CN100367843C - 核桃属树木嫩枝扦插繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明是一种核桃属树木嫩枝扦插繁殖技术，提供一种把嫁接技术和扦插技术有机地结合起来的技术，通过复幼技术、黄化技术、生长调节剂的诱导生根技术，对接穗进行特殊处理，然后进行培育和移植，实现核桃属树木的工业化无性繁殖技术。本发明的步骤和实施方式等详见说明书。本发明操作方法简便，常规设备和普通技术人员即可完成，成本低，生产效率高，适于工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及难生根树种的无性繁殖技术，具体地说，属于核桃属(Juglans sp.)树木嫩枝扦插繁殖技术。
背景技术
核桃(Juglans regia L.)的栽培历史悠久，拥有四大干果之首的美誉。核桃是一个广域经济树种，由于其良好的经济、生态和社会效益，在世界各国被广泛栽培。
我国核桃生产的现状是面积大、产量低、品质差。自上世纪60年代开始，我国开展了核桃选优协作和良种培育攻关，培育出一系列核桃良种，还培育出一些核桃与铁核桃种间杂交种，为我国核桃良种化打下较好的基础。在初步解决了核桃良种问题之后，核桃无性繁殖困难又突出地呈现在核桃良种化进程中，成为制约其发展的最主要因素，表现在一方面核桃良种不断涌现，另一方面用于规模化生产的品种却寥寥无几。
核桃无性繁殖困难表现在，常规嫁接成活率不稳定，繁殖系数低，扦插不易生根等缺点，即使常规嫁接成活，砧木与接穗在营养形态上不匹配，长成后的核桃有木材品质差，结果率低等缺点，加上多数良种为早实类型，形成长枝的能力很差，导致接穗产量远远满足不了嫁接繁殖的需要，使新品种的推广工作受到很大限制。因此，解决核桃良种快繁问题显得尤为迫切。
针对核桃无性繁殖现状，前人进行了一些研究，特别是随着植物组织培养技术的不断发展和完善，为核桃快繁提供了一种新的方法和良好的研究体系。在扦插繁殖实践方面，尽管采用了各种技术措施，但均未获得较为满意的结果。有报道介绍核桃品种经过试管内多继代培养，采用两步法(暗培养、光培养)成功地诱导了生根，实现了试管无性繁殖。
然而，这项技术存在设备昂贵、技术复杂、生产成本较高等不足，难以在生产单位推广和应用
发明内容
本发明针对需要解决的核桃属植物生根难，扦插繁殖系数小，移植成活率低的技术难题，提供了一种操作简单、成本低廉、稳定高效的核桃属植物无性繁殖的技术。
本发明的目的可以通过下述方法实现：
1、提供一种把嫁接技术和扦插技术有机地结合的无性繁殖技术，通过复幼技术、黄化技术、生长调节剂的诱导生根技术，对穗条进行特殊处理，实现核桃属树木的工业化无性繁殖技术。
2、根据以上1所述的核桃属树木嫩枝扦插繁殖技术，该技术的的步骤为：
1)植物材料的复幼处理；
2)埋干和黄化处理；
3)生长调节剂的配制和使用；
4)扦插培育；
5)移栽。
3、根据上述2所属的核桃属树木嫩枝扦插繁殖技术的步骤，其中植物材料的复幼处理步骤为：
①选接穗：选取健康饱满的，用现有技术方法培育的接穗。
②将选好的接穗嫁接在一年生基径大于1cm的砧木上，(选用本砧成活率最高)经过一年的培育，即成一年生嫁接苗，也就是用来培养扦插所用穗条的母枝。
生成的嫁接苗的健康标准：一年生嫁接苗顶芽饱满，叶色深绿，地茎(嫁接苗接口处)1cm以上，枝条粗壮，完全木质化，根系发达，无病虫害。
4、根据上述2所述的核桃属树木嫩枝扦插繁殖技术的步骤，其中埋干和黄化处理的步骤为：
①自接口以上剪取上述复幼的一年生嫁接苗，平放在沙上，覆沙4～5cm埋干，经过15～20天后萌生嫩枝，每根嫁接苗长约80～120cm，每4～5cm萌生嫩芽2～3个，继续覆沙平埋，促进萌生的嫩枝基部黄化；一般埋干后20～40天，待每根嫩枝长出4～5对复叶，嫩枝基部因为覆沙而有4cm明显黄化的部位时，即可算黄化合格。
②自接口以上，剪取半木质化，健壮无病虫害，直径约为0.4～0.6cm，长度为5～10cm的嫩枝，作为扦插材料。
