CN101258899B

CN101258899B - 一种饲草防霉复合添加剂及其应用

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Publication number: CN101258899B
Application number: CN2008101040123A
Authority: CN
Inventors: 杨富裕; 韩建国; 丁武蓉; 玉柱; 张蕴薇; 代艳
Original assignee: China Agricultural University
Current assignee: China Agricultural University
Priority date: 2008-04-14
Filing date: 2008-04-14
Publication date: 2011-08-10
Anticipated expiration: 2028-04-14
Also published as: CN101258899A

Abstract

本发明公开了一种饲草防霉复合添加剂及其应用。本发明所提供的饲草防霉复合添加剂的主要组成为：0.09-0.4质量份的淀粉酶/纤维素酶、8.7-104质量份的可溶性亚硫酸盐和53.7-170质量份的可溶性硫酸盐、21.7-65质量份的膨润土。本发明的饲草防霉复合添加剂，能快速降低草捆温度，抑制霉菌等有害微生物生长，不仅能够使饲草高水分保存，还可以为家畜补充必需微量营养元素，弥补饲草本身矿物质元素的不足。使用本发明的复合添加剂，能够达到长期保存高品质饲草的目的，而且本发明的复合添加剂，制备方法简单、成本低、效益高、无副作用、使用安全方便，因此本发明复合添加剂适合于大范围的推广应用。

Description

一种饲草防霉复合添加剂及其应用

技术领域

本发明涉及一种饲草防霉复合添加剂及其应用。

背景技术

奶牛业等养殖业的快速发展需要大量高品质饲草料的支撑，因此优质牧草的保存是大多数国家畜牧业生产中的重要环节，通过高品质贮藏，可以全年均衡供应优质饲草。

紫花苜蓿等豆科牧草作为饲草的主要来源之一，主要产品仍然是干草，这是因为干草易调制、贮存、运输方便，调制历史很早、需要的设备简单、技术易掌握，是很易被广大农牧民接受的一种加工保存饲料的方法。在美国，苜蓿干草占干草总量的60％，且有80％以上的苜蓿干草是在收获后打成捆贮藏的。但是，当牧草含水量高于19％时打捆极易造成霉烂，而且豆科牧草的第2、3茬草大多正值雨季，水分含量高，不能达到长期保存的效果，牧草霉腐严重时造成家畜死亡；含水量低于18％时打捆易造成豆科牧草叶片的大量脱落，而且晾晒时间长，造成胡萝卜素、叶绿素、Vc等因光化学作用大部分被分解破坏，粗蛋白等营养成分的损失较大，消化率也快速下降，严重降低了牧草的质量和品质。可以通过添加干草防霉剂调制高水分干草，减少叶片脱落，阻止草捆发热和抑制霉菌生长，确保干草产品的营养成分含量不降低，提高草产品的饲用价值和经济价值。目前美国等许多发达国家已经通过在贮藏过程中添加防霉剂进行高水分打捆来达到高品质干草保存的目的。20世纪50年代末，国外学者就开始了对苜蓿干草高水分打捆贮藏添加剂的研究，1991年美国“干草和种植者”杂志调查表明，1989年13.4％的干草生产者在打捆干草时添加添加剂，1991年这个数字上升到17.8％。

目前的添加剂中，单一添加剂主要有有机酸类、铵类化合物、尿素和生物防腐剂等，这些添加物都具有抑制微生物活动的作用，进而提高干草保存品质，但许多产品由于成本高还不能被广泛应用。由于单一成份添加剂对干草的保存品质和效果不如复合添加剂的改善作用明显，因此，国内外研究者从草产品市场出发，根据各地区的气候情况，集中力量开展干草添加剂复合物的研发。

近年来，我国牧草生产及保存正处于商业化生产迅速发展阶段，目前牧草的贮藏也主要以调制成干草为主，而在添加防霉剂这方面起步较晚，主要原因是采用的许多干草添加剂成本高。因而研制出高效成本低廉的添加剂以有效地贮藏高水分干草已成为当前研究中的一个重要方面。

发明内容

本发明的目的是提供一种饲草防霉复合添加剂，该复合添加剂适用于贮存饲草。

本发明所提供的饲草防霉复合添加剂，其主要组成为：0.09-0.4质量份的淀粉酶和/或纤维素酶、8.7-104质量份的可溶性亚硫酸盐、53.7-170质量份的可溶性硫酸盐和21.7-65质量份的膨润土。

其中，淀粉酶和/或纤维素酶的主要作用为：增加牧草中可溶性糖的含量，提高消化率，还可以打乱微生物体内淀粉酶分泌体系；

可溶性亚硫酸盐的主要作用是亚硫酸根经氧化还原作用消耗草捆中氧气含量，破坏霉菌等有害微生物的生存繁殖空间，抑制好氧性微生物活动，氧气的消耗可以有效的抑制植物呼吸作用，从而减少因呼吸作用造成的营养损耗。可溶性亚硫酸盐具体可为亚硫酸钾和/或亚硫酸钠；

