CN101257908A

CN101257908A - 腹膜透析液

Info

Publication number: CN101257908A
Application number: CNA2006800130780A
Authority: CN
Inventors: 太田人水; 花谷利春; 福田惠温; 三轮尚克; 三宅俊雄
Original assignee: Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo KK
Current assignee: Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo KK
Priority date: 2005-04-20
Filing date: 2006-04-13
Publication date: 2008-09-03
Anticipated expiration: 2026-04-13
Also published as: CN101257908B; WO2006115067A1; KR101338766B1; US20090023684A1; EP1878430A4; JP2012140468A; US20140148409A1; JPWO2006115067A1; KR20080008358A; EP1878430A1; EP1878430B1; US9066968B2; JP5507609B2

Abstract

本发明要解决的技术问题是提供一种脱水性良好、生物适应性高和存储稳定性好的腹膜透析液。该技术问题通过提供含有一种或两种以上选自环黑曲霉糖基黑曲霉糖、环麦芽糖基麦芽糖以及L－抗坏血酸2－葡萄糖苷的腹膜透析液得到解决。

Description

腹膜透析液

技术领域

本发明涉及适于肾不全患者等使用的腹膜透析液，更具体地，涉及一种具有良好生物适应性的含有一种或两种以上选自环黑曲霉糖基黑曲霉糖、环麦芽糖基麦芽糖以及L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的糖的腹膜透析液。

背景技术

腹膜透析是肾不全患者用来维持生命的重要方法，该方法通过向患者腹腔内注入透析液来交换或除去患者腹膜的毛细血管内的废弃物和水分等。与肾不全的另一个代表性疗法血液透析相比，由于其具有不一定需要大型装置设备和医生护士帮助的优点，受到希望回归社会生活的患者及远离医疗设备访问困难的患者的广泛接受。

然而，腹膜透析疗法具有以下列举的数种缺点。首先，现在市售的几乎全部腹膜透析液都含有葡萄糖作为渗透压剂，这导致产生多种问题。例如，由于患者体内会吸收葡萄糖，导致产生血糖值上升、脂质代谢异常、腹膜硬化引起的脱水不良等问题。此外，还存在调节透析液pH的关联问题。在现在的腹膜透析液中，为了维持高压蒸气灭菌时透析液中的葡萄糖的稳定性，必须将透析液调成近酸性的，但是向腹腔内频繁注射酸性液体，将对腹腔或腹膜间皮细胞产生不良影响。

此外，已知在将含有葡萄糖的透析液调成酸性的情况中，经过高压蒸气灭菌或长期保存等将在腹膜透析液中产生对人体有害的葡萄糖分解物5-羟甲基糖醛(例如，参见特开平8-71146号专利公报)。因此，一直以来研究者研究了如何较少产生葡萄糖分解物的方法。例如，除去透析液中的上述分解物的方法、灭菌方法及灭菌条件的改变等。然而，作为主要的渗透压剂，只要透析液中存在葡萄糖，透析液中就不可能完全不含有葡萄糖分解产物。此外，含有葡萄糖的透析液腹腔内给药后，一旦长时间没有交换透析液，葡萄糖将被吸收到毛细血管内，随时间推移产生脱水性能低下的缺点。

因此，提出了使用葡萄糖以外的糖作为渗透压剂。例如，低聚糖及多糖类、氨基酸及淀粉加水分解物的葡萄糖聚合物等(例如，参见特开平10-94598号专利公报、特开平8-85701号专利公报)。然而，这些渗透压剂价格非常高，并且，没有充分确认其在长期使用的生物安全性，并且由于易分解。由于这些原因，这些渗透压剂还没有在产业中实际应用。此外，还提出了含有氨基糖、L-抗坏血酸的物质作为渗透压剂(例如，参见特开平11-71273号专利公报)，这些物质在腹膜透析液的存储稳定性方面具有加压灭菌等时候分解、与其他成分发生反应等、会产生褐变物质等的问题。因此希望开发一种采用更好的渗透压剂的腹膜透析液。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种生物适应性高、具有良好的脱水性和存储稳定性的腹膜透析液。

