CN102144596A - 圆斑星鲽雌鱼与条斑星鲽雄鱼杂交育种育苗方法 - Google Patents

圆斑星鲽雌鱼与条斑星鲽雄鱼杂交育种育苗方法 Download PDF

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Abstract

一种圆斑星鲽雌鱼与条斑星鲽雄鱼杂交育种育苗方法,包括亲本选择,亲鱼培育和生殖调控,人工受精和孵化,仔稚鱼和幼鱼培育;母本选用3+龄圆斑星鲽,父本为2+龄条斑星鲽;通过控温、控光和营养强化,促进雌雄亲鱼性成熟同步。人工受精,受精率达到50%;孵化水温(10±0.5)℃,受精卵160h后孵出仔鱼,孵化率50%以上;饲料系列为L型轮虫+小球藻→卤虫无节幼体→配合饲料。仔鱼前期小水体(1-35日龄,水体3m3)培育,水温(10±0.5)℃;3d后,每2d升高0.5℃,至(15±0.5)℃后则维持不变;后期培育水体30m3。经80d培育,从仔鱼培育到平均30mm幼鱼的成活率为20%。本发明可培育新品种和实现规模化苗种繁育。

Description

圆斑星鲽雌鱼与条斑星鲽雄鱼杂交育种育苗方法
技术领域:
[0001] 本发明属于水产养殖海水鱼类苗种繁育,具体的说是一种选用圆斑星鲽雌鱼X 条斑星鲽雄鱼人工杂交培育养殖新品种和繁育苗种的方法。
背景技术:
[0002] 圆斑星鲽(Verasper variegates Τ. &S.)主要分布于我国黄海、渤海、东海以及 日本,朝鲜等海域,产量不多,为一种冷温型大型底栖鱼类,多生活在近岸水域或海湾内,不 做远距离洄游,是渔业资源增殖和人工养殖的优良品种。条斑星鲽(Verasper moseri)为 冷水性底栖大型鲽类,主要分布于日本茨城县以北的太平洋沿岸和若狭湾以北的日本海沿 岸,我国黄海和渤海以前也有分布,现在已多年未见渔获。星鲽外观漂亮、形体较大,肉质细 嫩鲜美,鳍边胶质厚而有弹性,富含多种维生素、微量元素,营养丰富,易于烹饪,深受消费 者喜爱,市场开发潜力巨大。目前,我国星鲽的自然资源极其稀少,已形不成渔获,因此,星 鲽人工繁育和养殖技术研究已引起广大渔业工作者的普遍重视。在国家“863”计划项目资 助下,黄海水产研究所已先后于2007年至2010年在山东省莱州明波水产有限公司、山东 省海阳市黄海水产有限公司和青岛市忠海水产有限公司实验完成了圆斑星鲽及条斑星鲽 人工繁育技术的突破,规模化繁育苗种达到百万尾量级。在海水鲆鲽鱼类杂交方面,目前国 内仅报道了褐牙鲆(早)X石鲽(ί )杂交、大菱鲆(早)X褐牙鲆(ί )杂交、褐牙鲆 (早)X犬齿牙鲆(ί )杂交、圆斑星鲽(早)X石鲽($ )杂交、漠斑牙鲆(早)X白点 牙鲆(έ )杂交等少数几种鲆鲽类的杂交。有关圆斑星鲽雌鱼X条斑星鲽雄鱼杂交尚未 见有报道。
发明内容:
[0003] 本发明拟解决的技术问题是:通过调控养殖环境水温和光照,模拟亲鱼性腺在自 然环境中的发育规律,人为刺激控制鱼类中枢神经系统和内分泌系统,促进圆斑星鲽雌鱼 和条斑星鲽雄鱼性腺同步发育;通过人工杂交育种的方法,使圆斑星鲽雌鱼X条斑星鲽雄 鱼杂交,培育新的优质苗种;同时探索出新苗种繁育的技术工艺。
[0004] 本发明按以下技术方案实现:主要内容包括,一、亲本选择;二、亲鱼培育和生殖 调控;三、人工受精和孵化;四、仔稚鱼和幼鱼的培育。
[0005] 一、亲本的选择:母本选用圆斑星鲽雌鱼,父本选用条斑星鲽雄鱼。
[0006] 二、亲鱼培育和生殖调控:包括:亲鱼的优选;亲鱼的饲料、饲喂及营养强化;水温 和光照综合生殖调控;培育条件及日常管理。
[0007] 1、亲鱼优选:
