CN100586952C

CN100586952C - 噁唑骈喜树碱酯衍生物及其制备方法和用途

Info

Publication number: CN100586952C
Application number: CN200610097473A
Authority: CN
Inventors: 李玉艳; 尤启冬
Original assignee: China Pharmaceutical University
Current assignee: China Pharmaceutical University
Priority date: 2006-11-10
Filing date: 2006-11-10
Publication date: 2010-02-03
Anticipated expiration: 2026-11-10
Also published as: CN1958590A

Abstract

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一类通式I的的噁唑骈喜树碱酯衍生物，R₁、R₂、R的定义见说明书，本发明还公开了这些衍生物的制备方法、含有这些衍生物的药物组合物和用途。本发明的通式I化合物具有抗肿瘤活性。

Description

噁唑骈喜树碱酯衍生物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一类新的具有抗肿瘤活性的噁唑骈喜树碱酯衍生物、还涉及这些衍生物的制备方法、含有这些衍生物的药物组合物和用途。

背景技术

喜树碱(Camptothecin，CPT)是从珙

科旱莲属植物喜树中提取的毒性生物碱，结构式如下：

CPT通过抑制细胞的拓扑异构酶I(topoisomerase enzymes I，TopoI)表现出很强的抗肿瘤活性(Hsiang Y.H.；Hertzberg R.；Hecht S.；Liu L.F.J.Biol.Chem.，1985，260，14873)。该酶在细胞DNA的复制、转录、重组、修复和超螺旋调控中发挥了关键作用，尤其是在肿瘤细胞中该酶呈现出不受其他因素影响的高水平的表达。由于作用机制独特，目前被作为抗肿瘤药物的主攻方向之一，三个CPT类抗肿瘤药物已经上市。日本第一制药公司研制的盐酸伊立替康(Irinotecan，CPT-11)，用作结肠癌的一线治疗药物(Vanhoefer U.，Harstrick A.，Achterrath W.，et.al.J Clin Oncol，2001，19：1501)。盐酸拓扑替康(Topotecan)1996年上市，广泛用作卵巢癌和小细胞肺癌的治疗(Hans-Georg Lerchen，Drugs Fut，2002，27，9：869)。2004年Belotecan(CKD)被用于卵巢癌和小细胞肺癌的治疗(Ahn S.K.，Kim J.M.，Hong C.I.Drugs Fut，2000，25：1243)。

在人的血液中，CPT存在着内酯环和羧酸形式之间的平衡，人血清白蛋白更易与羧酸形式的化合物结合，使平衡向右移动，导致血浆中喜树碱类化合物99.0％以上以羧酸形式存在(MiZ.；Burke T.G.Biochemistry 1994，33，10325)。CPT的羧酸形式使毒性增加，而抗肿瘤活性微乎其微。因此，CPT和已知的CPT衍生物普遍存在较高的毒副作用。

发明内容

本发明公开了一系列新的噁唑骈CPT20(S)酯衍生物，它们可以用于治疗各种类型的肿瘤。本发明的化合物比CPT和其他的CPT衍生物有更强的抗肿瘤活性，更好的血液稳定性和更低的毒副作用。

本发明是一种新的具有抗肿瘤活性的噁唑骈CPT酯衍生物。CPT的20位是具有羟基(S)的立体异构体，按照本发明的方法，在9，10位并入噁唑环，同时在20位的羟基上酯化生成对应的酯。发明人惊异的发现这种结构的改变使内酯环在人体血液中的稳定性提高，毒性减少。另外，也易于形成水溶性的盐，便于给药。药理试验证明：本发明化合物在体外对多种瘤株显示很强的抑制作用，在人血液中的稳定性大大增强。它们可以用于多种肿瘤的治疗，耐受性良好，能够配制成口服、局部或胃肠外给药的药物制剂。

本发明的喜树碱类化合物的结构通式如下：

其中

R₁表示氢、卤素、低级烷基、低级烷氧基、氰基、硝基、羟基、氨基、卤代低级烷基、卤代低级烷氧基、羧基、低级烷氧基羰基；

R₂表示氢、卤素、低级烷基、低级烷氧基、氰基、硝基、羟基、氨基、卤代低级烷基、卤代低级烷氧基、羧基、低级烷氧基羰基、三低级烷基硅烷基、低级烷基碳酰氧基、低级烷基碳酰胺基、低级烷基碳酰氧甲基；

R表示-(CH₂)nR₃；n＝0～10，其中R₃表示：低级烷基、低级烯基、苯基、X基团取代的苯基或被1-2个X或Y基团取代的具有1～3个N、O、S的5元或6元杂环；

