有植物特有的香味，无刺激性气味；
所述的复方天然植物提取物在防晒化妆品中应用；
本发明在防晒护肤品中上述植物提取物的配合用量为0.1～20％(w/w)，优选用量为2～8％(w/w)；
在加入本发明的防晒护肤品中，除上述必需成分以外，可以根据需要适当地配合通常在化妆品中使用的成分。例如，其它的美白剂、保湿剂、抗氧化剂、表面活性剂、醇类、水等基质成分；
本发明所述的防晒护肤品的剂型没有特别限定，可以为溶液、悬浮液、乳状液、霜剂、膏状、凝胶、奶液、护肤液、粉、香皂、油、干粉、粉底液、湿粉或喷剂。
一种防晒乳，含有以下按质量百分比计的成分：甲氧基肉桂酸乙基己酯3％、12-15烷基苯甲酸酯6％、二氧化钛2％、水杨酸乙基己酯5％、聚甘油-10肉豆蔻酸酯1％、甘油硬脂酸酯3％、环聚二甲基硅氧烷3％、二乙氨羟苯甲酰基苯甲酸己酯2.5％、4-甲基苄亚基樟脑2％、鲸蜡醇1％、VP/十六碳烯共聚物1％、聚二甲基硅氧烷1％、丁二醇5％、海藻糖1％、欧洲李果提取物1％、鲸蜡醇磷酸酯钾2.5％、烟酰胺0.5％、泛醇0.3％、黄原胶0.2％、香精0.1％、甘草酸二钾0.1％、EDTA二钠0.1％、甲基异噻唑啉酮0.01％和权利要求1～3任一项所述的具有防晒作用的复方天然植物提取物5％；
该防晒乳的制备过程如下：
(1)首先将丁二醇5％(w/w)、海藻糖1％(w/w)、欧洲李果提取物1％(w/w)、鲸蜡醇磷酸酯钾2.5％(w/w)、烟酰胺0.5％(w/w)、泛醇0.3％(w/w)、黄原胶0.2％(w/w)和去离子水53.69％(w/w)混合，加热至85℃；往其中加入香精0.1％(w/w)、甘草酸二钾0.1％(w/w)、EDTA二钠0.1％(w/w)和甲基异噻唑啉酮0.01％(w/w)，搅拌均匀；
(2)将氧基肉桂酸乙基己酯3％(w/w)、12-15烷基苯甲酸酯6％(w/w)、二氧化钛2％(w/w)、水杨酸乙基己酯5％(w/w)、聚甘油-10肉豆蔻酸酯1％(w/w)、甘油硬脂酸酯3％(w/w)、环聚二甲基硅氧烷3％(w/w)、二乙氨羟苯甲酰基苯甲酸己酯2.5％(w/w)、4-甲基苄亚基樟脑2％(w/w)、鲸蜡醇1％(w/w)、VP/十六碳烯共聚物1％(w/w)和聚二甲基硅氧烷1％(w/w)混合，加热至85℃；
(3)将步骤(2)得到的物料加入步骤(1)得到的物料，均质，冷却至45℃加入权利要求1～3任一项所述的具有防晒作用的复方天然植物提取物5％(w/w)，36℃停止搅拌出料，得到防晒乳。
本发明的原理：
卷柏即复活草，化学组成主要是以穗花杉双黄酮为代表的双黄酮成分和海藻糖。双黄酮化合物对290～400nm的紫外线有一定的吸收。卷柏提取物低浓度时对黑色素细胞活性有强力的抑制，并能增强皮肤细胞自身的SOD作用，抗氧化作用极强，还能加速清除紫外线照射产生的自由基，抵抗日晒造成的光老化和黑斑。卷柏含有丰富的海藻糖，其保湿性能优于芦荟。
玉兰，中药名为辛夷，是传统中药材，在我国有两千多年的栽培与药用历史。花蕾可入药，性温味辛，归肺胃经，具有散风寒、通鼻窍之功能。其主要含有挥发油、黄酮和生物碱。玉兰中的黄酮对羟基自由基有较强的清除能力；其挥发油有抗炎、镇痛和抗过敏作用，通过降低炎症组织毛细血管的通透性、抑制非特异性肿胀，能明显减轻充血、水肿和坏死。玉兰可以修复晒伤的皮肤，对日晒引起的皮肤红肿、过敏有很好的作用。
卷柏和玉兰花搭配，能有效清除紫外线产生的自由基、抑制酪氨酸酶活性、抑制黑色素生成。雪莲花和茉莉的加入可以增加本发明提取物的抗紫外线能力。其中雪莲花中多糖含量丰富，对紫外线具有很强的吸收能力；茉莉含挥发油，其芳香具有理气、开郁、安神、和中的作用。