[0008] 选择形态、体色正常、个体大、健康无伤3龄以上的圆斑星鲽雌鱼亲鱼,全长 达400-550mm,体重1300-3000g ;条斑星鲽雄鱼达2龄以上,全长四0-450讓,体重达 600-1500g。
[0009] 2、亲鱼的饲料、饲喂及营养强化培育:[0010] 亲鱼的饲料:饵料以小黄花鱼、小虾、牡蛎肉等为主。
[0011] 亲鱼的饲喂:日投喂2次,日投喂量为鱼体体重的1-3%。
[0012] 营养强化培育:自控温控光开始,在每公斤饵料中添加1_3%。维生素C、0. 2-0. 5%o 维生素E、l%。复合维生素,1.5% DHAU.5%的卵磷脂。
[0013] 3、水温和光照综合生殖调控:
[0014] 水温调控:产卵期到来前3个月,一般在11月中上旬,自然水温下降到16-17°C左 右时,将优选的亲鱼分批放入30m3亲鱼培育池内,雌雄数量比例为早:: 1〜1.5; 饲养密度3kg/m3。当自然水温16°C时,此时开始控温,控温方法:初始水温16°C,每5d水温 缓慢降低1°C,降至6°C时,此后维持6°C水温IOd ;然后水温从6°C开始回升,每5d水温缓 慢升高1°C,直至升高至9-10°C时,此后水温维持不变,定期观察亲鱼性腺发育情况;水温 靠地下井水和自然海水混合调节控制,或用锅炉加温调配水温。
[0015] 光照调控:自亲鱼放入培育池始,亲鱼培育池用黑色遮光帘(留有窗口,人工控光 前透射自然光用)遮光。控光方法:水温16°C时开始控光,使用普通白炽灯提供照明,调节 水面光照强度150-2801UX,光照节律时间变化从他延长至16h。初始光照时间为他;当水 温降至6°C时,开始延长光照时间,每5d增加光照时间lh(12min. /d),直至光照时间达到 16h,此后光照时间维持不变。定时器精确控制每天的光照时间。
[0016] 4、培育条件和日常管理:
[0017] 亲鱼培育期间,连续充气、流水培育,换水率500%,定时清池换水;水质条件: DO 彡 6. Omg/L, pH 7. 6-8. 5,盐度 29-33。
[0018] 日常管理:投喂过程中及时清除残饵、排污。每日观察亲鱼情况;做好记录。
[0019] 三、人工受精和孵化:包括:1、挤卵、采精;2、人工受精;3、洗卵;4、受精卵孵化。
[0020] 经过80d控温、控光和营养强化培育综合生殖调控后,圆斑星鲽雌鱼亲鱼性腺发 育至四期至五期,外观可观察到雌鱼腹部膨胀饱满。同时,条斑星鲽雄鱼性腺也基本发育成 熟。每天定时检查亲鱼,人工挤压圆斑星鲽亲鱼雌鱼腹部,一般能够获得成熟的卵子,此时 便可从条斑星鲽雄鱼体内采集精液,进行人工干法受精,人工受精后可获得优质受精卵。
[0021] 1、挤卵、采精:先捞出圆斑星鲽亲鱼雌鱼,用于轻轻挤压腹部,挤卵流入洗脸盆或 大烧杯,等待受精;捞出条斑星鲽雄鱼边挤压边用吸管采集精液滴入另一空烧杯;整个挤 卵过程要求在15min.内完成、采精过程要求在IOmin内完成。
[0022] 2、人工受精:采用干法受精。向盛精液中的烧杯中加50ml海水,搅动激活精子, 把被激活精于迅速倒入盛卵容器,快速搅动5min.,然后,向盛卵容器加入2000ml水温为 (10士0. 的清新海水,用玻璃棒搅动lmin.,整个受精过程要求在IOmin.内完成。
[0023] 3、洗卵:受精完成15min.后,把受精卵倒入筛绢缝制专用洗卵的手抄网,用清新 海水(10士0. 50C )洗卵5遍,把洗好的受精卵倒入预盛有500ml盐度35海水的2000ml量 筒中,然后加盐度35的海水至2000ml刻度,利用沉降法通过量筒分离受精卵与未受精卵, 浮卵基本为受精卵,估算受精率。