X基团表示卤代、低级烷基、低级烷氧基、氰基、硝基、羟基、氨基、卤代低级烷基、卤代低级烷氧基、羧基、低级烷氧基羰基、低级烷基碳酰氧基、低级烷基碳酰胺基或低级烷基碳酰氧甲基；

Y基团表示苯环、嘧啶环、吡咯环或吡啶环；

上述低级烷基、低级烯基、低级烷氧基表示C1～C6的烷基、烯基、烷氧基。

R₁优选表示氢、卤代、C1-C3的烷基、X基团取代的氨基。

R₂优选表示氢、C1-C3的烷基。

R优选表示乙烯基或-(CH₂)₂R₃，R₃优选表示被1-2个X或Y基团取代的含1～2个N原子的5元或6元杂环。

更为优选的是：

R₁表示氢、卤代、

R₂表示氢或乙基；R表示CH＝CH₂或-(CH₂)₂R₃，R₃表示甲氧基苯基哌嗪、甲基苯基哌嗪、4-氟苯基哌嗪或2-嘧啶基哌嗪。

本发明还包括通式I化合物的药学上可以接受的盐。药学上可以接受的盐是使有机或无机酸与式I所代表的化合物所生成的盐。此时式I中存在反应碱(例如可以利用的氨)。适合的盐例如包括乙酸盐、盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐等。还包括药学上可接受的其他盐。

本发明的部分化合物结构式如下：

本发明通式I的化合物可以用下列方法制备：

其中，a是浓硝酸/浓硫酸，b是N，N-R₁双取代的苯胺，c是丙烯酰氯，d是氨基化合物。

本发明还公开了含有通式I的药物组合物，该组合物含有通式I化合物及药学上可接受的载体。所述药学上可接受的载体是惰性的，如稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂等。所述组合物的剂型可以是：片剂、胶囊、锭剂、液体溶液或悬浮液；直肠剂型如栓剂；非肠道途径如肌内、静脉、皮内或皮下给药以及脂质体。

本发明的化合物一般的剂量为0.01-500mg/kg，也可根据病情的轻重偏离这个范围。

本发明的化合物经药理学试验表明，具有抗肿瘤或抗病毒功效，并且作用效果优于喜树碱。下面是本发明部分化合物的药理学试验及结果，所用化合物的编号等同于前文中的编号：

一、化合物IC₅₀试验：

测定按常规采用溴化四氮唑蓝(MTT)法，筛选了人乳腺癌细胞株(231)，人肝癌细胞株(Hepg2)，人结肠癌细胞株(CACO-2)，人小细胞肺癌细胞株(NCI-H446)。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测，大规模的抗肿瘤药物筛选，细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。阳性对照喜树碱(CPT)、拓扑替康(TPT)、10-羟基喜树碱(HCPT)，后两者是目前临床上广泛使用的抗肿瘤药物。

以肿瘤细胞体外筛选的方法测试了其活性。筛选了五种细胞株：人胃腺癌细胞株(BGC)、人乳腺癌细胞株(231)，人肝癌细胞株(Hepg2)，人结肠癌细胞株(CACO-2)，人小细胞肺癌细胞株(NCI-H446)。测定按常规采用溴化四氮唑蓝(MTT)法。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性溴化四氮唑蓝还原为难溶性的蓝紫色结晶物(Formazan)并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的紫色结晶物，用酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。该方法已广泛用于一些生物活性因子的活性检测，大规模的抗肿瘤药物筛选，细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。

细胞抑制率的计算：

下面是部分药物的IC₅₀值：

体外活性筛选结果

注释：仅对初筛结果细胞抑制率≥50％的化合物计算IC₅₀。IC₅₀值单位：μmol/L；“-”表示该项测试未做；“*”表示为初筛结果细胞抑制率＜50％，无法计算IC₅₀值。作为阳性对照的是喜树碱(CPT，1)、拓扑替康(TPT，3)、10-羟基喜树碱(HCPT)，后两者是目前临床上广泛使用的抗肿瘤药物。