膨润土的主要作用为：一方面，在干草保存初期能快速吸附牧草中大量的水分，吸水后其体积可膨胀10-30倍，同时其强的吸附性可以吸附细菌、真菌类微生物；另一方面还可以丰富牧草中微量元素，弥补牧草中矿物元素的不足，为家畜日粮中补充更全面的微量元素，以提高家畜生产性能，提高非蛋白氮的使用安全性和利用率。具体可为钠基膨润土和/或钙基膨润土。

为了抑制霉菌，同时增加环境离子浓度，在细胞壁外形成高渗透压，造成微生物渗透失水，还可在上述饲草防霉复合添加剂中添加53.7-170质量份的可溶性硫酸盐。可溶性硫酸盐具体可为硫酸钾和/或硫酸钠。

所述的饲草防霉复合添加剂可含有所述硫酸钠52-156质量份，所述亚硫酸钾8.7-104质量份，所述硫酸钾1.7-14质量份，所述淀粉酶0.09-0.4质量份，所述钠基膨润土21.7-65质量份。

所述饲草防霉复合添加剂具体含有：所述硫酸钠为100质量份、所述亚硫酸钾为30.8质量份、所述硫酸钾为1.5质量份、所述a-淀粉酶为0.4质量份、所述钠基膨润土为61.5质量份。

为了提高牧草品质和适口性，上述任一种饲草防霉复合添加剂还可包括6.5-23.9质量份的葡萄糖，优选为23质量份的葡萄糖。

在生产高品质牧草时需要进行高水分牧草打捆，因为牧草低水分打捆时营养损失大(32％-66％)，尤其是苜蓿等豆科牧草，而且易造成叶片大量掉落。针对以上问题，本发明的饲草防霉复合添加剂特别适合于以下几种饲草的贮存：一是华北和东北地区第2、3茬牧草，该牧草的收获期大多正值雨季，土壤含水量高，调制干草容易发霉；二是空气湿度大地区需要长期贮存的干草；三是打捆的高水分牧草。

具体来讲，本发明的饲草防霉复合添加剂特别适合于保存含20％-30％(质量百分含量)水分的饲草。在实际应用中，饲草防霉复合添加剂与饲草的质量比具体可为1.15kg饲草防霉复合添加剂/1吨饲草。

本发明的饲草防霉复合添加剂，能快速降低草捆温度，抑制霉菌等有害微生物生长，不仅能够使饲草高水分保存，还可以为家畜补充必需微量营养元素，弥补饲草本身矿物质元素的不足。使用本发明的饲草防霉复合添加剂，能够达到长期保存高品质饲草的目的，而且本发明的饲草防霉复合添加剂，制备方法简单、成本低、效益高、无副作用、使用安全方便，因此本发明饲草防霉复合添加剂适合于大范围的推广应用。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明均为常规方法。

下述实施例中的百分含量，如无特别说明，均为质量百分含量。

实施例1、饲草防霉复合添加剂的制备

一、16种不同的饲草防霉复合添加剂的组成及其配比

本实施例中的16种饲草防霉复合添加剂均由Na₂SO₄、K₂SO₃、K₂SO₄、a-淀粉酶、钠基膨润土、葡萄糖6种组分组成。其中，a-淀粉酶是由北京双旋微生物培养基制品厂生产，企标号：02-42，活力单位为3000-5000U/g；钠基膨润土由信阳市平桥区广运膨润土制品厂生产。

每种饲草防霉复合添加剂中Na₂SO₄、K₂SO₃、K₂SO₄、a-淀粉酶、钠基膨润土5种组分的配比如表2所示，其中，各因素水平如表1所示。按照表2的质量份数分别将5种组分进行混匀，同时分别加入相同质量份(5份)的葡萄糖并混匀，制成16种饲草防霉复合添加剂。将其在室温保存。

表1、苜蓿干草添加剂试验因素水平设计表

注：各数值表示各组分的质量份。

表2、L₁₆(4⁵)正交表

二、16种饲草防霉复合添加剂的效果检测

表3、16种添加剂在25kg干草中的添加量

添加剂编号	1	2	3	4	5	6	7	8
									添加量(g)	9.21	14.65	24.2	33.1	23.6	22.7	22.61	24.25
添加剂编号	9	10	11	12	13	14	15	16

添加量(g)

20.7

21.6

33.25

33.61

28.65

35.21

29.1

35.2

按照下述方法检测表2中所示的16种饲草防霉复合添加剂的效果，下面以表2中第1种饲草防霉复合添加剂为例详细叙述实验方法，其余15种均按照相同的方法，参照表3中各自在25kg干草中的添加量进行检测：

第一种添加剂的配制：按表2中1所示的质量份将5种组分混匀，同时加入5质量份的葡萄糖并混匀，参照表3中量共配制9.21g添加剂。将此9.21g添加剂全部溶解于100ml水中，得到100ml添加剂水溶液；然后将得到的100ml水溶液喷加到25kg苜蓿干草(含水量27％)中，再将干草打捆。如此重复5次。将草捆在平均25℃、50％湿度的环境下保存60天，然后取样，进行实验室分析，主要分析干草中：保存过程中草捆每天的温度、干物质、粗蛋白、可溶性糖、灰分、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、非蛋白氮，霉菌数量，牧草在家畜中干物质体外降解率、粗蛋白体外降解率、中性洗涤纤维体外降解率、酸性洗涤纤维体外降解率等。