[0024] 4、受精卵孵化:圆斑星鲽雌鱼X条斑星鲽雄鱼受精卵在盐度31-33海水中为悬浮 性或半沉性、无油球卵,透明、圆球形、卵黄均勻分布,卵径(1. 75 士 0. 08) mm (η = 30),350粒 /ml。孵化网箱为上部圆柱形,下部漏手形,底部充气,布卵密变为35万粒/m3水体;在水温 (10 士0. 5) °C,盐度 31-32,DO ≥ 6mg/L,pH7. 6-8. 5,光照 300_5001ux 条件下孵化,受精卵经160h脱膜孵出。
[0025]估算孵化率:孵化率(% ) = [ (N-n) /N] X 100%
[0026] η-孵化完毕后剩余的沉卵毫升数;N-孵化时放入的卵总毫升数。
[0027] 修正孵化率:孵化期间,每天取100粒卵镜检,通过观察胚胎发育比例情况,结合 (N-n)/N修正孵化率。
[0028] 四、仔稚鱼和幼鱼的培育
[0029] 初孵仔鱼布池密度为1万尾/m3,前3d静水培育,培育池初始水深500-600mm,从 第4d开始每天加水100mm,至800-900mm,第6日龄时开始换水,换水率由20%逐渐增加到 100%;1-19日龄微充气;第20日龄时改为长流水,并加装环流板,在也中形成环流,充气量 增大。仔鱼孵化后第7天开始投喂L型褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis),上下午各 一次,投喂密度IOind./ml,同时投喂小球藻(Chlorella sp.)密度1. 5X 106cells/ml,每 隔2d清底一次;12日龄开始增加投喂卤虫无节幼体(Artemia salina),卤虫密度0. 5ind. / ml,轮虫密度保持8ind. /ml,日投喂2次;19日龄停止投喂轮虫和小球藻,增加卤虫投喂量, 密度lind./ml ;31日龄诱导投喂人工配合饲料;46日龄停止投喂卤虫。饵料系列:L型褶 皱臂尾轮虫+小球藻一卤虫无节幼体一人工配合饲料,活饵料每次投喂前1¾进行营养强 化。
[0030] 营养强化:强化剂(升索牌,山东省海洋水产研究所生产)主要成分为DHA、EPA、 卵磷脂及复合维生素,用量为轮虫10-20g/亿ind.,卤虫SO-IOOg/亿ind.,强化时间12h。 仔稚鱼期前期培育使用3m3的圆形玻璃钢水槽小水体培育(培育时间35d),直至仔鱼左眼 开始向右侧翻转,进入变态期、个别稚鱼开始伏底时,分池、分苗并移入较大的水池(30m3)内, 进行稚鱼后期和幼鱼前期大水体二级培育(1000-1200尾/m2),然后转入幼鱼期正常培育。
[0031]整个培育过程中,育苗用水盐度 31,DO 彡 6mg/L,ρΗ7· 6-8. 5,[ΝΗ4+_Ν] ( 0. 3mg/ L,光照300-5001ux ;初孵仔鱼1-3日龄培育水温为(10 士 0. 5)°C,第4日龄逐渐升 高(0.5°C/2d)至15士0.5°C,此后维持不变。培育期间,每天随机取样30尾,解剖镜 (NIK0N-MSZ800)镜检观察记录仔稚鱼形态特征,测量卵黄囊长短径、仔鱼全长等数量性状, 记录仔鱼摄食率和存活率、仔稚幼鱼发育特征及生物学特性。
[0032] 本发明与已有技术对比具有的有益效果:
[0033] 本发明利用了条斑星鲽雄鱼比圆斑星鲽雄鱼个体大2-3倍的生长优势,且亲缘关 系较近的特点,进行了杂交培育新品种的探索。
[0034] 本发明根据圆斑星鲽雌鱼亲鱼和条斑星鲽雄鱼亲鱼的性腺发育规律,经前期的强 化培育,采用温度+光照+营养强化的综合生殖调控方法,促使诱导圆斑星鲽雌鱼和条斑星 鲽雄鱼亲鱼最终性腺同步发育成熟。
[0035] 本发明使圆斑星鲽雌鱼亲鱼成熟率高达70%,雌雄亲鱼成熟基本同步,通过干法 人工受精,受精率平均达到50%,孵化率平均达到50%以上。
[0036] 使用本发明方法的条件培育,从仔稚鱼培育到平均30mm幼鱼的成活率为20%,可 实现规模化苗种繁育。
