BR112020018699B1 - Composição probiótica e aditivo alimentício - Google Patents
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Abstract
COMPOSIÇÃO PROBIÓTICA E ADITIVO ALIMENTÍCIO. Trata-se de composições probióticas que contêm um consórcio de micróbios de fermentação de ácido láctico benéficos, bactérias que pertencem à família Bacilli, e levedura, e métodos com o uso dos mesmos como probiótico humano para ingestão ou como um aditivo de ração animal.
Description
[0001] A presente invenção refere-se a composições de micro-organismo e métodos para usar os mesmos. Em particular, a presente invenção se refere a uma composição de consórcios de micro-organismo incluindo micro-organismos de ácido láctico cocultivados com outras bactérias Bacilli e levedura para produzir uma composição útil em várias indústrias, incluindo agricultura, alimentos e ração animal e aditivos alimentícios, saúde e como uma substituição química.
[0002] A conscientização ambiental, restrições de recursos e a opinião pública geral têm demanda crescente por produtos e tecnologias verdes eficazes. Tais produtos e tecnologias verdes são aqueles que promovem a sustentabilidade e têm impacto mínimo no ambiente. Uma área que é explorada para desenvolver os produtos e tecnologias verdes é o uso de micro-organismos e suas propriedades especializadas.
[0003] Os micro-organismos foram usados na agricultura, saúde animal, saúde humana e gerenciamento de resíduos. Na agricultura, os micro-organismos são usados para intensificar a compostagem e corretivo de solo. Em animais e seres humanos, as bactérias benéficas, conhecidas como probióticos, são usadas para prevenir doenças causadas por bactérias nocivas que invadem a flora natural. Em gerenciamento de resíduo, os micro-organismos são usados para acelerar a decomposição de resíduo e degradar compostos odorosos.
[0004] Embora o uso de micro-organismos seja explorado, tal uso é impedido por questões de estabilidade, armazenamento e eficácia. Consequentemente, há uma necessidade por desenvolver tecnologias com base em micro-organismo e produtos que são estáveis sob várias condições, mantêm altos títulos de micróbios, têm uma vida útil considerável e podem ser facilmente usados.
[0005] Em um primeiro aspecto, a invenção fornece uma composição probiótica que é livre de bactérias não Bacilli detectáveis. Em uma modalidade, a presente composição probiótica em forma líquida contém uma fonte de carbono, um produto de fermentação, cerca de 20.000 a 50.000 cfu/ml de uma combinação de pelo menos cinco bactérias de ácido láctico incluindo Bacillus subtilis, um Lactobacillus sp., um Bifidobacterium sp., um Lactococcus sp., e Streptococcus thermophilus, pelo menos duas bactérias Bacilli gram-positivas não patogênicas com capacidade para fermentação, cada uma em um título de > 300.000 cfu/ml, e uma levedura.
[0006] Em outra modalidade, a presente composição probiótica está em forma seca, obtida por liofilização, secagem por aspersão, ou semelhantes, de uma composição líquida que contém uma fonte de carbono, um produto de fermentação, cerca de 20.000 a 50.000 cfu/ml de uma combinação de pelo menos cinco bactérias de ácido láctico incluindo Bacillus subtilis, um Lactobacillus sp., um Bifidobacterium sp., um Lactococcus sp., e Streptococcus thermophilus, pelo menos duas bactérias Bacilli gram-positivas não patogênicas com capacidade para fermentação, cada uma em um título de > 300.000 cfu/ml, e uma levedura.
[0007] Em outra modalidade, a presente composição probiótica em forma líquida contém uma fonte de carbono, um produto de fermentação, cerca de 20.000 a 50.000 cfu/ml de uma combinação de pelo menos cinco bactérias de ácido láctico incluindo Bacillus subtilis, um Lactobacillus sp., um Bifidobacterium sp., um Lactococcus sp., e Streptococcus thermophilus, pelo menos duas bactérias Bacilli gram-positivas não patogênicas com capacidade para fermentação, cada uma em um título de > 300.000 cfu/ml, bactérias púrpuras sem enxofre em um título de pelo menos 50.000 cfu/ml e uma levedura.
