CN101163486B - 阿奇霉素在生产用于治疗眼部感染的药物中的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及阿奇霉素在用于治疗眼部感染的药物的工业化生产中的用途，所述药物主要由浓度为1％-2％的阿奇霉素在药学上可接受的中长直链脂肪酸甘油三酯液体载体中的溶液构成，它可以局部使用，每只待治疗的眼睛每天使用2次，使用不超过4天。

Description

阿奇霉素在生产用于治疗眼部感染的药物中的用途

本发明涉及阿奇霉素在生产用于治疗和/或预防眼部感染的药物中的用途。它也涉及含有阿奇霉素的药物，其中阿奇霉素的形式与治疗细菌性结膜炎(特别是沙眼或脓性结膜炎)时的完全治疗相同。 

阿奇霉素，或称为N-甲基-11-氮杂-10-脱氧-二氢-红霉素，为大环内酯类抗生素，以其抗菌活性而闻名，尤其是它具有特别适用于治疗结膜感染的活性谱。实际上，与此类感染有关的绝大多数病原体都对该抗生素敏感。 

除了传统类型的结膜炎或脓性结膜炎外，阿奇霉素特别适用于治疗衣原体结膜炎，因为这些细胞内和非典型性细菌对阿奇霉素具有高度敏感性。衣原体结膜炎的发病率在西方国家很可能被低估了，该病可以通过与污染的生殖分泌物的直接接触而传播(如新生儿)，或者例如在消毒较差的游泳池中间接传播。在世界其它区域，特别是热带国家(非洲、亚洲、中东)，沙眼(一种由沙眼衣原体细菌导致的眼部感染性疾病)作为高发性地方病是非常普遍的。沙眼是致盲的主要感染性因素，也是眼部病患的主要原因。因此，人们迫切需要能够有效治疗细菌性结膜炎的方法，特别是在卫生条件不稳定的地区治疗沙眼的方法。 

本发明者提交的专利申请WO02/083178描述了其中阿奇霉素作为活性成分的局部应用的眼用组合物。阿奇霉素以分子状态存在于油性载体溶液中。优选采用的载体主要由中长直链脂肪酸甘油三酯(缩写为TCM)组成。阿奇霉素的浓度优选在重量比0.7％-2％之间。 

本发明源自下列事实的发现：含有浓度范围为1％-2％(基于阿奇霉素二水合物的重量比)的阿奇霉素(在油性载体溶液的液相中)的特定组合物以较少的给药次数在较短的治疗时间(少于4天)内就能够有效对抗影响眼球的感染性病原体。很明显，这种特性对于在高风险地区中有效完成治疗是非常重要的，在所述地区中生活条件使得感染机会增加，或者对于其中卫生知识教育或实施有待提高的人群也是非常重要的。 

在同样的条件下较少的日给药次数对人们而言也是有利的。本发明使得治疗次数降低到每日二次，这使其几乎没有风险，或者风险可以忽略不计，而且，2或3天(必要时4天)后即可治愈，在这种情况下患者一般不会过早停止治疗。 

根据本发明，在每只需要治疗的眼睛中每天使用2次，优选间隔使用，最好一次在早晨使用，另一次在晚上使用，两次给药至少间隔6小时，从而可以获得最佳疗效。在这些条件下，每次应用都能够传递治疗有效量的活性成分。 

本发明之前的技术主要源于本申请者的系列专利申请，可以参考已经述及的WO02/083178。也有其它参考文献涉及在局部眼用治疗中作为活性成分的阿奇霉素，但其中阿奇霉素与完全不同的载体相结合。Insite VisionIncorporated公司提交的专利申请US 2003/206956或Pfizer Products Inc.公司提交的专利申请EP 0925789即是如此。在以上两者中，阿奇霉素都是不溶的，即使在油性介质中也几乎不溶。它以固体形式分散在水性介质或软膏中。 

