CN101336614A - 雷竹种胚培养基及组培育苗方法 - Google Patents
雷竹种胚培养基及组培育苗方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101336614A CN101336614A CNA2008100633850A CN200810063385A CN101336614A CN 101336614 A CN101336614 A CN 101336614A CN A2008100633850 A CNA2008100633850 A CN A2008100633850A CN 200810063385 A CN200810063385 A CN 200810063385A CN 101336614 A CN101336614 A CN 101336614A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- embryo
- bamboo
- medium
- culture
- culture medium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241001330002 Bambuseae Species 0.000 title claims abstract description 52
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 title claims abstract description 51
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 title claims abstract description 51
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 title claims abstract description 51
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 title claims abstract description 51
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 title claims abstract description 33
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 title abstract description 6
- 238000012364 cultivation method Methods 0.000 title 1
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 8
- NQQVFXUMIDALNH-UHFFFAOYSA-N picloram Chemical compound NC1=C(Cl)C(Cl)=NC(C(O)=O)=C1Cl NQQVFXUMIDALNH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims abstract description 4
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims abstract description 4
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims abstract description 4
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims abstract description 4
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- MKPCNMXYTMQZBE-UHFFFAOYSA-N 7h-purin-6-amine;sulfuric acid;dihydrate Chemical compound O.O.OS(O)(=O)=O.NC1=NC=NC2=C1NC=N2.NC1=NC=NC2=C1NC=N2 MKPCNMXYTMQZBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 3
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 3
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 claims abstract description 3
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 claims abstract description 3
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 238000005286 illumination Methods 0.000 claims description 6
- LUBJCRLGQSPQNN-UHFFFAOYSA-N 1-Phenylurea Chemical compound NC(=O)NC1=CC=CC=C1 LUBJCRLGQSPQNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000005595 Picloram Substances 0.000 claims description 4
- 239000012297 crystallization seed Substances 0.000 claims description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 3
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 claims description 3
- 230000035784 germination Effects 0.000 claims description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 3
- 238000011017 operating method Methods 0.000 claims description 3