由上表本发明的化合物均显示有很好地对肿瘤细胞的抑制活性。

二、化合物的血液稳定性试验

1.样品处理过程：

取化合物2、CPT的溶液20ul于离心管中，加人全血500ul，涡旋15秒，置37℃水浴中。在固定时间点取出加甲醇2ml沉淀蛋白，涡旋1分钟。

高速离心(12000rad)离心8分钟。

取上清液进样，进样体积为20μl。

2.时间点设计：

化合物2与CPT相同：0，10min，20min，30min，1h，2h。

3.溶液配制：

化合物IIa的样品溶液配制：0.0154g化合物IIa于10ml容量瓶中，加二氯甲烷适量，超声溶解，加二氯甲烷至刻度，即得2.54mM的样品溶液。

CPT的样品溶液配制：0.0111g CPT于10ml容量瓶中，加DMF适量，超声溶解，加DMF至刻度，即得3.19mM的样品溶液。

化合物60的样品溶液配制：0.0140g化合物3于10ml容量瓶中，加二氯甲烷适量，超声溶解，加二氯甲烷至刻度，即得2.79mM的样品溶液。

标准溶液配制：吸取60μl样品溶液至10ml容量瓶中，加甲醇稀释至刻度。

4.色谱条件：

色谱柱：SHIMADZU VP-ODS 4.6×250mm

流速：1ml/min

柱温：35℃

检测波长：382nm

化合物IIa的流动相：甲醇∶磷酸缓冲盐(10mM KH₂PO₄，pH 4.0)＝70∶30；

CPT的流动相：甲醇∶磷酸缓冲盐(10mM KH₂PO₄，pH 4.0)＝60∶40；

化合物60的流动相：甲醇∶磷酸缓冲盐(10mM KH2PO4，pH 4.0)＝70∶30。

5.实验结果与讨论

稳定性测试结果：

时间点(min)	0	10	20	30	60	120
时间点(min)	0	10	20	30	60	120	CPT占初始值的比例	1	0.5157	0.3618	0.2106	0.0678	0.0518
化合物2占初始值的比例	1.0000	0.8974	0.9523	0.9957	0.9206	0.9172	CPT占初始值的比例	1	0.5157	0.3618	0.2106	0.0678	0.0518

实验结果证明化合物2内酯环的稳定性比对照物CPT有了显著的提高。在20min，血液中内酯环形式CPT占总量三分之一，而化合物2有约95％的内酯环形式；在2h，内酯环形式CPT占总量仅剩约5.2％，而化合物2还有约92％的内酯环形式。

综上所述，本发明的化合物在人的全血中稳定性有显著的提高，提示有可能具有更低的毒副作用。

具体实施方式

实施例1

噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-丙烯酰酯(化合物1)的合成

在250ml三颈瓶中，投入二氯甲烷100ml(溶剂)，依次加入噁唑[4，5-i]喜树碱2g(5.1mmol)、吡啶8.1ml(0.102mol)、丙烯酸酐14.2ml(0.113mol)，加热至回流，约8h。反应完毕后，以稀HCl溶液20ml×5洗涤，无水Na₂SO₄干燥。柱层析分离纯化得到产品1.1g，为黄红色粉末状固体。收率：48.7％。m.p.：260℃(dec).ESI-MS：C₂₄H₁₇N₃O₆，MW＝443；m/z：442(M-H)。¹H-NMR(CDCl₃，300Hz)：δ9.07(t，1H，J＝1.92Hz，噁唑H)，8.34(d，1H，J＝2.04Hz，C₇-H)，8.28(m 1H，C₁₂-H)，8.09(m，1H，C₁₁-H)，7.26(s，1H，C₁₄-H)；6.55(d，1H，J＝1.28Hz，C₂₀-CH＝CH₂)，6.32(m，1H，C₂₀-CH＝CH₂)，6.01(d，1H，J＝1.26Hz，C₂₀-CH＝CH₂)；5.72(m，1H，C₅-CH₂-)，5.47(d，1H，J＝7.86，C₅-CH₂-)，5.38(m，2H，C₁₇-CH₂-)；2.16(m，2H，C₂₀-CH₂CH₃)，1.01(m，3H，C₂₀-CH₂CH₃)(ppm)。IR：(KBr)3458，1760，1747，1661，1601，1519，1405，1233，1056，838，682(cm^-1)。

实施例2

噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-(4-(2-吡啶基)-哌嗪基-1)-丙酯(化合物2)的合成

将[4，5-i]噁唑喜树碱-20-O-丙烯酯0.20g(4.5mmol)溶于氯仿30ml中，加入1-(2-吡啶基)-哌嗪0.22ml(0.22g，13.5mmol)，室温搅拌2h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析得浅黄色粉末25mg。收率9.2％。m.p.：190℃(dec)；ESI-MS：C₃₃H₃₀N₆O₆，MW＝606。m/z：607(M+H)，629(M+Na)。¹H-NMR(CDCl₃)：δ：9.01(s，1H，噁唑H)，8.34(s，1H，C₇-H)，8.11(m，1H，C₁₂-H)，8.06(m，1H，C₁₁-H)，7.84(m，1H，C₁₄-H)：7.36~6.48(m，4H，C₂₀-Pyridine：Ar-H)；5.73(d，1H，J＝17.1Hz，C₅-CH₂-)，5.42(s，1H，C₅-CH₂-)，5.39(d，2H，J＝15.4Hz，C₁₇-CH₂-)；3.63(s，4H，C₂₀-COCH₂CH₂-)，2.78(b，8H，C₂₀-Piperazine：-CH₂CH₂-)；2.16(m，2H，C₂₀-CH₂CH₃)；1.02(t，3H，J＝7.45Hz，C₂₀-CH₂CH₃)(ppm)。IR：(KBr)3437，3128，2933，1756，1665，1610，1592，1235，1156，1047，827，683。(cm^-1)；Anal：Calcd：(C₃₀H₃₀N₆O₆.1.5H₂O)C：62.55；N：13.26；H：5.24；Found：C：63.01，N：12.86，H：4.95。

