CN101926887A - 治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法，该胶囊制剂的质量控制方法是由性状、鉴别、检查和含量测定组成，其中鉴别是对白英、白花蛇舌草、一点红、积雪草和一枝黄花的鉴别，含量测定是用高效液相色谱法和紫外可见分光光度法分别对制剂中绿原酸和总黄酮的含量测定。本发明所采用的质量控制方法科学合理，准确度高，重现性好，能全面有效地控制质量妇科炎症和子宫肌瘤的胶囊制剂的质量，确保该制剂的临床疗效。
Description
技术领域
本发明涉及一种治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法，属于中药技术领域。
背景技术
妇科炎症是指妇女生殖系统感染所引起的疾病。由于女性生殖器官的特殊性，妇科炎症为成年女性的常见、多发病，其临床表现也多种多样，临床常见的妇科炎症有阴道炎、宫颈炎、盆腔炎、子宫内膜炎等，病因复杂且常伴有多种严重并发症，往往经久不愈，对女性的生活和工作有很大影响，影响生活质量和夫妻生活，并会导致不孕、诱发肿瘤等，后患无穷。妇科炎症已成为困扰现代女性的一大疾病。子宫肌瘤是女性生殖器官中最常见的良性肿瘤，也是人体中常见的肿瘤之一。子宫肌瘤主要由子宫平滑肌细胞增生而形成。一般子宫肌瘤的主要症状有：月经不调、腹部肿块、压迫症状、疼痛、白带增多、不育、循环系统症状等。除了子宫肌瘤本身对广大女性造成很大身心伤害之外，临床实践证实，子宫肌瘤常常并发卵管卵巢病变，也极易和子宫体腺癌和子宫颈癌同时存在。虽然子宫肌瘤为良性肿瘤，大多数症状不明显，但如发现不及时，会危及身体多个器官，亦可造成不孕，因此早防早治是十分必要的。
目前对妇科炎症的治疗主要以外用药为主，如洗剂、栓剂、泡腾片、泡沫剂、凝胶剂等，该类制剂多是治标不治本，携带、使用均不方便，而且大多数妇科药品仍含有甲硝唑、克霉唑类抗生素，过多使用这类药品的直接后果就是使病菌产生耐药性，破坏阴道菌群间的制约关系，导致真菌生长旺盛，治疗周期不断延长，不断增加药品剂量，疾病得不到有效治疗，对于急性炎症，西医快，但在慢性期西医无能为力。目前西医治疗子宫肌瘤有两种方法：一是采用性激素药物以强行降低雌激素水平，缓解子宫肌瘤症状，但是过多使用激素类药物对人体不利，可能导自身平衡失调。二是对于较大瘤体，西医主张手术治疗，采用肌瘤摘除术或子宫切除术。手术治疗的优点是显效较快，但如果内分泌失调这一根本致病原因未能改变，子宫肌瘤复发的可能性很大，同时手术对病人带来很大的痛苦，影响器官的完整性及生育能力。中药对子宫肌瘤的治疗是从调理气血、化淤散结、补益冲任着手，通过全面调理女性各脏器功能，调整内分泌，改善微循环，清除体内淤积，从而达到消除子宫肌瘤的目的。具有安全性高、毒副作用小等优点，根治之后不易复发。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供一种治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法，包括性状、鉴别、检查和含量测定。所制定的质量控制方法能全面有效地控制胶囊制剂的质量，从而确保了胶囊制剂的临床疗效。
为了解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案：治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法，这种制剂这样制备：取白英300g、白花蛇舌草300g、地稔240g、地耳草100g、一点红200g、积雪草100g、一枝黄花100g、王瓜子100g、鬼针草100，加8倍量水煎煮3次，每次煎煮0.5小时，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度为1.25的浸膏，减压干燥，粉碎，过80目筛，加入淀粉适量，装入胶囊，每粒装0.4g，制成1000粒；质量控制方法由性状、鉴别、检查和含量测定组成，其中鉴别是对白英、白花蛇舌草、一点红、积雪草和一枝黄花的鉴别，含量测定是用高效液相色谱法和紫外-可见分光光度法分别对制剂中绿原酸和总黄酮的含量测定。
上述的治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法，具体是这样的：
性状：本品为硬胶囊，内容物为棕褐色颗粒及粉末，气微，味苦、微涩；
鉴别：以白英对照药材为对照、以羧甲基纤维素钠为黏合剂、以氯仿-甲醇-水的下层液为展开剂照薄层色谱法鉴别白英；以白花蛇舌草对照药材为对照、以羧甲基纤维素钠为黏合剂、以氯仿-乙醇-浓氨为展开剂照薄层色谱法鉴别白花蛇舌草；以一点红对照药材为对照、以羧甲基纤维素钠为黏合剂、以氯仿-丙酮-甲醇为展开剂照薄层色谱法鉴别一点红；以积雪草对照药材为对照、以羧甲基纤维素钠为黏合剂、以甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂照薄层色谱法鉴别积雪草；以一枝黄花对照药材为对照、以羧甲基纤维素钠为黏合剂、以环已烷-乙酸乙酯为展开剂照薄层色谱法鉴别一枝黄花；
检查：符合中国药典2005年版一部附录IL中胶囊剂项下的各项规定；含量测定：
一支黄花 以绿原酸对照品为对照，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为15∶85的乙腈-0.4％磷酸为流动相照高效液相色谱法测定胶囊制剂中绿原酸的含量；
总黄酮 以芦丁对照品为对照，以5％亚硝酸钠溶液、10％硝酸铝溶液及氢氧化钠试液为显色剂，照紫外-可见分光光度法测定胶囊制剂中总黄酮的含量。
前述的治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法，所述鉴别由以下项组成：
(1)白英鉴别：取胶囊内容物5g，加乙醇30ml，超声提取30分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，挥干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取白英对照药材1g，同法制成药材对照溶液；照薄层色谱法 