本发明人为了解决上述技术问题，锐意研究，在电解质和渗透压剂为主要成分的腹膜透析液方面，意外地发现使用一种或两种以上选自环黑曲霉糖基黑曲霉糖、环麦芽糖基麦芽糖以及L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的糖作为渗透压剂可配制出生物适应性高、具有良好的脱水性和存储稳定性的腹膜透析液，由此完成了本发明。

根据本发明的组成可得到生物适应性高、具有良好的脱水性和存储稳定性的腹膜透析液。也就是说，能够实现脱水量的增加和脱水时间的延长。并且，能抑制以葡萄糖为代表的成分的分解及褐变物质等的生成，因而得到较少对生物有害的物质、具有良好存储稳定性的腹膜透析液。此外，得到对生物膜及腹膜间皮细胞来说损害较少的腹膜透析液。而且，本发明的腹膜透析液由于不含有葡萄糖作为必须成分，可以适当地调整其中含有的葡萄糖的量，使患有糖尿病等疾病的患者能适当地利用。

具体实施方式

本发明使用的环黑曲霉糖基黑曲霉糖是同申请人的国际公开WO02/10361号等公开的具有环{→6}-α-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-α-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-α-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-α-D-吡喃葡萄糖基-(1→)结构的环状四糖(以下在全部本说明书中称为环黑曲霉糖基黑曲霉糖：Cyclonigerosylnigerose，缩写为“CNN”)。同时，本发明使用的环麦芽糖基麦芽糖是同申请人的2005-95148号专利公报等公开的具有环{→6}-α-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-α-D-吡喃葡萄糖基-(1→6)-α-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-α-D-吡喃葡萄糖基-(1→)结构的环状四糖(以下在全部本说明书中称为环麦芽糖基麦芽糖：Cyclomaltosylmaltose，缩写为“CMM”)。此外，这两种环状四糖合称为“环状四糖”。这些环状四糖的任意一种均可以采用发酵法、酶法、合成法等方法配制得到。假如考虑经济上的问题，例如可以采用上述专利等公开的方法，优选用环状四糖生成酶处理淀粉部分加水分解物的方法。依据这种方法，可以自廉价材料淀粉中获得高收率的环状四糖。此外，依据本发明，环状四糖不一定要高度精制也可以，可以采取与配制过程中产生的其它糖或环状四糖衍生物共存的未分离组合物形态；也可以使用将这些混合物部分精制或高度精制得到的物质。此外，还可使用将配制过程中共存的还原性糖加氢，使之转化成糖醇后得到的物质。然而，考虑到要腹腔内给药，因此希望是98质量％以上的高纯度物质、特别希望是99质量％以上的高纯度物质。此外，还希望是经过除菌及脱热原处理的物质。

本发明使用的L-抗坏血酸2-葡萄糖苷可用发酵法、酶法、合成法等多种方法制得。假如考虑到经济上的问题，例如，可以采用同申请人提出的特开平3-135992号专利公报等公开的方法，优选用糖转移酶来处理L-抗坏血酸和淀粉部分加水分解物的混合溶液。依据这个方法，可从廉价材料淀粉部分分解物和L-抗坏血酸中获得高收率的L-抗坏血酸2-葡萄糖苷。此外，还可以任意地使用市售的L-抗坏血酸2-葡萄糖苷(株式会社林原生物化学研究所出售，商品名：“AA2G”)经除菌及脱热原处理后的产品。假如考虑到能获得本发明的腹膜透析液的效果，本发明使用的L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的纯度并无限制，但是考虑到要腹腔内给药，因此希望是98质量％以上的高纯度物质，特别希望是99质量％以上的高纯度物质。此外，还希望该种物质是经过除菌和脱热原处理的。