附图说明:
[0037] 图1 :70日龄圆斑星鲽雌鱼X条斑星鲽雄鱼杂交Fl具体实施方式:
[0038] 圆斑星鲽的雄鱼个体较小,雌雄差异较大,而条斑星鲽雄鱼个体较大,两者同属于 一属,亲缘关系较近,杂交后代有可能遗传各自的优良基因、出现优势互补。在国家“863” 计划(No. 2006AA10A414)和(No. 2010AA10A402)项目资助下,2009-2010年我们对圆斑星鲽 雌鱼X条斑星鲽雄鱼杂交进行了试验研究,探索培育新的优质养殖品种。两者尽管同属一 属,但亦各自有各自的生物学特性。如何使二者发育同步,是首先遇到的问题;人工受精、受 精卵孵化、仔稚鱼培育、规模化苗种繁育等也是新的问题。
[0039] 下面结合实施例对本发明内容进行详细叙述,本研究于2009-2010年在山东海阳 基地进行,具体实施过程如下:
[0040] 一、确定亲本:母本选用圆斑星鲽雌鱼,父本选用条斑星鲽雄鱼。
[0041] 二、亲鱼培育:包捂亲鱼的优选、饵料及营养强化、水温和光照综合生殖调控及其 它日常管理等。
[0042] 1、亲鱼的优选:
[0043] 实验选用圆斑星鲽雌鱼3龄以上亲鱼30尾,条斑星鲽雄鱼2龄以上亲鱼50尾 (30早:50 $ ),圆斑星鲽雌鱼全长达400-550mm、平均470mm,体重1300-3000g,平均体重 2105g ;条斑星鲽雄鱼全长^0_450mm、平均362mm,体重600_1500g、平均950g。亲鱼体形、 体色正常,健康无损伤。亲鱼放入2个方形抹角培育池(5. 5X5. 5 = 30. 25m2,水深1. Om)
进行培育。
[0044] 2、亲鱼的饲料、饲喂及营养强化培育:
[0045] 亲鱼的饲料:饵料以小黄花鱼、小虾、牡蛎肉等为主。
[0046] 亲鱼的饲喂:日投喂2次,日投喂量为鱼体体重的1. 5%。
[0047] 营养强化:自控温控光开始,在每公斤饵料中添加1. 5%。维生素C、0. 3%。维生素Ε、 1%。复合维生素,1. 5% DHAU. 5%卵磷脂。
[0048] 3、水温和光照调控:
[0049] 水温调控:当自然水温16°C时,此时开始控温,控温方法:初始水温16°C,每5d水 温缓慢降低rc,降至6°C时,此后维持6°C水温IOd;然后水温从6°C开始回升,每5d水温 缓慢升高1°C,直至升高至9-10°C时,此后水温维持不变,定期观察亲鱼性腺发育情况;水 温靠地下井水和自然海水混合调节控制。
[0050] 光照调控:自亲鱼放入培育池始,亲鱼培育池就用黑色遮光帘(留有窗口,人工控 光前透射自然光用)遮光。控光方法:水温16°C时开始控光,使用普通白炽灯提供照明,调 节水面光照强度150-2801UX,光照节律时间变化从他延长至16h。初始光照时间为他;当 水温降至6°C时,开始延长光照时间,每5d增加光照时间lhaaiiin. /d),直至光照时间达到 16h,此后光照时间维持不变。定时器精确控制每天的光照时间。
[0051] 4、培育条件和日常管理:
[0052] 亲鱼培育期间,连续充气、流水培育,换水率500%,定时清池换水;培育用水为砂 滤自然海水和井水混合调配,水质条件:D0彡6. Omg/L, pH 8. 2,盐度31。
[0053] 日常管理:投喂过程中及时清除残饵、排污。每日观察亲鱼情况;做好记录。
[0054] 三、人工受精和孵化
[0055] 经过80d控温、控光和营养强化培育综合生殖调控后,圆斑星鲽雌鱼亲鱼性腺发
7育至四期至五期,外观可观察到雌鱼腹部膨胀饱满。同时,条斑星鲽雄鱼也基本性腺成熟。 每天定时检查亲鱼,人工挤压圆斑星鲽亲鱼雌鱼腹部,一般能够获得成熟的卵子,此时便可 从条斑星鲽雄鱼体内采集精液,进行人工干法受精,人工受精后可获得优质受精卵。