超临界流体萃取(Supeporitical Fluid Extraction，SFE)技术是近年发展起来的一项新技术。超临界是处于临界温度(Te)和临界压力(Pe)以上的流体，例如CO2、氨、乙烯、丙烷、水等。目前研究较多的为CO2，在超临界状态下流体兼有气液两相的双重特点，既具有与气体相当的高扩散系数和低粘度，又具有与液体相近的密度和对物质良好的溶解能力，因此可作为溶剂进行萃取。对中药挥发油的提取，传统的方法是水蒸气蒸馏法，但它有许多弊端，如有效成分易被破坏，提取时间过长等。SFE技术与之比较其主要优点有如：挥发油的收率明显、提取时间缩短、没有残留的有机溶剂等。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及有益效果：本发明运用超临界提取技术对中草药中的有效成分进行提取，具有流程简单、操作方便和提取效率高等优点。采用本发明的植物提取物做紫外吸收剂，大大降低单纯使用化学紫外吸收剂引起的接触致敏作用和光接触致敏作用，再辅以较少的物理化学紫外吸收剂制成的防晒化妆品，能有效地防止强紫外线对皮肤辐射，达到较高SPF值，同时大大减少化学防晒剂对皮肤的损伤。含有本发明植物提取物制成的化妆品还能对日晒引起的皮肤干痛、红肿有很好的修复作用，清除紫外线产生的自由基，防止皮肤黑色素沉着，具有防晒黑晒红、抗衰老抗刺激的作用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
(1)将80质量份卷柏、55质量份玉兰、45质量份雪莲花和20质量份茉莉分别干燥、粉碎过10目筛，得到粗粉。
(2)第一步萃取：将粉碎后的玉兰和茉莉放入萃取釜，采用CO2超临界流体萃取，提取温度45℃，提取压力30Mpa，提取时间为150min，CO2流速为18L/h，在分离温度45℃，分离压力6Mpa下收集挥发油及油脂提取物；
(3)第二步萃取：在步骤(2)经超临界提取后的药渣中加入步骤(1)粉碎后的卷柏、雪莲花和作为夹带剂的乙醇(浓度为体积百分比95％)，乙醇的质量用量相当于萃取釜中物料质量的10％；在提取温度50℃，提取压力30Mpa，提取时间150min，CO2流速18L/h下再次进行CO2超临界流体萃取；分离温度50℃，分离压力8Mpa；
(4)将步骤(3)超临界提取后的卷柏、雪莲、玉兰和茉莉的药渣，加入相当于药渣质量5倍质量的水，加热提取2次，每次1小时；合并滤液，滤液浓缩至原体积的1/3，冷却至40℃以下；接着，在搅拌状态下，加入无水乙醇，使最终得到的混合液中乙醇含量达质量百分比60％；
(5)密闭放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清减压回收乙醇，浓缩程度为相对密度1.10(70℃测)，得到浓缩液；
(6)将步骤(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均匀，将其命名为防晒植物提取物I。
实施例2
(1)将75质量份卷柏、45质量份玉兰、30质量份雪莲花和10质量份茉莉分别干燥、粉碎过10目筛，得到粗粉。
(2)第一步萃取：将粉碎后的玉兰和茉莉放入萃取釜，采用CO2超临界流体萃取，提取温度45℃，提取压力30Mpa，提取时间为150min，CO2流速为18L/h，在分离温度45℃，分离压力6Mpa下收集挥发油及油脂提取物；
(3)第二步萃取：在步骤(2)经超临界提取后的药渣中加入步骤(1)粉碎后的卷柏、雪莲花和作为夹带剂的乙醇(浓度为体积百分比95％)，乙醇的质量用量相当于萃取釜中物料质量的10％；在提取温度50℃，提取压力30Mpa，提取时间150min，CO2流速18L/h下再次进行CO2超临界流体萃取；分离温度50℃，分离压力8Mpa；
(4)将步骤(3)超临界提取后的卷柏、雪莲、玉兰和茉莉的药渣，加入相当于药渣质量5倍质量的水，加热提取2次，每次1小时；合并滤液，滤液浓缩至原体积的1/3，冷却至40℃以下；接着，在搅拌状态下，加入无水乙醇，使最终得到的混合液中乙醇含量达质量百分比60％；
(5)密闭放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清减压回收乙醇，浓缩程度为相对密度1.12(70℃测)，得到浓缩液；
(6)将步骤(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均匀，将其命名为防晒植物提取物II。
实施例3
(1)将50质量份卷柏、60质量份玉兰、10质量份雪莲花和25质量份茉莉分别干燥、粉碎过10目筛，得到粗粉。