试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为17∶2∶2的氯仿-甲醇-水的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)白花舌蛇草鉴别：取胶囊内容物5g，加乙醇30ml，浸渍30分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加无水乙醇5ml溶解，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取白花舌蛇草对照药材1g，加水50ml，加热回流1小时，放冷，滤液浓缩至近干，加60％的乙醇45ml，搅匀，滤过，滤液浓缩至约2ml，加硅藻土适量搅匀，干燥，加乙醇30ml同供试品法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为2∶2∶0.1的氯仿-乙醇-浓氨为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，至105℃烘到斑点清晰，在供试品色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(3)一点红鉴别：取胶囊内容物5g，加氨水10ml，浸润10分钟，加氯仿30ml回流提取20分钟，过滤，滤液水浴挥干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取一点红0.5g，同法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，至装有浓氨水的展开缸晨面饱和15分钟后，再移到以体积比为1∶1∶1的氯仿-丙酮-甲醇为展开剂的展开缸里，展开，取出，晾干，喷以新配制的碘化铋钾溶液；供试品色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)积雪草鉴别：取胶囊内容物10g，加甲醇30ml，水浴回流1小时，过滤，滤液水浴挥干，残渣加水30ml加热溶解，放冷，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，各次为20ml、20ml、10ml，弃去乙醚液，水层挥尽乙醚，用水饱和的正丁醇提取3次，各次为20ml、20ml、10ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的1％氢氧化钾液洗3次，每次30ml，正丁醇液挥干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取积雪草对照药材0.5g同法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液对照药材5ul，样品和阴性各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为4∶5∶1的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，至105℃烘到斑点清晰，在供试品色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(5)一支黄花鉴别：取胶囊内容物5g，加沸程为60℃-90℃的石油醚20ml，超声提取1小时，过滤，滤液水浴挥干，残渣加乙酸乙酯2ml溶解，作为供试品溶液；另取一支黄花对照药材2g，同法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5ul，分别点于同 一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为3∶1的环已烷醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
前述的治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法，所述胶囊制剂中绿原酸的含量测定为：
一支黄花色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为15∶85的乙腈-0.4％磷酸为流动相；流速为1.0ml/min；检测波长为327nm；柱温：35℃，理论板数按绿原酸峰计算应不低于1000；
对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇制成每1ml中含绿原酸15ug的溶液，即得；
供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品，混匀，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％的甲醇50ml，称重，超声30分钟，放冷，用50％的甲醇补重，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml至25ml棕色量瓶中，加50％甲醇定容摇匀，用0.45μm滤膜滤过，作为供试品溶液；
测定法：分别取供试品溶液和对照品溶液各10μl，照高效液相色谱法，注入液相色谱仪测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；
总黄酮 对照品溶液的制备：精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品适量，置25ml量瓶中，加甲醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀。精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，制成每1ml中含芦丁0.192168mg的溶液，即得；
标准曲线制备：精密量取对照品溶液1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，7ml，分别置25ml量瓶中，各加水至6.0ml，加5％亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1ml，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应试剂为空白，照紫外可见分光光度法，在500nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；
供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品，混匀，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加70％乙醇50ml，称重，超声30min，放冷，用70％的乙醇补重，精密吸取该液2ml至25ml容量瓶中，各加水至6.0ml，照标准曲线制备项下的方法，自“加水至6.0ml”起同法操作制得供试品溶液，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含无水芦丁的重量，计算，即得。
前述的治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法，每粒胶囊含一支黄花以绿 原酸(C16H18O9)计，不少于1.5mg；每粒胶囊含总黄酮以无水芦丁(C27H30O16)计，不少于45mg。
为了研究治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法，发明人进行了大量的实验以筛选最佳方案，具体如下：
一、性状的研究
根据样品的试验结果拟定，三批中试样品均与拟定结果描述一致，列入质量控制方法正文。
二、鉴别方法的研究
2.1处方中白英的薄层色谱鉴别