[0056] 1、挤卵、采精:先捞出圆斑星鲽亲鱼雌鱼,用手轻轻挤压腹部,挤卵流入洗脸盆或 大烧杯,等待受精;捞出条斑星鲽雄鱼边挤压边用吸管采集精液滴入另一空烧杯;整个挤 卵过程在15min.内完成、采精过程在IOmin内完成。
[0057] 2、人工受精:采用干法受精。向盛精液中的烧杯中加入50ml海水,搅动激活精子, 把被激活精子迅速倒入盛卵容器,快速搅动5min.,然后,向盛卵容器加入2000ml水温为 10 士0. 5°C的清新海水,用玻璃棒搅动lmin.,整个受精过程在IOmin.内完成。
[0058] 3、洗卵:受精完成15min.后,把受精卵倒入筛绢缝制的专用洗卵的手抄网,用清 新海水10士0. 5°C洗卵5遍,把洗好的受精卵倒入预盛有500ml盐度35海水(预先调配好) 的2000ml量筒中,然后加海水至2000ml刻度,用量筒分离受精卵与未受精卵,浮卵基本为 受精卵,估算受精率。
[0059] 4、受精卵孵化:圆斑星鲽雌鱼X条斑星鲽雄鱼受精卵在盐度31海水中为悬浮性、 部分呈沉性、无油球卵,透明、圆球形、卵黄均勻分布,卵径1.75 士 0. 08mm (η = 30),350粒/ ml。孵化网箱为上部圆柱形,下部漏斗形,底部充气,布卵密度为35万粒/m3水体;在水温 10士0. 5°C,盐度31,DO彡6mg/L,pH8. 2,光照300-5001ux条件下孵化,受精卵经160h脱膜孵出。
[0060]估算孵化率:孵化率(% ) = [ (N-n) /N] X 100%
[0061] η-孵化完毕后剩余的沉卵毫升数;N-孵化时放入的卵总毫升数。
[0062] 修正孵化率:孵化期间,每天取100粒卵镜检,通过观察胚胎发育比例情况,结合 (N-n)/N修正孵化率。
[0063] 四、仔稚鱼和幼鱼培育
[0064] 初孵仔鱼全长4.82士0. 12mm,布池密度为1万尾/m3,前3d静水培育,培育池 初始水深500mm,从第4d开始每天加水100mm,至900mm,第6日龄时开始换水,换水率 由20%逐渐增加到100% ;1-19日龄微充气;第20日龄时改为长流水,并加装环流板,在 池中形成环流,充气连加大。仔鱼孵化后第7d开始投喂L型褶皱臂尾轮虫(Brachionus plicatilis),上下午各一次,投喂密度IOind./ml,同时投喂小球藻(Chlorella sp.) 密度1. 5X106cells/ml,每隔2d清底一次;12日龄开始增加投喂卤虫无节幼体 (Artemiasalina),卤虫密度0. 5ind. /ml,轮虫密度保持8ind. /ml,日投喂2次;19日龄停 止投喂轮虫和小球藻,增加卤虫投喂量,密度lind. /ml ;31日龄诱导投喂人工配合饲料;46 日龄停止投喂卤虫;50日龄稚鱼完成变态,左眼完全转至右侧,营底栖活动;70日龄(全长
3 士 3. 23) mm (η = 30))进入幼鱼期,幼鱼体被鳞片逐渐形成,有眼侧出现近圆形鳞片, 基部鳞棘约9枚,无眼侧为长扇形鳞片,各鳍条均发育完善,基部鳞棘1个,体态和生活习性 与成鱼无异,子一代Fl外形和生活习性酷似圆斑星鲽,见附图1。
[0065] 饵料系列:L型褶皱臂尾轮虫+小球藻一卤虫无节幼体一人工配合饲料,活饵料投 喂前1¾进行营养强化。营养强化:强化剂(升索牌,山东省海洋水产研究所生产)主要成 分为DHA、EPA、卵磷脂及复合维生素,用量为轮虫10-20g/亿ind.,卤虫80_100g/亿ind., 强化时间12h。仔稚鱼期前期培育使用3m3的圆形玻璃钢水槽小水体培育(培育时间35d),直至仔鱼左眼开始向右侧翻转,进入变态期、个别稚鱼开始伏底时,分池、分苗并移入较大 的水池(30m3)内,进行稚鱼后期和幼鱼前期大水体二级培育(1000-1200尾/m2),然后转入 幼鱼期正常培育。
