CN101507469B - 一种复合酶蛋白的制备方法 - Google Patents

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Abstract

一种复合酶蛋白的制备方法,其特征是制备方法为:好氧发酵培养基配置、厌氧发酵培养基配置、培养基灭菌、菌种激活、扩增培养、接种、好氧发酵条件、厌氧发酵条件、低温干燥、混合、包装即可。本发明的优点是:1、菌种优良,传代稳定性强;2、各菌种在发酵过程中起协同作用,各菌生长、代谢旺盛,产酶能力增强;3、好氧发酵和厌氧发酵菌分开分别进行发酵,让每个菌株最大产酶性能发挥出来;4、原料中不易被动物吸收的蛋白转化成容易消耗吸收的菌体单细胞蛋白,使产品营养价值得到提高。

Description

ー种复合酶蛋白的制备方法
技术领域
[0001 ] 本发明涉及ー种酶蛋白的制备方法,尤其涉及ー种复合酶蛋白的制备方法。
背景技术
[0002] 将“酶”添加到饲料中提高饲料营养价值和畜禽生产性能的设想和实践,已有数十年的历史。早在20世纪50年代,Jensen等(1957)和Fry等(1958)曾报道,添加粗制淀粉酶和蛋白酶,可显著提高鸡的生长速度和饲料转化率。早期是从大麦芽中得到淀粉酶,以后用动物来源的胃蛋白酶和胰蛋白酶;植物来源的木瓜蛋白酶(papain);曲霉中制取了植酸酶,但在相当长的历史时期内,由于生产成本高、活性低、稳定性差等问题,一直未能进入实用阶段。20世纪90年代前后,由于生物工程特别是酶工程的迅猛发展,生产成本下降,活性和稳定性大幅度提高。到了 20世纪末,在全国范围内,酶制剂在配合饲料中的用量都有极大增加。二十世纪80年代末,酶制剂开始引入我国,ー些国外企业的饲用酶制剂陆续进入我国市场,如美国建明公司、芬兰饲料国际有限公司的饲用酶制剂等。目前,除了进ロ产品外,近年来也开发出各种饲用酶制剂,并已进入饲料市场。近年来,国内外大量的饲养实验和消化代谢实验都充分证明添加各种饲用酶制剂不仅能有效地消除饲料抗营养因子的有害作用,而且能全面促进养分的分解消化和吸收利用,提高畜禽的生长速度、饲料转化效率和增进畜禽健康。不仅如此,在应用各种酶制剂提高氮、磷利用率的同时,还可以减少与生态效益兼顾的重要科学技术措施,酶制剂在饲料エ业中有广阔的应用前景。
发明内容
[0003] 本发明的目的在于提供ー种复合酶蛋白的制备方法,该方法制备的产物提高动物生产性能,发挥生产潜カ,改善饲料转化率,降低饲料成本,无残毒,无耐药性。
[0004] 本发明是这样来实现的,其特征是制备方法为:
[0005] I、好氧发酵培养基配置:将血粉、皮革粉、羽毛、麸皮按照I : 2 : I : 12的重量比例混合,并将混合物与水按I. 8 : I的重量比例混合;
[0006] 2、厌氧发酵培养基配置:将果渣、米糠、甘薯粉渣按照3 : I : I的重量比例混合 ,并将混合物与水按6 : 4的重量比例混合;
[0007] 3、培养基灭菌:将培养基放入灭菌器中高温蒸汽灭菌;
[0008] 4、菌种激活:①按各菌种要求配置基础培养基分装:将配好的培养基分装于待接种三角瓶中,并塞上棉塞;③灭菌:在O. IMPa下灭菌15min,其后让其自然降压至常压,冷却,待接种;④接种:待培养基冷却至40°C接种,接种量为O. 5% ;⑤培养:将接种后的试管放入恒温培养箱内培养,培养完毕后备用;
[0009] 5、扩增培养:将母发酵剂扩大培养得到所需量的工作发酵剂,培养结束放入4°C的冰箱中保存备用;
[0010] 6、接种:在无菌条件下,以一定的接种量向物料中加入生产发酵剂,好氧发酵菌种的接种量为1% -2%,厌氧发酵菌种的接种重量为3%,其中好氧发酵菌种包括米曲霉、栖土曲霉、黑曲霉、扣囊拟内孢酶,厌氧发酵菌种包括苏氨酸高产菌、植物乳杆菌、粪链球菌、酵母菌;
[0011] 7、好氧发酵条件:发酵温度28-35°C,时间2天,自动控温,间歇通风,通风量为I. 2立方米/min ;
[0012] 8、厌氧发酵条件:厌氧发酵为自然堆积发酵,时间为7天;
[0013] 9、低温干燥:采用低温气流干燥,物料温度在65°C以内,水分控制在14%以内;
[0014] 10、混合:将好氧条件和厌氧条件下产生的酶蛋白按4 : I比例混合得到复合酶蛋白;
[0015] 11、包装即可。
[0016] 本发明的优点是:1、菌种优良,传代稳定性强;2、各菌种在发酵过程中起协同作用,各菌生长、代谢旺盛,产酶能力增强;3、好氧发酵和厌氧发酵菌分开分别进行发酵,让每个菌株最大产酶性能发挥出来;4、原料中不易被动物吸收的蛋白转化成容易消耗吸收的菌·体单细胞蛋白,使产品营养价值得到提高。
具体实施方式
[0017] 实施例一
[0018] I、好氧发酵培养基配置:将血粉、皮革粉、羽毛、麸皮按照I : 2 : I : 12的重量比例混合,并将混合物与水按I. 8 : I的重量比例混合;
[0019] 2、厌氧发酵培养基配置:将果渣、米糠、甘薯粉渣按照3 : I : I的重量比例混合,并将混合物与水按6 : 4的重量比例混合;
[0020] 3、培养基灭菌:将培养基放入灭菌器中高温蒸汽灭菌;
[0021] 4、菌种激活:①按好氧发酵菌种和厌氧发酵菌种配置基础培养基分装:将配好的培养基分装于待接种三角瓶中,并塞上棉塞;③灭菌:在O. IMPa下灭菌15min,其后让其自然降压至常压,冷却,待接种;④接种:待培养基冷却至40°C接种,接种量为0.5%培养:将接种后的试管放入恒温培养箱内培养,培养完毕后备用;
[0022] 5、扩增培养:将母发酵剂扩大培养得到工作发酵剂,培养结束放入4°C的冰箱中保存备用;
[0023] 6、接种:在无菌条件下,以好氧发酵菌种的接种量为1% _2%和厌氧发酵菌种的接种量为3%向物料中加入生产发酵剂,其中好氧发酵菌种包括米曲霉、栖土曲霉、黑曲霉、扣囊拟内孢酶,厌氧发酵菌种包括苏氨酸高产菌、植物乳杆菌、粪链球菌、酵母菌;
[0024] 7、好氧发酵条件:发酵温度28°C,时间2天,自动控温,间歇通风,通风量为I. 2立方米/min ;
[0025] 8、厌氧发酵条件:厌氧发酵为自然堆积发酵,时间为7天;
[0026] 9、低温干燥:采用低温气流干燥,物料温度为50°C,水分控制在14%以内;
[0027] 10、混合:将好氧条件和厌氧条件下产生的酶蛋白按4 : I比例混合得到复合酶蛋白;
[0028] 11、包装即可。
[0029] 实施例ニ
[0030] I、好氧发酵培养基配置:将血粉、皮革粉、羽毛、麸皮按照I : 2 : I : 12比例混合,并将混合物与水按1.8 : I混合;
[0031] 2、厌氧发酵培养基配置:将果渣、米糠、甘薯粉渣按照3 : I : I混合,并将混合物与水按6:4混合;
[0032] 3、培养基灭菌:将培养基放入灭菌器中高温蒸汽灭菌;
[0033] 4、菌种激活:①按各菌种要求配置基础培养基分装:将配好的培养基分装于待接种三角瓶中,并塞上棉塞;③灭菌:在O. IMPa下灭菌15min,其后让其自然降压至常压,冷却,待接种;④接种:待培养基冷却至40°C接种,接种量为O. 5% ;⑤培养:将接种后的试管放入恒温培养箱内培养,培养完毕后备用;
[0034] 5、扩增培养:将母发酵剂扩大培养得到所需量的工作发酵剂,培养结束放入4°C的冰箱中保存备用; [0035] 6、接种:在无菌条件下,以一定的接种量向物料中加入生产发酵剂,好氧发酵菌种 的接种量为2%,厌氧发酵菌种的接种重量为3%,其中好氧发酵菌种包括米曲霉、栖土曲霉、黑曲霉、扣囊拟内孢酶,厌氧发酵菌种包括苏氨酸高产菌、植物乳杆菌、粪链球菌、酵母菌;
[0036] 7、好氧发酵条件:发酵温度35°C,时间2天,自动控温,间歇通风,通风量为I. 2立方米/min ;
[0037] 8、厌氧发酵条件:厌氧发酵为自然堆积发酵,时间为7天;
[0038] 9、低温干燥:采用低温气流干燥,最高物料温度为65°C,水分控制在14%以内;
[0039] 10、混合:将好氧条件和厌氧条件下产生的物质按4 : I比例混合;
[0040] 11、包装即可。