取胶囊内容物5g，加乙醇30ml，超声提取30分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，挥干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取白英对照药材1g，同上法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为17∶2∶2的氯仿-甲醇-水的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。阴性对照无干扰；经3批中试样品验证，此方法重复性好，专属性强，故将其列为质量控制方法。
2.2处方中白花舌蛇草的薄层色谱鉴别
取胶囊内容物5g，加乙醇30ml，浸渍30分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加无水乙醇5ml溶解，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取白花舌蛇草对照药材1g，加水50ml，加热回流1小时，放冷，滤液浓缩至近干，加60％的乙醇45ml，搅匀，滤过，滤液浓缩至约2ml，加硅藻土适量搅匀，干燥，加乙醇30ml同供试品法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为2∶2∶0.1的氯仿乙醇浓氨为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，至105℃烘到斑点清晰，在供试品色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；阴性对照无干扰；经3批中试样品验证，此方法重复性好，专属性强，故将其列为质量控制方法。
2.3处方中积雪草的薄层色谱鉴别
取胶囊内容物10g，加甲醇30ml，水浴回流1小时，过滤，滤液水浴挥干，残渣加水30ml加热溶解，放冷，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次， 各次为20ml、20ml、10ml， 弃去乙醚液，水层挥尽乙醚，用水饱和的正丁醇提取3次，各次为20ml、20ml、10ml，合并正 丁醇液，用正丁醇饱和的1％氢氧化钾液洗3次，每次30ml，正丁醇液挥干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取积雪草对照药材0.5g同法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液对照药材5ul，样品和阴性各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为4∶5∶1的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，至105℃烘到斑点清晰，在供试品色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；经3批中试样品验证，此方法重复性好，专属性强，故将其列为质量控制方法。
2.4处方中一点红薄层色谱鉴别
取胶囊内容物5g，加氨水10ml，浸润10分钟，加氯仿30ml回流提取20分钟，过滤，滤液水浴挥干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取一点红0.5g，同法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，至装有浓氨水的展开缸里面饱和15分钟后，再移至以体积比为1∶1∶1的氯仿丙酮甲醇为展开剂的展开缸里，展开，取出，晾干，喷以新配制的碘化铋钾溶液；供试品色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；经3批中试样品验证，此方法重复性好，专属性强，故将其列为质量控制方法。
2.5处方中一支黄花薄层色谱鉴别
取胶囊内容物5g，加石油醚20ml(60℃-90℃)，超声1小时，过滤，滤液水浴挥干，残渣加乙酸乙酯提取2ml溶解，作为供试品溶液；另取一支黄花对照药材2g，同法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为3∶1的环已烷醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；经3批中试样品验证，此方法重复性好，专属性强，故将其列为质量控制方法。
三、检查项的研究
3.1崩解时限
按《中国药典》2005年版一部“附录XII A崩解时限检查法”测定，规定本品应在30分钟内全部崩解，本品三批检测结果见表1，均符合规定。
3.2水分检查
按《中国药典》2005年版一部“附录IX H水分测定法 第一法”测定，测定结果见表1，3批样品均符合规定。
3.3装量差异检查
依据《中国药典》2005年版一部“附录I L胶囊剂”项下进行检查，结果见表1，3批样品均符合规定。
3.4重金属检查
照《中国药典》2005年版一部附录IX E重金属检查法第二法操作。
3.4.1标准铅溶液的制备：精密称取在105℃干燥至恒重的硝酸铅0.117g，置1000ml容量瓶中，加硝酸5ml，水50ml，溶解后，用水稀释至刻度，摇匀，即得标准铅贮备液。临用时，精密量取前贮备液10ml，置100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于10ug的铅)。
3.4.2供试品溶液的制备：精密称取本品内容物1g，置坩锅中，电炉上缓缓炽灼至完全炭化，放冷，加硫酸1ml，使恰湿润，用低温加热至硫酸除尽，加硝酸0.5ml，蒸干，放冷，马弗炉中500～600℃炽灼使完全灰化，放冷加盐酸2ml，置水浴上蒸干后加水15ml，滴加氨试液至酚酞指示剂显中性，再加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml，微热溶解后，移至纳氏比色管中，加水稀释成25ml。
3.4.3阳性对照液的制备：将配制供试品溶液的试剂，置另一坩锅中蒸干后，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，加入标准铅溶液1ml，再加水稀释成25ml。
3.4.4空白对照液的制备：将配制供试品溶液的试剂，置另一坩锅中蒸干后，加醋酸盐缓冲液(pH3.5)2ml与水15ml，微热溶解后，移置纳氏比色管中，再加水稀释成25ml。
3.4.5比色：供试品溶液、阳性对照液和空白对照液的3支纳氏比色管中分别加硫代乙酰胺试液各2ml，摇匀，放置2分钟，同置白纸上，自上向下透视，供试品液显出的颜色与阳性对照液比较，颜色更浅，空白对照无干扰。结果见表1。
结果表明，3批样品重金属含量均小于10ppm，故未列入正文。
3.5砷盐检查
照《中国药典》2005年版一部附录IXF砷盐检查法第一法操作。
3.5.1标准砷溶液的制备：称取三氧化二砷0.121g，置1000ml量瓶中，加20％氢氧化钠溶液5ml溶解后，用适量稀硫酸中和，再加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，作为贮备液。临用前，精密量取贮备液10ml，置1000ml量瓶中，加稀硫酸10ml，用水稀释至刻度，摇匀，即得(每1ml相当于1μg的As)。