[0008] Em outra modalidade, a presente composição probiótica está em forma seca, obtida por liofilização, secagem por aspersão, ou semelhantes, de uma composição líquida que contém uma fonte de carbono, um produto de fermentação, cerca de 20.000 a 50.000 cfu/ml de uma combinação de pelo menos cinco bactérias de ácido láctico incluindo Bacillus subtilis, um Lactobacillus sp., um Bifidobacterium sp., um Lactococcus sp., e Streptococcus thermophilus, pelo menos duas bactérias Bacilli gram-positivas não patogênicas com capacidade para fermentação, cada uma em um título de > 300.000 cfu/ml, bactérias púrpuras sem enxofre em um título de pelo menos 50.000 cfu/ml, e uma levedura.
[0009] Em uma modalidade, a levedura é uma espécie de Saccharomyces. Em uma modalidade mais específica, a levedura é Saccharomyces cerevisiae. Em uma modalidade ainda mais específica, a levedura é uma cepa específica de Saccharomyces cerevisiae que é geralmente reconhecida como segura para ingestão ou aprovada para uso em ração animal ou alimento humano, como, por exemplo, Saccharomyces cerevisiae NCYC Sc47, Saccharomyces cerevisiae PCM KKP 2059p, ou Saccharomyces cerevisiae IFO 0203.
[0010] Em uma modalidade, as bactérias Bacilli gram-positivas não patogênicas com capacidade para fermentação são uma ou mais dentre Bifidobacterium spp., Lactobacillus spp., Lactococcus spp., Camobacterium spp., Streptococcus spp., e Bacillus spp. Em uma modalidade mais específica, as bactérias Bacilli gram-positivas não patogênicas com capacidade para fermentação são uma ou mais dentre Bifidobacterium animalis, Lactobacillus acidophilus, Bacillus subtilus, Lactococcus lactis, Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum, Camobacterium divergens, e Lactobacillus rhamnosus.
[0011] Em uma modalidade particular, as presentes bactérias Bacilli gram-positivas não patogênicas com capacidade para fermentação compreende Bifidobacterium animalis DSM 16284, Lactobacillus acidophilus CECT 4529 e Bacillus subtilus ATCC PTA 6737. Em outra modalidade particular, as presentes bactérias Bacilli gram- positivas não patogênicas com capacidade para fermentação compreendem Lactococcus lactis PCM B/00039, Lactobacillus casei PCM B/00080, Lactobacillus plantarum PCM B/00081 e Camobacterium divergens PCM KKP 20l2p. Em ainda outra modalidade particular, as presentes bactérias Bacilli gram-positivas não patogênicas com capacidade para fermentação compreendem Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469.
[0012] Em uma modalidade, a fonte de carbono contém um carboidrato, como glicose, amido, celulose, frutose, sacarose ou semelhantes. Em uma modalidade, a fonte de carbono é material vegetal, como silagem. Em outra modalidade, a fonte de carbono é um material vegetal da família de grama (Poaceae). Em algumas modalidades, a fonte de carbono é material vegetal relativamente não refinado, como silagem, palha, palhiço, grama, talos, folhas e semelhantes. Em outras modalidades, a fonte de carbono compreende um material vegetal mais refinado, como farinha, xarope, melaço ou semelhantes. Em outra modalidade, uma fonte de carbono compreende moléculas orgânicas purificadas ou semipurificadas, como proteína, gordura, ácidos graxos, carboidratos ou semelhantes. Em uma modalidade mais específica, a fonte de carbono compreende um farelo de grãos, como, por exemplo, farelo de arroz, ou um xarope ou melaço de cana-de-açúcar.
[0013] Em uma modalidade, o produto de fermentação contém um ácido orgânico, um álcool, ou ambos. Em uma modalidade particular, o produto de fermentação contém ácido láctico ou etanol. Em outra modalidade, o produto de fermentação contém melaço de cana-de-açúcar fermentado ou farelo de arroz fermentado.
