CN102409069B - 花生壳低聚木糖的制备方法 - Google Patents
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Abstract
一种花生壳低聚木糖的制备方法，将花生壳粉碎至40目筛，加入到氢氧化钠溶液中置于水浴锅中加热，加以超声辅助；置于离心机中离心，取上清液，残渣用蒸馏水反复洗涤至中性，洗液并入上清液中，调节pH值，蒸发浓缩；再加入三倍体积的无水乙醇，静置、离心弃去上清液，沉淀后烘干，碾成粉末状加蒸馏水溶解，调节pH值，作为酶解底物，加入木聚糖酶，放入水浴锅中加热；反应结束后，在沸水中灭酶，然后离心，取上清液；将酶解液制得的粗低聚木糖液过SephadexG-25凝胶柱，用0.1mol/LNaCl溶液洗脱，DNS法对洗脱液进行跟踪测试，收集洗脱峰值处的低聚木糖液，再将各组分的洗脱液进行真空浓缩至适当体积，蒸馏水透析过夜，冷冻干燥，最后制得经过纯化的样品。
Description
技术领域
本发明涉及食品工程技术，具体说是涉及一种花生壳低聚木糖的制备方法。
背景技术
我国是花生种植大国，花生产量丰富的同时也产生大量的花生壳农业废料。从我国对花生壳的利用情况来看，除少量作为粗饲料外，大量的花生壳并没有得到充分的利用，而是作为农业废料被烧掉或白白扔掉，造成资源浪费和环境污染。花生壳中主要成分为综纤维素和木质素，占80%以上。可做为低聚木糖的生产原料。低聚木糖具有促进肠道内双歧杆菌增殖、提高免疫力、抗肿瘤、降低血压、血糖、血清胆固醇等有益人们身体健康的功能性质。在环境问题日益凸显的今天，寻找花生壳新的利用途径尤为重要，具有十分重要的经济和社会意义。
发明内容
本发明的目的正是针对花生壳的开发利用而提供一种花生壳低聚木糖的制备方法。
本发明的目的可通过下述技术措施来实现：
本发明的花生壳低聚木糖的制备方法是通过下述步骤来实现的：
a、挑选无发霉的花生壳，用清水洗涤去除表面污垢，沥干水后自然晾干，粉碎后过40目筛；
b、取过筛后所得到的物料40~60 g加入到7%氢氧化钠溶液700~900mL中置于水浴锅中加热至75~85℃，加以超声辅助；水浴结束后，将其置于离心机中在3000r/min条件下离心10min，取上清液，残渣用蒸馏水反复洗涤至中性，洗液并入上清液中，调节PH值至pH7~8，蒸发浓缩至浓缩度为10%；再加入三倍体积的无水乙醇，静置24 h，离心弃去上清液，沉淀于30℃下烘干，碾成粉末状；
c、将b步骤制得的粉末按固液比1:50的量加入到中蒸馏水溶解，调节pH值至pH5，作为酶解底物，加入2%~4%的木聚糖酶，震荡使其完全溶解，放入水浴锅中在40~50℃的条件下加热7~9h；反应结束后，在沸水中灭酶8~13 min，然后将其置于离心机中在3000r/min条件下离心10min，取上清液；
d将酶解液制得的粗低聚木糖液过SephadexG-25凝胶柱，上样量1.0mL，用0.1mol/LNaCl溶液洗脱，洗脱速度为5mL/10min，自动部分收集器（BSZ-160自动部份收集器，上海青浦沪西仪器厂）收集，每管收集5mL，DNS法对洗脱液进行跟踪测试，收集洗脱峰值处的低聚木糖液，再将各组分的洗脱液进行真空浓缩至适当体积，蒸馏水透析过夜，冷冻干燥，最后制得经过纯化的样品。
本发明的有益效果如下：花生壳价格低廉，且花生产地就地取材，节省运费。加入超声辅助，降低了碱液浓度、处理温度和处理时间，从而降低碱液对设备的腐蚀，节约能源。酶法处理后，产品主要为木二糖和木三糖，有效控制了产品纯度。
具体实施方式
为了更好的理解本发明，下面结合实施例进一步阐明本发明的内容，但本发明的内容不局限于下面的实施例。
实施例1
将处理、粉碎后过40目筛的花生壳粉40g，加入7%氢氧化钠溶液300mL中，置于水浴锅中于80℃加热，加以120w超声辅助；水浴80min，之后将样品于3000r/min离心10min，取上清液，残渣用蒸馏水反复洗涤至中性，洗液并入上清液，中和至pH7~8，旋转蒸发浓缩至浓缩度为10%，再加入三倍体积的无水乙醇，静置24 h，离心弃去上清液，沉淀于30℃下烘干，碾成粉末状22.8g；将上步骤制得的木聚糖粉末加入1000mL蒸馏水溶解，调至pH5，加入3%木聚糖酶，震荡使其完全溶解，放入水浴锅中45℃加热8h后，将试管放入沸水中10 min灭酶，然后3000 r/min离心10 min取上清液；将酶解液过SephadexG-25凝胶柱，上样量每次1.0mL，用0.1mol/LNaCl溶液洗脱，洗脱速度为5mL/10min，自动部分收集器收集，每管收集5mL，DNS法对洗脱液进行跟踪测试，收集洗脱峰值处的低聚木糖液，再将各组分的洗脱液进行真空浓缩至适当体积，蒸馏水透析过夜，冷冻干燥，最后制得经过纯化的样品11.25g。