3.5.2供试品溶液的制备：精密称取本品内容物1g，置坩埚中，加入氢氧化钙0.5g，混匀，加水湿润，烘干，在小火上小心炽灼， (注意不使内容物溅出)至烟雾除尽，移入马弗 炉中在500～600℃炽灼至灰化，放冷，加盐酸5ml和水23ml，水浴上加热溶解，作为供试品溶液。
3.5.3阳性对照液的制备：精密量取标准砷溶液2ml，置坩锅中，同3.5.2方法制得阳性对照液。
3.5.4空白对照液的制备：另取坩锅一只，加入氢氧化钙0.5g，同供试品溶液的制备方法制得空白对照液。
3.5.5砷斑的制备：将供试品溶液、阳性对照液、空白对照液分别移至测砷瓶中，再分别加碘化钾试液5ml，酸性氯化亚锡试液5滴，在室温放置10分钟后，加锌粒2g，30℃水浴中反应45分钟，取出溴化汞试纸，观察砷斑颜色，结果供试品溶液砷斑浅于标准砷斑颜色。结果见表1。结果表明，3批样品砷盐含量均小于2ppm，故未列入正文。
表1三批样品检查结果表
| 样品批号 | 2008001 | 2008002 | 2008003 |
| 崩解时间(min) | 19 | 18 | 19 |
| 装量差异 | 符合规定 | 符合规定 | 符合规定 |
| 水分(％) | 1.9 | 1.8 | 2.0 |
| 重金属(ppm) | ＜10 | ＜10 | ＜10 |
| 砷盐(ppm) | ＜2 | ＜2 | ＜2 |
3.6 微生物检查方法验证
实验材料：生化培养箱、立式压力蒸汽消毒器、双筒实目显微镜。阳性对照菌及常规微生物检验用化学试剂和玻璃仪器等。
营养琼脂、玫瑰红钠琼脂、曙红亚甲蓝琼脂、胆盐乳糖增菌培养基、胆盐乳糖发酵培养基(以上均为中国北京三科科技开发公司马生产，按CP05版规定配制及灭菌)、四-甲基伞形酮葡萄糖苷酸(中国北京牛牛基因技术有限公司)；大肠埃希菌[CMCC(B)44102]、金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B)62501]、白色念珠菌[CMCC(F)98001]、黑曲霉[CMCC(F)98003]，以上菌种均来源于贵州省药品检验所。
供试液制备：按规定取胶囊内容物，充分摇匀后混合，取胶囊内容物10g，加入pH7.0的无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，即为1∶10供试液。验证结果见表2至表5。
表2 细菌、霉菌及酵母菌计数方法验证回收试验记录
回收率＝(试验组平均菌落数-供试品对照组平均菌落数)/菌液组平均菌落数×10表3 采用培养基稀释法0.2mL/皿
表4 控制菌检查方法验证记录(大肠埃希菌)
表5 控制菌检查方法验证记录(大肠菌群)
由验证试验可知，本品可采用常规法进行霉菌和酵母菌、大肠埃希菌、大肠菌群检验，用培养基稀释法(0.2mL/皿)对细菌进行检验。按验证方法对本品的三批样品微生物限度进行了检查，结果均符合规定。
结论：由以上实验可知，可采用常规方法对胶囊制剂进行检查项下的各项检查。
四、胶囊制剂中含量测定的研究
绿原酸本品中一支黄花含有绿原酸，现代研究表明，绿原酸具有具有较强的抗菌、消炎、解毒、利胆、对月经过多，子宫功能性出血有良好的止血效果等多种药理作用；其对大肠杆菌、金色葡萄球菌、肺炎球菌和病毒等有较强的抑制作用，是一支黄花的有效成分，本品采用高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定了其含量，测定方法参照药 材一支黄花中绿原酸测定方法进行。
4.1仪器与试药 高效液相色谱仪：LC-2010HT(日本岛津)；SeriesIII泵(美国)，Mode500紫外检测器(美国)；TG332A(十万分之一)天平(上海)；甲醇(色谱纯，天津大茂)；水(重蒸馏，临用前制备)，磷酸(分析纯，天津大茂)，绿原酸中检所，批号：110753-200212)。样品三批(批号：2008001、2008002、2008003)。
4.2色谱条件DiamonsilC18柱(5μm)，流动相：乙腈-0.4磷酸(15∶85)；流速：1.0ml/min；检测波长327nm；柱温：35℃。
4.3系统适用性试验 分别取绿原酸对照品溶液、供试品溶液及缺一支黄花的阴性样品对照溶液各10μl注入液相色谱仪，记录色谱。从图谱可知，在此色谱条件下，绿原酸峰与其他组分峰分离完全，在与绿原酸峰相同的保留时间处，阴性对照无干扰。
4.4供试品溶液的制备
本试验对供试品处理方法作了以下考察：
4.4.1提取方法选择
方法1：取本品内容物，置具塞锥形瓶中，以50％甲醇溶液为提取溶剂，以回流方法提取，考察了不同提取时间内容物绿原酸含量。结果见表6。
表6提取方法1考察结果
| 提取时间(小时) | 1 | 2 | 3 |
| 含量(mg/g) | 0.142 | 0.363 | 0.286 |
方法2：取本品内容物，以50％的甲醇为提取溶剂，以超声为处理方法，考察了不同提取时间内容物绿原酸含量。结果见表7。
表7提取方法2考察结果
| 提取时间(分钟) | 10分钟 | 20分钟 | 30分钟 | 45分钟 |
| 含量(mg/g) | 0.91 | 1.18 | 4.093 | 3.102 |
试验结果表明，本品采用50％的甲醇超声提取效率高、提取30分钟与45分钟差不多，用其为本品供试品处理方法；根据不同提取时间考察结果，确定超声时间为30分钟。
4.4.2提取溶剂比较
取本品内容物，分别以甲醇、50％甲醇、乙醇和4mol/l的盐酸溶剂，超声提取30分钟，过滤，滤液经微孔滤膜过滤，作为供试品溶液，测定绿原酸含量，结果溶剂50％甲醇的提取效果最好，而甲醇提取效果次之、4mol/l的盐酸提取效果最差且颜色最深，由于以50％甲醇为溶剂制备的供试品与甲醇为溶剂制备的供试品颜色相近，且50％的甲醇提取的含量高，则选择50％的甲醇为样品提取溶剂，结果见表8。
表8提取溶剂考察结果
| 提取溶剂 | 乙醇 | 20％甲醇 | 4mol/l的盐酸 | 甲醇 |
| 含量(mg/g) | 0.34 | 4.026 | 0.416 | 3.038 |
试验结果表吸，本品还是采用50％的甲醇作为提取溶剂较为合适。
4.5线性关系教考察 精密称取绿原酸对照品20.25mg，置50ml量瓶中，加甲醇溶孵并稀释至刻度，摇匀，精密吸取2ml，置50ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，得0.0162mg/ml的绿原酸对照品溶液，分别精密吸取绿原酸对照品溶液2μl、5μl、10μl、15μl、20μl，注入色谱仪，记录色谱图，测定峰面积积分值，测定结果见表9，并以对照品进样量X(μg)为横坐标，峰面积值Y(mv.s)为纵坐标，绘制标准曲线，结果表明，绿原酸在0.0324～0.324μg范围内线性关系良好。
表9 绿原酸线性关系考察
将回归方程拟合为过原点的方程得：y=1027147x。取线性关系考察中最低点进样量(0.0324μg)分别代入上述两个方程，计算得两者相对偏差为0.26％，说明本品可用外标一点法进行含量测定。
4.6精密度试验 精密吸取绿原酸对照品溶液10μl(0.0162mg/m1)，重复进样5次，测定绿原酸峰面积积分值，求出相对标准偏差，结果表明精密度度良好，结果见表10。