本发明是含有一种或两种以上选自环黑曲霉糖基黑曲霉糖、环麦芽糖基麦芽糖以及L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的糖质作为渗透压剂的腹膜透析液。依据上述组成，能够廉价地调节渗透压。此外，依据添加的渗透压剂的种类及用量，可改变和调节脱水性能和脱水时间。

在该透析液不会给生命体造成重度伤害并能发挥脱水性能的范围内，本发明的腹膜透析液的渗透压没有特别的限制。通常，优选适当调节这种透析液中选自环黑曲霉糖基黑曲霉糖、环麦芽糖基麦芽糖以及L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的一种或两种以上的糖质、电解质及其他成分的组合用量，将该渗透压调节至282mOsm/L-820mOsm/L，特别优选调节至282mOsm/L-400mOsm/L。

优选将本发明的腹膜透析液的pH调节至3-9，特别优选将腹膜透析液的pH调节至5.0-7.5。通过调节腹膜透析液的pH至上述范围，将对腹膜及腹膜间皮细胞产生较少损伤。还可适当的选择生理学上允许的物质作为缓冲剂，例如，乳酸钠、碳酸氢钠等。

本发明的腹膜透析液可通过在水中溶解一种或两种以上选自环黑曲霉糖基黑曲霉糖、环麦芽糖基麦芽糖以及L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的糖质作为渗透压剂，并且溶解生理学上允许的可与腹膜透析液组合使用的成分而制得。此外，本发明的腹膜透析液还可以通过在公知的腹膜透析液中添加一种或两种以上选自环黑曲霉糖基黑曲霉糖、环麦芽糖基麦芽糖以及L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的糖质作为渗透压剂而制得，还可以用一种或两种以上选自环黑曲霉糖基黑曲霉糖、环麦芽糖基麦芽糖以及L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的糖质替换公知的腹膜透析液的渗透压剂的一部分或全部来制得。这种情况下环状四糖和/或L-抗坏血酸2-葡萄糖苷在腹膜透析液中的添加量是能将含有电解质(无机盐类成分)、其他成分的透析液的渗透压调节至上述范围的量；通常使用范围为按无水物换算合计0.1％(W/V)至35％(W/V)，优选0.5％(W/V)至25％(W/V)(以下，在本说明书中没有特别限定时，“％(W/V)”记为“％”)。

此外，在不妨碍本发明的腹膜透析液的作用的范围内，出于调节透析液的脱水性能以及改善存储稳定性、补充营养、预防和治疗肾病及透析产生的临床症状及合并症等目的，本发明的腹膜透析液可添加任意一种或两种以上的各种电解质，具体是：葡萄糖、果糖、乳糖、蔗糖、α，α-海藻糖、α，β-海藻糖、β，β-海藻糖、乳蔗糖、麦芽低聚糖、环糊精、水饴(日语)、麦芽糖糊精等糖类；甘露醇、山梨糖醇、木糖醇、麦芽糖醇为代表的糖醇类；葡萄糖胺、乙酰葡萄糖胺、半乳糖胺等氨基糖；麦芽糖糊精的加氢物及分子内含有α，α-海藻糖结构的糊精为代表的非还原性低聚糖及多糖类；支链淀粉、角叉菜胶、硫酸软骨素及透明质酸等粘多糖体及其盐；天然橡胶类；以羧甲基纤维素为代表的合成高分子聚合物、胶原、胶、多肽等水溶性高分子。此外，上述电解质的添加用量希望接近人体液的离子浓度，通常将各种无机盐组合起来计算，希望在钠离子120mEq-150mEq、钾离子0mEq-10mEq、钙离子3mEq-5mEq、镁离子0mEq-3mEq、氯离子100mEq-120mEq、碳酸氢根离子25mEq-40mEq的范围内。此外，可在这些离子中添加磷酸离子，进一步任选地铜、锌等微量元素的离子。