另外，其作者要求在阿奇霉素非常宽的浓度范围(自0.01％到2％或2.5％)的总量中尽可能采用较少的治疗次数，但在他们所提供的实施例中，以阿奇霉素二水合物计的浓度不超过0.5％。另外，实验的任何结果都没有说明它能够支持在这些条件下的治疗的有效性。现在已经能够确定在这些专利中所表达的希望是徒劳的，在实践中，所述组合物至少要持续治疗5天，否则它不能较好地治疗眼部感染。 

实际上，在本发明的药物制剂中，TCM是一种基本的组成成分，阿奇霉素在这些脂肪酸甘油三酯中的溶解也是基本要素之一，该甘油酯在产品通常所处的任何温度和压力下均为液体状态。决定药物有效性和在给定条件下治疗成功性的另一个重要因素与溶液中活性成分的浓度有关，该浓度可以准确选择，以保证在令人满意的溶液稳定性和储存条件下获得该有效性。 

因此，根据本发明，阿奇霉素的浓度范围最好在1％-2％之间。在绝大多数应用病例(无论是人或是动物)中获得满意效果的本发明的实施方案 中，所述浓度在1％-1.5％之间，特别是在1.3％-1.5％之间，优选1.5％，以阿奇霉素二水合物的重量与组合物的总重量的比值表示。然而，已经发现，在动物(如兔)兽用药中观察到的结果并非总能照搬到其它动物种属，如羊或牛中。在后者病例中，特别是在人沙眼病例中，通常优选采用的浓度范围在重量比1.5％-2％之间，优选在1.5％-1.7％(以阿奇霉素二水合物的重量计算)。 

用于溶解阿奇霉素的载体为油性液体，一种具有较低不饱和度的脂肪油。它很容易应用于眼睛，并且在使用后，与软膏相比，能够非常明显的减少视觉的模糊。它能够在泪液和结膜中保持较长的时间，部分原因是由于在眼部表明形成的油性膜不太容易被泪液除去。 

在本发明优选的实施方案中，TCM类载体是由含有5-18个碳原子的饱和脂肪酸的酯构成的，特别是饱和脂肪酸的甘油三酯，其中甘油的醇官能团被具有中长直链的饱和烃的酸完全酯化，所述酸例如癸酸(C₁₀)和辛酸(C₈)。 

在实践中，使用的载体为自椰子种属中提取、纯化和/或氢化的脂肪油，它含有至少95％的辛酸和/或癸酸。在化学上充分定义的此类载体特别有益的一点是对眼睛没有刺激性。它通常含有50％-80％的辛酸和20％-50％的癸酸。在本发明优选的实施方案中，采用含有50％-65％辛酸和30％-45％癸酸的载体。 

另外，在此类载体中的阿奇霉素溶液具有良好的化学和物理稳定性。尤其是，根据本发明制备的药物具有能够在常温下长期储存的优点，包括当温度高于如30℃时可放置数月，经观察活性成分并不发生任何降解。即使溶液中不存在防腐剂时，也能够获得该结果。此特性是非常有益的，特别是在热带国家中普遍存在的沙眼的治疗中更为有益，因为它有助于含有这些溶液的药物的储存和运输。与其它抗生素眼用组合物不同，本发明药物不需要储存在冷藏环境中，即使在外部环境温度较高的情况下也是如此。 

本发明生产的药物优选最多给药3天。特别优选在2天或3天内通过每天2次局部应用给药。 

如此短的治疗时间在此前的局部眼用治疗的现有技术中从未提到过， 无论是采用阿奇霉素或是采用目前已知的其它抗生素均是如此。由于下述几个原因，此类短的治疗周期具有特别的优点。 

一方面，它减少了与较长治疗周期中重复给药有关的过敏或刺激的风险。另一方面，该治疗易于实施，因为只需要较少的总给药次数。因而可以减少过早停止治疗的风险，在长时间的治疗中过早停止治疗存在非常普遍，并且对实施的要求更加严格。使用时间较短和治疗简单也更适合现代生活，无论是对于充满活力的成人还是对于社区儿童的治疗均是如此。 