表10精密度实验结果
4.7稳定性试验 取一供试品(批号2008001)，按质量控制方法正文中供试品溶液的制备方法制备供试液。在室温下每隔一段时间进样10μl，测定绿原酸峰面积值，求相对 标准偏差，结果表明，经原酸在12小时内基本稳定(RSD＝0.53％)，结果见表11。
表11 稳定性试验结果
4.8重复性试验 精密取本品(批号：2008001)各1g，共6份，按质量控制方法正文中供试品溶液的制备方法制备供试液。精密吸取供试品溶液各10μl，测定绿原酸峰面积积分值，计算含量，求相对标准偏差，结果表明，重复性良好(RSD＝0.84％)。见表12。
表12重复性试验结果
4.9中间精密度 取同一批样品(批号：2008001)，分两组由不同操作人员在不同设备上对本品进行含量测定，结果表明，中间精密度良好(RSD＝0.48％)。结果见表13。A组：LC-2010HT高效液相色谱仪；B组：SSI高效液相色谱仪。
表13中间精密度试验结果
4.10回收率试验 采用加样回收法试验，取已知含量的同一批样品(批号：2008001)6份，精密称取各约0.5g，精密加入绿原酸对照品适量，按供试品溶液制备方法制备成供试品溶液，精密吸取供试品溶液备10μl，照上述色谱条件测定，记录色谱图，计算含量，结 果表明，绿原酸的回收率良好，结果见表14。
表14加样回收试验结果
| 6 | 0.509 | 2.036 | 2.013 | 169573 | 4.0925 | 102.2 |
4.11样品测定 取3批中试样品，按质量控制方法正文测定其中绿原酸含量(结果见表15)。按下式计算含量：
4.11样品测定 取3批中试样品，按质量控制方法正文测定其中绿原酸含量(结果见表15)。按下式计算含量：
式中： 
-供试品绿原酸峰面积积分值
-绿原酸对照品峰面积积分值
-供试品取样量(g)
-平均装量(g)
50、25、5-供试品稀释体积(ml)
表15 3批样品中绿原酸的含测结果
本品在生产过程中绿原酸转移率均不低于30％，考虑到生 产和贮存过程对药品的影响，我们规定本品每粒含一支黄花以绿原酸计，不得少于1.5mg。
总黄酮
照紫外-可见分光光度法(中国药典2000年版一部附录V A)测定。
(1)仪器与试药TU-1000型可见紫外分光光度计(北京通用仪器设备公司)；亚硝酸 钠(分析纯，天津大茂)、硝酸铝(分析纯，天津大茂)、氢氧化钠(分析纯，天津大茂)均为分析纯；芦丁对照品(中国药品生物制品鉴定所，100080-200306)；样品三批(批号：20081113、20081114、20081115)。
(2)标准溶液的制备精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品适量，置25ml量瓶中 ，加甲醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀。精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，制成每1ml中含芦丁0.192168mg的溶液，即得。
(3)检测波长选择及阴性对照试验称取样品(批号：20081113)0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加70％乙醇50ml，称重，超声30min，放冷，用70％的乙醇补重，精密吸取该液2ml至25ml容量瓶中，加水至6.0ml，加5％亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1ml，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，作为供试品溶液；精密量取芦丁对照品溶液及水各3ml，分别置25ml量瓶中，自“加水至6.0ml”起同法操作制得对照品溶液及空白对照溶液。取上述三种溶液适量，在400～600nm波长范围内扫描，对照品溶液和供试品溶液在500nm处有最大吸收，而阴性对照溶液在此波长下的吸收度与供试品溶液的吸收度相比，小于5％，符合相关规定，因此我们选择500nm为本品中总黄酮的检测波长。
(4)标准曲线精密量取芦丁对照品溶液1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，分别置25ml量瓶中，各加水至6.0ml，加5％亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1ml，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应试剂为空白，照紫外可见分光光度法，在500nm波长处测定吸光度，经回归得到如下方程：A＝0.4464C+0.00541(r＝1.0000)。式中A为吸光度值，C为比色液中芦丁对照品溶液浓度。芦丁对照品浓度在7.687～46.1210μg/ml范围内，吸光度和浓度呈良好的线性关系，结果见表16。
表16 芦丁对照品标准曲线考察
| 序号 | 浓度(mg/ml) | 吸收度 |
| 1 | 7.687 | 0.90 |
| 2 | 15.3730 | 0.177 |
| 3 | 23.0600 | 0.264 |
| 4 | 30.7470 | 0.350 |
| 5 | 38.4340 | 0.435 |
| 6 | 46.1210 | 0.518 |
( 5)精密度试验 取“标准曲线”项下3号对照品溶液(23.0600ug/ml)适量，依法重复测定5次，记录吸收度值，求出相对标准偏差，结果表明，对照品芦丁吸收度测定精密度良好，RSD＝0.43％，结果见表17。
表17精密度试验结果
(6)稳定性试验 称取样品(批号：20081113)0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加70％乙醇50ml，称重，超声30min，放冷，用70％的乙醇补重，精密吸取该液2ml至25ml容量瓶中，加水至6.0ml，照标准曲线的制备项下的方法，自“加水至6.0ml”起，制备成供试品溶液；在室温下每隔一段时间依法测定吸收度，求相对标准偏差；结果表明，该方法测定样品中总黄酮吸收度在12小时内基本稳定，RSD＝0.61％，结果见表18。
表18 稳定性试验结果
(7)重复性试验 取称取样品(批号：20081113)6份，取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加70％乙醇50ml，称重，超声30min，放冷，用70％的乙醇补重，精密吸取该液2ml至25ml容量瓶中，加水至6.0ml，照标准曲线的制备项下的方法，自“加水至6.0ml”起，制备成供试品溶液；依法重复测定6次，记录吸收度值，求出相对标准偏差，结果表明，该方法测定样品中芦丁吸收度重复性良好，RSD＝0.74％，结果见表19。
表19重复性试验结果
( 8)回收率试验 采用加样回收试验，取已知含量的重复性试验的同一批样品(总黄酮平均含量为120.3225mg/g)共5份，精密称取0.1g，分别加入无水芦丁对照品适量，按供试品溶液制备方法制备成供试品溶液，照上述条件测定吸光度，计算含量，求相对标准偏差，回归方程为：A＝0.4464C+0.00541(r＝1.0000)；RSD0.38％，结果表明，此方法具有较好的加样回收率，结果见表20。