- 239000003415 peat Substances 0.000 claims description 3
- 239000010451 perlite Substances 0.000 claims description 3
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 claims description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 claims description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 claims description 3
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 claims description 3
- 239000010455 vermiculite Substances 0.000 claims description 3
- 235000019354 vermiculite Nutrition 0.000 claims description 3
- 229910052902 vermiculite Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 3
- AFWYNOWVYKOMGZ-UHFFFAOYSA-N 8-benzyl-7h-purine-2,6-diamine Chemical compound N=1C2=NC(N)=NC(N)=C2NC=1CC1=CC=CC=C1 AFWYNOWVYKOMGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000004867 thiadiazoles Chemical class 0.000 claims description 2
- 241000011500 Phyllostachys praecox Species 0.000 abstract description 2
- 235000008545 Phyllostachys praecox Nutrition 0.000 abstract description 2
- PRPINYUDVPFIRX-UHFFFAOYSA-N 1-naphthaleneacetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CC=CC2=C1 PRPINYUDVPFIRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- NWBJYWHLCVSVIJ-UHFFFAOYSA-N N-benzyladenine Chemical compound N=1C=NC=2NC=NC=2C=1NCC1=CC=CC=C1 NWBJYWHLCVSVIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- HFCYZXMHUIHAQI-UHFFFAOYSA-N Thidiazuron Chemical compound C=1C=CC=CC=1NC(=O)NC1=CN=NS1 HFCYZXMHUIHAQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 abstract 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 abstract 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 13
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 9
- 238000009313 farming Methods 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 239000000701 coagulant Substances 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 2
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000035922 thirst Effects 0.000 description 1
- 238000012549 training Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- Y02P60/216—
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
一种雷竹种胚培养基,由下列原料及其份量组成:MS盐类+MT维生素+或0.3或1或3mg/L的BA即苄氨基腺嘌呤+0.1mg/L的NAA即α-奈乙酸+0.1mg/L的氨氯吡啶酸+0.001mg/L的TDZ即噻二唑苯基脲+20g/L的葡萄糖+100mg/L的肌醇+10mg/L的硫酸腺嘌呤+0.5g/L的麦芽抽提物,培养基的pH值为5.0-6.0。用本培养基组培育苗包括下列操作步骤:外植体的采集与选择、种子的洗净灭菌与取种胚、接种与培养、继代或移栽培养。用本培养基与组培方法,首创了雷竹这一经济价值高的中径散生竹的优良培养基与种苗组培方法,为雷竹的进一步研究、探索新的生物工程打下基础,实现快速而充足提供雷竹种苗的希望在即。
Description
【技术领域】
本发明涉及一种生物组织的培养基和组织培养方法。
【背景技术】
雷竹(Phyllostachys praecox),又名早竹、早园竹、雷公竹,禾本科竹亚科刚竹属竹种。雷竹是一种优良的笋用竹种,年亩产竹笋高达2吨,年亩产值超2万元人民币。雷竹通过覆盖、施肥、增温措施,不但增产显著,而且能提前在春节前的冬季出笋,给春节市场提供人们渴求的鲜笋,成为抢手年货和赠送礼品。雷竹的适应性强,在低山缓坡地、房前屋后地、废耕地、河滩地均宜栽种,近年我国南方农村自发开劈雷竹林地的热情很高,发展很快,但都是依靠传统的移栽母竹或竹鞭来繁殖,速度慢、用地多、运输不便、成本高并受季节限制,而且长此以往,无法克服竹种品质劣化和成片同时开花死亡的灾难性后果的产生。雷竹,作为一种中径的散生竹,至今未见通过组织培养、快速育成种苗,解决竹农急需雷竹苗的问题的有关报道和实物问世。
【发明内容】