③扦插前叶片处理方法：剪去插穗基部以上3～4cm的全部叶片，其余叶片剪除1/2待用。
埋干还可以连砧木一起平埋，方法与步骤同上。
5、根据上述2所述的核桃属树木嫩枝扦插繁殖技术的步骤，其中生长调节剂的配制和使用方法为：
①生长调节剂的配制：
所用的生长调节剂可以是IBA溶液也可以是ABT生根粉溶液、IAA溶液、NAA溶液，有效浓度为0.25～4mg·ml-1其配制方法如下：
用玻璃烧杯将4mg生长调节剂溶解在500ml 75％的酒精中，再加500ml蒸馏水，所得原液浓度为4000ppm；
取上述配制好的原液100ml，加入蒸馏水0～1500ml，混合均匀， 即为所需0.25～4mg·ml-1生长调节剂溶液。
②生长调节剂的使用方法：将嫩枝插穗基部在配制好的生长调节剂中进行速蘸处理，速蘸的时间是2～3秒。
6.扦插培育：
①准备插壤：插壤为充分腐熟的牛粪和粗锯末(直径2～4mm或4～5mm的腐熟糠皮)以等体积比混合，插壤用杀菌剂消毒。
杀菌剂可以是2000倍多菌灵液也可以是现有技术配方的各种杀菌剂。
②将准备好的嫩枝利用现有技术扦插在插床中。
③插床呈弓形用塑料膜覆盖，采用棚外遮荫和喷水降温，棚内光强为全日照的17.1～38.0％，插床温度15～28℃，插壤温度4月为7～10℃，5月为15～25℃，6月为18～26℃；棚内相对湿度保持在85％～98％；插壤含水率95％左右。
7、移栽
①温室移栽
a强光炼苗：以光强1020Lx为宜，14天后叶色明显加深至深绿，叶片加厚，抗性增强，利于移栽成活。强光炼苗是决定移栽成活率的关键环节。
b移栽基质的选择：蛭石+草炭土以体积比为2∶3的比例混合，搅拌均匀，此种基质保水性好、透气性好，较理想；基质湿度：82～85％。
c环境条件的控制：温度25±3℃，湿度控制在95％左右。
②大田移栽
移栽苗在温室中生长40天即可移入大田，按常规叶面喷水方法，前7～10天每天喷2～3次，7～10天以后每3～5天喷水一次。初期田间管理主要是水分管理，此时叶面蒸发快而苗根吸水能力差，采用叶面喷水方式，是保持移栽苗体内水分平衡的有效方法。
移栽前不主张施肥，移栽1周后可以叶面施肥，大约3～4周后，就可以按照一般大田育苗技术规范管理。
8.此技术还可用于其它难生根树种的无性繁殖。
下面对本发明进行进一步描述：
上述植物材料的复幼处理和埋干黄化能促进嫩枝插穗生根，其影响见表1
表1
| 处理 | 生根率(％) |
| 未经复幼处理的核桃苗埋干 | 0b |
| 复幼嫁接苗 | 0b |
| 复幼嫁接苗埋干 | 85a |
(说明：生根率数据采用百分数差异显著性比较，其它数据采用GraphPad3.0软件进行比较，Dunnett’s测验确定显著性水平，小写字母不同表示差异达显著水平)
上述黄化处理与扦插生根的关系以奇异核桃Paradox，J.regia x J.hansis)和辽宁1号核桃(Juglans regia L.)为例说明。
在埋干(包括黄化)处理中，嫩枝基部黄化或未黄化对嫩枝扦插成活影响明显。见图1基部黄化对嫩枝插穗生根的影响
由图1可以看出，基部未黄化的奇异核桃和辽宁1号核桃，嫩枝的生根率分别为15.8％和5％，基部黄化的分别是93.3％和69.17％。在试验中还发现，如果覆沙太厚，超过6cm会影响埋干苗侧芽的萌发和生长，因此覆沙厚度以4～5cm为宜。
上述的核桃属树木嫩枝扦插繁殖技术的步骤，其中生长调节剂的配制和使用方法为：
IBA溶液：用玻璃烧杯将4mgIBA溶解在500ml75％的酒精中，再加500ml蒸馏水，所得原液浓度为4000ppm。使用时根据试验需要确定稀释倍数，就可以得到不同浓度的IBA溶液，取上述配制好的原液100ml，加入蒸馏水至0～1500ml，混合均匀，即为所需0.25～4mg·ml-1生长调节剂溶液。对当时用不完或不用的原液应该用棕色玻璃瓶装好，放在5℃以下避光处保存。
ABT生根粉溶液：配方及配制方法同上
IAA溶液： 配方及配制方法同上
NAA溶液： 配方及配制方法同上