(2)第一步萃取：将粉碎后的玉兰和茉莉放入萃取釜，采用CO2超临界流体萃取，提取温度35℃，提取压力35Mpa，提取时间为180min，CO2流速为10L/h，在分离温度35℃，分离压力3Mpa下收集挥发油及油脂提取物；
(3)第二步萃取：在步骤(2)经超临界提取后的药渣中加入步骤(1)粉碎后的卷柏、雪莲花和作为夹带剂的乙醇(浓度为体积百分比95％)，乙醇的质量用量相当于萃取釜中物料质量的10％；在提取温度35℃，提取压力20Mpa，提取时间180min，CO2流速10L/h下再次进行CO2超临界流体萃取；分离温度50℃，分离压力6Mpa；
(4)将步骤(3)超临界提取后的卷柏、雪莲、玉兰和茉莉的药渣，加入相当于药渣质量5倍质量的水，加热提取2次，每次1小时；合并滤液，滤液浓缩至原体积的1/3，冷却至40℃以下；接着，在搅拌状态下，加入无水乙醇，使最终得到的混合液中乙醇含量达质量百分比65％；
(5)密闭放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清减压回收乙醇，浓缩程度为相对密度1.10(70℃测)，得到浓缩液；
(6)将步骤(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均匀，将其命名为防晒植物提取物III。
实施例4
(1)将100质量份卷柏、20质量份玉兰、50质量份雪莲花和5质量份茉莉分别干燥、粉碎过10目筛，得到粗粉。
(2)第一步萃取：将粉碎后的玉兰和茉莉放入萃取釜，采用CO2超临界流体萃取，提取温度55℃，提取压力50Mpa，提取时间为60min，CO2流速为25L/h，在分离温度55℃，分离压力10Mpa下收集挥发油及油脂提取物。
(3)第二步萃取：在步骤(2)经超临界提取后的药渣中加入步骤(1)粉碎后的卷柏、雪莲花和作为夹带剂的乙醇(浓度为体积百分比95％)，乙醇的质量用量相当于萃取釜中物料质量的10％；在提取温度55℃，提取压力40Mpa，提取时间60min，CO2流速25L/h下再次进行CO2超临界流体萃取；分离温度55℃，分离压力13Mpa；
(4)将步骤(3)超临界提取后的卷柏、雪莲、玉兰和茉莉的药渣，加入相当于药渣质量5倍质量的水，加热提取2次，每次1小时；合并滤液，滤液浓缩至原体积的1/3，冷却至40℃以下；接着，在搅拌状态下，加入无水乙醇，使最终得到的混合液中乙醇含量达质量百分比60％；
(5)密闭放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清减压回收乙醇，浓缩程度为相对密度1.15(70℃测)，得到浓缩液；
(6)将步骤(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均匀，将其命名为防晒植物提取物IV。
实施例5
(1)将50质量份卷柏和60质量份玉兰分别干燥、粉碎过10目筛，得到粗粉。
(2)第一步萃取：将粉碎后的玉兰放入萃取釜，采用CO2超临界流体萃取，提取温度35℃，提取压力20Mpa，提取时间为180min，CO2流速为10L/h，在分离温度35℃，分离压力3Mpa下收集挥发油及油脂提取物。
(3)第二步萃取：在步骤(2)经超临界提取后的药渣中加入步骤(1)粉碎后的卷柏和作为夹带剂的乙醇(浓度为体积百分比95％)，乙醇的质量用量相当于萃取釜中物料质量的10％；在提取温度35℃，提取压力20Mpa，提取时间180min，CO2流速10L/h下再次进行CO2超临界流体萃取；分离温度35℃，分离压力6Mpa；
(4)将步骤(3)超临界提取后的卷柏和玉兰的药渣，加入相当于药渣质量5倍质量的水，加热提取2次，每次1小时；合并滤液，滤液浓缩至原体积的1/3，冷却至40℃以下；接着，在搅拌状态下，加入无水乙醇，使最终得到的混合液中乙醇含量达质量百分比60％；
(5)密闭放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清减压回收乙醇，浓缩程度为相对密度的1.20(70℃测)，得到浓缩液；
(6)将步骤(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均匀，将其命名为防晒植物提取物V。