本发明针对至今尚未成功地培育出雷竹组培苗的现实情况,存在着无法向急需雷竹种苗的竹农快速而充足提供的缺憾,本发明要解决的问题是提供一种雷竹种胚培养基和用该培养基培养雷竹种苗的整套方法。
解决上述问题的技术方案是:
本雷竹种胚培养基,由下列成分及其份量组成:MS盐类+MT维生素+或0.3或1或3mg/L的BA即苄氨基腺嘌呤+0.05或0.1或1mg/L的NAA即α-奈乙酸+0.05或0.1或0.5mg/L的氨氯吡啶酸+0.0001或0.001或0.01mg/L的TDZ即噻二唑苯基脲+20g/L的葡萄糖+100mg/L的肌醇+10mg/L的硫酸腺嘌呤+0.5g/L的麦芽抽提物,培养基的pH值为5.0-6.0。
本雷竹种胚培养基组培育苗方法包括如下操作步骤:
(1)外植体的采集与选择:取雷竹种子长度≥0.6cm,种胚长度1-2mm,选择心形期胚与鱼雷形期胚;
(2)种子的洗净、灭菌与取种胚:将刚采集的种子去掉外箨,用蒸馏水冲洗干净,放入1%浓度的NaClO的溶液中真空抽滤灭菌10min,再用无菌水冲洗5次,在无菌操作台上用解剖镜和小镊子剥去种皮,并用小刀尖挑取种胚;
(3)接种与培养:将切得的雷竹种胚接种到如权利要求1所述的雷竹种胚培养基中,暗培养2d后再置于光照周期16h/d、光照强度2400Lux的光下、环境温度25±2℃中继续培养26d,共28d,便出现新绿色的生有根的试管苗,发芽率达50%;
(4)继代或移栽培养:将该生根的试管苗进行继代培养,或置于驯化室,强光20000Lux下驯化2周,先用清水洗去根部培养基,种植于体积比为蛭石∶珍珠岩∶泥炭=1∶1∶1的盆装基质中,逐个套透明塑料袋,该袋每二天剪一小口,一周后弃袋移入温室栽种。
本发明的有益效果是:首创了雷竹这一中径散生竹用种胚作外植体组培育苗的整套方法,提供了雷竹种胚育苗的优良培养介质,为进一步探索雷竹的基因工程、拓宽外植体材料等奠定了基础。另一方面,为具有极高经济价值、竹农渴望栽种的雷竹苗,提供了充足而快速的供苗途径,而且还具有省地、运输方便、成本低、不受季节限制等优点。
【具体实施方式】
本发明下面结合实施例作进一步说明:培养基选用的原料及配比是除MS盐类、MT维生素外,还有BA(0、0.3、1、3mg/L)、NAA(0、0.05、0.1、1mg/L)、氨氯吡啶酸(0.05、0.1、0.5mg/L)、TDZ(0.0001、0.001、0.01mg/L),再加入权利要求1中记载的营养剂和凝固剂,这里MS、MT、营养剂、凝固剂为最佳的固定加入量以外(其中的MS、MT加入量按产品说明书执行),BA和NAA除都有不加和加的两种情况。BA还有0.3、1、3mg/L三种不同的加入量,NAA有0.05、0.1、1mg/L三种不同加入量,氨氯吡啶酸有0.05、0.1、0.5三种不同加入量,TDZ有0.0001、0.001、0.01三种不同加入量,培养基的pH值也分别有5、5.2、5.7、6四种情况,所以共组合了多种配方,分别置于160支试管内,对雷竹种胚进行组培,其生根发芽与褐化与否的情况如表1:
(表1)
从表中可看出,序号为7、3、6的生长竹苗的情况最好,所有八组试验,都没有褐化发生。由此选择序号7、6、3的配方组合成优选的pH值为5.7,优选的BA加入量度为0.3mg/L、NAA的加入量为0.1mg/L;其它原料的最佳加入量按权利要求确定值和MS、MT的说明书规定值办。上面给出的是一个点的数值的加入量,实际上从最低到最高的整个区间值的加入量也都是可行的。
本雷竹种胚组培育苗方法包括如下操作步骤:
(1)外植体的采集与选择:取雷竹种子长度≥0.6cm,种胚长度1-2mm,选择心形期胚与鱼雷形期胚;
(2)种子的洗净、灭菌与取种胚:将刚采集的种子去掉外箨,用蒸馏水冲洗干净,放入1%浓度的NaClO的溶液中真空抽滤灭菌10min,再用无菌水冲洗5次,在无菌操作台上用解剖镜和小镊子剥去种皮,并用小刀尖挑取种胚;
(3)接种与培养:将切得的雷竹种胚接种到如权利要求1所述的雷竹种胚培养基中,暗培养2d后再置于光照周期16h/d、光照强度2400Lux的光下、环境温度25±2℃中继续培养26d,共28d,便出现新绿色的生有根的试管苗,发芽率达50%;
(4)继代或移栽培养:将该生根的试管苗进行继代培养,或置于驯化室,强光20000Lux下驯化2周,先用清水洗去根部培养基,种植于体积比为蛭石∶珍珠岩∶泥炭=1∶1∶1的盆装基质中,逐个套透明塑料袋,该袋每二天剪一小口,一周后弃袋移入温室栽种。
Claims (2)
1、一种雷竹种胚培养基,其特征是由下列原料及其份量组成:MS盐类+MT维生素+或0.3或1或3mg/L的BA即苄氨基腺嘌呤+0.05或0.1或1mg/L的NAA即α-奈乙酸+0.05或0.1或0.5mg/L的氨氯吡啶酸+0.0001或0.001或0.01mg/L的TDZ即噻二唑苯基脲+20g/L的葡萄糖+100mg/L的肌醇+10mg/L的硫酸腺嘌呤+0.5g/L的麦芽抽提物,培养基的pH值为5.0-6.0。
2、如权利要求1所述的雷竹种胚培养基组培育苗方法,包括如下操作步骤:
(1)外植体的采集与选择:取雷竹种子长度≥0.6cm,种胚长度1-2mm,选择心形期胚与鱼雷形期胚;
(2)种子的洗净、灭菌与取种胚:将刚采集的种子去掉外箨,用蒸馏水冲洗干净,放入1%浓度的NaC10的溶液中真空抽滤灭菌10min,再用无菌水冲洗5次,在无菌操作台上用解剖镜和小镊子剥去种皮,并用小刀尖挑取种胚;
(3)接种与培养:将切得的雷竹种胚接种到如权利要求1所述的雷竹种胚培养基中,暗培养2d后再置于光照周期16h/d、光照强度2400Lux的光下、环境温度25±2℃中继续培养26d,共28d,便出现新绿色的生有根的试管苗,发芽率达50%;
(4)继代或移栽培养:将该生根的试管苗进行继代培养,或置于驯化室,强光20000Lux下驯化2周,先用清水洗去根部培养基,种植于体积比为蛭石∶珍珠岩∶泥炭=1∶1∶1的盆装基质中,逐个套透明塑料袋,该袋每二天剪一小口,一周后弃袋移入温室栽种。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNA2008100633850A CN101336614A (zh) | 2008-08-12 | 2008-08-12 | 雷竹种胚培养基及组培育苗方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CNA2008100633850A CN101336614A (zh) | 2008-08-12 | 2008-08-12 | 雷竹种胚培养基及组培育苗方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101336614A true CN101336614A (zh) | 2009-01-07 |