不同的生长调节剂对生根情况的影响如表2所示：
表2：辽宁1号核桃用不同生长调节剂处理平均生根情况
| 生长调节剂类型 | 浓度1(ppm) | 生根率(％) | 浓度2(ppm) | 生根率(％) | 浓度2(ppm) | 生根率(％) |
| IBA | 500 | 85 | 1000 | 80 | 2000 | 60 |
| ABT | 500 | 74 | 1000 | 77 | 2000 | 34 |
| IAA | 500 | 52 | 1000 | 45 | 2000 | 21 |
| NAA | 500 | 36 | 1000 | 23 | 2000 | 15 |
从表2中可以看出，植物生长调节剂最优选为IBA，其效果稳定，作用明显。
不同浓度的生长调节剂对生根情况也有很大的影响，以IBA溶液为例。
表3不同浓度IBA溶液处理对嫩枝扦插生根和愈合的影响
| IBA(mg·ml<sup>-1</sup>) | 切口愈合率(％) | 死亡率(％) | 生根率(％) |
| 0 | 0d | 77.5a | 0d |
| 0.25 | 20.0c | 50.3b | 15.0c |
| 0.35 | 75.6b | 22.4c | 38.2b |
| 0.45 | 85.6b | 0e | 91.8a |
| 0.5 | 90.0a | 0e | 93.3a |
| 1 | 92.5a | 5.75d | 86.5a |
| 2 | 93.8a | 0e | 87.5a |
| 4 | 81.3b | 14.5c | 41.4b |
| 8 | 75.8b | 24.0c | 0d |
(说明：切口愈合率和生根率数据采用百分数差异显著性比较，其它数据采用GraphPad3.0软件进行比较，Dunnett’s测验确定显著性水平，小写字母不同表示差异达显著水平)
由表3可以看出，IBA溶液的浓度在0.25～4mg·ml-1范围时，对嫩枝扦插生根和愈合的效果最好。
植物生长调节剂：药名：IBA(吲哚丁酸)/IAA(吲哚乙酸)/NAA(萘乙酸)；注册商标：SIGMA；农药登记号：133-32-4 EC NO 205-105-5；生产厂家：SIGMA CHEMICALCO.；经销商：北京辉北生物技术有限公司。
本发明技术培育的核桃属树种成活率达68-92％
此技术还可用于其它难生根树种的无性繁殖。
将复幼的嫁接苗埋干、黄化，促进生根的技术分别应用于核桃属及其它一些难生根树种上，均获得了较好的生根结果，如表4所示。
表4核桃属树木嫩枝扦插繁殖技术在核桃属及其它难生根树种上的应用
| 树种 | 扦插嫩枝数 | 生根率(％) | 树种 | 扦插嫩枝数 | 生根率(％) | |
| 核桃楸 | 80 | 97.5 | 马褂木 | 80 | 86.3 | |
| 山核桃 | 62 | 93.5 | 山杨 | 200 | 98 | |
| 黑核桃 | 76 | 53.9 | 黑樱桃 | 90 | 75.6 | |
| 楸树 | 60 | 93.3 | 红叶李 | 70 | 88.6 | |
| 三毛杨 | 85 | 100 |
本发明把嫁接技术和扦插技术有机地结合起来，通过复幼技术、黄化技术、生长调节剂的诱导生根技术，对接穗进行特殊处理，实现核桃属树木的工业化无性繁殖技术。本发明操作方法简便，常规设备和普通技术人员即可完成，成本低，生产效率高，适于工业化生产。
具体实施方式
实施例1奇异核桃接穗的复幼处理
①选接穗：选取健康的，用现有技术方法培育的奇异核桃接穗1000根。
②将选好的接穗嫁接在一年生基径大于1cm的本砧上，经过一年的培育，即成一年生嫁接苗，也就是将用来培养扦插所用穗条的母枝。生成健康嫁接苗982根。
生成的嫁接苗的健康标准：一年生嫁接苗顶芽饱满，叶色深绿，地茎(嫁接苗指接口)1cm以上，枝条粗壮，完全木质化，根系发达，无病虫害。
实施例2山核桃(J.cathayensis Dode.)接穗的复幼处理
选接穗：选取健康的，用现有技术方法培育的山核桃接穗1000根。