实施例2
将处理、粉碎后过40目筛的花生壳粉50g，加入7%氢氧化钠溶液800mL中，置于水浴锅中于80℃加热，加以120w超声辅助；水浴80min，之后将样品于3000r/min离心10min，取上清液，残渣用蒸馏水反复洗涤至中性，洗液并入上清液，中和至pH7~8，旋转蒸发浓缩至浓缩度为10%，再加入三倍体积的无水乙醇，静置24 h，离心弃去上清液，沉淀于30℃下烘干，碾成粉末状28.5g；将上步骤制得的木聚糖粉末加入1000mL蒸馏水溶解，调至pH5，加入3%木聚糖酶，震荡使其完全溶解，放入水浴锅中45℃加热8h后，将试管放入沸水中10 min灭酶，然后3000 r/min离心10 min取上清液；将酶解液过SephadexG-25凝胶柱，上样量每次1.0mL，用0.1mol/LNaCl溶液洗脱，洗脱速度为5mL/10min，自动部分收集器收集，每管收集5mL，DNS法对洗脱液进行跟踪测试，收集洗脱峰值处的低聚木糖液，再将各组分的洗脱液进行真空浓缩至适当体积，蒸馏水透析过夜，冷冻干燥，最后制得经过纯化的样品14.4g。
实施例3
将处理、粉碎后过40目筛的花生壳粉60g，加入7%氢氧化钠溶液1000mL中，置于水浴锅中于80℃加热，加以120w超声辅助；水浴80min，之后将样品于3000r/min离心10min，取上清液，残渣用蒸馏水反复洗涤至中性，洗液并入上清液，中和至pH7~8，旋转蒸发浓缩至浓缩度为10%，再加入三倍体积的无水乙醇，静置24 h，离心弃去上清液，沉淀于30℃下烘干，碾成粉末状34g；将上步骤制得的木聚糖粉末加入1000mL蒸馏水溶解，调至pH5，加入3%木聚糖酶，震荡使其完全溶解，放入水浴锅中45℃加热8h后，将试管放入沸水中10 min灭酶，然后3000 r/min离心10 min取上清液；将酶解液过SephadexG-25凝胶柱，上样量每次1.0mL，用0.1mol/LNaCl溶液洗脱，洗脱速度为5mL/10min，自动部分收集器收集，每管收集5mL，DNS法对洗脱液进行跟踪测试，收集洗脱峰值处的低聚木糖液，再将各组分的洗脱液进行真空浓缩至适当体积，蒸馏水透析过夜，冷冻干燥，最后制得经过纯化的样品17.3g。
Claims (1)
1.一种花生壳低聚木糖的制备方法，其特征在于：该制备方法是通过下述步骤来实现的：
a、挑选无发霉的花生壳，清洗、晾干后，粉碎后过40目筛；
b、取过筛后所得到的物料40~60 g加入到7%氢氧化钠溶液700~900mL中置于水浴锅中加热至75~85℃，加以超声辅助；水浴结束后，将其置于离心机中在3000r/min条件下离心10min，取上清液，残渣用蒸馏水反复洗涤至中性，洗液并入上清液中，调节PH值至pH7~8，蒸发浓缩至浓缩度为10%；再加入三倍体积的无水乙醇，静置24 h，离心弃去上清液，沉淀于30℃下烘干，碾成粉末状；
c、将b步骤制得的粉末按固液比1:50的量加入到蒸馏水溶解，调节pH值至pH5，作为酶解底物，加入2%~4%的木聚糖酶，震荡使其完全溶解，放入水浴锅中在40~50℃的条件下加热7~9h；反应结束后，在沸水中灭酶8~13 min，然后将其置于离心机中在3000r/min条件下离心10min，取上清液；
d、将酶解液制得的粗低聚木糖液过SephadexG-25凝胶柱，上样量1.0mL，用0.1mol/LNaCl溶液洗脱，洗脱速度为5mL/10min，自动部分收集器收集，每管收集5mL，DNS法对洗脱液进行跟踪测试，收集洗脱峰值处的低聚木糖液，再将各组分的洗脱液进行真空浓缩至适当体积，蒸馏水透析过夜，冷冻干燥，最后制得经过纯化的样品。
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