实施例6
(1)将100质量份卷柏和20质量份玉兰分别干燥、粉碎过10目筛，得到粗粉。
(2)第一步萃取：将粉碎后的玉兰放入萃取釜，采用CO2超临界流体萃取，提取温度55℃，提取压力50Mpa，提取时间为60min，CO2流速为25L/h，在分离温度55℃，分离压力10Mpa下收集挥发油及油脂提取物。
(3)第二步萃取：在步骤(2)经超临界提取后的药渣中加入步骤(1)粉碎后的卷柏和作为夹带剂的乙醇(浓度为体积百分比95％)，乙醇的质量用量相当于萃取釜中物料质量的10％；在提取温度55℃，提取压力40Mpa，提取时间60min，CO2流速25L/h下再次进行CO2超临界流体萃取；分离温度55℃，分离压力13Mpa；
(4)将步骤(3)超临界提取后的卷柏和玉兰的药渣，加入相当于药渣质量5倍质量的水，加热提取2次，每次1小时；合并滤液，滤液浓缩至原体积的1/3，冷却至40℃以下；接着，在搅拌状态下，加入无水乙醇，使最终得到的混合液中乙醇含量达质量百分比60％；
(5)密闭放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清减压回收乙醇，浓缩程度为相对密度1.10(70℃测)，得到浓缩液；
(6)将步骤(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均匀，将其命名为防晒植物提取物VI。
对比例1
(1)将100质量份卷柏和20质量份香薷分别干燥、粉碎过过10目筛，得到粗粉。
(2)第一步萃取：将粉碎后的香薷放入萃取釜，采用CO2超临界流体萃取，提取温度55℃，提取压力50Mpa，提取时间为60min，CO2流速为25L/h，在分离温度55℃，分离压力10Mpa，下收集挥发油及油脂提取物。
(3)第二步萃取：在步骤(2)经超临界提取后的药渣中加入步骤(1)粉碎后的卷柏和作为夹带剂的乙醇(浓度为体积百分比95％)，乙醇的质量用量相当于萃取釜中物料质量的10％；在提取温度55℃，提取压力40Mpa，提取时间60min，CO2流速25L/h下再次进行CO2超临界流体萃取；分离温度55℃，分离压力13Mpa；
(4)将步骤(3)超临界提取后的卷柏和香薷的药渣，加入相当于药渣质量5倍量的水，加热提取2次，每次1小时；合并滤液，滤液浓缩至原体积的1/3，冷却至40℃以下；接着，在搅拌状态下，加入无水乙醇，使最终得到的混合液中乙醇含量达质量百分比65％；
(5)密闭放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清减压回收乙醇，浓缩程度为相对密度的1.10(70℃测)，得到浓缩液；
(6)将步骤(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均匀，将其命名为防晒植物提取物VII。
对比例2
(1)将100质量份卷柏、20质量份香薷、50质量份雪莲花和5质量份茉莉分别干燥、粉碎过过10目筛，得到粗粉。
(2)第一步萃取：将粉碎后的香薷和茉莉放入萃取釜，采用CO2超临界流体萃取，提取温度55℃，提取压力50Mpa，提取时间为60min，CO2流速为25L/h，在分离温度55℃，分离压力10Mpa，下收集挥发油及油脂提取物。
(3)第二步萃取：在步骤(2)经超临界提取后的药渣中加入步骤(1)粉碎后的卷柏、雪莲花和作为夹带剂的乙醇(浓度为体积百分比95％)，乙醇的质量用量相当于萃取釜中物料质量的10％，与用量相当于萃取釜中物料质量的10％的95％乙醇夹带剂一次性加入萃取釜；在提取温度55℃，提取压力40Mpa，提取时间60min，CO2流速25L/h下再次进行CO2超临界流体萃取；分离温度55℃，分离压力13Mpa；
(4)将步骤(3)超临界提取后的卷柏、雪莲、香薷和茉莉的药渣，加入相当于药渣质量5倍质量的水，加热提取2次，每次1小时；合并滤液，滤液浓缩至原体积的1/3，冷却至40℃以下；接着，在搅拌状态下，加入无水乙醇，使最终得到的混合液中乙醇含量达质量百分比60％；
