CN102260286A - 一种分离纯化粗产品L-α-甘油磷酸胆碱的方法 - Google Patents

一种分离纯化粗产品L-α-甘油磷酸胆碱的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN102260286A
CN102260286A CN201110141032XA CN201110141032A CN102260286A CN 102260286 A CN102260286 A CN 102260286A CN 201110141032X A CN201110141032X A CN 201110141032XA CN 201110141032 A CN201110141032 A CN 201110141032A CN 102260286 A CN102260286 A CN 102260286A
Authority
CN
China
Prior art keywords
glycerophosphorylcholine
thick
purification
separation
aluminium sesquioxide
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201110141032XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN102260286B (zh
Inventor
张洪斌
赵艳艳
胡雪芹
曹明成
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hefei University of Technology
Original Assignee
Hefei University of Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hefei University of Technology filed Critical Hefei University of Technology
Priority to CN201110141032.XA priority Critical patent/CN102260286B/zh
Publication of CN102260286A publication Critical patent/CN102260286A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102260286B publication Critical patent/CN102260286B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Abstract

本发明公开了一种分离纯化粗产品L-α-甘油磷酸胆碱的方法,首先将粗产品L-α-甘油磷酸胆碱加入无水乙醇中,于50℃搅拌溶解,然后加入活化碱性三氧化二铝,搅拌脱色2小时,离心分离后除去下层三氧化二铝固相,对上层溶液相进行干燥浓缩,直到溶液相成为粘稠状油状物为止,然后将浓缩后的溶液相经过硅胶层析柱,收集含有L-α-甘油磷酸胆碱产品的洗脱液,将收集到的洗脱液蒸发浓缩除去溶剂,真空干燥即得提纯产物。本发明方法产物纯度可达99.5%以上,所用三氧化二铝和无水乙醇可以再生重复利用,成本低、较适合大规模工业化生产。