[0014] Em uma modalidade específica, a composição probiótica contém (a) uma mistura de bactérias vivas de ácido láctico em título cumulativo de 20.000 a 50.000 cfu/ml incluindo (i) Bacillus subtilis, (ii) um Lactobacillus sp., (iii) um Bifidobacterium sp., (iv) um Lactococcus sp., e (v) Streptococcus thermophilus; (b) Saccharomyces cerevisiae NCYC Sc47; e (c) >300.000 cfu/ml cada um dentre (i) Bifidobacterium animalis DSM 16284, (ii) Lactobacillus acidophilus CECT 4529, e (iii) Bacillus subtilus ATCC PTA 6737. Em uma modalidade mais específica, a composição probiótica contém (a) uma mistura de bactérias vivas de ácido láctico em título cumulativo de 20.000 a 50.000 cfu/ml incluindo (i) Bacillus subtilis, (ii) um Lactobacillus sp., (iii) um Bifidobacterium sp., (iv) um Lactococcus sp., e (v) Streptococcus thermophilus; (b) Saccharomyces cerevisiae NCYC Sc47; (c) >300.000 cfu/ml cada um dentre (i) Bifidobacterium animalis DSM 16284, (ii) Lactobacillus acidophilus CECT 4529, e (iii) Bacillus subtilus ATCC PTA 6737 e (d) melaço fermentado.
[0015] Em outra modalidade específica, a composição probiótica contém (a) uma mistura de bactérias vivas de ácido láctico em título cumulativo de 20.000 a 50.000 cfu/ml incluindo (i) Bacillus subtilis, (ii) um Lactobacillus sp., (iii) um Bifidobacterium sp., (iv) um Lactococcus sp., e (v) Streptococcus thermophilus; (b) Saccharomyces cerevisiae PCM KKP 2059p; e (c) >300.000 cfu/ml cada um dentre (i) Lactococcus lactis PCM B/00039, (ii) Lactobacillus casei PCM B/00080, (iii) Lactobacillus plantarum PCM B/00081, e (iv) Carnobacterium divergens PCM KKP 20l2p. Em uma modalidade mais específica, a composição probiótica contém (a) uma mistura de bactérias vivas de ácido láctico em título cumulativo de 20.000 a 50.000 cfu/ml incluindo (i) Bacillus subtilis, (ii) um Lactobacillus sp., (iii) um Bifidobacterium sp., (iv) um Lactococcus sp., e (v) Streptococcus thermophilus; (b) Saccharomyces cerevisiae PCM KKP 2059p; (c) >300.000 cfu/ml cada um dentre (i) Lactococcus lactis PCM B/00039, (ii) Lactobacillus casei PCM B/00080, (iii) Lactobacillus plantarum PCM B/00081, e (iv) Carnobacterium divergens PCM KKP 20l2p; e (d) melaço fermentado.
[0016] Em ainda outra modalidade específica, a composição probiótica contém (a) uma mistura de bactérias vivas de ácido láctico em título cumulativo de 20.000 a 50.000 cfu/ml incluindo (i) Bacillus subtilis, (ii) um Lactobacillus sp., (iii) um Bifidobacterium sp., (iv) um Lactococcus sp., e (v) Streptococcus thermophilus; (b) Saccharomyces cerevisiae IFO 0203; e (c) >300.000 cfu/ml de Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469. Em uma modalidade mais específica, a composição probiótica contém (a) uma mistura de bactérias vivas de ácido láctico em título cumulativo de 20.000 a 50.000 cfu/ml incluindo (i) Bacillus subtilis, (ii) um Lactobacillus sp., (iii) um Bifidobacterium sp., (iv) um Lactococcus sp., e (v) Streptococcus thermophilus; (b) Saccharomyces cerevisiae IFO 0203; (c) >300.000 cfu/ml de Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469; e (d) melaço fermentado.
[0017] Em um segundo aspecto, a invenção fornece um método para fabricar a composição probiótica do primeiro aspecto da invenção. Em uma modalidade, o método contém as etapas de (a) obter um produto fermentado que contém bactérias vivas de ácido láctico e, então, (b) adicionar uma bactéria Bacilli gram-positiva não patogênica com capacidade para fermentação e uma levedura ao produto fermentado.
[0018] Em outra modalidade, o método contém as etapas de (a) fermentar uma primeira fonte de carbono com um consórcio de bactérias de ácido láctico para produzir um produto fermentado, e (b) adicionar uma bactéria Bacilli gram-positiva não patogênica com capacidade para fermentação e uma levedura ao produto fermentado. Opcionalmente, uma segunda fonte de carbono ou primeira fonte de carbono adicional pode ser adicionada como uma etapa (c), e a nova mistura permitiu que o fermento forme o produto de fermentação adicional.