(5)密闭放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清减压回收乙醇，浓缩程度为相对密度的1.10(70℃测)，得到浓缩液；
(6)将步骤(2)、(3)、(5)得到的提取液混合均匀，将其命名为防晒植物提取物VIII。
效果实施例：
一、检测方法
用二甲基亚砜分别将前述实施例的复方中药提取物配制成浓度为质量体积比1％的活性成分溶液，进行以下的实验。
(1)自由基清除作用的测定
取活性成分溶液2ml及浓度为100μmol/L的二苯基苦基苯肼(DPPH)溶液(该溶液的溶剂是为水)2ml先后加入同一具塞试管中，摇匀；室温下静置30分钟，以溶剂为空白于517nm波长下测定样品吸光度。
抑制率：K％＝[1-(Ai-Aj)/Ac]×100％；
Ai：2ml DPPH溶液+2ml活性成分溶液的吸光度；
Aj：2ml活性成分溶液+2ml溶剂(即二甲基亚砜)的吸光度；
Ac：2ml DPPH溶液+2ml溶剂(即二甲基亚砜)的吸光度。
(2)抗紫外线性能测定
在280～400nm波长范围内，每隔10nm进行扫描，确定各波长下活性成分溶液的透光率，计算波长范围的平均吸收率。
(3)抑制小鼠黑色素细胞中酪氨酸活力试验
将处于对数生长期的B16小鼠黑色素细胞(中科院上海细胞所)接种于96孔板中，培养基为RPMI1640+体积百分比10％的小牛血清，每孔100μl(104个细胞/孔)，置37℃、5％CO2培养箱中培养24h后，添加过滤除菌后的活性成分溶液50μl。继续培养3d后，弃去上清液，用pH值为6.8的0.15％(w/v)聚丁二酸丁二醇酯冲洗两遍，每孔加90μl含1％(体积分数)Triton X-100的PBS(0.01M，pH值7.4)。冰浴中超声破碎，每孔加10μl 10mmol/L的L-多巴(L-dopa)，37℃孵育60min，于475nm处比色，空白孔调零，测各孔吸光度值。
抑制率＝(1-药物组平均吸光度值÷对照组平均吸光度值)×100％
(4)抑制小鼠黑色素细胞中中黑素合成试验
将B16小鼠黑素瘤细胞以1×105个/ml的密度接种于直径为9cm的培养皿，在37℃、5％CO2的条件下培养2天，弃上清液，加入过滤除菌后的活性成分溶液18～22ml，接着培养3天，弃上清液，(0.01M，pH值7.4)PBS洗涤，每孔加入0.5ml质量百分比0.2％的胰酶溶液消化细胞3min，每皿加2ml维持液终止消化。吹打混匀后，每种浓度取出0.5ml做细胞计数。其余细胞悬液以2500r/min离心5min，弃上清液，于沉淀中加入NaOH溶液，加热使黑色素溶解，选择490nm波长的酶联免疫检测仪上测吸光度值。
黑色素合成抑制率＝[1-(药物孔吸光度值÷药物孔细胞密度)÷(对照孔吸光度值÷对照孔细胞密度)]×100％
(5)天然植物提取物对UVA损伤的修复作用测定
乳酸脱氢酶(LDH)释放法是反映细胞膜损伤的一个重要指标，LDH是在细胞水平上对天然提取物的防紫外线能力进行评估。
实验方法：将人皮肤成纤维细胞ESF-1(中科院上海细胞所)接种于96孔培养板，采用DMEM培养基，在37℃、5％CO2的条件下培养。细胞贴壁24h后吸出上清，PBS(0.01M，pH值7.4)洗涤一次，每孔加入5μL PBS，UVA 10J/cm2照射，照射完毕，吸出上清，加入用DMEM稀释的浓度分别为5mg/mL提取物，培养24h后取上清进行LDH检测。采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒(四川迈克)，在7020Automatic Analyzer(HITACH)上进行乳酸脱氢酶活性测定。同时设细胞对照、阴性对照和空白对照(如表1所示)。
表1
| 细胞 | UVA照射 | 提取物 | |
| 样品 | √ | √ | √ |
| 细胞对照 | √ | × | √ |
| 阴性对照 | √ | √ | × |
| 空白对照 | × | √ | √ |
修复率＝[(样品LDH活性-细胞对照LDH活性)÷(阴性对照LDH活性-细胞对照LDH活性)]×100％
二、实验结果：
(1)自由基清除作用的测定，结果如表2所示：