Description

一种分离纯化粗产品L- α -甘油磷酸胆碱的方法
一、技术领域
[0001] 本发明涉及一种分离纯化粗产品L-α -甘油磷酸胆碱的方法。
二、背景技术
[0002] L- α -甘油磷酸胆碱(L- α -GPC)是体内天然存在的水溶性磷脂代谢产物,它能够穿过血脑屏障,是乙酰胆碱和磷酸卵磷脂合成的胆碱源。L- α -GPC属于胆碱酯酶抑制剂,能够有效的预防和治疗脑缺血性中风、轻至中度阿尔茨海默氏症导致的记忆力下降和认知功能障碍,轻至中度多发性脑梗死型痴呆,改善年轻患者的记忆力和提高注意力,改善衰老患者的脑健康状况,是保肝良药和治疗老年痴呆的处方药。
[0003] 对粗产品L- α -甘油磷酸胆碱进行分离纯化,使其达到药用级别,能够使用于临床和制剂研究,可以提高我国医疗水平,并有效的降低由于进口 L-α-甘油磷酸胆碱药物制剂所导致的药价偏高。
[0004] L-α -GPC分子式为C8H2tlNO6P,分子量为257. 22,可与水混溶,能溶于甲醇,乙醇,不溶于氯仿、醚、油类,在紫外可见光下无特征吸收。L-α -GPC的结构式如下:
[0005]
Figure CN102260286AD00031
[0006] 实验室制备的粗产品L- α -甘油磷酸胆碱颜色为深棕色,纯净的L- α -甘油磷酸胆碱应为无色透明。粗产品L-α-甘油磷酸胆碱达不到药用级别,需要经过分离纯化后,才能进行制剂研究和临床应用。
[0007] CN 102041281A使用活性炭脱色和离子交换树脂层析的方法对L- α -甘油磷酸胆碱进行分离纯化,能够得到纯度达98. 8%的产品,纯度不高,不能直接进行制剂和临床研
[0008] W0/2007/145476使用的分离纯化L- α -甘油磷酸胆碱的方法是:将L- α -甘油磷酸胆碱在乙醇溶液中结晶)后,用离子交换树脂进行分离纯化;EP 0486100 Al所使用的分离纯化L-α -甘油磷酸胆碱的方法是:α -GPC首先通过阳离子交换树脂层析后,然后在乙醇溶液里面结晶,从而达到分离纯化的目的。以上两种分离纯化方法都对L- α -甘油磷酸胆碱进行了结晶,这对L-α -甘油磷酸胆碱粗产品的纯度要求较高,其分离提纯较为复杂, 成本较高。
三、发明内容
[0009] 本发明旨在提供一种提纯率高、能耗低、所用分离纯化材料可以再生重复利用、成本低、适合大规模工业化生产的分离纯化粗产品L-α -甘油磷酸胆碱的方法。[0010] 本发明解决技术问题采用如下技术方案:
[0011] 本发明分离纯化粗产品L-α -甘油磷酸胆碱的方法的特点在于:利用三氧化二铝脱色法和硅胶柱层析法相结合的工艺对粗产品L- α -甘油磷酸胆碱进行分离纯化。
[0012] 本发明分离纯化粗产品L-α -甘油磷酸胆碱的方法的特点在于按以下步骤操作:
[0013] 将粗产品L-α -甘油磷酸胆碱加入无水乙醇中,于50°C搅拌溶解,然后加入活化碱性三氧化二铝,搅拌脱色2小时,离心分离后除去下层三氧化二铝固相,对上层溶液相进行干燥浓缩,直到溶液相成为粘稠状油状物为止,然后将浓缩后的溶液相经过硅胶层析柱, 收集含有L-α -甘油磷酸胆碱产品的洗脱液,将收集到的洗脱液蒸发浓缩除去溶剂,真空干燥即得提纯产物。
[0014] 本发明分离纯化粗产品L-α -甘油磷酸胆碱的方法的特点也在于:所述L-α -甘油磷酸胆碱与活化碱性三氧化二铝的质量比为1 : (5-10);所述L-α-甘油磷酸胆碱与硅胶层析柱中装填的活化硅胶粉的质量比为1 : (40-50)。
[0015] 本发明分离纯化粗产品L-α -甘油磷酸胆碱的方法的特点也在于:用活化碱性三氧化二铝脱色时所用试剂为无水乙醇;硅胶柱层析时所用洗脱剂为混合溶剂,所述混合溶剂中甲醇、乙醇和氯仿的体积比为50 : 35 : 15。
[0016] 碱性三氧化二铝和硅胶粉的质量对分离纯化效果影响很大,要求其颗粒细致、大小均勻,亦即有较大的表面积和适当的吸附活性,否则不能与样品组分、样品溶剂、展开剂发生化学反应,更不能与溶剂及展开剂发生溶解。通常三氧化二铝的吸附能力与其自身的含水量有关。含水越多,吸附活性越小,吸附能力越小。硅胶的吸附能力比氧化铝稍弱,其吸附活性也与含水量呈负性相关。本发明所选用的碱性三氧化二铝和硅胶粉均是100-200 目的。