[0019] Em uma modalidade, as bactérias vivas de ácido láctico ou o consórcio de bactérias de ácido láctico contém Bacillus subtilis, Lactobacillus sp., Bifidobacterium sp., Lactococcus sp. e Streptococcus thermophilus. Em uma modalidade, a fonte de carbono é ou contém glicose, sacarose, frutose, amido e/ou celulose, e semelhantes. Em outra modalidade, a fonte de carbono é uma fonte vegetal, como silagem, palhiço, palha, farelo e/ou xarope ou melaço, e semelhantes. Em uma modalidade preferencial, a fonte de carbono é farelo de arroz ou melaço de cana-de-açúcar, e o produto de fermentação é melaço fermentado ou farelo fermentado que contém ácido láctico.
[0020] Em um terceiro aspecto, a invenção fornece uma ração animal que contém uma composição probiótica do primeiro aspecto.
[0021] Em um quarto aspecto, a invenção fornece um método para produzir a ração animal do terceiro aspecto. Em uma modalidade, a composição probiótica é combinada com uma fonte de nutrição, como silagem, farelos, grãos alimentícios, e semelhantes.
[0022] Em um quinto aspecto, a invenção fornece um método para manter ou melhorar a saúde de um animal alimentando-se o animal com a composição probiótica do primeiro aspecto ou a ração animal do terceiro aspecto da invenção.
[0023] Em um sexto aspecto, a invenção fornece um método para manter ou melhorar a qualidade alimentícia ou rendimento alimentício de um animal criado para alimentação alimentando-se o animal com a composição probiótica do primeiro aspecto ou a ração animal do terceiro aspecto da invenção.
[0024] De acordo com a presente invenção, as composições incluindo múltiplos micro-organismos assim como métodos para uso foram constatados. Em particular, foi constatado que um consórcio de micro-organismos pode ser cultivado para produzir composições que têm estabilidade e meia-vida intensificados. Tais composições são úteis nas indústrias de agricultura, alimentos e rações e saúde, assim como a substituição química em outras indústrias.
[0025] As composições úteis nessa invenção incluem micro-organismos e aditivos. Os micro-organismos podem incluir a espécie de bactérias e fungos, incluindo levedura e espécies de mofo. Os micro-organismos adequados incluem aqueles comumente conhecidos na técnica como micro-organismos fototrópicos, de ácido láctico, probióticos e que utilizam sulfeto.
[0026] Os exemplos de micro-organismos fototrópicos, de ácido láctico, probióticos, membros de família Bacilli e que utilizam sulfeto são encontrados, por exemplo, em Bergey's Manual of Determinative Bacteriology and Bergey's Manual of Systematic Bacteriology. Por exemplo, os micro-organismos que utilizam sulfeto incluem a espécie de bactérias púrpuras sem enxofre, Chromatianeae, bactérias verdes com enxofre, bactérias incolores com enxofre e bactérias verdes filamentosas. Os microorganismos probióticos podem incluir gênero Lactobacillus, gênero Enterococcus, gênero Bifidiobacterium, gênero Bacillus, gênero Pseudomonas, gênero Sporolactobacillus, gênero Micromonospora, gênero Micrococcus, gênero Rhodococcus e E. coli. Os micro-organismos fototrópicos podem incluir Rhodopseudomonas, Rodobactor e combinações dos mesmos. Por exemplo, os micro-organismos fototrópicos podem incluir Rhodopseudomonas palustris, R. sphaeroides, Rhodospirillum centenum, R. photometricum, R. rubrum, Rhodopila globiformis, Rhodobacter sphaeroides e combinações dos mesmos. Os microorganismos de ácido láctico podem incluir Lactobacillus, Lactococcus e combinações dos mesmos. Por exemplo, os micro-organismos de ácido láctico podem incluir Lactobacillus casei, L. plantarum, L. acidophilus, L. fermentum, L. brevis, L. lactis, L. reuteri, L. bulgaricus, L. cellobiosus, L. curvatus, L. delbrukil, L. helbeticus, L. euterii, L. salivarius, L. rhamnosus, L. gaserli, L. jensenii, L. sporogenes, Lactococcus lactis, Streptococcus (Enterococcus) faecium, S. faecalis, S. cremoris, S. di acetyl actis, S. intermedius, S. lactis, S. thermophilus, Pediococuss acidilactici, P. cerevisiae (damnosus), P. pentosaceus, P. acidilacticii, Leuconostoc mesenteroides, e combinações dos mesmos. Os micro-organismos Bacilli podem incluir o gênero Bacillus e combinações dos mesmos. Por exemplo, os micro-organismos Bacilli pode incluir Bacillus licheniformis, B. subtilus, B. toyoi, B. amyloliquefaciens, B. megateriu, B. pumilus, B. coagulans, B. lentus, B. thermophilus, B. laterosporus, B. cereus, B. circulans, e combinações dos mesmos. Os micro-organismos Bifidobacterium podem incluir o gênero Bifidobacterium e combinações dos mesmos. Por exemplo, os microorganismos Bifidobacterium podem incluir Bifidobacterium bifidum, B. pseudolongum, B. thermophilus, B. adolescentis, B. animalis, B. infantis, B. longum, e combinações dos mesmos. Micro-organismo Pseudomonas pode incluir Pseudomonas aeruginosa, P. putida, P. cepacia, P. fluorescens, e combinações dos mesmos.