同时，在本发明的腹膜透析液中，如果必要的话，还可有利地含有任意一种或两种以上的抗炎剂、抗菌剂、抗肿瘤剂、利尿剂、解热剂、镇痛剂、免疫激活剂、细胞激活剂、生理活性物质等医药成分；抗氧化剂；以乳酸、柠檬酸、葡萄糖醛酸为代表的有机酸；乳化剂；芦丁、橙皮苷、柚苷等维生素P类、维生素B₁、维生素B₂、维生素B₆、维生素B₁₂、L-抗坏血酸、维生素E、或这些维生素类的衍生物等维生素类；含有氨基酸或N-乙酰氨酸等氨基酸衍生物的氨基酸类；CoQ10(辅酶Q10)、α-硫辛酸、L-肉碱、腺苷及其モcAMP、双cAMP或三cAMP等碱类等成分。

本发明的腹膜透析液的制备是将各种成分从原料阶段变成制品阶段的适当的制备过程，或对已有制品进行的对例如稀释、浓缩、干燥、过滤、离心分离、混合、混捏、溶解、融解、分散、混悬、乳化、浸渍、浸透、散布、涂布、涂覆、固化、粉碎等一种或两种以上的方法适当地组合的过程。此外，将这样制得的腹膜透析液密封入聚氯乙烯及乙烯基乙酸聚乙烯等软质塑料制成的袋子及玻璃容器等内，必要的话，通过加压蒸汽灭菌、热水灭菌、膜过滤等方法进行灭菌处理。并且，在组合使用了存储稳定性较差的成分及与其他成分在长时间混合状态时易发生分解、变性的情况中，任选地可分别制备2种以上的组成成分，到使用时再将其混合。此外，任选地在使用时，用灭菌蒸馏水来稀释本发明的腹膜透析液成分的混合粉末及其高浓度水溶液。

本发明的腹膜透析液的使用方法没有特别的限制，可根据已知的腹膜透析疗法的方法进行。此外，本发明的腹膜透析液的用量也没有任何的限制，可根据治疗对象患者的状态、治疗目的、肾机能的丧失程度等来进行适当的调整。通常是，一次1L-2L的量，1日一次至数次向腹腔内注射，一定时间后即可体外排出，如此即可交换除去体内蓄积的水分及废弃物。这一系列的操作，例如将导管保留在腹腔内，可以通过患者自身或护士的手利用重力及泵等在自己家、办公室、旅行之前等进行；或者可进行间歇的腹膜透析法及机械自动化的连续的循环腹膜环流法。此外，本发明的腹膜透析液可用作血液透析的透析液、脏器保存液、腹腔、胸腔、脏器清洗液等。

此外，由于环状四糖及L-抗坏血酸2-葡萄糖苷具有强烈的抑制自由基生成的作用，将对给药本发明的腹膜透析液后引起的腹膜。横膈膜及消化系统脏器的炎症、细胞障碍、导管插入部位的伤口发生恶化、炎症等之类的与自由基的产生有关的伤害以及这些伤害的扩大有抑制的效果，因此，本发明的腹膜透析液具有良好的生物适应性。

以下，根据实验来详细说明本发明。同时，在以下实验中，使用根据下述制备例1的方法制备的环黑曲霉糖基黑曲霉糖(CNN)5含水结晶，以及根据下述制备例2的方法制备的环麦芽糖基麦芽糖(CMM)5含水结晶作为环状四糖。

<实验1：环状四糖或L-抗坏血酸2-葡萄糖苷对腹膜透析液褐变的影响>

根据表1示出的组成，制备含有CNN5含水结晶粉末、CMM5含水结晶粉末或L-抗坏血酸2-葡萄糖苷(株式会社林原生物化学研究所出售的、试剂级)的腹膜透析液。将这些腹膜透析液装入各个玻璃瓶中，密封，121℃灭菌40分钟，肉眼观察有无褐变，并将284nm的吸光度的增加作为指标，判断有无生成5-羟甲基糖醛，表1示出结果。同时，表1使用含有葡萄糖的腹膜透析液作为对照。