[0017] 碱性三氧化二铝的预处理方法是:将碱性三氧化二铝平铺在容器中,于250°C的烘箱中烘烤4小时,得到活化碱性三氧化二铝;
[0018] 硅胶粉的预处理方法是:将硅胶粉平铺在容器中,于105°C的烘箱中烘烤30分钟, 得到活化硅胶粉。
[0019] 粗产品L- α -甘油磷酸胆碱颜色为深棕色,纯净的L- α -甘油磷酸胆碱应为无色透明。
[0020] 与现有技术相比本发明的有益效果:
[0021] 1、本发明首先使用活化碱性三氧化二铝对粗产品L-α-甘油磷酸胆碱脱色,然后用硅胶柱对脱色后的L- α -甘油磷酸胆碱层析,能够得到纯度达99. 5%以上的L- α -甘油磷酸胆碱产品,该纯化产品可以直接用于制剂研究。
[0022] 2、本发明脱色所使用的三氧化二铝可以再生利用,脱色时所使用的溶剂无水乙醇也可以经过冷凝回收利用,能耗低、成本低、适合大规模工业化生产。
四、附图说明
[0023] 图1是粗产品L- α -甘油磷酸胆碱的HPLC谱图。
[0024] 图2是经过活化碱性三氧化二铝脱色的L- α -甘油磷酸胆碱的HPLC谱图。
[0025] 图3是经过硅胶柱层析的终产品L- α -甘油磷酸胆碱的HPLC谱图。五、具体实施方式
[0026] 本发明所用粗产品L- α -甘油磷酸胆碱为通过常规方法制备得到或者市购,市购厂家为常熟富士莱医药化工有限公司、启东亚美化工有限公司和苏州工业园区亚科化学试剂有限公司。
[0027] 本发明非限定实施例如下。
[0028] 1、碱性三氧化二铝和硅胶粉的预处理:
[0029] 将碱性三氧化二铝(100-200目)平铺在容器中,于250°C的烘箱中烘烤4小时,得到活化碱性三氧化二铝;将硅胶粉(100-200目)平铺在容器中,于105°C的烘箱中烘烤30 分钟,得到活化硅胶粉。
[0030] 2、碱性三氧化二铝对粗产品L- α -甘油磷酸胆碱脱色:
[0031] 称取粗产品L-α-甘油磷酸胆碱(深棕色),加入无水乙醇,在50°C下搅拌溶解后,加入粗产品L- α -甘油磷酸胆碱质量5-10倍量的活化碱性三氧化二铝,搅拌脱色池,离心分离,除去下层三氧化二铝固相,将上层溶液相蒸发浓缩除去溶剂,得到塑黄色的脱色后的L-α-甘油磷酸胆碱。
[0032] 由图1可以看出,粗产品L-α -甘油磷酸胆碱含有杂质色谱峰,纯度很低;由图2 可以看出,经过碱性三氧化二铝脱色后,在L- α -甘油磷酸胆碱的液相色谱图中,杂质峰明显减少。经过该步骤脱色后,L-α -甘油磷酸胆碱的纯度达到85%以上。
[0033] 3、脱色后的L- α -甘油磷酸胆碱过硅胶层析柱
[0034] a、硅胶柱装柱:
[0035] 称取粗产品L- α -甘油磷酸胆碱质量的40-50倍的活化硅胶粉,用甲醇浸泡后,湿法装柱。装柱的效果直接影响层析分离效果,装好的硅胶柱应该是密实均勻无气泡。
[0036] b、上样
[0037] 向脱色后的L-α-甘油磷酸胆碱中添加无水乙醇,无水乙醇的添加量为使 L-α -甘油磷酸胆碱恰好全部溶解为止,然后将L-α -甘油磷酸胆碱的乙醇溶液缓缓加入层析柱项端的平面内。
[0038] C、洗脱
[0039] 缓慢向硅胶层析柱内加入洗脱剂进行洗脱,注意在洗脱的过程中,柱上端溶剂不能干,并对柱下端流出的洗脱液分段收集,检测,合并含有L- α -甘油磷酸胆碱的洗脱液, 蒸发浓缩除去溶剂,即可得到无色透明的的L-α-甘油磷酸胆碱产品。在洗脱过程中,所用洗脱液为复合溶剂,其体积比为:甲醇:乙醇:氯仿=50 : 35 : 15。
[0040] 通过由图3看出,经过硅胶柱层析后,L- α -甘油磷酸胆碱的液相色谱图为一个单峰,其纯度可以达到99. 5%以上。
[0041] 4、碱性三氧化二铝的再生
[0042] 市售的碱性三氧化二铝为纯白色粉末,对粗产品L-α -甘油磷酸胆碱脱色后碱性三氧化二铝变为深棕色。
[0043] 碱性三氧化二铝的再生步骤如下:将脱色过粗产品L- α -甘油磷酸胆碱的碱性三氧化二铝,用蒸馏水反复的洗剂后,置于马弗炉中,在400°C下煅烧池,即可实现再生。再生后的碱性三氧化二铝恢复为纯白色粉末。