实施例3

噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-(4-(4-硝基苯基)哌嗪基-1)-丙酯(化合物3)的合成

将[4，5-i]噁唑喜树碱-20-O-丙烯酯0.20g(0.45mmol)溶于氯仿30ml中，加入1-(4-硝基苯基)哌嗪0.89g(1.35mmol)，室温搅拌2h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析得浅黄色粉末26mg。收率：8.9％.m.p.＝245℃(dec)；ESI-MS：C₃₄H₃₀N₆O₈，MW＝650；m/z＝651(M+H)，673(M+Na)。¹H-NMR(CDCl₃，300Hz)：δ：9.01(s，1H，噁唑H)，8.32(s，1H，C₇-H)，7.28~6.56(3H，C₁₂-H，C₁₁-H，C₁₄-H)；7.89(m，4H，Ar-H)；5.68~5.39(4H，C₅-CH₂-；C₁₇-CH₂-)；3.44(m，4H，C₂₀-COCH₂CH₂-)，2.40(b，8H，C₂₀-Piperazine-CH₂CH₂-)，2.14(m，2H，C₂₀-CH₂CH₃)；1.01(t，3H，C₂₀-CH₃，J＝7.42Hz)(ppm)；IR：(KBr)3415，3104，2931，1761，1660，1609，1562，1593，1516，1478，1233，1112，1049，995，825，752，683(cm¹)。Anal：Calcd：(C₃₀H₃₀N₆O₈.2.5H₂O)C：58.70；N：12.08；H：5.07；Found：C：58.33，N：12.35，H：4.84。

实施例4

噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-(4-(4-甲基苯基)哌嗪基-1)-丙酯(化合物4)的合成

将[4，5-i]噁唑喜树碱-20-O-丙烯酯0.20g(0.45mmol)溶于氯仿30ml中，加入1-(4-甲基苯基)哌嗪0.28g(1.35mmol)的氯仿溶液。室温搅拌1h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析得浅黄色粉末21mg。收率：7.5％.m.p.＝260℃ dec；ESI-MS：C₃₅H₃₃N₅O₆，MW＝619；m/z＝620(M+H)，642(M+Na)。¹H-NMR(CDCl₃)：δ：9.01(s，1H，噁唑H)，8.32(d，1H，J＝3.91Hz，C7-H)，7.88(s，1H，C₁₂-H)，7.50(s，1H，C₁₁-H)，7.28(d，1H，J＝13.1Hz，C₁₄-H)，6.89~6.62(4H，Ar-H)；5.68(m，1H，C₅-CH₂-)，5.34(1H，m，C₅-CH₂-)，5.30(m，2H，C₁₇-CH₂-)；3.15(m，4H，C₂₀-COCH₂CH₂-)，2.73(b，8H，C₂₀-Piperazine：-CH₂CH₂-)；2.19~2.16(5H，m，C₂₀-CH₂CH₃，Ph-CH₃)；1.01(t，3H，J＝7.45Hz，C₂₀-CH₂CH₃)(ppm)。IR：(KBr)3450，2978，2938，1754，1663，1611，1514，1451 1234，1157，1047，935，820，681，625(cm^-1)。

实施例5

噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-(4-苯基-哌嗪基-1)-丙酯(化合物5)的合成

将[4，5-i]噁唑喜树碱-20-O-丙烯酯0.20g(0.45mmol)溶于氯仿30ml中，加入1-苯基哌嗪0.21g(1.35mmol)的氯仿溶液。室温搅拌12h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析得浅黄色粉末21mg。收率：7.7％。m.p.240℃ dec；ESI-MS：C₃₄H₃₁N₅O₆，MW＝605，m/z＝606(M+H)，628(M+Na)。¹H-NMR(CDCl₃)：δ：(ppm)9.01(s，1H，噁唑H)，8.33(s，1H C₇-H)，8.01(s，1H，C₁₂-H)，7.88(s，1H，C₁₁-H)，7.30(s，1H，C₁₄-H)，7.12~6.77(5H，Ar-H)；5.69(d，1H，J＝17.1Hz，C₅-CH₂-)，5.43(d，1H，J＝15.6Hz，C₅-CH₂-)，5.38(d，2H，J＝15.3Hz，C₁₇-CH₂-)；3.23(s，4H，C₂₀-COCH₂CH₂-)，2.80(b，8H，C₂₀-Piperazine：-CH2CH2-)；2.29(m，2H，C₂₀-CH₂CH₃)，1.01(t，3H，J＝7.46Hz，C₂₀-CH₂CH₃(ppm)。IR：(KBr)3459，2977，2935，2823，1753，1665，1609，1557，1498，1233，1154，1045，940，824，681(cm^-1)。