表20供试品中芦丁加样回收试验结果
| 序号 | 样品取样量g) | 理论含量(mg) | 加入量(mg) | 吸收度 | 实测值(mg) | 回收量(mg) | 回收率(％) | 平均回收率％) | RSD(％) |
| 1 | 0.105 | 12.2957 | 12.1209 | 0.435 | 24.7564 | 12.4607 | 102.80 | ||
| 2 | 0.106 | 12.3115 | 12.1209 | 0.436 | 24.6965 | 12.3850 | 102.18 | ||
| 3 | 0.102 | 12.4609 | 12.1209 | 0.442 | 24.8613 | 12.4004 | 102.31 | 102.52 | 0.38 |
| 4 | 0.105 | 12.5101 | 12.1209 | 0.438 | 25.0638 | 12.5537 | 103.57 | ||
| 5 | 0.101 | 12.2425 | 12.1209 | 0.439 | 24.5753 | 12.3328 | 101.75 |
(9)3批样品测定及成品含量限度制定 按“重复性”测定项下制备供试品溶液和对照品溶液，测定吸光度，计算其中总黄酮的含量，结果见表21。
表21 3批样品中总黄酮含量测定结果
本品处方多味药均含总黄酮，考虑到生产工艺的波动和检测操作误差等因素的影响，根据3批本品含量测定结果，暂定本方每粒含总黄酮含量为45mg。
五、质量控制方法中所用到的标准物质
绿原酸对照品：购于中国药品生物制品检定所，批号：110753-200212，供含量测定用 。
芦丁对照品：购于中国药品生物制品检定所，批号：100080-200306，供含量测定用。
白英对照药材：购于中国药品生物制品检定所，批号：121316-200402，供鉴别用。
积雪草对照药材：购于中国药品生物制品检定所，批号：121514-200501，供鉴别用。
白花舌蛇草对照药材：购于中国药品生物制品检定所，批号：121183，供鉴别用。
一点红对照药材：购于中国药品生物制品检定所，批号：121359-200502，供鉴别用。
一支黄花对照药材：购于中国药品生物制品检定所，批号：1214338-200602，供鉴别用。
本发明的有益效果：与现有技术相比，本发明建立了治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法，对胶囊制剂的性状、鉴别、检查和含量测定进行了研究和筛选，所采用的质量控制方法科学合理，准确度高，重现性好，能全面有效地控制质量妇科炎症和子宫肌瘤的胶囊制剂的质量，确保该制剂的临床疗效。本发明药物制剂具有清热解毒、化瘀散结，消痈止痛的功效，是一种安全、有效、质量可控的治疗妇科炎症和子宫肌瘤的中药新药。
下面结合具体实施方式对本发明作进一步的说明。
具体实施方式
实施例。治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法如下：
性状：本品为硬胶囊，内容物为棕褐色颗粒及粉末，气微，味苦、微涩；
鉴别：(1)白英鉴别：取胶囊内容物5g，加乙醇30ml，超声提取30分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，用乙酸乙酯20ml，合并乙酸乙酯液，挥干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取白英对照药材1g，同上法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为17∶2∶2的氯仿甲醇水的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(2)白花舌蛇草鉴别：取胶囊内容物5g，加乙醇30ml，浸渍30分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加无水乙醇5ml溶解，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取白花舌蛇草对照药材1g，加水50ml，加热回流提取1小时，放冷，滤过，滤液浓缩至近干，加60％的乙醇45ml，搅匀，滤过，滤液浓缩至约2ml，加硅藻土适量搅匀，干燥，加乙醇30ml，同供试品法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为2∶2∶0.1的氯仿-乙醇-浓氨为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，至105℃烘到斑 点清晰，在供试品色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(3)一点红鉴别：取胶囊内容物5g，加氨水10ml，浸润10分钟，加氯仿30ml回流提取20分钟，过滤，滤液水浴挥干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取一点红0.5g，同法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，至装有浓氨水的展开缸晨面饱和15分钟后，再移到时以体积比为1∶1∶1的氯仿丙酮甲醇为展开剂的展开缸里展开，取出，晾干，喷以新配制的碘化铋钾溶液；供试品色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(4)积雪草鉴别：取胶囊内容物10g，加甲醇30ml，水浴回流1小时，过滤，滤液水浴挥干，残渣加水30ml加热溶解，放冷，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，各次为20ml、20ml、10ml，弃去乙醚液，水层挥尽乙醚，用水饱和的正丁醇提取3次，各次为20ml、20ml、10ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的1％氢氧化钾液洗3次，每次30ml，正丁醇液挥干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取积雪草对照药材0.5g同法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液对照药材5ul，样品和阴性各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为4∶5∶1的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，至105℃烘到斑点清晰，在供试品色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