表1

从表1可看出，含有环状四糖、L-抗坏血酸2-葡萄糖苷以及环状四糖和L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的任意的腹膜透析液在灭菌后均无产生褐变，并且没有生成5-羟甲基糖醛。与之相对的，对照的含有葡萄糖的腹膜透析液在灭菌后观察到了褐变，并且生成了对生物体有害的5-羟甲基糖醛。这个结果表明含有环状四糖和/或L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的腹膜透析液较含有葡萄糖的腹膜透析液具有更好的稳定性和安全性。

<实验2：环状四糖对腹膜透析液脱水性能的影响(1)>

用透析管进行以下的环状四糖对透析液脱水性能的影响的研究实验。即根据表2示出的成分组成，制备含有葡萄糖或CNN的透析液。将1.5mL这些透析液的任一种装入透析管(分子量区分度15000、直径16mm、长70mm)中，用クレンメ密封，将透析管置于在精制水中分别加入氯化钠和葡聚糖(和光纯药工业株式会社出售、分子量60000-90000)使其含量分别为9g/L和6g/L制备而成的1L外部液体，进行透析。测定透析开始1小时后至14小时后的透析管的质量，计算管内透析液的液量。用3条透析管进行1种透析液的实验。以透析前透析管内透析液的液量为100，将3只透析管的结果平均，计算各种组成的透析液被外部液体浸渍时液量随时间的变化的相对值。表3示出了管内透析液液量的增加率。

表2

表3

从表3可以看出，向透析管中装入含有7.5％、15％和30％CNN的透析液(透析液3、透析液4、透析液5)并用1L外部液体进行透析时，与向透析管中装入含有3.86％葡萄糖的透析液(对照2)进行透析的情况相比，在透析开始1小时后，透析管内的液量有较大比例的增加。在装入含有2.27％葡萄糖的透析液(对照1)的透析管与装入含有3％CNN的透析液(透析液2)的透析管中，装入透析液2的透析管内液量的增加率较高；装入含有1％CNN的透析液(透析液1)的透析管与对照1相比几乎没有增加率。此外，比较装入含有CNN透析液的透析管内的液量，透析管内的液量的增加率随着透析液中环状四糖的含量的增高而增高。与含有3.86％葡萄糖的透析液(对照2)相比，装入较低渗透压的含有7.5％CNN的透析液(透析液3)、装入与对照2的透析液大致相同渗透压的含有15％CNN的透析液(透析液4)时，比含有3.86％葡萄糖的透析液(对照2)的透析管内的液量增加率更高，表明CNN较葡萄糖具有更优的脱水性能。此外，用按照下述制备例2的方法制备的CMM来代替表2示出的CNN进行相同的实验，得到与使用CNN的情况大致相同的结果，因此仅在表2示出使用CNN时的结果。

<实验3：环状四糖对腹膜透析液脱水性能的影响(2)>

用大鼠进行以下的环状四糖对透析液脱水性能的影响的研究实验。首先，在表2记载的浓度的电解质溶液中溶解CNN、CMM或抗坏血酸2-葡萄糖苷，制备含有7.5％CNN的透析液(透析液1)、含有7.5％CMM的透析液(透析液2)及含有6.7％L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的透析液(透析液3)(任一种浓度都是换算成无水物的)。作为对照的，在相同的电解液溶液中溶解换算成无水物含量为3.86％的葡萄糖，制备成透析液(对照)。其次，将禁食4小时的7-8周大的CD(SD)IGF大鼠(日本チヤ一ルスリバ一株式会社出售，雄性，体重256g-317g)乙醚吸入麻醉，用带21号注射针头的10mL注射器将上述任一种透析液10mL腹腔内给药。给药2小时、4小时、6小时、14小时后，用乙醚麻醉致死大鼠后，用带19号注射针头的10mL容积注射器回收腹腔内的贮留液，测定液量。以这些测定值为基础，将对照的透析液腹腔内给药后立即从腹腔内回收的液量作为100，求其相对值，计算注入腹腔内的透析液的液量的增加率，结果如表4所示。同时，各种透析液在各测定时间用3只大鼠来进行实验。此外，在将透析液腹腔内给药后立即回收的透析液的液量的平均值是9.4mL。