实施例6

噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-(4-苄基哌嗪基-1-)-丙酯(化合物6)的合成

将[4，5-i]噁唑喜树碱-20-O丙烯酯0.20g(0.45mmol)溶于氯仿30ml中，加入1-苄基哌嗪0.28g(1.35mmol)的氯仿溶液。室温搅拌12h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析得浅黄色粉末12mg。收率：4.3％.m.p.251℃(dec)；ESI-MS：C₃₅H₃₃N₅O₆，MW＝619，m/z＝620(M+H)，642(M+Na)。¹H-NMR(CDCl₃)：δ：9.06(s，1H，噁唑H)，8.34(s，1H，C₇-H)，8.22(d，1H，J＝9.33Hz，C₁₂-H)，8.06(d，1H，J＝9.1Hz，C₁₁-H)，7.26(d，5H，J＝5.94Hz，Ar-H)；5.71(d，1H，J＝17.19Hz，C₅-CH₂-)，5.43(t，3H，J＝17.43Hz，C₁₇-CH₂-)；3.51(m，2H，-Ph-CH₂-)；2.66~2.29(m，14H，C₂₀-COCH₂CH₂-；C₂₀-CH₂CH₃；C₂₀-Piperazine：-CH₂CH₂-)，1.01(t，3H，J＝7.5Hz，C₂₀-CH₂CH₃)(ppm)。IR：(KBr)3447，3061，2808，1747，1660，1599，1558，1519，1451，1233，1052，821，681(cm^-1)。

实施例7

噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-(4-(4-氟苯基)哌嗪基)-丙酯(化合物7)的合成

将[4，5-i]噁唑喜树碱-20-O-丙烯酯0.20g(0.45mmol)溶于氯仿30ml中，加入1-(4-氟苯基)哌嗪0.24g(1.35mmol)。室温搅拌2h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析得浅黄色粉末15mg。收率：5.35％。m.p.235℃(dec)；ESI-MS：C₃₄H₃₀N₅O₆F，MW＝622(M-H)。¹H-NMR(CDCl₃)：δ：9.06(s，1H，噁唑H)，8.32(s，1H，C₇-H)，8.07(d，1H，J＝9.2Hz，C₁₂-H)，7.90(d，1H，J＝9.2Hz，C₁₁-H)，7.28(s，1H，C₁₄-H)，6.75(2H，t，Ar-H)，6.64(2H，t，Ar-H)；5.69(1H，d，J＝17.1Hz，C₅-CH₂-)，5.53(3H，m，C₅-CH₂-，C₁₇-CH₂-)，3.10(4H，s，C₂₀-COCH₂CH₂-)；2.80~2.27(8H，m，C₂₀-Piperazine：-CH₂CH₂-)；1.59(s，2H，C₂₀-CH₂CH₃)，1.04(t，3H，C₂₀-CH₂CH₃，J＝7.45Hz)(ppm)。IR：(KBr)3452，3020，2820，1747，1663，1609，1509，1454，1235，1159，1049，901，820，680(cm^-1)。

实施例8

噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-(4-(4-氯苄基)哌嗪基)-丙酯(化合物8)的合成

将[4，5-i]噁唑喜树碱-20-O-丙烯酯0.20g(0.45mmol)溶于氯仿30ml中，加入1-(4-氯苄基)哌嗪0.26g(1.35mmol)的氯仿溶液。室温搅拌12h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析得浅黄色粉末11mg。收率：3.74％。m.p.255℃(dec)；ESI-MS：C₃₅H₃₂N₅O₆Cl，MW＝653，m/z＝654(M+H)，676(M+Na)。¹H-NMR(CDCl₃)：δ：9.06(s，1H，噁唑H)，8.35(d，1H，J＝5.95Hz，C₇-H)，8.20(d，1H，J＝9.2Hz，C₁₂-H)，8.05(d，1H，J＝9.2Hz，C₁₁-H)，7.26(s，1H，C₁₄-H)；7.20(d，2H，J＝8.35Hz，C₂₀：Ar-H)，7.13(d，2H，J＝8.25Hz，Ar-H)。5.71(d，1H，J＝17.1Hz，C₅-CH₂-)，5.4(d，1H，J＝17.2Hz，C₅-CH₂-)，5.36(d，2H，J＝2.1Hz，C₁₇-CH₂-)；3.5(s，2H，C₂₀：-Ph-CH₂-)；2.7(m，4H，C₂₀-COCH₂CH₂-)；2.5(8H，b，C₂₀-Piperazine：-CH₂CH₂-)；2.28~2.16(m，2H，C₂₀-CH₂CH₃)；0.99(t，3H，J＝7.45Hz，C₂₀-CH₂CH₃)(ppm)。IR：(KBr)3439，3064，2811，1747，1661，1602，1561，1520，1439，1235，1159，1049，820，680(cm^-1)。