将选好的接穗嫁接在一年生基径大于1cm的本砧上，经过一年的培育，即成一年生嫁接苗，也就是将用来培养扦插所用穗条的母枝。生成健康嫁接苗976根。
生成的嫁接苗的健康标准：一年生嫁接苗顶芽饱满，叶色深绿，地茎(嫁接苗指接口)1cm以上，枝条粗壮，完全木质化，根系发达，无病虫害。
实施例3辽宁1号核桃接穗的复幼处理
选接穗：选取健康的，用现有技术方法培育的市售辽宁1号核桃接穗1000根。其他操作同实施例1，生成健康嫁接苗984根。
实施例4奇异核桃嫁接苗埋干和黄化处理
①将实施例1培育的复幼的奇异核桃一年生嫁接苗，截取接口以上枝条平埋(埋干)，埋干覆沙4～5cm，15～20天后自平埋的枝条上萌生嫩枝，每根嫁接苗枝条大约长80～120cm，每5cm枝条上有2～3个芽眼，枝条上每一个芽眼萌生一条嫩枝。覆沙的目的是促进萌生的嫩枝基部黄化；一般埋干后20～40天，每根萌条有4～5对复叶，嫩枝基部因为覆沙而有4cm明显黄化的部位时，即可算黄化合格。
②自接口以上，剪取半木质化，健壮无病虫害，直径约为0.4～0.6cm，长度为7～10cm的嫩枝，982根嫁接苗，生成50845根合格黄化嫩枝，作为扦插材料。
③扦插前叶片处理方法：去除插穗基部以上3～4cm的全部叶片，其余叶片剪除1/2待用。
实施例5奇异核桃嫁接苗埋干和黄化处理
将实施例2所述复幼的山核桃一年生嫁接苗，连砧木一起平埋(埋干)，其它步骤同实施例4，生成62413根黄化合格的嫩枝，作为扦插材料
实施例6奇异核桃嫁接苗埋干和黄化处理
将实施例1所述复幼的奇异核桃一年生嫁接苗，连砧木一起平埋(埋干)，其它步骤同实施例4，生成58426根黄化合格的嫩枝，作为扦插材料。
实施例7生长调节剂IBA溶液的配制和使用
①IBA溶液的配制：用玻璃烧杯将4mgIBA溶解在500ml75％的酒精中，再加500ml蒸馏水，所得IBA原液浓度为4000ppm。
取上述配制好的IBA原液100ml，加入蒸馏水至700ml，混合均匀，即为所需0.5mg·ml-1IBA溶液。
②生长调节剂的使用方法：将嫩枝插穗基部在配制好的生长调节剂中进行速蘸处理，速蘸的时间是2～3秒。
实施例8～11生长调节剂IBA溶液的配制和使用
配制IBA原液方法同实施例6，取上述配制好的IBA原液100ml，配制IBA溶液方法同实施例6，加入蒸馏水量及所配制IBA溶液浓度见下表，使用IBA溶液方法同实施例6。
| 实施例8 | 实施例9 | 实施例10 | 实施例11 | |
| 加入蒸馏水量 | 0ml | 100ml | 200ml | 400ml |
| IBA溶液浓度 | 4mg·ml<sup>-1</sup> | 2mg·ml<sup>-1</sup> | 1.33mg·ml<sup>-1</sup> | 0.8mg·ml<sup>-1</sup> |
| 实施例12 | 实施例13 | 实施例14 | 实施例15 | |
| 加入蒸馏水量 | 500ml | 790ml | 1043ml | 1500ml |
| IBA溶液浓度 | 0.67mg·ml<sup>-1</sup> | 0.45mg·ml<sup>-1</sup> | 0.35mg·ml<sup>-1</sup> | 0.25mg·ml<sup>-1</sup> |
实施例16辽宁1号核桃苗的扦插培育
①准备插壤：插壤为充分腐熟的牛粪和直径4～5mm的腐熟糠皮以等比例(v/v)混合，插壤用2000倍多菌灵液消毒。
将准备好的，经过生长调节剂0.5mg·ml-1IBA溶液。速蘸处理的辽宁1号核桃穗条1000根，利用现有技术扦插在插床中。
②插床用弓形塑料膜覆盖，采用棚外遮荫和喷水降温，棚内光强为全日照的17.1～38.0％，插床温度15～28℃，插壤温度4月为7～10℃，5月为15～25℃，6月为18～26℃，插壤温度与季节和气候有关；棚内相对湿度保持在85％～98％；插壤含水率95％左右。
经过扦插培育后，有820根苗正常生根，长势良好，生根率82％。