表4

从表4中可以看出，在将含有CNN、CMM或L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的透析液(透析液1、透析液2、透析液3)腹腔内给药的的情况中，腹腔内的驻留液量在给药后4小时分别达到最大的增加率(198％、197％、195％)，第6小时的时候仍能维持增加率，14小时候分别减少至162％、163％或159％。与此对应的，在将含有葡萄糖的对照的透析液腹腔内给药的情况中，腹膜内贮留液量在给药后4小时时与将含有CNN、CMM或L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的透析液(透析液1、透析液2、透析液3)腹腔内给药的情况相同，增加率上升，但它的增加率较透析液1至透析液3低，并且，第6小时的时候增加率反而转为减少(166％)，第14小时的时候降低到131％。这些实验结果示出含有环状四糖或L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的透析液较含有葡萄糖的透析液，在腹腔内给药的情况中，不仅仅具有增加脱水量的优点，还比含有葡萄糖的透析液具有延长脱水时间效果的优点。

实验1至实验3的结果表明了含有环状四糖和/或L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的透析液与含有葡萄糖的透析液相比更稳定，并且具有更优的脱水性能、可实现增加脱水量和延长脱水时间，能够被有利地使用。

<制备例1：制备环黑曲霉糖基黑曲霉糖>

在玉米淀粉浓度约20％的淀粉乳中加入0.1％碳酸钙，调节pH至6.5，加入质量相当于淀粉克数0.3％的α-淀粉酶(ノボ社出售，商品名“タ一マミ一ル60L”)，95℃反应15分钟，随后120℃高压蒸汽灭菌20分钟，随后急速冷冻至35℃，获得DE值(dextrose equivalent)约4的液化溶液，往溶液中加入相当于淀粉克数0.2mL的含有国际公开WO02/10361号公开的来自细菌球孢菌素(グロビスポルス)C9(FERM BP-7143)的α-异麦芽糖基葡萄糖生长酶和α-异麦芽糖基转移酶的酶液，进一步地加入相当于淀粉固形物克数10单位的环麦芽糖糊精·グルカノトランスフエラ一ザ(株式会社林原生物化学研究所制造)，在pH6.0温度35℃时反应48小时。将该反应液在95℃保持30分钟，调节至pH5.0、温度50℃，加入相当于固形物克数10单位的α-葡萄糖苷酶剂(天野制药株式会社出售，商品名“トランスグルコシタ一ザL(アマノ)”)，反应24小时，进一步地加入相当于固形物克数30单位的葡萄糖淀粉酶剂(ナガセ生化学工业株式会社出售，商品名“グルコチ一ム”)，反应17小时，将该反应液加热至95℃保持30分钟，冷却，过滤，将得到的滤液根据常规方法用活性炭脱色，用H型及OH型离子交换树脂脱盐，精制，进一步浓缩，得到以固形物计算的含有34.2％葡萄糖、62.7％CNN、3.1％其他糖质的CNN的含有浓度为60％的糖浆。