实施例9

2’-氟-噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-(4-(4-甲氧基苯基)哌嗪基)-丙酯(化合物9)的合成

将2’-氟-[4，5-i]噁唑喜树碱-20-O-丙烯酯0.20g(0.44mmol)溶于氯仿30ml中，加入1-(4-甲氧基苯基)哌嗪0.29g(1.35mmol)的氯仿溶液。室温搅拌12h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析得浅黄色粉末23mg。收率：7.40％。m.p.213℃(dec)¹H-NMR(CDCl₃)：δ：8.35(d，1H，J＝2.89Hz，C₇-H)，8.23(d，1H，J＝9.21Hz，C₁₂-H)，8.07(d，1H，J＝9.21Hz，C₁₁-H)，8.04(s，1H，C₁₄-H)；7.26(5H，s，Ar-H)；5.7(d，1H，J＝17.2Hz，C₅-CH₂-)，5.3(d，3H，J＝4.26Hz，C₅-CH₂-；C₁₇-CH₂-)；3.56(m，2H，C₂₀-CH₂CH₂-)，2.76(10H，m，C₂₀-COCH₂CH₂-：C₂₀-Piperazine：-CH₂CH₂-)；2.17(m，2H，C₂₀-CH₂CH₃)；1.7(s，3H，-OCH₃)；1.0(m，3H，C₂₀-CH₂CH₃)(ppm)。IR：(KBr)3415，3011，2924，1748，1661，1604，1512，1238，1156，822，617(cm^-1)。

实施例10

噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-(4-(2-嘧啶基)哌嗪基-1)-丙酯(化合物10)的合成

将[4，5-i]噁唑喜树碱-20-O-丙烯酯0.20g(0.45mmol)溶于氯仿30ml中，加入1-(2-嘧啶基)哌嗪0.22ml(0.22g，1.35mmol)。室温搅拌12h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析浅黄色粉末15mg。收率：5.5％。m.p.＝243℃(dec)；ESI-MS：C₃₂H₂₉N₇O₆，MW＝607；m/z＝608(M+H)，630(M+Na)。¹H-NMR(CDCl₃)：δ：9.06(d，1H，J＝9.5Hz，噁唑H)，8.34(d，1H，J＝6.93Hz，C₇-H)，8.23(d，2H，J＝4.71Hz，C₁₂-H，C₁₁-H)，8.11(t，1H，J＝7.2Hz，C₁₄-H)；7.7(s，1H，C₂₀：pyridine-ArH)，7.36(s，1H，C₂₀：pyridine-ArH)，6.45(s，1H，C₂₀：pyridine-ArH)；5.75(d，1H，J＝20.9Hz，C₅-CH₂-)，5.43(d，3H，J＝17.8Hz，C₅-CH₂-；C₁₇-CH₂-)；3.95(m，4H，C₂₀-CO-CH₂CH₂-)；2.65(m，8H，C₂₀-Piperazine：-CH₂CH₂-)，2.17(m，2H，C₂₀-CH₂CH₃)，1.03(t，3H，J＝7.5Hz，C₂₀-CH₂CH₃)(ppm)。IR：(KBr)3454，1745，1662，1608，1585，1497，1235，1048，983，832，682(cm^-1)。Anal：Calcd：(C₃₂H₂₉N₇O₆.H₂O)C：61.43；N：15.67；H：4.99；Found：C：61.58，N：15.30，H：4.92。