另外，对于剂量的非顺从性，特别是过早停止治疗，提高了菌株对抗生素的耐药性。这在医院环境中更为明显。因为眼睛局部治疗的目的是处理一系列潜在致病性微生物污染的介质，易于理解，避免耐药性菌株进行选择的风险是非常重要的，所以，需要非常认真地坚持服用有效剂量。较短时间的治疗(如本发明所提出的)能够提高对处方剂量的顺从性。 

与口服治疗相比，本发明提出的治疗方法也具有局部应用的优点。尤其是，它不需要饮用即可完成。该特点在对沙眼的治疗中是最重要的，因为在热带国家中水通常是不纯净的，为了服用药物而饮水有可能导致其它疾病。 

因此，特别是与现有技术相比，用于治疗细菌性结膜炎(特别是沙眼或脓性结膜炎)的本发明的治疗方案的有效性是非常有益的。在每天给药2次的处方条件下(特别是早晨起床时一次，夜晚上床时一次)，在少于4天的情况下(特别是2-3天)，阿奇霉素和TCM类载体的结合对于眼部感染的治疗具有良好的效果。由于抗生素的使用需要严格限定在必需的情况下，因此给药次数的减少符合健康组织的要求。尤其是，对于脓性结膜炎的痊愈治疗，可以选择3天的治疗时间，相当于总共在眼睛中使用6次(每只感染的眼睛)。对于沙眼(眼睛沙眼衣原体感染)的根治，治疗时间最好缩短到2天，相当于使用4次。 

本发明的另一个目的涉及产品使用的方便性和使副作用不存在，本发明提供了含有阿奇霉素的眼用药物的单剂量小瓶包装。根据本发明的实施方案，这意味着用于眼部给药的产品被存放在小容量的密封瓶中，这些小瓶均含有足够每次处方应用的药物量，尤其是足以适用于每个个体的两只 眼睛的每一只的使用。 

每个小瓶含有的组合物的量足以保证在使用期间治疗有效量的活性成分被传递到每只眼睛。该剂量优选为至少每只眼睛约为0.24mg，每个小瓶含有例如组合物的量至少相当于2滴，因此优选体积在34-100μl之间，即30-96mg的阿奇霉素在TCM中的溶液。例如，小瓶可以含有约400μl的组合物，使其能够保证每只眼睛中给药1滴，17-50μl的体积，即15-48mg。该单剂量小瓶给药后可以废弃：它是一次性使用的小瓶。 

此类包装形式具有许多优点。首先，每次给药时，它能够使其易于传递治疗有效的剂量。另外，在医院环境中，通过消除瓶口污染的风险避免了病人内部和病人外部污染的风险。另外，由于组合物在室温下具有良好的稳定性，这使其在使用过程中能够获得最佳的卫生条件。在热带国家使用的情况下，该性质显得更加重要。 

单剂量小瓶的包装形式也使其能够在组合物中可以不使用防腐剂。所以，在本发明优选的实施方案中，药物中不含防腐剂，它很好地降低了对使用者的眼部刺激的风险。不含防腐剂也有助于药物在塑料制成的小瓶中进行包装。因此，根据本发明优选的实施方案，单剂量小瓶每一个均以塑料安瓿的形式单独生产，小瓶形成具有末端瓶颈的使用管嘴，使用者用手可以将其折断。 

单剂量包装形式，以及治疗眼部感染所必须的给药次数的减少(本发明中优选4次或6次)，可以很好地减少产品误用的风险，因为所有的剂量均是用于治疗。从经济学的观点来看，它也是有益的，因为它给予了有限次数的剂量。 

同样，用于治疗细菌性结膜炎(特别是沙眼或脓性结膜炎)的药物最好以与药物治疗完整体系相一致的形式提供。本发明的包装形式最好是能够盛放4-6个单剂量小瓶的盒子的形式，每一个小瓶含有能够传递34-100μl(即30-96mg)溶液的量，该溶液中阿奇霉素在油性载体中的重量比约为1.5％，所述载体基本上由中长直链脂肪酸甘油三酯构成。优选不加防腐剂。 