(5)一支黄花鉴别：取胶囊内容物5g，加石油醚20ml(60℃-90℃)，超声1小时，过滤，滤液水浴挥干，残渣加乙酸乙酯提取2ml溶解，作为供试品溶液；另取一支黄花对照药材2g同法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为3∶1的环已烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
检查：符合中国药典2005年版一部附录I L中胶囊剂项下的各项规定；
含量测定：绿原酸 照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VI D)测定胶囊制剂中绿原酸的含量：
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.4％磷酸(15∶85)为流动相；流速为1.0ml/min；检测波长为327nm；柱温：35℃。理论板数按绿原酸峰计算应不低于1000。
对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇制成每lml中含绿原酸0.0162 mg的溶液，即得。
供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品，混匀，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％的甲醇50ml，称重，超声30分钟，放冷，用50％的甲醇补重，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml至25ml棕色量瓶中，加50％甲醇定容摇匀，用0.45μm滤膜滤过，作为供试品溶液。
测定法：分别取供试品溶液和对照品溶液各10μl，照高效液相色谱法，注入液相色谱仪测定，记录色谱图。按外标法以峰面积计算，即得。每粒治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂含一支黄花以绿原酸(C16H18O9)计，不少于1.5mg。
总黄酮 对照品溶液的制备：精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品适量，置25ml量瓶中，加甲醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀。精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，制成每lml中含芦丁0.192168mg的溶液，即得
标准曲线制备：精密量取对照品溶液1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，7ml，分别置25ml量瓶中，各加水至6.0ml，加5％亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1ml，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法，在500nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。
供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品，取本品取0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加70％乙醇50ml，称重，超声30min，放冷，用70％的乙醇补重，精密吸取该液2ml至25ml容量瓶中，加水至6.0ml，照标准曲线制备项下的方法，自“加水至6.0ml”起同法操作制得供试品溶液，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含无水芦丁的重量，计算，即得。每粒治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂含总黄酮以无水芦丁(C27H30O16)计，不少于45.0mg。
功能主治：清热解毒、化瘀散结，消痈止痛。用于妇科炎症，子宫肌瘤，宫颈癌，卵巢囊肿，盆腔炎性包块。
用法用量：口服。一次3粒，一日3次。
规格：每粒装0.4g。
贮藏：密封，防潮。因本品为中药提取浸膏，容易吸潮变质，故需密封。
Claims (5)
1.一种治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法，这种制剂这样制备：取白英300g、白花蛇舌草300g、地稔240g、地耳草100g、一点红200g、积雪草100g、一枝黄花100g、王瓜子100g、鬼针草100，加8倍量水煎煮3次，每次煎煮0.5小时，滤过，滤液浓缩至60℃相对密度为1.25的浸膏，减压干燥，粉碎，过80目筛，加入淀粉适量，装入胶囊，每粒装0.4g，制成1000粒，其特征在于：质量控制方法由性状、鉴别、检查和含量测定组成，其中鉴别是对白英、白花蛇舌草、一点红、积雪草和一枝黄花的鉴别，含量测定是用高效液相色谱法和紫外可见分光光度法分别对制剂中绿原酸和总黄酮的含量测定。
2.按照权利要求1所述的治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法，其特征在于：
性状：本品为硬胶囊，内容物为棕褐色颗粒及粉末，气微，味苦、微涩；
鉴别：以白英对照药材为对照、以羧甲基纤维素钠为黏合剂、以氯仿甲醇水的下层液为展开剂照薄层色谱法鉴别白英；以白花蛇舌草对照药材为对照、以羧甲基纤维素钠为黏合剂、以氯仿乙醇浓氨为展开剂照薄层色谱法鉴别白花蛇舌草；以一点红对照药材为对照、以羧甲基纤维素钠为黏合剂、以氯仿丙酮甲醇为展开剂照薄层色谱法鉴别一点红；以积雪草对照药材为对照、以羧甲基纤维素钠为黏合剂、以甲苯乙酸乙酯甲酸为展开剂照薄层色谱法鉴别积雪草；以一枝黄花对照药材为对照、以羧甲基纤维素钠为黏合剂、以环己烷乙酸乙酯为展开剂照薄层色谱法鉴别一枝黄花；
检查：符合中国药典2005年版一部附录IL中胶囊剂项下的各项规定；含量测定：
一支黄花 以绿原酸对照品为对照，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比为15∶85的乙腈0.4％磷酸为流动相照高效液相色谱法测定胶囊制剂中绿原酸的含量；
总黄酮 以芦丁对照品为对照，以5％亚硝酸钠溶液、10％硝酸铝溶液及氢氧化钠试液为显色剂，照紫外可见分光光度法测定胶囊制剂中总黄酮的含量。
3.按照权利要求1或2所述的治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的 质量控制方法，其特征在于：所述鉴别由以下项组成：