表2
| 抑制率(％) | |
| 实施例1 | 94.5 |
| 实施例2 | 93.6 |
| 实施例3 | 91.3 |
| 实施例4 | 90.8 |
| 实施例5 | 88％ |
| 实施例6 | 86％ |
| 对比例1 | 64％ |
| 对比例2 | 71％ |
(2)抗紫外线性能测定，结果如表3所示：
表3
| 280～320nm吸收率(％) | 320～400nm吸收率(％) | |
| 实施例1 | 100 | 97.3 |
| 实施例2 | 100 | 98.2 |
| 实施例3 | 100 | 95.4 |
| 实施例4 | 100 | 94.7 |
| 实施例5 | 100 | 94.5 |
| 实施例6 | 98.4 | 93.1 |
| 对比例1 | 73.1 | 82.0 |
| 对比例2 | 82.3 | 84.5 |
(3)抑制小鼠黑色素细胞中酪氨酸活力试验，结果如表4所示：
表4
| 抑制率(％) | |
| 实施例1 | 65.3 |
| 实施例2 | 66.1 |
| 实施例3 | 53.8 |
| 实施例4 | 56.9 |
| 实施例5 | 52.5 |
| 实施例6 | 54.1 |
| 对比例1 | 43.3 |
| 对比例2 | 44.6 |
(4)抑制小鼠黑色素细胞中黑素合成试验，结果如表5所示：
表5
| 抑制率(％) | |
| 实施例1 | 62.0 |
| 实施例2 | 61.8 |
| 实施例3 | 58.7 |
| 实施例4 | 57.5 |
| 实施例5 | 55.8 |
| 实施例6 | 54.3 |
| 对比例1 | 49.2 |
| 对比例2 | 47.6 |
(5)天然植物提取物对UVA损伤的修复作用测定，结果如表6所示：
表6
| 修复率(％) | |
| 实施例1 | 64.2 |
| 实施例2 | 61.3 |
| 实施例3 | 59.4 |
| 实施例4 | 58.1 |
| 实施例5 | 56.5 |
| 实施例6 | 57.3 |
| 对比例1 | 42.5 |
| 对比例2 | 41.8 |
上述实验结果表明，以卷柏和玉兰为原料得到的提取物能有效清除紫外线产生的自由基、抑制酪氨酸酶活性、抑制黑色素生成。香薷与玉兰都属于发散风寒药，性味归经相似，主治风寒表证，具有除黑增白的作用，含有挥发油；将香薷与卷柏搭配效果差于卷柏和玉兰搭配，可见本发明提供的配方效果更优。本发明通过将雪莲花和茉莉为辅助得到的提取物，清除紫外线产生的自由基、抑制酪氨酸酶活性、抑制黑色素的能力更强，同时吸收紫外线和修复紫外线损伤的皮肤的功能显著。
应用实施例
本发明取上述植物提取液配制成防晒乳，配方如下：
A相：
B相：
C相：
D相：天然植物提取物 5％；
A，B分别加热至85℃，将C相加入B相，搅拌均匀，将A加入BC混合相中，均质后，冷却至45℃加入D相，36℃停止搅拌出料。
将制备得到的防晒乳按照我国卫生部《化妆品卫生规范》(2007年版)中《防晒化妆品防晒指数(SPF值)测定方法》和《防晒化妆品长波紫外线防护指数(PFA值)测定方法》进行检验。
在以下表中，“SPF标准品”按照我国卫生部《防晒化妆品防晒指数(SPF值)测定方法》中规定的“标准品”；“PFA标准品”按照我国卫生部《防晒化妆品长波紫外线防护指数(PFA值)测定方法》中规定的“标准品”。待测样品1、2、3分别为实施例1、2、3的植物提取物，均以5％的量加入到以上防晒乳配方中，即得到待测样品1、2、3。空白对照按上述防晒乳制备方法制备，为不加本发明植物提取物的空白基质，测得其SFA值为8.2，PFA值为5.3。
(1)样品1的SPF和PFA值测试：
选择受试者：共10人，男3人，女7人，年龄20～40，平均年龄28.4±4.48岁，符合受试者志愿入选标准。标准品及样品的SPF和PFA值测定结果如表7所示：
表7
结论：人体测试结果显示，含植物提取物样品1的SPF值为17.70，PFA值为8.56；
(2)样品2的SPF和PFA值测试：
选择受试者：共10人，男3人，女7人，年龄20～40，平均年龄27.6±5.23岁，符合受试者志愿入选标准。标准品及样品的SPF和PFA值测定结果如表8所示：