每一个小瓶最好为单剂量小瓶，即，在每次使用后多余的内容物被丢弃，无论处方治疗的是两只眼睛还是一只眼睛，使用者每次使用均开启新 的小瓶。用于眼睛局部给药的频率为每天2次，共使用2或3天。对于沙眼的治疗而言，2天的时间就足够了。 

此类包装形式中所提供的药物在坚持严格卫生要求的生产厂家开始的物流循环中是特别有益的，如此便于向那些交通不发达的地区或卫生习惯较差的人群提供帮助。 

通过实施例的方式对特定实施方案进行详细说明，从而对本发明的优选特性和有益的结果加以阐述。除非另外说明，以数字或其它方式所给出的所有的量值均首先以国际标准单位表示，其次作为物质的量表示。 

实施例1 

根据下列配方，制备含有1.5％重量比的阿奇霉素的眼用组合物： 

阿奇霉素二水合物：                1.5g 

TCM：                       适量至100g 

该组合物不含防腐剂。它以单剂量小瓶包装。 

采用的油性载体与欧洲药典专著对含有95％中链甘油三酯(TCM)的精制脂肪油的定义相符，其中甘油的醇官能团被饱和烃的羧酸完全酯化，所述烃的链为直链和中等长度的链，即基本上为癸酸和/或辛酸。在优选的实施方案中，采用的中链甘油三酯含有50％-65％的辛酸和30％-45％的癸酸。 

将相当于最终质量98％的TCM的量在水浴中加热至70℃。阿奇霉素粉末在搅拌下溶于甘油三酯。将混合物于70℃继续加热数分钟，然后将得到的溶液冷却至室温。随后，将溶液根据TCM重量进行调节，将混合物搅拌数分钟即可完成。 

冷却后阿奇霉素仍保留在溶液中，得到的溶液为澄清透明的。通过过滤对其进行除菌处理。该过程在室温下进行。过滤在无菌环境下通过由聚醚砜膜制成的0.2μm孔的滤膜进行。如此，获得理想的溶液。该溶液的粘度为30mPa.s(于20℃为30cPo)。其密度为0.95。其折射率等于1.45。该值与泪液的值相似，泪液的折射率在正常个体中等于1.33。所以，在使用该组合物时，视力发生模糊的风险可以减至最小。 

稳定性研究根据下列方法进行。将溶液储存在黑暗中，温度和湿度分 别为自25℃和60％至40℃和小于25％。在各时间点自溶液中取样，通过高效液相色谱分析，以便于观察阿奇霉素随时间的降解。结果显示得到的溶液随时间的流逝保持稳定，在40℃超过6个月的时间内依然稳定。所以，不需要将其存放在冰箱中以保证其稳定。 

在其包装形式中，该溶液在温度达到30℃时至少在24个月内保持稳定。 

实施例2 

采用实施例1的相同方法，根据下列配方，制备含有重量比为1％的阿奇霉素的眼用组合物： 

阿奇霉素二水合物：                    1g 

TCM：                             适量至100g 

该组合物不含防腐剂。它以单剂量小瓶包装。 

实施例3 

采用实施例1的相同方法，根据下列配方，制备含有重量比为1.7％的阿奇霉素的眼用组合物： 

阿奇霉素二水合物：              1.7g 

TCM：                       适量至100g 

该组合物不含防腐剂。它以单剂量小瓶包装。 

实施例4 

在动物中进行三种眼部用药的药代动力学研究。向兔眼中滴入1滴(即最大量为50μl或48mg)实施例1组合物，滴入方式为：1次；或者2次，间隔12小时；或者4次，在3天的时间内平均间隔时间。 

最后一次滴入后8h、12h、24h、2天、3天和6天，自泪腺液、结膜和角膜取样。通过高效液相色谱质谱测定每一个样品中阿奇霉素的量。 

以上三种研究能够说明下列问题： 

-滴入实施例1组合物后，阿奇霉素的浓度明显高于临界浓度S，S为阿奇霉素在眼部获得治疗效果所必需的浓度，这种情况在泪腺膜中维持至少12小时，在结膜中维持8小时，在角膜中维持24小时。 