[0066] 整个培育过程中,育苗用水盐度^_33,D0彡6mg/L,pH7. 6-8. 5,[NH4+_N]彡0. 3mg/ L,光照300-5001ux ;初孵仔鱼1-3日龄培育水温为(10士0.5) °C,第4日龄逐渐升 高(0.5°C/2d)至15士0.5°C,此后维持不变。培育期间,每天随机取样30尾,解剖镜 (NIK0N-MSZ800)镜检观察记录仔稚鱼形态特征,测量卵黄囊长短径、仔鱼全长等数量性状, 记录仔鱼摄食率和存活率、仔稚幼鱼发育特征及生物学特性。
[0067] 五、实验结果:
[0068] 圆斑星鲽雌鱼亲鱼成熟率高达70%,雌雄亲鱼成熟基本同步,可采卵期共持续 60d左右,共采卵15批次,共获得优质受精卵11800ml,受精率平均为50% ;获得初孵仔鱼 100万尾,孵化率平均为52%。经过80d培育,从初孵仔鱼(4. 82 士 0. 12) mm培育到30mm左 右,幼鱼的成活率为20% ;共培育出30mm左右的幼鱼20万尾,实现了规模化苗种紧育。

Claims (4)

1. 一种圆斑星鲽雌鱼与条斑星鲽雄鱼杂交育种育苗方法,其特征在于它的方法包括以 下步骤:一)、亲本选择;二)、亲鱼培育和生殖调控;三)、人工受精和孵化;四)仔稚鱼和幼 鱼的培育;一)、亲本选择:母本选用3龄以上圆斑星鲽雌鱼,父本选用2龄以上条斑星鲽雄鱼;二)、亲鱼培育和生殖调控;包括:亲鱼的优选;亲鱼的饲料、饲喂及营养强化;水温和光照综台生殖调控;培育条 件及日常管理;1)、亲鱼优选:选择形态、体色正常、个体大、健康无伤3龄以上的圆斑星鲽雌鱼亲鱼,全长 达400-550mm,体重1300-3000g ;条斑星鲽雄鱼达2龄以上,全长四0-450讓,体重达 600-1500g ;将优选的亲鱼分批放入30m3亲鱼培育池内,雌雄数量比例为早:$ = 1 : 1〜1. 5 ;饲 养密度:3kg/m3 ;2)、亲鱼的饲料、饲喂及营养强化培育:亲鱼的饲料:饵料以小黄花鱼、小虾、牡蛎肉为主;亲鱼的饲喂:日投喂2次,日投喂量为鱼体体重的1-3% ;营养强化培育:自控温控光开始,在每公斤饵料中添加1_3%。维生素C、0. 2-0. 5%。维生 素E、1%。复合维生素,1. 5%DHAU.5%的卵磷脂;3)、水温和光照综合生殖调控:水温调控:当自然水温降至16°C时,此时开始控温;控温方式:每5d水温缓慢降低 1°C,降至6°C时,此后维持6°C水温IOd ;然后水温从6°C开始回升,每5d缓慢升高1°C,直 至升高到9-10°C时,此后水温维持不变,定期观察亲鱼性腺发育情况;光照调控:自亲鱼放入培育池,水温16°C始,调节水面光照强度150-2801UX,初始光照 时间为他;当水温降至6 °C时,开始延长光照时间,每5d增加光照时间Ih,直至光照时间达 到16h,此后光照时间长度维持不变;定时器精确管理每天的光照时间;4)、培育条件和日常管理:日常管理:亲鱼培育期间,连续充气、流水培育,换水率500%,定时清池换水;水质条件=DO彡6. Omg/L, pH 7. 6-8. 5,盐度29-33 ;及时清除残饵、排污;三)、人工受精和孵化:包括:1、挤卵、采精;2、人工受精;3、洗卵;4、受精卵孵化;经过80d控温、控光和营养强化培育,圆斑星鲽雌鱼亲鱼性腺发育至四期至五期,外观可观察到雌鱼腹部膨胀饱满,同时,条斑星鲽雄鱼性腺也基本成熟;1)、挤卵、采精:先捞出圆斑星鲽亲鱼,用手轻轻挤压腹部,挤卵流入洗脸盆或大烧杯等 待受精;然后捞出条斑星鲽雄鱼边挤压边用吸管采集精液滴入另一空烧杯;整个挤卵过程 要求在15min.内完成、采精过程要求在lOmin.