Claims (4)

1. 一种分离纯化粗产品L-α -甘油磷酸胆碱的方法,其特征在于:利用三氧化二铝脱色法和硅胶柱层析法相结合的工艺对粗产品L- α -甘油磷酸胆碱进行分离纯化。
2.根据权利要求1所述的分离纯化粗产品L-α -甘油磷酸胆碱的方法,其特征在于按以下步骤操作:将粗产品L-α -甘油磷酸胆碱加入无水乙醇中,于50°C搅拌溶解,然后加入活化碱性三氧化二铝,搅拌脱色2小时,离心分离后除去下层三氧化二铝固相,对上层溶液相进行干燥浓缩,直到溶液相成为粘稠状油状物为止,然后将浓缩后的溶液相经过硅胶层析柱,收集含有L-α -甘油磷酸胆碱产品的洗脱液,将收集到的洗脱液蒸发浓缩除去溶剂,真空干燥即得提纯产物。
3.根据权利要求2所述的分离纯化粗产品L-α -甘油磷酸胆碱的方法,其特征在于: 所述L-α-甘油磷酸胆碱与活化碱性三氧化二铝的质量比为1 : (5-10);所述L-α-甘油磷酸胆碱与硅胶层析柱中装填的活化硅胶粉的质量比为1 : (40-50)。
4.根据权利要求2所述的分离纯化粗产品L-α -甘油磷酸胆碱的方法,其特征在于: 用活化碱性三氧化二铝脱色时所用试剂为无水乙醇;硅胶柱层析时所用洗脱剂为混合溶剂,所述混合溶剂中甲醇、乙醇和氯仿的体积比为50 : 35 : 15。
CN201110141032.XA 2011-05-27 2011-05-27 一种分离纯化粗产品L-α-甘油磷酸胆碱的方法 Active CN102260286B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201110141032.XA CN102260286B (zh) 2011-05-27 2011-05-27 一种分离纯化粗产品L-α-甘油磷酸胆碱的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201110141032.XA CN102260286B (zh) 2011-05-27 2011-05-27 一种分离纯化粗产品L-α-甘油磷酸胆碱的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102260286A true CN102260286A (zh) 2011-11-30
CN102260286B CN102260286B (zh) 2014-01-15

Family

ID=45007146

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201110141032.XA Active CN102260286B (zh) 2011-05-27 2011-05-27 一种分离纯化粗产品L-α-甘油磷酸胆碱的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102260286B (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105061494A (zh) * 2015-08-12 2015-11-18 芜湖福民生物药业有限公司 甘磷酸胆碱晶体的制备方法
CN105131029A (zh) * 2015-08-12 2015-12-09 芜湖福民生物药业有限公司 甘磷酸胆碱晶体的制备方法
CN108997413A (zh) * 2018-07-19 2018-12-14 芜湖福民生物药业股份有限公司 甘油磷脂酰胆碱的制备方法
CN108997411A (zh) * 2018-07-19 2018-12-14 芜湖福民生物药业股份有限公司 甘油磷脂酰胆碱的纯化方法
CN106459107B (zh) * 2014-06-10 2019-09-27 凯米股份公司 用于纯化L-α-甘油磷酰胆碱的工艺