实施例11

噁唑[4，5-i]喜树碱-7-乙基-20-O-(4-(4-甲基苄基)哌嗪基-1)-丙酯(化合物11)的合成

将[4，5-i]噁唑喜树碱7-乙基-20-O-丙烯酯0.20g(0.45mmol)溶于氯仿30ml中，加入1-(4-甲基苄基)哌嗪0.26g(1.35mmol)的氯仿溶液。室温搅拌12h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析得浅黄色粉末15mg。收率：4.9％。m.p.＝263℃(dec)，¹H-NMR(CDCl₃)：δ：9.06(s，1H，噁唑H)，8.23(d，1H，J＝9.2Hz，C₁₂-H)，8.07(d，1H，J＝9.2Hz，C₁₁-H)，7.20(s，1H，C₁₄-H)；7.07(m，4H，Ar-H)；5.72(d，1H，J＝17.2Hz，C₅-CH₂-)，5.44(t，3H，J＝10.8，C₅-CH₂-；C₁₇-CH₂-)；3.48(m，4H，-Ph-CH₂-，C₇-CH₂CH₃)；2.69(t，12H，J＝21.7Hz，C₂₀-COCH₂CH₂-；C₂₀-Piperazine；-CH₂CH₂-)；2.23(m，5H，C₂₀-CH₂CH₃；C₂₀-Ph-CH₃)；1.33(t，3H，＝7.11Hz，C₇-CH₂CH₃)1.01(t，3H，＝7.48Hz，C₂₀-CH₂CH₃)(ppm)。

实施例12

(N-甲基，N-苯基-胺基-)噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-(4-(4-硝基苯基)哌嗪-1)-丙酯(化合物12)的合成

将(N-甲基，N-苯基-胺基-)噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-丙烯酯0.20g (0.36mmol)溶于氯仿30ml中，加入1-(4-硝基苯基)哌嗪的氯仿溶液，含有1-(4-硝基苯基)哌嗪0.23g(1.09mmol)。室温搅拌12h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析得浅黄色粉末14mg。收率：5.2％。m.p.＝257℃(dec)；ESI-MS：C₄₁H₃₇N₇O₈，MW＝755；m/z＝778(M+Na)。¹H-NMR(CDCl₃)：δ8.98(s，1H，C₇-H)，7.96(t，2H，J＝5.3Hz，C₁₂-H，C₁₁-H)，7.71(t，1H，J＝3.72Hz，C₁₄-H)，7.59~6.42(m 10H，噁唑N-Ph：Ar-H；Ar-H)；5.77(d，1H，J＝17.2Hz，C₅-CH₂-)，5.50(d，1H，J＝17.2Hz，C₅-CH₂-)，5.36(d，2H，J＝11.4Hz，C₁₇-CH₂-)；3.77(s，3H，-N-CH₃)，(3.48，1.04，Ethyl Acetate-CDCl₃)；3.30～3.22(m，4H，C₂₀-CO-CH₂CH₂-)；2.65(m，8H，C₂₀-Piperazine：-CH₂CH₂-)；2.3(m，2H，C₂₀-CH₂₂CH₃)；1.02(t，3H，C₂₀-CH₂CH₃)。IR：(KBr)3434，3011，1748，1662，1636，1595，1564，1496，1241，1114，802，760(cm^-1)。Anal：Calcd：(C₄₁H₃₇N₇O₈.2.6H₂O)C：61.36；N：12.22；H：5.30；Found：C：61.28，N：11.72，H：5.02。

实施例13

(N-甲基，N-苯基-胺基-)噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-(4-(4-氟苯基)哌嗪-1)-丙酯(化合物13)的合成

将(N-甲基，N-苯基-胺基-)噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-丙烯酯0.20g(0.36mmol)溶于氯仿30ml中，加入1-(4-氟苯基)哌嗪0.19g(1.09mmol)的氯仿溶液。室温搅拌12h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析得浅黄色粉末12.8mg。收率：4.9％。m.p.＝270℃(dec)；ESI-MS：C₄₁H₃₇N₆O₆F，MW＝728；m/z＝729(M+H)751(M+Na)。¹H-NMR(CDCl₃)：δ8.96(s，1H，C₇-H)，7.75(m，2H，C₁₂-H，C₁₁-H)，7.53(m，4H，Ar-H)，7.37(m，1H，C₁₄-H)；7.28(s，1H，噁唑N-Ph：Ar-H)，6.83~6.68(4H，噁唑N-Ph：Ar-H)；5.76(d，1H，J＝17.2Hz，C₅-CH₂-)，5.46(d，1H，J＝17.2Hz，C₅-CH₂-)，5.35(d，2H，J＝7.40Hz，C₁₇-CH₂-)；3.77(s，3H，-N-CH₃)，(3.48，1.04，Ethyl Acetate-CDCl₃)；3.09(m，4H，C₂₀-CO-CH₂CH₂-)；2.76(b，8H，C₂₀-Piperazine：-CH₂CH₂-)；2.23(m，2H，C₂₀-CH₂CH₃)；1.02(t，3H，C₂₀-CH₂CH₃，J＝7.47Hz)(ppm)。IR：(KBr)3412，2916，1746，1665，1634，1565，1495，1150，814(cm^-1)。

实施例14

(N-甲基，N-苯基-胺基-)噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-(4-苄基哌嗪-1)-丙酯(化合物14)的合成