-间隔12小时2次滴入后，随着最后一次滴入，这些浓度在泪腺膜 中显著高于浓度S至少24小时，在结膜中8小时，角膜中24小时。 

-3天内平均滴入4次后，最后一次滴入完成后的随后的两天内，对于泪腺膜而言，所有待治疗的眼睛的三分之二中的阿奇霉素的水平高于浓度S，而对于结膜而言，实际上所有待治疗的眼睛中阿奇霉素的水平高于浓度S。在角膜中，该浓度在最后滴入后随后的6天内仍然显著高于浓度S。 

综上所述，以实施例的组合物形式给药于兔眼的阿奇霉素在眼睛表面具有良好的分布性并能够在眼睛的表面结构中以高浓度维持较长的时间，该结构是发挥治疗活性所要求的靶器官：泪腺膜、结膜、角膜，这些都可以在滴入少数几次后在较短的时间内达到。 

在最后滴入完成后，尤其是角膜在较长的时间内具有较高的阿奇霉素水平。它可能扮演储库的角色，其中阿奇霉素在每次滴入后均在此浓集，然后将阿奇霉素随时间逐渐释放到泪腺膜中。角膜的这种角色有助于解释在短时间内少数几次滴入就可以获得的治疗效果。 

实施例5 

在动物中进行实施例1组合物的三种眼睛毒理学研究。这些研究着眼于确定该组合物对兔角膜敏感性的作用、对大鼠眼睛急性耐受性和重复给药后大鼠眼睛耐受性的作用。 

-兔角膜敏感性：单次给予实施例1组合物后，它没有改变。 

-急性眼睛耐受性：根据Draize方法，单次滴入眼睛后，对实施例1、2和3三种组合物进行了实验。这些治疗均没有对眼睛造成刺激。 

-重复给药后大鼠眼睛耐受性： 

采用实施例的组合物，通过一天滴入2或3次共28天的方法进行数项研究，与每天滴入3次实施例1组合物的载体中的安慰剂(生理盐水)进行对比。 

结果表明该治疗具有良好的系统耐受性。在眼睛周围，多次滴入含有1.5％、1％和1.7％阿奇霉素二水合物的组合物只是在治疗的第二周导致对眼睛的刺激(发红、球结膜水肿、分泌物)。眼睛的组织病理学检查显示没有损伤。 

眼睛毒理学研究的结果表明本发明组合物： 

a)不会导致任何角膜感觉缺失， 

b)没有刺激性， 

c)在推荐的治疗条件下不会产生任何副作用，因为显示的缺点只是在每天滴入三次并且在治疗的第二周以后才出现。 

实施例6 

采用实施例1、2和3的组合物，在正常个体中进行五种人体临床研究。总共260人参与了这些试验。 

其中两个试验主要研究了单只眼睛1滴给药后三种组合物的眼睛耐受性，与仅使用载体进行了对照。另外三个实验研究了每天重复2次共1或3天的单次两侧滴入或单侧滴入后眼睛耐受性以及泪腺和结膜的药代动力学。 

这五个试验能够确定：在正常个体中，待研究的三种浓度的组合物的滴入可以被眼睛表面很好地耐受。 

滴入后最常见的眼睛症状为烧灼感和刺痛感，滴入后30分钟开始，几分钟或几小时后消失。在这些研究中，在载体对照组中观察到的眼睛症状与此相似。这使其对本发明而言更为有益，即限定组合物滴入的次数和治疗的时间。 

在这些研究中，试验的三种浓度都能被很好耐受，对眼睛表面的组织病理学检查表明，在耐受性方面，没有观察到治疗组之间存在临床上的相关差异。尤其是，在每天重复2次共进行3天的单侧滴入研究中，没有观察到另外的局部副作用。在所有的情况下，都没有记录到与治疗有关的系统副作用。 