实施例17辽宁1号核桃苗的移苗
①温室移栽
a移栽基质的选择：蛭石+草炭土以体积比为2∶3的比例混合，搅拌均匀，此种基质保水性好、透气性好，较理想；基质湿度：82～85％。
b将上述实施例16中培育好的辽宁1号核桃苗移植到温室中
c强光炼苗：以光强1020Lx为宜，14天后叶色明显加深至深绿，叶片加厚，抗性增强，利于移栽成活。强光炼苗是决定移栽成活率的关键环节。
d环境条件的控制：温度25±3℃，相对湿度控制在95％左右。
②大田移栽
移栽苗在温室中生长40天即可移入大田，前7～10天每天喷2～3次，7～10天以后每3～5天喷水一次。初期田间管理主要是水分管理，此时叶面蒸发快而苗根吸水能力差，采用叶面喷水方式，是保持移栽苗体内水分平衡的有效方法。
移栽前不主张施肥，移栽1周后可以叶面施肥，大约3～4周后，就可以按照一般大田育苗技术规范管理了。经过8周后检测，成活750株，幼苗长势良好。
Claims (10)
1.一种核桃属树木嫩枝扦插繁殖方法，其特征是把嫁接技术和扦插技术结合起来，包括以下具体步骤：
①植物材料的复幼处理，对接穗进行筛选，将选好的接穗嫁接在砧木上，经培育，即成嫁接苗，用于培养扦插所用穗条的母枝；
②埋干和黄化处理，将嫁接苗覆沙平埋，促进萌生的嫩枝基部黄化，剪取嫩枝，作为扦插材料；
③生长调节剂的使用，将嫩枝基部在配制好的生长调节剂中进行速蘸处理；
④扦插培育，将准备好的经生长调节剂处理的嫩枝扦插在插床中；
⑤移栽，经过温室移栽和大田移栽两个步骤将扦插苗移入大田。
2.根据权利要求1所述的核桃属树木嫩枝扦插繁殖方法，其特征在于：
所述的接穗嫁接使用的砧木为一年生基径大于1cm的砧木。
3.根据权利要求1所述的核桃属树木嫩枝扦插繁殖方法，其特征在于：所述的嫁接苗的培育时间为一年。
4.根据权利要求1所述的核桃属树木嫩枝扦插繁殖方法，其特征在于：
所述的平埋的覆沙深度为4～5cm。
5.根据权利要求1所述的核桃属树木嫩枝扦插繁殖方法，其特征在于：所述的剪取嫩枝，是自接口以上，剪取健康无病虫害，直径为0.4～0.6cm，长度为5～10cm的嫩枝并剪去插穗基部以上3～4cm的全部叶片，其余叶片剪除1/2，作为扦插材料。
6.根据权利要求1所述的核桃属树木嫩枝扦插繁殖方法，其特征在于：
所用的生长调节剂是IBA溶液、ABT生根粉溶液、IAA溶液或NAA溶液，其有效浓度为0.25～4mg·L-1。
7.根据权利要求1或6所述的核桃属树木嫩枝扦插繁殖方法，其特征在于：所用的生长调节剂的配置方法如下：
①用玻璃烧杯将4mg生长调节剂溶解在500ml 75％的酒精中，再加500ml蒸馏水，所得原液浓度为4000ppm；
②取上述配制好的原液100ml，加入蒸馏水0～1500ml，混合均匀，即为所需0.25～4mg·L-1生长调节剂溶液。
8.根据权利要求1所述的核桃属树木嫩枝扦插繁殖方法，其特征在于：
所述的插床中的插壤为充分腐熟的牛粪和直径为2～4mm的粗锯末或直径为4～5mm的腐熟糠皮以等体积比混合，并用杀菌剂消毒；插壤温度4月为7～10℃，5月为15～25℃，6月为18～26℃，插壤含水率95％左右。
9.根据权利要求1或8所述的核桃属树木嫩枝扦插繁殖方法，其特征在于：
所述的插床呈弓形，用塑料膜覆盖，采用棚外遮荫和喷水降温，棚内光强控制在全日照的17.1～38.0％，插床温度15～28℃，棚内相对湿度保持在85～98％。
10.根据权利要求1所述的核桃属树木嫩枝扦插繁殖方法，其特征在于：
所述的温室移栽包括：
a.移栽基质的选择，将蛭石+草炭土以体积比为2∶3的比例混合，搅拌均匀，基质湿度为82～85％；
b.强光炼苗，采用的光强以1020Lx为宜，炼苗时间为14天；
c.温室育苗，强光炼苗后，继续培养26天；
d.温室环境条件的控制为温度控制在25±3℃，相对湿度控制在95％左右；
e.温室移栽40天，将所述的移栽苗移入大田。
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