CN101508954A

CN101508954A - 用于细胞迁移研究及高通量药物筛选的划痕实验装置

Info

Publication number: CN101508954A
Application number: CNA2009100681581A
Authority: CN
Inventors: 周军; 谢松波; 高金珉
Original assignee: Nankai University
Current assignee: Nankai University
Priority date: 2009-03-18
Filing date: 2009-03-18
Publication date: 2009-08-19

Abstract

本发明涉及一种简便快速的划痕实验装置，适用于细胞迁移研究以及以细胞迁移为靶点的高通量药物筛选。本发明带有可拆卸的橡胶划头，以含有多个孔的细胞培养板(6、12、24、96、384孔板等)为实验对象，能精确地套在细胞培养板上，只需轻轻一推，就可以产生整齐均一的划痕，且划痕位置固定，便于拍照及后续的统计分析。本装置也适用于高通量筛选系统的自动化工作平台，用于快速筛选以细胞迁移为靶点的药物。另外，本发明可重复使用，所带的橡胶划头具有可拆卸功能，经酒精喷洒，紫外线照射后即可使用。本发明为划痕实验提供了一种简便快速的办法，具有很大的市场前景。

Description

用于细胞迁移研究及高通量药物筛选的划痕实验装置

发明领域

本发明涉及一种简便快速的划痕实验装置，适用于细胞迁移研究以及以细胞迁移为靶点的高通量药物筛选。

发明背景

细胞迁移在人体的正常生理活动和疾病发生中普遍存在，例如细胞的觅食、伤口损伤愈合、胚胎发生、神经系统形成、免疫反应、癌症转移等很多事件都涉及到细胞迁移。细胞迁移是当前生命科学研究的一个重要方向和热点，科学家们试图通过对细胞迁移的研究，在血管损伤修复、阻止癌症转移、植皮等医学应用方面取得更大成果。

目前研究细胞迁移主要有两种实验方法：划痕实验和transwell实验。上皮细胞、角质细胞等在生理状态下形成单层或者复层上皮，在创伤愈合等病理状态下，细胞发生迁移，以侧向的运动为主。划痕实验很好地模拟了这种运动形式，并且操作方便，细胞外围环境容易控制，因此是研究细胞迁移的一个很好的模型。在现行的划痕实验中，一般采用无菌的塑料枪头人工手划，具有划痕不直、划痕位置不确定、不便于拍照及后续的定量统计分析等缺陷。另外，现行的划痕方法不适用于以细胞迁移为靶点进行高通量药物筛选。

针对以上实际问题，本领域很有必要发明一种操作快速方便、划痕位置固定、适用于细胞迁移研究及高通量药物筛选的装置。

发明内容

本发明的目的是提供一种快速方便的划痕实验装置，适用于细胞迁移研究及高通量药物筛选，且划痕均一，位置固定，便于后续的拍照与定量分析。

本发明具有以下几个特征

1.侧壁可以沿折痕折叠，当侧壁1和侧壁2折叠，侧壁3和侧壁4展开时，该装置可以沿着细胞培养板横向移动，产生一道划痕。类似地，当侧壁3和侧壁4折叠，侧壁1和侧壁1展开时，该装置可以沿着细胞培养板纵向移动，产生一道垂直的划痕。

2.橡胶划痕棒条形板可以拆分下来，它与板盖通过螺丝固定。这样，当样品数目较少时，可以只安装上合适数量的橡胶划痕棒条形板，充分利用细胞培养板的每个孔。

3.可适用于高通量筛选系统，通过计算机控制的自动化工作站代替人工进行加样、划痕、清洗、培养基更换、拍照统计等操作，使操作过程程序化，减少人工操作造成的误差，结果更准确可靠。

附图说明

图1是本发明的整体结构示意图。

图2是本发明的橡胶划痕棒条形板的结构示意图。

具体实施方式

根据实验的需要，选择适当数量的橡胶划痕棒条形板，用螺丝固定在相应的位置上。实验前用紫外线照射安装好的装置，进行灭菌。

在细胞培养板中铺好细胞，划痕实验时拿开细胞培养板的板盖，把本发明套在细胞培养板上，侧壁1和侧壁2折叠下来，侧壁3和侧壁4伸展开，使橡胶划痕棒位于细胞培养板的孔的最左边，轻轻向右推动，划出一道划痕；接着侧壁3和侧壁4折叠下来，侧壁1和侧壁2伸展开，使橡胶划痕棒位于细胞培养板的孔的最上边，轻轻向下推动，划出一道划痕。这样，一道十字交叉的划痕就产生了。然后，洗去划掉的细胞，换成新鲜的细胞培养基。观察，拍照。拍照时以十字交叉处为参照点，这样一个孔就可以拍4个视野。

Claims

1、一种用于细胞迁移研究和高通量药物筛选的划痕实验装置，其特征如下：

(a)与细胞培养板尺寸精确吻合的划痕装置板身。

(b)板身上有螺丝小孔，可以固定镶有橡胶划痕棒的条形板。

(c)条形板上镶有一定数量的橡胶划痕棒。

2、根据权利要求1所述的板身，其四侧壁均可以沿折痕折叠与展开，折叠时正好与细胞培养板套牢，并可以平行地自由滑动。

3、根据权利要求1所述的镶有橡胶划痕棒条形板，其两侧有螺丝孔正好可以用螺丝与板身固定在一起，也可以拆下来。

4、根据权利要求1所述的橡胶划痕棒，其位置正好位于每个细胞培养板的孔的正中央处。

5、根据权利要求1所述的橡胶划痕棒，其高度比培养板的高度略高，且与细胞接触端的直径为5毫米。

6、划痕实验中该装置的使用方法：

(a)前一天晚上接种细胞于细胞培养板中。

(b)实验时，将该装置的两侧伸展开，另两侧折叠下来套在细胞培养板上，按住自左向右轻轻推动该装置。

(c)类似地，将该装置折叠下来的两侧展开，将伸展的两侧折叠下来套住细胞培养板，按住自上而下轻轻推动该装置。

(d)清洗划痕，洗去划去的细胞。

(e)换成新鲜的含有血清的培养基培养细胞，每隔一段时间观察和拍照。

7、根据权利要求6所述的划痕实验，实验前细胞先用无血清的培养基培养一个晚上。

8、根据权利要求6所述的划痕实验，划痕后可以加入抑制或促进细胞迁移的药物。

9、根据权利要求6所述的划痕实验，拍照时每次拍照位置要一致。

10、根据权利要求9所述的拍照位置，可以取十字交叉的划痕为标记，每次拍十字交叉处的4个视野。

11、根据权利要求9所述的划痕实验，通过测量划痕区域的像素定量分析细胞迁移的速度。

12、该装置可适用于高通量药物筛选系统，通过计算机控制的自动化工作站代替人工进行加样、划痕、清洗、培养基更换、拍照统计等操作。