表8
结论：人体测试结果显示，含植物提取物样品2的SPF值为17.39，PFA值为8.63。
(3)样品3的SPF和PFA值测试：
选择受试者：共10人，男3人，女7人，年龄20～40，平均年龄26.7±5.44岁，符合受试者志愿入选标准。标准品及样品的SPF和PFA值测定结果如表9所示：
表9
结论：人体测试结果显示，含植物提取物样品3的SPF值为15.08，PFA值为7.58。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种具有防晒作用的天然植物提取物，其特征在于通过如下步骤制备得到：
（1）将50～100质量份卷柏和20～60质量份玉兰分别干燥、粉碎过筛，得到粗粉；
（2）首先将粉碎后的玉兰加入萃取釜，采用CO2超临界流体萃取，提取温度35～55℃，提取压力20～50 Mpa，提取时间为1～3h，CO2流速为10～25L/h；分离温度35～55℃，分离压力为3~10Mpa下收集挥发油及油脂提取物；
（3）接着在步骤（2）经超临界提取后的药渣中加入步骤（1）粉碎后的卷柏和作为夹带剂的乙醇，乙醇的用量相当于萃取釜中物料质量10%；接着于提取温度35～55℃，提取压力20～40Mpa，提取时间1～3h，CO2流速10～25 L/h，再次进行CO2超临界流体萃取；分离温度35～55℃，分离压力6～13Mpa；
（4）将步骤（3）经提取后的药渣，加水煎煮两次，合并滤液，浓缩，冷却至40℃以下；接着，在搅拌状态下，加入乙醇，使最终得到的混合液中乙醇含量达60～65%；
（5）密闭放置至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清液减压回收乙醇，得到浓缩液；
（6）将步骤（2）、（3）、（5）得到的提取液混合均匀，为具有防晒作用的天然植物提取物。
2.一种具有防晒作用的天然植物提取物，其特征在于：通过如下步骤制备得到：
（1）将50～100质量份卷柏、20～60质量份玉兰、10～50质量份雪莲花和5～25质量份茉莉分别干燥、粉碎过筛，得到粗粉；
（2）首先将粉碎后的玉兰和茉莉放入萃取釜，采用CO2超临界流体萃取，提取温度35～55℃，提取压力20～50Mpa，提取时间为1～3h，CO2流速为10～25L/h；分离温度35～55℃，分离压力为3~10Mpa下收集挥发油及油脂提取物；
（3）接着在步骤（2）经超临界提取后的药渣中加入步骤（1）粉碎后的卷柏、雪莲花和作为夹带剂的乙醇，乙醇的用量相当于萃取釜中物料质量10%；接着于提取温度35～55℃，提取压力20～40Mpa，提取时间1～3h，CO2流速10～25 L/h，再次进行CO2超临界流体萃取；分离温度35～55℃，分离压力6～13Mpa；
（4）将步骤（3）经提取后的药渣，加水煎煮两次，合并滤液，滤液浓缩至原体积的1/3，冷却至40℃以下；接着，在搅拌状态下，加入无水乙醇，使最终得到的混合液中乙醇含量达60～65%；
（5）密闭放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清液减压回收乙醇，得到浓缩液；
（6）将步骤（2）、（3）、（5）得到的提取液混合均匀，为具有防晒作用的天然植物提取物。
3.根据权利要求2所述的具有防晒作用的天然植物提取物，其特征在于以包含下列按质量份计的原料制备而成：卷柏75～80份、玉兰45～55份、雪莲花30～45份和茉莉10～20份。
4.权利要求1所述的具有防晒作用的天然植物提取物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
（1）将50～100质量份卷柏和20～60质量份玉兰分别干燥、粉碎过筛，得到粗粉；
（2）首先将粉碎后的玉兰加入萃取釜，采用CO2超临界流体萃取，提取温度35～55℃，提取压力20～50 Mpa，提取时间为1～3h，CO2流速为10～25L/h；分离温度35～55℃，分离压力为3~10Mpa下收集挥发油及油脂提取物；