(1)白英鉴别：取胶囊内容物5g，加乙醇30ml，超声提取30分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加水20ml溶解，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯液，挥干，残渣加乙醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取白英对照药材1g，同法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为17∶2∶2的氯仿-甲醇-水的下层液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(2)白花舌蛇草鉴别：取胶囊内容物5g，加乙醇30ml，浸渍30分钟，过滤，滤液蒸干，残渣加无水乙醇5ml溶解，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取白花舌蛇草对照药材1g，加水50 ml，加热回流1小时，放冷，滤液浓缩至近干，加60％的乙醇45ml，搅匀，滤过，滤液浓缩至约2 ml，加硅藻土适量搅匀，干燥，加乙醇30 ml同供试品法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为2∶2∶0.1的氯仿-乙醇浓氨为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，至105℃烘到斑点清晰，在供试品色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(3)一点红鉴别：取胶囊内容物5g，加氨水10ml，浸润10分钟，加氯仿30ml回流提取20分钟，过滤，滤液水浴挥干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取一点红0.5g，同法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，至装有浓氨水的展开缸里面饱和15分钟后，再移到以体积比为1∶1∶1的氯仿-丙酮-甲醇为展开剂的展开缸里，展开，取出，晾干，喷以新配制的碘化铋钾溶液；供试品色谱中，在与对照品溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(4)积雪草鉴别：取胶囊内容物10g，加甲醇30ml，水浴回流1小时，过滤，滤液水浴挥干，残渣加水30ml加热溶解，放冷，移至分液漏斗中，用乙醚提取3次，各次为20ml、20ml、10ml，弃去乙醚液，水层挥尽乙醚，用水饱和的正丁醇提取3次，各次为20ml、20ml、10ml，合并正丁醇液，用正丁醇饱和的1％氢氧化钾液洗3次，每次30ml，正丁醇液挥干，残渣加甲醇1ml溶解，作为供试品溶液；另取积雪草对照药材0.5g同法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液对照药材5ul，样品10ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为4∶5∶1的甲苯-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％的硫酸乙醇溶液，至105℃烘到斑点清晰，在供试品色谱中，在与对照品 溶液色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；
(5)一支黄花鉴别：取胶囊内容物5g，加沸程为60℃-90℃的石油醚20ml，超声1提取小时，过滤，滤液水浴挥干，残渣加乙酸乙酯提取2 ml溶解，作为供试品溶液；另取一支黄花对照药材2g，同法制成药材对照溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以体积比为3∶1的环己烷-醋酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
4.按照权利要求1或2所述的治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法，其特征在于：所述胶囊制剂中绿原酸的含量测定为：
一支黄花色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为15∶85的乙腈-0.4％磷酸为流动相；流速为1.0ml/min；检测波长为327nm；柱温：35℃，理论板数按绿原酸峰计算应不低于1000；
对照品溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，加甲醇制成每1ml中含绿原酸15ug的溶液，即得；
供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品，混匀，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％的甲醇50ml，称重，超声30分钟，放冷，用50％的甲醇补重，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml至25ml棕色量瓶中，加50％甲醇定容摇匀，用0.45μm滤膜滤过，作为供试品溶液；
测定法：分别取供试品溶液和对照品溶液各10μl，照高效液相色谱法，注入液相色谱仪测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；
总黄酮 对照品溶液的制备：精密称取在120℃干燥至恒重的芦丁对照品适量，置25ml量瓶中，加甲醇适量，置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀。精密量取10ml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，制成每lml中含芦丁0.192168 mg的溶液，即得；
标准曲线制备：精密量取对照品溶液1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，7ml，分别置25ml量瓶中，各加水至6.0ml，加5％亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液1ml，放置6分钟，加氢氧化钠试液10ml，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法，在500nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线；
供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品，混匀，取0.2g，精密称定，置具塞锥形 瓶中，精密加70％乙醇50ml，称重，超声30 min，放冷，用70％的乙醇补重，精密吸取该液2ml至25ml容量瓶中，各加水至6.0ml，照标准曲线制备项下的方法，自“加水至6.0ml”起同法操作制得供试品溶液，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含无水芦丁的重量，计算，即得。
5.按照权利要求1、2或4所述的治疗妇科炎症和子宫肌瘤的药物制剂的质量控制方法，其特征在于：每粒胶囊含一支黄花以绿原酸(C16H18O9)计，不少于1.5mg；每粒胶囊含总黄酮以无水芦丁(C27H30O16)计，不少于45mg。
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