其中各种实验室分析方法如下：

1)、保存过程中草捆每天的温度：

每天上午10:00用温差电偶测量一次草捆的温度，每次测量测定位置为草捆中心和两侧的温度，直到草捆温度趋于稳定为止，每捆干草至少测3次不同位置的温度取其平均值。

2)、干物质：除去植物自由水和结合水所剩的部分为植物干物质。试验方法采用烘箱干燥法。将干草样品称重记下重量，在烘箱中65℃干燥48h直到恒重，并记录所称的重量以计算干物质(DM)含量。

3)、粗蛋白：采用全自动凯氏定氮仪Foss2300测定。实验步骤如下：1、样品制备：取保存后草捆样品，在60℃烘箱中干燥48-72h直到恒重并粉碎过1mm筛；2、样品称重：从中称取0.5g左右，记下重量W，然后全部移入消化管；3、消化：向消化管中加入10ml浓硫酸和3g左右的GuSO₄.5H₂O和K₂SO₄混合催化剂(其质量比为CuSO₄.5H₂O∶K₂5O₄＝1∶10)，将其放入消化炉中420℃消化1个小时左右直到样品呈淡绿色透明状；4、用凯氏定氮仪测定含氮量。

4)、可溶性糖：本试验采用蒽酮-硫酸比色法测定样品中可溶性碳水化合物含量。从保存后草捆取样进行测定。

用到的试剂如下：

蒽酮-硫酸溶液：将0.4g蒽酮溶于100ml88％硫酸(84份体积98％浓硫酸与16份体积蒸馏水混合)。冰箱内保存，现用现配。

80％乙醇溶液。

蔗糖标准溶液：准确称取0.25g蔗糖，用80％乙醇溶解，定容至250ml，然后稀释成40-100微克/毫升不同浓度的标准液。

测定：a)称取20g保存后的干草样品，加入180ml蒸馏水，高速打浆。用4层粗纱布过滤，离心。

b)用80％乙醇稀释不同倍数，制备待测液。

c)吸取待测液2.00ml于干燥试管中，放冰水中冷却2分钟，各试管中加入6.00ml蒽酮-硫酸溶液，摇匀，沸水浴5min显色。

d)冷却，分光光度计640nm比色。

标准曲线的制作：试管中分别加入0、10、20、40、60、80、100、120微克/毫升的不同浓度的蔗糖标准溶液，加80％乙醇调整各试管溶液均为2.00毫升，放冰水中冷却2分钟，各试管中再加入6ml蒽酮-硫酸溶液，摇匀，沸水浴5min。冷却后比色。

5)、灰分：采用干灰法。步骤：1.将坩埚烧至恒重：将干净坩埚放入高温炉中，在550℃±20℃下灼烧30min，取出，在空气中冷却约1min，放入干燥器中冷却30min，称重；再重复灼烧、冷却、称重，直至两次质量之差小于0.0005g为恒重；2.称样品：在已知质量的坩埚中称取2-5g干草样品(勿使样品高于坩埚深度的1/2，灰分质量应在0.05g以上)。3.炭化：将盛有样品的坩埚放在电炉上，坩埚盖须留一小缝隙，小心炭化，在炭化过程中，应在低温状态加热灼烧直至无烟，然后升温灼烧至样品无炭粒(勿着明火)。4.灰化及称恒重：将炭化至无烟坩埚用坩埚钳移入高温炉内，坩埚盖须留一小缝隙，在550℃±20℃下灼烧3h，待炉温降至200℃以下，取出，在空气中冷却约1min，放入干燥器中冷却30min，称重。再同样灼烧1h，冷却、称重，直至两次质量之差小于0.001g为恒重。5.计算灰分。

6)、中性洗涤纤维(NDF)：采用ANKOM2000纤维仪(美国ANKOM公司)进行。具体步骤：1.保存后干草取一部分样品在60℃烘箱中干燥48-72h直到恒重并粉碎，准确称取粉碎样品(通过40目标准铜筛)1-2.0g左右，装入已烘干称重的纤维袋中，封口并置于纤维仪。2.加入室温的中性洗涤剂100ml和数滴十氢化萘(消泡剂)以及0.5g无水亚硫酸钠。3.纤维仪测定。

7)、酸性洗涤纤维(ADF)：采用ANKOM2000纤维仪进行。具体步骤：1.保存后干草取一部分样品在60℃烘箱中干燥48-72h直到恒重并粉碎，准确称取粉碎样品(通过40目标准铜筛)1-2.0g左右，装入已烘干称重的纤维袋中，封口并置于纤维仪。2.加入室温的酸性洗涤剂100ml和数滴十氢化萘(消泡剂)以及0.5g无水亚硫酸钠。3.纤维仪测定。