另外，正常个体的药代动力学研究在91个正常个体中进行，他们在每只眼睛中单次滴入含有1.5％阿奇霉素二水合物的组合物，并与含有0.5％阿奇霉素二水合物的组合物进行了对照。滴入后10分钟、30分钟、2小时、4小时、8小时、12小时和24小时，对泪液中阿奇霉素进行了分析。 

与敏感菌和中等敏感菌的最小抑制浓度相比，观察发现，在浓度的值和维持时间方面，1.5％阿奇霉素二水合物的滴眼液远远超过0.5％的滴眼 液。1.5％的滴眼液的有效浓度维持的时间较长，时间周期总是大于24小时。另外，泪液中阿奇霉素的浓度远低于0.5％的滴眼液。对于0.5％的滴眼液而言，单剂量的滴入不足以保证在泪腺膜中维持阿奇霉素的有效治疗浓度数个小时。 

在另一项研究中，给予36个正常个体单只眼睛1滴含有1.5％阿奇霉素二水合物的组合物，相当于1次剂量，每天2次，共给药3天。最后1滴滴入后12小时，分析泪液样本中的阿奇霉素。得到的结果表明，在该最后的时间，泪腺中的浓度仍然相对较高。 

最后1滴实施例1组合物滴入后12小时，泪腺中阿奇霉素的浓度大于0.5μg/ml(敏感菌的最大临界阈值)或大于4μg/ml(中等敏感菌的最大临界阈值)的治疗眼睛的数量分别为：12∶12和8∶12。当采用1％的滴眼液时，这些比例分别为：11∶12和3∶12，这些数据略微差一些。 

这些泪腺药代动力学研究结果表明：每天2次(早、晚各1次)每次1至2滴共3天给予本发明组合物可以有效治疗细菌性眼部感染。 

在第五项研究中，也对36个个体(3组，每组12人)进行下列试验：在更晚的时间测定了阿奇霉素的泪腺和结膜浓度，即在采用2滴含有1.5％阿奇霉素二水合物的组合物滴入开始治疗进行1天后或连续进行3天后的7天(在泪眼和结膜中)和14天(在结膜中)测定。与单剂量口服给予1g阿奇霉素的个体组进行对比。 

这些研究的结果表明：以每次1滴、每天2次、共进行3天(即总共给予约2mg的阿奇霉素)的剂量方案滴入本发明的组合物后，在滴入已经停止后的5天内结膜内仍然保持显著的阿奇霉素浓度，它保证了该给药方案的有效性，同时避免了副作用的缺点，特别是避免了眼睛毒理学方面的缺点，并且提供了短时间治疗的所有的优点。 

Claims (7)

1.阿奇霉素在制备治疗和预防人类沙眼感染的药物中的用途，所述药物主要由浓度为1％-2％的阿奇霉素在药学上可接受的中长直链脂肪酸甘油三酯液体载体中的溶液构成，并以滴眼液形式存在，其用于每只眼睛每天使用2次，仅使用2或3天。

2.权利要求1的用途，其中阿奇霉素存在于中长直链脂肪酸甘油三酯溶液中的浓度在1％-1.5％之间，以阿奇霉素二水合物的重量计。

3.权利要求2的用途，其中阿奇霉素存在于中长直链脂肪酸甘油三酯溶液中的浓度在1.3％-1.5％之间，以阿奇霉素二水合物的重量计。

4.权利要求1的用途，其中阿奇霉素存在于中长直链脂肪酸甘油三酯溶液中的浓度在1.5％-2％之间，以阿奇霉素二水合物的重量计。

5.权利要求1-4中任一项的用途，其中所述溶液不含有超过0.2微米的颗粒，并且不含有任何防腐剂。

6.权利要求1-4中任一项的用途，其中阿奇霉素的溶液被进行除菌处理，这是通过在室温、无菌环境下经由聚醚砜膜制成的0.2μm孔的滤膜过滤来进行的。

7.权利要求5的用途，特征在于所述药物被包装为4或6个单剂量滴眼液小瓶的盒子，每个小瓶含有的量足以传递34-100μl的所述溶液。