Family
ID=40210898
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CNA2008100633850A Pending CN101336614A (zh) | 2008-08-12 | 2008-08-12 | 雷竹种胚培养基及组培育苗方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101336614A (zh) |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101444188B (zh) * | 2009-01-13 | 2012-11-28 | 安徽农业大学 | 一种竹子种胚培养的消毒方法 |
CN104303996A (zh) * | 2014-08-07 | 2015-01-28 | 中国林业科学研究院亚热带林业研究所 | 红竹体细胞胚胎发生的方法 |
CN104542279A (zh) * | 2014-12-24 | 2015-04-29 | 广西大学 | 一种多刺多毛植物外植体的消毒灭菌方法 |
CN104541870A (zh) * | 2014-12-30 | 2015-04-29 | 中国林业科学研究院亚热带林业研究所 | 地被竹地毯式景观苗培育方法 |
CN105028212A (zh) * | 2015-08-28 | 2015-11-11 | 浙江农林大学 | 藓竺竹高效再生体系的建立方法 |
KR20180020475A (ko) * | 2016-08-18 | 2018-02-28 | 대한민국(농촌진흥청장) | 기내배양에 의한 대나무 대량증식 방법 |
CN108174753A (zh) * | 2018-03-09 | 2018-06-19 | 重庆市铜梁区林业技术指导站 | 雷竹的鞭向处理方法及装置 |
-
2008
- 2008-08-12 CN CNA2008100633850A patent/CN101336614A/zh active Pending
Cited By (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101444188B (zh) * | 2009-01-13 | 2012-11-28 | 安徽农业大学 | 一种竹子种胚培养的消毒方法 |
CN104303996A (zh) * | 2014-08-07 | 2015-01-28 | 中国林业科学研究院亚热带林业研究所 | 红竹体细胞胚胎发生的方法 |
CN104542279A (zh) * | 2014-12-24 | 2015-04-29 | 广西大学 | 一种多刺多毛植物外植体的消毒灭菌方法 |
CN104541870A (zh) * | 2014-12-30 | 2015-04-29 | 中国林业科学研究院亚热带林业研究所 | 地被竹地毯式景观苗培育方法 |
CN104541870B (zh) * | 2014-12-30 | 2016-05-25 | 中国林业科学研究院亚热带林业研究所 | 地被竹地毯式景观苗培育方法 |
CN105028212A (zh) * | 2015-08-28 | 2015-11-11 | 浙江农林大学 | 藓竺竹高效再生体系的建立方法 |
KR20180020475A (ko) * | 2016-08-18 | 2018-02-28 | 대한민국(농촌진흥청장) | 기내배양에 의한 대나무 대량증식 방법 |
KR101887221B1 (ko) * | 2016-08-18 | 2018-08-09 | 대한민국(농촌진흥청장) | 기내배양에 의한 대나무 대량증식 방법 |
CN108174753A (zh) * | 2018-03-09 | 2018-06-19 | 重庆市铜梁区林业技术指导站 | 雷竹的鞭向处理方法及装置 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN105340747A (zh) | 一种甘草无性快速繁殖方法 | |
CN102742495B (zh) | 甜樱桃矮化砧嫩枝扦插无纺布容器育苗方法及基质组合物 | |
CN104041273A (zh) | 一种中药材甜叶菊的盆栽驯化方法 | |
CN101336614A (zh) | 雷竹种胚培养基及组培育苗方法 | |
CN101946602A (zh) | 一种木薯的育苗移栽方法 | |
CN103931492A (zh) | 苹果砧木m9的组培快速育苗方法 | |
CN102657014A (zh) | 一种金花茶扦插育苗的方法 | |
CN102845313A (zh) | 狗枣猕猴桃的离体快速繁殖方法 | |
CN103222425A (zh) | 一种适宜南高丛蓝莓高效快繁技术 | |
CN104604694A (zh) | 一种改良海菜花组培苗根系的种苗培育和移栽方法 | |
CN102823502A (zh) | 毛葡萄离体快速繁殖培养方法 | |
CN103299904A (zh) | 一种北五味子人工种子制备和育苗方法 | |
CN103583360B (zh) | 一种定向诱导提高六道木苗木耐盐性的方法 | |
CN105613287A (zh) | 一种法斗木莲组织快繁育苗方法 | |
CN101637130B (zh) | 海南粗榧种胚培养育苗方法 | |
CN101717748B (zh) | 诱导裙带菜孤雌生殖幼孢子体体细胞产生雌配子体的方法 | |
CN105028084A (zh) | 一种梨树苗的高效育苗技术 | |
CN105875410B (zh) | 一种墨兰与虎头兰的杂交兰种苗的快速繁殖方法 | |
CN101703003B (zh) | 象草的快速繁殖方法 | |
CN117204342A (zh) | 一种辣椒种子培养及种苗培育的快速扩繁方法 | |
CN101444166A (zh) | 山胡萝卜简易快繁方法 | |
CN102090310B (zh) | 紫罗兰无土栽培基质 | |
CN103609444A (zh) | 常绿萱草的组织培养法 | |
CN103283504A (zh) | 用于梨树多倍体试管苗试管外嫁接成苗的方法 | |
CN102657098A (zh) | 樱桃砧木嫩茎段离体培养方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Open date: 20090107 |