8)、非蛋白氮：保存后干草取一部分样品在60℃烘箱中干燥48-72h直到恒重并粉碎过1mm筛为测定样品。配制10％三氯乙酸溶液，1％硼酸溶液，40％NaOH溶液，配制并标定0.1mol/L盐酸溶液。准确称取0.5g干草样品，置于锥形烧瓶(125ml)中，加入50ml蒸馏水，保持30分钟；然后加10ml 10％三氯乙酸溶液(TCA)，保持20-30分钟；重力下过滤；用三氯乙酸溶液冲洗两次；滤纸转入凯氏瓶中，凯氏定氮仪测氮。以滤纸为对照，计算含氮量，为真蛋白含量。用总氮减去真蛋白氮含量等于非蛋白氮。

9)、霉菌数量：采用平皿计数方法，测定霉菌数。步骤：1.采样：在草捆的不同部位用取样器采取，放入自封袋中，冷藏。2.以无菌操作称取样品25g，放入含有225ml灭菌稀释液的玻璃塞三角瓶中，置振荡器上，振荡30min，即为1∶10的稀释液。3.用灭菌吸管吸取稀释液10ml，注入带玻璃珠的试管中，置微型混合器上混合3min，或注入试管中，另用带橡皮乳头的1ml灭菌吸管反复吹吸50次，使霉菌孢子分散开。4.取1ml稀释液，注入含有9ml灭菌稀释液试管中，另换一支吸管吹吸5次，此液为1∶100稀释液。5.按上述操作顺序作10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1ml灭菌吸管，根据对样品污染情况的估计，选择三个合适稀释度，分别在作10倍稀释的同时，吸取1ml稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度作两个平皿，然后将凉至45℃左右的高盐察氏培养基注入平皿中，充分混合，培养3天后开始观察，培养观察一周。6.计算：通常选择菌落数的30-100个之间的平皿计数，同稀释度的2个平皿的菌落平均数乘以稀释倍数，即为每克样品中所含霉菌数。

10)、家畜中干物质体外降解率：

步骤：

1.制作样品纤维袋：将纤维袋用6B铅笔编号并做记录，将编号的纤维袋在65℃烘箱中烘干至恒重后记录数据重量。取0.5g左右在60℃烘箱中干燥48-72h直到恒重并粉碎过1mm筛的保存后干草样品，将其无损失地装入一个纤维消化袋中，然后用封口机(温州机械设备有限公司)封口。

2.配制培养液：试验动物为三头带有永久性瘤胃瘘管的西门塔儿肉牛。瘤胃液在早晨饲喂前采集，并将采的瘤胃液用四层纱布过滤，将过滤的瘤胃液迅速加入装有经CO₂饱和并预热(39℃)的缓冲液的玻璃瓶中，配制成混合培养液(瘤胃液与缓冲液的比例为1∶2)。

3.试验测定方法：试验样品的体外培养采用活体外两阶段法，将制备好的样品袋放入100ml的玻璃培养管中，每根管放3个样品纤维袋，其中，两个是加入样品的样品袋，一个是不加样品的空纤维袋作为空白对照，用塑料封口机封口。每个样品三个重复。混合培养液边加热边用磁力搅拌器进行搅拌，同时通入经除氧铜柱除氧的CO₂，向培养管中通入CO₂，同时用自动加液器向培养管加入70ml混合培养液，迅速盖好橡胶盖，放入39℃恒温水浴箱中培养48h。发酵开始6h内每小时摇动1次，以后每2h摇动1次，12h后每4h摇动1次。发酵48h后倒去全部培养液，取出装入样品的纤维袋，迅速用冷水冲洗，以终止微生物发酵反应。然后在每个含有样品纤维袋的管中加入35ml的新鲜的胃蛋白酶溶液(0.2％)，但无需通入CO₂然后在39℃水浴锅厌氧培养48h，并且每天振动两次。培养完取出后用水洗净，105℃烘干12～24h，称量和计算样品干物质消化率。

11)、粗蛋白体外降解率：将体外消化后的样品105℃烘干后用凯氏定氮仪测定含氮量，CP消失率％＝[样品CP-(未消化的CP-空白CP)]/样品CP*100。

12)、中性洗涤纤维体外降解率：将体外消化后的样品105°烘干后，测定NDF。方法同测定NDF相同，NDF消失率％＝(样品NDF-未消化的NDF)/样品NDF*100。

13)、酸性洗涤纤维体外降解率等：将体外消化后的样品105°烘干后，测定ADF。方法同测定ADF相同，ADF消失率％＝(样品ADF-未消化的ADF)/样品ADF*100。

上述13个实验中，每个实验中测试5捆干草。

其余15种添加剂均按照上述方法进行检测，并按照上述方法分别检测16种添加剂分别添加到25％含水量、30％含水量的苜蓿干草中的情况。

数据用SPSS12.0软件及综合评判法进行分析，根据正交设计的部分实验反应全面试验的优点，评价16种添加剂中每个成分对高蛋白、可溶性糖、干物质、体外消化率、灰分含量，低温度、纤维、非蛋白氮、微生物含量的影响，采用综合平衡法，选择各个成分的理想比例，最终得出最佳的复合添加剂。