将(N-甲基，N-苯基-胺基-)噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-丙烯酯0.20g(0.36mmol)溶于氯仿30ml中，加入1-苄基哌嗪0.19g(1.09mol)的氯仿溶液。室温搅拌12h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析得浅黄色粉末10mg。收率：3.8％。m.p.＝270℃(dec)；ESI-MS：C₄₂H₄₀N₆O₆，MW＝724；m/z＝725(M+H)。¹H-NMR(CDCl₃)：δ8.94(s，1H，C₇-H)，7.90(d，1H，J＝8.85Hz，C₁₂-H)，7.78(d，1H，J＝9.09Hz，C₁₁-H)，7.49(m，4H，Ar-H)，7.36(m，1H，C₁₄-H)；7.24(m，5H，噁唑N-Ph：Ar-H)；5.71(d，1H，J＝17.2Hz，C₅-CH₂-)，5.43(d，1H，J＝17.1Hz，C₅-CH₂-)，5.31(s，2H，C₁₇-CH₂-)；3.74(s，3H，-N-CH₃)；3.43(m，2H，C₂₀：-Ph-CH₂-)，2.76~2.54(12H，C₂₀-CO-CH₂CH₂-，C₂₀-Piperazine：-CH₂CH₂-)；2.18(m，2H，C₂₀-CH₂CH₃)；1.00(t，3H，C₂₀-CH₂CH₃，J＝7.47Hz)；IR：(KBr)3483，3414，2945，1744，1638，1618m1563，1149，814(cm^-1)。Anal：Calcd：(C₄₂H₄₀N₆O₆.2H₂O)C：66.30；N：11.05；H：5.83；Found：C：66.11，N：10.70，H：5.55。

实施例15

噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-(4-乙基-哌嗪基-1)-丙酯(化合物15)的合成将[4，5-i]噁唑喜树碱-20-O-丙烯酯0.20g(0.45mmol)溶于氯仿30ml中，加入1-乙基哌嗪0.15g(1.35mmol)的氯仿溶液。室温搅拌12h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析得浅黄色粉末19mg。收率：7.7％。m.p.230℃dec；¹H-NMR(CDCl₃)：δ：(ppm)9.03(s，1H，噁唑H)，8.30(s，1H C₇-H)，7.98(s，1H，C₁₂-H)，7.84(s，1H，C₁₁-H)，7.30(s，1H，C₁₄-H)，5.65(d，1H，J＝15.1Hz，C₅-CH₂-)，5.39(d，1H，J＝16.6Hz，C₅-CH₂-)，5.37(d，2H，J＝16.6Hz，C₁₇-CH₂-)；3.20(s，4H，C₂₀-COCH₂CH₂-)，2.77(b，10H，-CH₂-)；2.29(m，2H，C₂₀-CH₂CH₃)，1.11(t，3H，J＝6.89Hz，C-CH₂CH₃)，1.01(t，3H，J＝7.42Hz，C₂₀-CH₂CH₃(ppm)。

实施例16

噁唑[4，5-i]喜树碱-20-O-(四氢吡咯-1)-丙酯(化合物16)的合成

将[4，5-i]噁唑喜树碱-20-O-丙烯酯0.20g(0.45mmol)溶于氯仿30ml中，加入四氢吡咯0.10g(1.35mmol)的氯仿溶液。室温搅拌12h，以6g硅胶进行柱层析，氯仿∶甲醇＝100∶1(v/v)洗脱，柱层析得浅黄色粉末43mg。收率：21％。m.p.212℃ dec；δ：(ppm)8.99(s，1H，噁唑H)，8.35(s，1H C7-H)，8.04(s，1H，C12-H)，7.85(s，1H，C11-H)，7.32(s，1H，C14-H)，5.71(d，1H，J＝15.8Hz，C5-CH2-)，5.44(d，1H，J＝16.1Hz，C5-CH2-)，5.38(d，2H，J＝16.1Hz.C17-CH2-)；3.24(s，4H，C20-COCH2CH2-)，2.71(b，8H，-CH2-)；2.30(m，2H，C20-CH2CH3)，1.03(t，3H，J＝7.40Hz，C20-CH2CH3(ppm)。

Claims

1、下列通式I的喜树碱类化合物或其药用盐：

其中

R₁表示氢、卤素；R₂表示氢或乙基；R表示CH＝CH₂或-(CH₂)₂R₃，R₃表示甲氧基苯基哌嗪、甲基苯基哌嗪、4-氟苯基哌嗪或2-嘧啶基哌嗪。

2、权利要求1的通式I的喜树碱类化合物或其药用盐，其中所述的药用盐是乙酸盐、盐酸盐、硫酸盐或磷酸盐。

3、一种药物组合物，其中含有权利要求1的通式I的化合物或其药用盐及药学上可接受的载体。

4、权利要求1的通式I化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。