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0486100A1 (en) * 1990-11-15 1992-05-20 MAGIS FARMACEUTICI S.p.A. Process for preparing alpha-glycerophosphorylcholine
CN101544667A (zh) * 2008-03-27 2009-09-30 南京莱尔生物化工有限公司 一种L-α-甘油磷酸胆碱的合成方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0486100A1 (en) * 1990-11-15 1992-05-20 MAGIS FARMACEUTICI S.p.A. Process for preparing alpha-glycerophosphorylcholine
CN101544667A (zh) * 2008-03-27 2009-09-30 南京莱尔生物化工有限公司 一种L-α-甘油磷酸胆碱的合成方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
曹栋等: "三氧化二铝柱层析法分离大豆磷脂中磷脂酰胆碱的研究", 《中国油脂》, vol. 26, no. 6, 31 December 2001 (2001-12-31), pages 51 - 53 *
汪燕等: "柱层析法制备高纯磷脂酰胆碱", 《中国油脂》, vol. 32, no. 7, 31 December 2007 (2007-12-31), pages 60 - 62 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106459107B (zh) * 2014-06-10 2019-09-27 凯米股份公司 用于纯化L-α-甘油磷酰胆碱的工艺
US10787469B2 (en) 2014-06-10 2020-09-29 Chemi S.P.A. Process for the purification of L-α-glycerophosphorylcholine
CN105061494A (zh) * 2015-08-12 2015-11-18 芜湖福民生物药业有限公司 甘磷酸胆碱晶体的制备方法
CN105131029A (zh) * 2015-08-12 2015-12-09 芜湖福民生物药业有限公司 甘磷酸胆碱晶体的制备方法
CN108997413A (zh) * 2018-07-19 2018-12-14 芜湖福民生物药业股份有限公司 甘油磷脂酰胆碱的制备方法
CN108997411A (zh) * 2018-07-19 2018-12-14 芜湖福民生物药业股份有限公司 甘油磷脂酰胆碱的纯化方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN102260286B (zh) 2014-01-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102260286B (zh) 一种分离纯化粗产品L-α-甘油磷酸胆碱的方法
CN102093410B (zh) 一种用硅胶柱层析法分离纯化甘油磷酸胆碱的方法
CN102775523B (zh) 一种制备高纯度低分子肝素钠的工艺
CN106478664B (zh) 一种发酵液中提取纯化他克莫司的方法
CN101891781A (zh) 一种制备高纯度栀子苷的方法
CN101343297B (zh) 一种利用活性炭提取纯化栀子苷的方法
CN102010454B (zh) 一种胞磷胆碱钠化合物及其新方法
CN102875450A (zh) 一种从桑叶中提取制备1-脱氧野尻霉素的工艺方法
CN101851221B (zh) 一种从落叶松中制备二氢槲皮素的方法
CN101768163B (zh) 阳离子交换树脂分离纯化氯化两面针碱的方法
CN106226426A (zh) 一种高效液相色谱拆分卡格列净五元环杂质对映体的方法
CN101805391B (zh) 一种供注射用丹参酮ⅱa磺酸钠的制备方法
CN102060693A (zh) 一种富集纯化升麻中阿魏酸的方法
CN102093328B (zh) 一种富集纯化松树皮中原花青素的方法
CN104311616A (zh) 一种从秦皮中提取高纯度秦皮甲素和秦皮苷的方法
CN103254226B (zh) 一种固定床吸附法分离纯化卵磷脂的方法
CN108218757A (zh) 对2-(4-丙基吡咯烷-2-酮)-丁酰胺非对映异构体的拆分方法
CN1321123C (zh) 一种高纯度蛋黄脑磷脂的制备方法
CN101544575B (zh) 天然4-羟基-异亮氨酸的制备方法
CN106117191B (zh) 一种高效分离提纯葛根素的方法
CN104788509A (zh) 一种从脱脂麦胚中提取制备高纯度棉子糖的工艺
CN104043393B (zh) 用于分离银杏叶聚戊烯醇的改性介孔材料及其制备方法
CN103467428B (zh) 一种柚皮素的制备方法
CN102633846A (zh) 一种林可霉素纯化方法
CN101747402B (zh) 一种富集纯化费菜中熊果酸的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
C06 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C10 Entry into substantive examination
GR01 Patent grant
C14 Grant of patent or utility model