将这种含有CNN的糖浆上强酸性阳离子交换树脂(オルガノ株式会社，商品名“アンバ一ライトCR-1310(Na型))柱进行分离。在内径为5.4cm带有外壳的4根不锈钢制的柱子中填充树脂，笔直放置时树脂层全长20m(各柱的树脂层长5m)。将柱内温度维持在60℃，加入相当于树脂5v/v％的糖浆，用60℃的温水以SV0.13流动，用HPLC来监控溶出液的糖组成，截取含有较多CNN的部分，精制，得到以固形物计算含有约98％的CNN的CNN含有液。将该溶液浓缩到浓度为约70％后，转移入助晶罐中，加入相当于固形物约2％的CNN含水结晶作晶种助其结晶，逐渐冷却，得到结晶率约45％的マスキツト。用干燥塔的喷嘴在150kg/cm²高压下对マスケツト进行喷雾。同时，在干燥塔上部用85℃的热风送风，收集设计在底部的移动用的金属网传送带上的结晶粉末，在传送带下送入45℃的温风，将该粉末缓慢地移动出干燥塔外，取出。将结晶粉末填充入熟成塔中，送入温风，熟成10小时后，完成干燥和结晶，得到纯度98％以上的CNN5含水结晶粉末。本品由于不被腹腔内的酶所分解，较使用葡萄糖、低聚糖等作为渗透压剂的腹膜透析液具有较小的渗透压变化，可有利地用作腹膜透析液的渗透压剂。

<制备例2：制备环麦芽糖基麦芽糖(CMM)>

在1.5％淀粉部分分解物(松谷化学工业株式会社出售，商品名“パインデツクス#4”)、0.5％酵母提取物(日本制药株式会社出售，商品名“ポリペプトン”)、0.1％酵母提取物(日本制药株式会社出售，商品名“酶エキスS”)、0.1％磷酸二钾、0.06％磷酸钠2水合物、0.05％硫酸镁7水合物、0.3％碳酸钙及水制得的培养基中接种开2005-95148号专利公报上记载的アルスロバクタ一·ダロビホルミスM6(FERM BP-8448)，27℃、230rpm时旋转振荡培养120小时。培养后，将培养液离心分离(8000rpm、20分钟)除菌，得到的培养的上清作为酶液，向其加入含有2％可溶性淀粉和2mM氯化钙的50mM的醋酸缓冲液，40℃反应24小时后，约100℃热处理10分钟使反应停止。

然后，用盐酸将反应物调整至pH5.0后，添加对应于固形物1克4000单位的α-葡萄糖苷酶剂(天野エンザイム株式会社出售，商品名“トランスグルコシタ一ザL(アマノ)”)以及对应于固形物1克250单位的葡萄糖淀粉酶(ナガセ生化学工业株式会社出售)，在50℃时反应16小时。反应后，约100℃热处理10分钟，使反应停止。随后，向反应液中添加氢氧化钠调节pH至12，98℃保持1小时，分解还原糖。过滤除去不溶物，用离子交换树脂(三菱化学株式会社制造，商品名“ダイヤイオン SK-1B”和“ダイヤイオン WA30”)和阴离子交换树脂(オルガノ株式会社制造，商品名“IRA411”)脱色、脱盐、精密过滤后，用蒸发器浓缩，真空干燥，得到纯度98％以上的CMM5含水结晶粉末。本品由于不被腹腔内的酶所分解，较用葡萄糖、低聚糖等作为渗透压剂的腹膜透析液来说渗透压变化小，可有利地用作腹膜透析液的渗透压剂。

以下将根据实施例更详细地说明本发明。本发明并不受到实施例的限制。

实施例1

在蒸馏水中溶解根据制备例1的方法制备的CNN5含水结晶粉末9.5g、氯化钠0.567g、乳酸钠3.92g、氯化钙0.294g和氯化镁0.103g，用0.294g氢氧化钠调节pH至约7.5后，加蒸馏水至总量1000mL。用0.2μm的膜滤器过滤上述溶液，填充入聚氯乙烯树脂(PVC)制的袋子中，121℃加压蒸汽灭菌20分钟。

目视本品，寻找变色的地方，没有发现变色，同时，测定284nm处的吸光度，与加压蒸汽灭菌前进行比较，没有发现吸光度增加，因此确认没有生成5-羟甲基糖醛类。本品是具有良好存储稳定性和生物适应性的腹膜透析液。此外，本发明可用作血液透析用的透析液。并且，可用其他缓冲剂(如碳酸氢钠等)来代替上述的乳酸钠。