实验结果如下：

表4、16种添加剂分别添加到含25％水分苜蓿干草中的结果

添加剂编号

干物质％

粗蛋白％

可溶性糖g/kg

灰分％

中性洗涤纤维％

酸性洗涤纤维％

非蛋白氮g/kg

霉菌数量×10⁵g^-1DM

家畜中干物质体外降解率％

粗蛋白体外降解率％

中性洗涤纤维体外降解率％

酸性洗涤纤维体外降解率％

1

8648±0.45

20.09±0.11

18.34±0.57

10.65±0.34

46.10±0.36

30.20±0.48

6.27±0.75

3.18±0.48

67.27±1.03

88.96±0.74

45.44±0.77

30.97±0.89

2

87.72±0.59

20.00±0.40

21.86±0.50

11.85±0.75

46.22±0.43

29.58±0.45

5.85±0.20

2.99±1.23

67.04±0.33

89.51±0.85

40.65±0.97

29.97±0.88

3

87.69±0.55

20.35±0.39

22.00±0.57

10.84±0.54

50.83±0.56

30.13±0.54

5.69±0.20

2.31±0.43

65.38±0.61

86.94±1.21

41.89±0.69

35.03±0.77

4

87.99±0.54

20.26±0.59

23.67±0.93

12.82±0.54

46.19±0.65

30.04±0.64

5.53±0.44

2.58±1.03

66.43±1.63

88.99±1.25

43.54±0.53

27.76±1.53

5

87.96±0.55

20.42±0.57

22.52±0.45

10.95±0.57

46.03±0.33

28.62±0.34

6.20±0.15

2.07±0.73

67.03±0.48

89.21±0.78

43.32±0.55

35.64±0.89

6

88.78±0.46

20.40±0.54

26.04±0.66

13.47±0.45

46.36±0.48

30.47±0.78

5.55±0.22

1.21±0.83

66.43±1.49

90.45±1.35

42.06±0.85

30.54±0.78

7

88.49±0.43

20.21±0.74

24.98±0.33

10.86±0.65

46.49±0.55

30.32±0.79

5.45±0.28

1.92±0.93

66.59±0.93

88.34±0.49

42.14±0.64

33.64±0.89

8

88.65±0.62

20.32±0.58

23.97±0.75

10.70±0.37

47.97±0.34

29.35±0.44

5.59±0.45

1.82±0.44

64.98±0.21

90.01±0.90

41.03±0.64

25.32±0.83

9

88.56±0.45

19.77±0.65

24.45±0.47

10.71±0.78

45.93±0.71

28.92±0.78

4.65±0.29

2.73±1.31

66.93±0.34

90.75±0.50

41.34±0.63

30.54±0.96

10

88.86±0.64

19.910.74

24.90±0.66

16.56±0.38

44.890.44

29.060.87

4.18±0.16

1.19±0.83

66.78±0.95

91.09±1.45

38.32±0.17

29.44±0.56

11

88.68±0.56

20.13±0.79

23.53±0.45

18.83±0.23

46.83±0.44

29.30±0.90

4.77±0.66

1.21±0.93

66.98±0.63

89.48±0.93

43.34±0.69

27.53±0.75

12

89.07±0.52

20.28±0.73

24.45±0.33

17.07±0.67

46.43±0.87

28.95±0.46

4.70±0.28

0.98±0.73

67.61±0.84

91.04±0.80

43.49±0.68

31.45±0.79

13

88.60±0.47

20.490.48

20.45±0.53

12.86±0.55

46.61±0.66

29.93±0.18

4.93±0.55

1.21±0.74

67.33±0.39

90.01±0.53

43.95±0.34

31.38±0.17

14

89.00±0.29

20.02±0.47

19.92±0.56

11.63±0.68

45.55±0.46

30.92±0.34

5.00±0.15

1.02±0.63

66.98±0.74

90.27±0.64

40.30±0.41

33.45±0.95

15

89.03±0.45

19.53±0.45

21.19±0.70

18.26±0.66

45.62±0.47

30.36±0.70

4.70±0.20

0.99±0.13

64.98±0.95

89.93±0.63

38.45±0.62

28.84±0.91

16

89.04±0.66

20.36±0.56

20.03±0.41

15.88±0.66

44.87±0.69

30.36±0.48

5.46±0.45

0.97±0.17

64.83±0.73

89.73±0.99

39.74±0.72

28.55±0.74

表5、16种添加剂分别添加到25％水分干草后草捆贮藏过程中每天的温度

15

31.8±1.66

29.4±0.45

32.9±3.74

40.4±2.86

42.8±3.65

42.9±1.74

41.6±1.96

35.7±133

34.5±0.84

30.5±0.32

30.7±0.19

30.6±0.16

30.2±0.84

30.6±0.77

16

30.1±0.67

28.5±1.73

30.4±1.83

39.8±3.73

42.8±3.83

42.4±3.95

37.8±2.63