内完成;2)、人工受精:采用干法受精,向盛精液的烧杯中加50ml海水,搅动激活精子,把 被激活精子迅速倒入盛卵容器,快速搅动5min.,然后,向盛卵容器加入2000ml水温为 10 士 0. 5°C的清新海水,用玻璃棒搅动lmin.,整个受精过程要求在IOmin.内完成;3)、洗卵:受精完成15min.后,把受精卵倒入筛绢缝制专用洗卵的手抄网,用 10士0. 5°C的清新海水洗卵5遍,把洗好的受精卵倒入预盛有500ml盐度为35海水的2000ml量筒中,加盐度35的海水至2000ml,分离受精卵与未受精卵,计算受精率;4)、受精卵孵化:孵化网箱为上部圆柱形,下部漏斗形,底部充气;布卵密度为35万粒 /m3 水体,在水温 10士0. 5°C,盐度 31-33,DO ≥ 6mg/L,ρΗ7· 8-8. 5,光照 300_5001ux 孵化条 件下,受精卵经160h孵化,仔鱼脱膜孵出;四)、仔稚鱼和幼鱼的培育:初孵仔鱼布池密度为1万尾/m3水体,前3天静水培育,培育池初始水深500-600mm, 从第4d开始每天加水100mm,至800-900mm,第6日龄时开始换水,换水率由20%逐渐增加 到100% ;1-19日龄微充气;第20日龄时改为长流水,并加装环流板,在池中形成环流;充 气量增大;仔鱼孵出后第7d开始投喂L型褶皱臂尾轮虫,上下午各一次,投喂密度IOind. / ml,同时投喂小球藻,密度1.5X106CellS/ml,每隔2天清底一次;12日龄开始增加投喂卤 虫无节幼体,卤虫密度0. 5ind./ml,轮虫保持8ind./ml,日投喂2次;19日龄停止投喂轮 虫和小球藻,卤虫投喂增加,密度lind. /ml ;31日龄诱导投喂人工配合饲料;46日龄停止 投喂卤虫;仔鱼期前期培育使用3m3的圆形玻璃钢水槽小水体培育,仔鱼左眼开始向右侧 翻转,进入变态期、个别稚鱼开始伏底时,分池、分苗移入30m3水池内进行大水体二级培育, 1000-1200尾/m2,直至稚鱼完成变态、伏底,然后转入正常培育。
2.根据权利要求1所述的圆斑星鲽雌鱼与条斑星鲽雄鱼杂交育种育苗方法,其特征在 于所述投喂的L型褶皱臂尾轮虫和卤虫无节幼体在投喂前12h进行营养强化。
3.根据权利要求1所述的圆斑星鲽雌鱼与条斑星鲽雄鱼杂交育种育苗方法,其特征在 于所述整个培育过程中,育苗用水盐度四-33,DO≥6mg/L, pH7. 5-8. 5,[NH4+-N]≤0. 3mg/ L,光照 300-5001ux。
4.根据权利要求1所述的圆斑星鲽雌鱼与条斑星鲽雄鱼杂交育种育苗方法,期特征在 于所述初孵仔鱼1-3日龄培育水温为10 士 0.5°C,3d后,从第4日龄开始,每2d升高0.5°C, 最终至15 士 0. 5 °C.
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Assignee: Qingdao Hai Hui Aquatic Seed Co. Ltd.

Assignor: Inst of Huanghai Sea Marine Products, Chinese Academy of Aquatic Product Science

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Denomination of invention: Method for hybridizing female verasper variegatus and male verasper moseri for breeding and fry cultivating

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