实施例2

在蒸馏水中溶解根据制备例2的方法制备的CMM5含水结晶粉末9.5g、葡萄糖0.1g、氯化钠0.567g、乳酸钠3.92g、氯化钙0.294g和氯化镁0.103g，用0.294g氢氧化钠调节pH至约7.5后，加蒸馏水至总量1000mL。用0.2μm的膜滤器过滤上述溶液，填充入PVC制的袋子中，121℃加压蒸汽灭菌20分钟。

目视本品，寻找变色的地方，没有发现变色，同时，测定284nm处的吸光度，与加压蒸汽灭菌前进行比较，没有发现吸光度的增加，因此确认没有生成5-羟甲基糖醛类。本品是具有良好存储稳定性和生物适应性的腹膜透析液。此外，本发明可用作血液透析用的透析液、脏器的清洗液、保存液等。并且，可用其他缓冲剂(如碳酸氢钠等)来代替上述的乳酸钠。

实施例3

在蒸馏水中溶解市售的L-抗坏血酸2-葡萄糖苷(株式会社林原生物化学研究所出售，试剂级)经活性炭处理后，用0.2μm的膜滤器过滤，除去热原和微生物后得到的产品4g、氯化钠0.567g、乳酸钠3.92g、氯化钙0.294g和氯化镁0.103g，用适量氢氧化钠调节pH至约6.5后，加蒸馏水至总量1000mL。用0.2μm的膜滤器过滤上述溶液，填充入PVC制的袋子中，121℃加压蒸汽灭菌20分钟。

本品是具有良好存储稳定性和生物适应性的腹膜透析液。此外，本发明可用作血液透析用的透析液。

实施例4

在蒸馏水中溶解根据制备例1的方法制备的CNN5含水结晶粉末4.6g、实施例3中制备的除去了热原和微生物得到的L-抗坏血酸2-葡萄糖苷2.1g、氯化钠0.567g、乳酸钠3.92g、氯化钙0.294g和氯化镁0.103g，用适量氢氧化钠调节pH至约7.5后，加蒸馏水至总量1000mL。用0.2μm的膜滤器过滤上述溶液，填充入聚氯乙烯树脂(PVC)制的袋子中，121℃加压蒸汽灭菌20分钟。

本品是具有良好存储稳定性和生物适应性的腹膜透析液。此外，本品可用作血液透析用的透析液。并且，可用其他缓冲剂(如碳酸氢钠等)来代替上述的乳酸钠。

产业上利用的可能性

根据以上说明，本发明是完全基于独立的见解的含有选自环黑曲霉糖基黑曲霉糖、环麦芽糖基麦芽糖及L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的一种或两种以上糖质的腹膜透析液，具有良好的脱水性能、较高的生物适应性以及良好的存储稳定性和显著的作用。此外，本发明的腹膜透析液没有严重的副作用，是可简便快捷使用的人的腹膜透析液。本发明是具有显著作用效果的发明，对本研究领域做出很大贡献，是非常有意义的发明。

Claims

1.一种腹膜透析液，其特征在于在液体中含有一种或两种以上选自环黑曲霉糖基黑曲霉糖、环麦芽糖基麦芽糖以及L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的糖。

2.如权利要求1所述的腹膜透析液，其含有一种或两种以上其他的糖。

3.如权利要求1或权利要求2所述的腹膜透析液，其特征在于葡萄糖含有的一种或两种以上选自环黑曲霉糖基黑曲霉糖、环麦芽糖基麦芽糖以及L-抗坏血酸2-葡萄糖苷的糖的含量为按无水物换算合计0.1％(W/V)至35％(W/V)。

4.如权利要求1至3任一项所述的腹膜透析液，其渗透压为282mOsm/L至820mOsm/L。

5.如权利要求1至4任一项所述的腹膜透析液，其pH被调节至3-9。

6.用于如权利要求1至5任一项所述的腹膜透析液的使用时进行溶解的粉末或使用时进行稀释的浓缩液。

7.如权利要求1至6任一项所述的腹膜透析液，其作为血液透析的透析液。