35.4±2.77

31.5±1.94

30.3±0.63

30.5±0.94

30.6±0.63

30.3±0.73

30.4±0.62

表6、16种添加剂分别添加到含30％水分苜蓿干草中的结果

添加剂编号

干物质％

粗蛋白％

可溶性糖g/kg

灰分％

中性洗涤纤维％

酸性洗涤纤维％

非蛋白氮g/kg

霉菌数量×10⁵g^-1DM

家畜中干物质体外降解率％

粗蛋白体外降解率％

中性洗涤纤维体外降解率％

酸性洗涤纤维体外降解率％

1

87.68上0.38

19.40±0.84

21.29±0.33

13.65±0.21

48.14±0.90

27.89±0.57

5.83±0.35

2.65±0.31

67.06±1.70

88.33±0.97

45.13±1.13

30.28±1.46

2

87.79±0.12

19.05±0.76

22.45±0.98

14.83±0.43

46.64±0.99

29.74±0.70

5.35±0.68

3.43±1.23

66.05±1.33

89.46±1.09

39.76±0.43

29.75±0.53

3

88.18±0.83

19.49±0.30

21.49±0.32

12.96±0.17

46.99±0.29

29.74±0.23

5.80±0.20

2.65±0.78

65.40±0.95

86.59±1.53

41.62±2.89

32.48±3.09

4

87.52±0.99

19.23±0.33

20.71±0.66

16.46±0.73

48.65±0.62

28.46±0.47

5.87±0.67

2.94±2.32

66.39±2.76

88.99±3.30

43.38±1.62

26.97±2.86

5

88.03±0.45

19.44±0.28

22.07±0.20

16.52±0.81

47.45±0.64

30.19±0.81

5.80±0.30

2.43±2.01

66.97±2.99

88.44±1.27

43.97±0.96

34.97±0.42

6

88.38±0.87

19.51±0.10

24.83±0.90

13.03±0.63

46.87±0.49

28.78±0.54

4.97±0.58

1.45±1.23

66.51±1.08

90.25±1.41

41.45±2.38

28.45±2.29

7

88.06±0.32

19.18±0.40

22.03±0.11

14.55±0.77

48.05±1.11

30.43±0.23

5.23±0.41

3.87±0.76

65.74±2.99

86.01±0.44

41.18±1.60

32.07±1.84

8

88.42±0.10

18.95±0.22

20.75±0.36

13.80±0.10

47.58±0.89

28.83±0.38

4.76±0.81

3.32±0.98

64.24±1.56

89.78±1.68

39.19±2.74

24.53±1.12

9

88.58±0.32

19.18±0.18

22.21±0.47

14.29±0.63

45.37±0.49

28.97±0.12

5.04±0.94

3.31±1.54

66.49±1.22

90.54±1.82

40.25±2.58

29.73±1.24

10

87.97±0.72

19.03±0.37

25.290.49

13.40±0.16

46.23±0.28

29.32±0.19

4.70±0.57

2.10±0.32

66.14±2.56

91.44±1.45

37.63±2.87

27.02±3.46

11

87.99±0.24

19.33±0.20

26.640.21

15.99±0.29

46.29±0.79

28.38±0.78

5.02±0.69

1.60±0.29

65.50±1.95

88.62±2.14

39.57±2.92

25.77±3.80

12

88.39±0.77

19.38±0.55

25.42±0.31

15.60±0.97

45.17±0.15

28.93±0.27

4.62±0.81

1.47±0.99

66.39±1.27

88.36±3.37

39.58±2.09

28.28±2.47

13

87.94±0.72

19.09±0.65

23.50±0.63

11.33±0.13

47.18±0.28

28.97±0.39

4.52±0.47

1.98±1.45

66.83±1.36

89.43±3.19

43.23±2.27

29.87±2.33

14

88.27±0.28

18.99±0.37

22.61±0.78

14.10±0.18

46.62±0.54

30.66±0.11

5.22±0.15

2.19±1.75

66.39±2.09

89.38±1.02

39.80±2.50

31.54±2.68

15

88.27±0.49

19.14±0.26

22.65±0.99

13.11±0.97

47.16±0.38

30.31±0.19

5.61±0.38

1.99±3.01

64.46±2.56

88.81±0.65

36.84±1.52

26.23±0.72

16

88.00±0.83

18.84±0.93

22.12±0.30

10.61±0.47

47.14±0.30

29.91±0.44

5.17±0.33

2.07±1.87

64.91±2.38

88.65±5.13

38.61±2.39

26.96±3.94

表7、16种添加剂分别添加到30％水分干草后草捆贮藏过程中每天的温度

12

29.4±0.83

27.2±0.38

28.4±0.77

31.9±3.56

35.2±5.20

39.2±5.25

41.8±2.64

38.5±2.07

32.2±1.48

32.2±1.84

30.7±0.63

30.4±0.45

31.4±0.48

31.1±034

13

30.2±0.29