Claims (1)

1. ー种复合酶蛋白的制备方法,其特征是: (1)好氧发酵培养基配制:将血粉、皮革粉、羽毛、麸皮按照I : 2 : I : 12的重量比例混合,并将混合物与水按I. 8 : I的重量比例混合; (2)厌氧发酵培养基配制:将果渣、米糠、甘薯粉渣按照3 : I : I的重量比例混合,并将混合物与水按6 : 4的重量比例混合; (3)培养基灭菌:将培养基放入灭菌器中高温蒸汽灭菌; (4)菌种激活:①按好氧发酵菌种和厌氧发酵菌种配制基础培养基分装:将配好的培养基分装于待接种三角瓶中,并塞上棉塞;③灭菌:在O. IMPa下灭菌15min,其后让其自然降压至常压,冷却,待接种;④接种:待培养基冷却至40°C接种,接种量为O. 5% ;⑤培养:将接种后的试管放入恒温培养箱内培养,培养完毕后备用; (5)扩增培养:将母发酵剂扩大培养得到工作发酵剂,培养结束放入4°C的冰箱中保存备用; (6)接种:在无菌条件下,以好氧发酵菌种的接种量为1% _2%和厌氧发酵菌种的接种量为3%向物料中加入生产发酵剂,其中好氧发酵菌种为米曲霉、栖土曲霉、黑曲霉、扣囊拟内孢酶,厌氧发酵菌种为苏氨酸高产菌、植物乳杆菌、粪链球菌、酵母菌; (7)好氧发酵条件:发酵温度28-35°C,时间2天,自动控温,间歇通风,通风量为I. 2立方米/min ; (8)厌氧发酵条件:厌氧发酵为自然堆积发酵,时间为7天; (9)低温干燥:采用低温气流干燥,物料温度低于65°C,水分控制在14%以内; (10)混合:将好氧条件和厌氧条件下产生的酶蛋白按4 : I比例混合得到复合酶蛋白; (11)包装即可。
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