（3）接着在步骤（2）经超临界提取后的药渣中加入步骤（1）粉碎后的卷柏和作为夹带剂的乙醇，乙醇的用量相当于萃取釜中物料质量10%；接着于提取温度35～55℃，提取压力20～40Mpa，提取时间1～3h，CO2流速10～25 L/h，再次进行CO2超临界流体萃取；分离温度35～55℃，分离压力6～13Mpa；
（4）将步骤（3）经提取后的药渣，加水煎煮两次，合并滤液，浓缩，冷却至40℃以下；接着，在搅拌状态下，加入乙醇，使最终得到的混合液中乙醇含量达60～65%；
（5）密闭放置至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清液减压回收乙醇，得到浓缩液；
（6）将步骤（2）、（3）、（5）得到的提取液混合均匀，为具有防晒作用的天然植物提取物。
5.权利要求2所述的具有防晒作用的天然植物提取物的制备方法，其特征在于包括如下步骤：
（1）将50～100质量份卷柏、20～60质量份玉兰、10～50质量份雪莲花和5～25质量份茉莉分别干燥、粉碎过筛，得到粗粉；
（2）首先将粉碎后的玉兰和茉莉放入萃取釜，采用CO2超临界流体萃取，提取温度35～55℃，提取压力20～50Mpa，提取时间为1～3h，CO2流速为10～25L/h；分离温度35～55℃，分离压力为3~10Mpa下收集挥发油及油脂提取物；
（3）接着在步骤（2）经超临界提取后的药渣中加入步骤（1）粉碎后的卷柏、雪莲花和作为夹带剂的乙醇，乙醇的用量相当于萃取釜中物料质量10%；接着于提取温度35～55℃，提取压力20～40Mpa，提取时间1～3h，CO2流速10～25 L/h，再次进行CO2超临界流体萃取；分离温度35～55℃，分离压力6～13Mpa；
（4）将步骤（3）经提取后的药渣，加水煎煮两次，合并滤液，滤液浓缩至原体积的1/3，冷却至40℃以下；接着，在搅拌状态下，加入无水乙醇，使最终得到的混合液中乙醇含量达60～65%；
（5）密闭放置12h至沉淀完全，除去沉淀，得到的上清液减压回收乙醇，得到浓缩液；
（6）将步骤（2）、（3）、（5）得到的提取液混合均匀，为具有防晒作用的天然植物提取物。
6.根据权利要求4或5所述的具有防晒作用的天然植物提取物的制备方法，其特征在于：
步骤（1）中所述的粗粉的粒度为能过10目筛；
步骤（2）中所述的提取的条件为提取温度45℃，提取压力30Mpa，提取时间150min，CO2流速18L/h，分离温度45℃，分离压力为6Mpa；
步骤（3）中所述的乙醇的浓度为体积百分比95%；
步骤（3）中所述的提取的条件为提取温度50℃，提取压力30Mpa，提取时间150min，CO2流速18L/h，分离温度50℃，分离压力8Mpa；
步骤（4）中所述的水煮提取的条件为水的质量用量相当于所述的药渣质量的5倍；提取两次，每次1小时。
7.根据权利要求4或5所述的具有防晒作用的天然植物提取物的制备方法，其特征在于：步骤（5）中所述浓缩液的浓缩程度为于70℃检测、相对密度为1.10～1.20。
8.权利要求1～3任一项所述的具有防晒作用的天然植物提取物在制备防晒化妆品中的应用。
9.根据权利要求8所述的具有防晒作用的天然植物提取物在制备防晒化妆品中的应用，其特征在于：所述的防晒化妆品的剂型为溶液、霜剂、凝胶、粉或喷剂。
10.一种防晒乳，其特征在于含有以下按质量百分比计的成分：甲氧基肉桂酸乙基己酯3%、12-15烷基苯甲酸酯6%、二氧化钛2%、水杨酸乙基己酯5%、聚甘油-10肉豆蔻酸酯1%、甘油硬脂酸酯3%、环聚二甲基硅氧烷3%、二乙氨羟苯甲酰基苯甲酸己酯2.5%、4-甲基苄亚基樟脑2%、鲸蜡醇1%、VP/十六碳烯共聚物1%、聚二甲基硅氧烷1%、丁二醇5%、海藻糖1%、欧洲李果提取物1%、鲸蜡醇磷酸酯钾2.5%、烟酰胺0.5%、泛醇0.3%、黄原胶0.2%、香精0.1%、甘草酸二钾0.1%、EDTA二钠0.1%、甲基异噻唑啉酮0.01%和权利要求1～3任一项所述的具有防晒作用的天然植物提取物5%；
所述的具有防晒作用的天然植物提取物于70℃检测、相对密度为1.10～1.20。
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