28.6±0.34

29.7±0.52

37.8±3.67

42.5±0.93

38.7±2.99

39±1.63

34.9±1.92

32.1±1.56

31.2±0.90

29.8±0.17

29.9±0.44

31.7±0.18

31.4±0.67

14

30±0.71

29±0.42

30.7±1.74

37.2±3.19

44.4±2.28

37.9±1.54

40.1±3.99

34±0.99

30.9±0.64

30.1±0.29

303±0.45

30.1±0.47

31.7±0.68

30.8±0.30

15

31.2±1.63

28.5±0.85

32.1±3.94

40.7±2.61

43.2±3.41

42.4±1.37

41.4±1.17

35.6±1.50

32.6±0.90

30.7±0.64

30.5±0.43

30.6±0.61

31.2±0.40

30.9±0.21

16

30±1.03

28.4±1.23

30.8±1.41

39.9±4.11

43.3±3.12

42.9±3.16

37.6±2.11

36.4±2.17

31.7±1.18

30.5±0.50

30.9±0.29

30±0.22

31.2±0.36

30.9±0.37

根据正交表优化分析，得出能提高高水分苜蓿干草保存营养品质的理想添加剂b的组成为：硫酸钠100质量份、亚硫酸钾30.8质量份、硫酸钾1.5质量份、a-淀粉酶0.4质量份、钠基膨润土61.5质量份，另外添加葡萄糖23质量份。由于正交试验的特点，可以根据已试验的16个添加剂，选出最优比例。结果表明，16种添加剂中第12个综合效果最好，该理想添加剂与之相近。

三、对以上最佳添加剂b的效果检测

(一)检测方法：

按照25kg干草中添加28.25g添加剂的标准进行添加实验。

将各组分按照添加剂b中的质量份数进行称取并混匀，共28.25g，将其全部溶解于100ml水中，得到100ml添加剂水溶液；然后用喷雾器将100ml添加剂水溶液均匀喷于水分含量约27％的25kg苜蓿干草中，喷洒过程中将草小心翻动一次，以便能尽量喷洒完全，之后进行打捆，设置无添加剂的27％含水量(记作CKg)和17％含水量(记作CKd)干草为对照。实验设5次重复。从打捆之日起，每天上午10:00用温差电偶测定草捆温度，直到草捆温度趋于稳定为止。

在贮藏过程中，分别在保存60天时取样。取样完成后立即装入塑料袋中用冰块冷冻运回实验室进行分析。测定指标为以上所有指标，测定方法相同。

(二)检测结果

添加剂b的检测结果如下：

测得的各项指标值如表8、9所示。

表8、保存60天后苜蓿干草的成分

DM％

CP％

WSCg/kg

灰分％

NDF％

ADF％

NPNg/kg

霉菌数量×10⁵g^-1DM

家畜中干物质体外降解率％

粗蛋白体外降解率％

中性洗涤纤维体外降解率％

酸性洗涤纤维体外降解率％

CKd

89.07±0.78

17.57±0.45

19.56±0.87

12.87±0.77

44.32±0.31

29.60±0.92

5.14±0.18

2.21±0.12

67.1±0.83

88.4±0.67

46.5±0.34

34.8±0.83

CKg

87.47±0.65

18.34±0.45

17.80±0.74

15.00±0.30

46.89±0.23

29.93±0.53

6.24±0.33

4.01±0.47

65.8±1.32

88.2±1.54

41.8±1.61

27.7±0.90

有复合添加剂的干草

88.41±0.48

20.41±0.83

25.42±0.19

16.52±0.25

45.23±0.34

28.90±0.51

4.53±0.55

1.02±0.34

66.4±1.21

90.02±0.89

39.6±0.76

29.3±0.84

表9、保存过程中不同天数温度变化

1天

2天

3天

4天

5天

6天

7天

8天

9天

10天

11天

12天

13天

14天

CKd

28.6±0.45

27.9±0.23

27.5±0.87

31±0.56

25.8±0.23

23.3±0.34

26.1±0.56

25.6±0.39

26.4±0.22

27.1±0.60

28.0±0.59

27.6±0.67

29.7±0.67

28.9±0.33

CKg

33.1±0.23

32.5±0.13

46±0.34

50.4±0.33

48.6±0.98

41.1±0.38

41.3±0.67

36.9±0.33

35.3±0.50

31.6±0.77

29.5±0.38

29.7±0.39

31.3±0.59

31.8±0.12

有复合添加剂的干草

29.4±0.56

27.2±0.15

28.4±0.56

31.9±0.34

35.2±0.74

39.2±0.59

41.8±0.49

38.50.45

32.2±0.28

32.2±0.43

30.7±0.60

30.4±0.33

31.4±0.34

31.1±0.45

结果表明，该添加剂b保存30％及以下含水量的苜蓿干草的效果最佳，而且保存的干草中的营养成份比较高，保存后粗蛋白20.41％、可溶性糖25.42g/kg、霉菌1.02×10⁵g^-1DM、非蛋白氮4.53g/kg、灰分16.52％、蛋白体外消化率90.02％。添加了添加剂b的干草与高水分对照相比，添加剂b使草捆保存期温度降低、最高温度值降低、温度高峰期推迟，干草霉菌数量、纤维和非蛋白氮降低，营养成分和蛋白消化率增加。各营养成分也高于低水分对照。

四、另外试验得到其余两种添加剂，其效果低于最优添加剂b，但相对其余添加剂也有较好的效果：

添加剂a：硫酸钠156质量份、亚硫酸钾104质量份、硫酸钾14质量份、a-淀粉酶0.4质量份、钠基膨润土65质量份、葡萄糖23.9质量份。该添加剂a保存30％及以下含水量的苜蓿干草效果最佳，而且保存的干草中的营养成份比较高，保存后粗蛋白18.84％、可溶性糖22.12％、霉菌2.07×10⁵g^-1DM、非蛋白氮5.17g/kg、灰分10.61％、蛋白体外消化率88.65％。

添加剂c：硫酸钠52质量份、亚硫酸钾8.7质量份、硫酸钾1.7质量份、a-淀粉酶0.09质量份、钠基膨润土21.7质量份、葡萄糖6.5质量份。该添加剂c保存25％及以下含水量的苜蓿干草的效果最佳，而且保存的干草中的营养成份比较高，保存后粗蛋白19.05％、可溶性糖21.29g/kg、霉菌2.65×10⁵g^-1DM、非蛋白氮5.83g/kg、灰分13.65％、蛋白体外消化率88.33％。

实施例2、添加剂b的最优添加量的确定

将实施例1获得的最佳添加剂b，分别以0.5kg、1kg、1.15kg、1.5kg添加剂/t干草的比例，添加到含水量为27％左右的苜蓿干草中，然后将苜蓿干草打捆保存60天，按照实施例1中所述方法进行取样并检测各项营养指标。

实验设3次重复，测得的实验数据如表10所示：

表10、添加剂b的最佳添加量的确定(平均值±标准差)

添加剂的添加里(kg/t干草)

干物质％

粗蛋白％

可溶性糖g/kg

灰分％

中性洗涤纤维％

酸性洗涤纤维％

非蛋白氮g/kg

霉菌数量×10⁵g^-1DM

家畜中干物质体外降解率％

粗蛋白体外降解率％

中性洗涤纤维体外降解率％

酸性洗涤纤维体外降解率％

0.5kg

88.20±0.34

19.87±0.77

24.34±0.12

15.01±0.49

45.43±0.18

28.90±0.20

5.47±0.35

1.52±0.94

66.07±0.29

89.77±0.59

39.37±0.23

29.01±0.22

1kg

88.26±0.33

20.31±0.48

25.31±0.46

16.32±0.30

45.22±0.49

28.99±0.14

4.98±017

1.27±0.39

66.18±0.55

89.90±0.38

39.54±0.45

29.21±0.49

1.15kg

88.97±0.48

20.41±0.83

25.42±0.19

16.52±0.25

45.23±0.34

28.90±0.51

4.53±0.55

1.02±0.34

66.46±1.21

90.02±0.89

39.6±0.76

29.3±0.84

1.5kg

89.05±0.22

19.76±0.31

25.11±0.18

16.65±0.12

46.29±0.19

29.11±0.49

4.66±079

1.26±0.49

66.00±0.50

90.00±0.69

39.57±0.86

29.03±0.19

数据用SPSS12.0软件及综合评判法进行分析，对于1吨干草，1.15kg添加剂的添加量与其它添加量相比，可使苜蓿干草中有较高的干物质保存率、粗蛋白和可溶性糖，有略高的粗蛋白、干物质、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维的体外消化率，同时具有较低的粗纤维含量、非蛋白氮和霉菌数量。

实验结果表明，复合添加剂在含有27％水份干草中的最佳添加量为1.15kg添加剂/t干草。

Claims

1.一种饲草防霉复合添加剂，其主要组成为：0.09-0.4质量份的淀粉酶和/或纤维素酶、8.7-104质量份的可溶性亚硫酸盐、53.7-170质量份的可溶性硫酸盐和21.7-65质量份的膨润土。

2.根据权利要求1所述的饲草防霉复合添加剂，其特征在于：所述可溶性亚硫酸盐为亚硫酸钾和/或亚硫酸钠。

3.根据权利要求2所述的饲草防霉复合添加剂，其特征在于：所述膨润土为钠基膨润土和/或钙基膨润土。

4.根据权利要求3所述的饲草防霉复合添加剂，其特征在于：所述可溶性硫酸盐为硫酸钾和/或硫酸钠。

5.根据权利要求4所述的饲草防霉复合添加剂，其特征在于：所述硫酸钠52-156质量份，所述亚硫酸钾8.7-104质量份，所述硫酸钾1.7-14质量份，所述淀粉酶0.09-0.4质量份，所述钠基膨润土21.7-65质量份。

6.根据权利要求4所述的饲草防霉复合添加剂，其特征在于：硫酸钠100质量份、亚硫酸钾30.8质量份、所述硫酸钾1.5质量份、α-淀粉酶0.4质量份、钠基膨润土61.5质量份。

7.根据权利要求1-6任一所述的饲草防霉复合添加剂，其特征在于：所述添加剂还包括6.5-23.9质量份的葡萄糖。

8.根据权利要求7所述的饲草防霉复合添加剂，其特征在于：所述葡萄糖为23质量份。

9.权利要求1-8任一所述饲草防霉复合添加剂在贮藏饲草中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述饲草的水分含量为30％及以下；所述百分含量为质量百分含量。

11.根据权利要求9或10所述的应用，其特征在于：所述饲草防霉复合添加剂与所述饲草的使用配比为1.15kg饲草防霉复合添加剂∶1吨饲草。