[0027] Em algumas modalidades, a presente composição probiótica contém bactérias Bacilli gram-positivas não patogênicas. Em modalidades mais específicas, as bactérias Bacilli gram-positivas não patogênicas da presente composição probiótica contêm um ou mais dentre Bifidobacterium actinocoloniiforme, Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium angulatum, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium aquikefiri, Bifidobacterium asteroides, Bifidobacterium biavatii, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium bohemicum, Bifidobacterium bombi, Bifidobacterium bourn, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium callitrichos, Bifidobacterium catenulatum, Bifidobacterium choerinum, Bifidobacterium commune, Bifidobacterium coryneforme, Bifidobacterium cuniculi, Bifidobacterium crudilactis, Bifidobacterium denticolens, Bifidobacterium dentium, Bifidobacterium eulemuris, Bifidobacterium faecale, Bifidobacterium gallicum, Bifidobacterium gallinarum, Bifidobacterium hapali, Bifidobacterium indicum, Bifidobacterium inopinatum, Bifidobacterium kashiwanohense, Bifidobacterium infantis, Bifidobacterium lemurum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium magnum, Bifidobacterium merycicum, Bifidobacterium minimum, Bifidobacterium mongoliense, Bifidobacterium moukalabense, Bifidobacterium myosotis, Bifidobacterium pseudocatenulatum, Bifidobacterium pseudolongum, Bifidobacterium psychraerophilum, Bifidobacterium pullorum, Bifidobacterium reuteri, Bifidobacterium ruminantium, Bifidobacterium saguini, Bifidobacterium scardovii, Bifidobacterium stellenboschense, Bifidobacterium stercoris, Bifidobacterium saeculare, Bifidobacterium subtile, Bifidobacterium thermacidophilum, Bifidobacterium thermophilum, Bifidobacterium tissieri, e Bifidobacterium tsurumiense, Bifidobacterium animalis ssp. animalis (DSM 16284), Bifidobacterium longum subsp. Suis (DSM 20211), Bifidobacterium animalis subsp. animalis (DSM 20104), Bifidobacterium animalis subsp. lactis (DSM 20105), e Bifidobacterium animalis subsp. lactis (ATCC 27536), Lactobacillus acetotolerans, Lactobacillus acidifarinae, Lactobacillus acidipiscis, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus agilis, Lactobacillus algidus, Lactobacillus alimentarius, Lactobacillus amylolyticus, Lactobacillus amylophilus, Lactobacillus amylotrophicus, Lactobacillus amylovorus, Lactobacillus animalis, Lactobacillus antri, Lactobacillus apodemi, Lactobacillus aviarius, Lactobacillus bifermentans, Lactobacillus brevis, Lactobacillus buchneri, Lactobacillus camelliae, Lactobacillus casei, Lactobacillus catenaformis, Lactobacillus ceti, Lactobacillus coleohominis, Lactobacillus collinoides, Lactobacillus composti, Lactobacillus concavus, Lactobacillus coryniformis, Lactobacillus crispatus, Lactobacillus crustorum, Lactobacillus curvatus, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii, Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis, Lactobacillus dextrinicus, Lactobacillus diolivorans, Lactobacillus equi, Lactobacillus equigenerosi, Lactobacillus farraginis, Lactobacillus farciminis, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus fomicalis, Lactobacillus fructivorans, Lactobacillus frumenti, Lactobacillus fuchuensis, Lactobacillus gallinarum, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus gastricus, Lactobacillus ghanensis, Lactobacillus graminis, Lactobacillus hammesii, Lactobacillus hamsteri, Lactobacillus harbinensis, Lactobacillus hayakitensis, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus hilgardii, Lactobacillus homohiochii, Lactobacillus iners, Lactobacillus ingluviei, Lactobacillus intestinalis, Lactobacillus jensenii, Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus kalixensis, Lactobacillus kefiranofaciens, Lactobacillus kefiri, Lactobacillus kimchii, Lactobacillus kitasatonis, Lactobacillus kunkeei, Lactobacillus leichmannii, Lactobacillus lindneri, Lactobacillus malefermentans, Lactobacillus mali, Lactobacillus manihotivorans, Lactobacillus mindensis, Lactobacillus mucosae, Lactobacillus murinus, Lactobacillus nagelii, Lactobacillus namurensis, Lactobacillus nantensis, Lactobacillus oligofermentans, Lactobacillus oris, Lactobacillus panis, Lactobacillus pantheris, Lactobacillus parabrevis, Lactobacillus parabuchneri, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus paracollinoides, Lactobacillus parafarraginis, Lactobacillus parakefiri, Lactobacillus paralimentarius, Lactobacillus paraplantarum, Lactobacillus pentosus, Lactobacillus perolens, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus pontis, Lactobacillus protectus, Lactobacillus psittaci, Lactobacillus rennini, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus rimae, Lactobacillus rogosae, Lactobacillus rossiae, Lactobacillus ruminis, Lactobacillus saerimneri, Lactobacillus sakei, Lactobacillus salivarius, Lactobacillus sanfranciscensis, Lactobacillus satsumensis, Lactobacillus secaliphilus, Lactobacillus sharpeae, Lactobacillus siliginis, Lactobacillus spicheri, Lactobacillus suebicus, Lactobacillus thailandensis, Lactobacillus ultunensis, Lactobacillus vaccinostercus, Lactobacillus vaginalis, Lactobacillus versmoldensis, Lactobacillus vini, Lactobacillus vitulinus, Lactobacillus zeae, e Lactobacillus zymae, Lactobacillus casei DSM 28872, Lactobacillus casei PCM B/00080 , Lactobacillus casei DSM 28872, Lactobacillus plantarum KKP/593/p, Lactobacillus plantarum KKP/788/p, Lactobacillus plantarum PCM B/00081, Lactobacillus plantarum (NCIMB 41638), Lactobacillus plantarum DSM 29024, Lactobacillus plantarum (ATCC 55943), Lactobacillus plantarum (ATCC 55944), Lactobacillus plantarum (ATCC PTSA-6139), Lactobacillus plantarum (CNCM 13235), Lactobacillus plantarum DSM 11672, Lactobacillus plantarum (DSM 12836), Lactobacillus plantarum (DSM 12837), Lactobacillus plantarum (DSM 16565), Lactobacillus plantarum (DSM 16568), Lactobacillus plantarum (DSM 18112), Lactobacillus plantarum (DSM 18113), Lactobacillus plantarum (DSM 18114), Lactobacillus plantarum (DSM 19457), Lactobacillus plantarum (DSM 21762), Lactobacillus plantarum (DSM 23375), Lactobacillus plantarum (DSM 29025), Lactobacillus plantarum (DSM 3676), Lactobacillus plantarum (DSM 3677), Lactobacillus plantarum (DSM 8862), Lactobacillus plantarum (DSM 8866), Lactobacillus plantarum (LMG- 21295), Lactobacillus plantarum (NCIMB 30083), Lactobacillus plantarum (NCIMB 30084), Lactobacillus plantarum (NCIMB 30084), Lactobacillus plantarum (NCIMB 30084), Lactobacillus plantarum (NCIMB 30236), Lactobacillus plantarum (NCIMB 41028), Lactobacillus plantarum (NCIMB 42150), Lactobacillus plantarum (VTT E-78076), Lactobacillus plantarum C KKP/788/p, Lactobacillus plantarum CECT 4528, Lactobacillus plantarum CECT 4528, Lactobacillus plantarum K KKP/593/p, Lactobacillus plantarum LP287, Lactobacillus plantarum LP329, Lactobacillus plantarum LP329, Lactobacillus plantarum NCIMB 30238, Lactobacillus buchneri KKP/907/p, Lactobacillus buchneri (DSM 22963), Lactobacillus buchneri (DSM 12856) , Lactobacillus buchneri (DSM 13573), Lactobacillus buchneri CCM 1819, Lactobacillus buchneri (DSM 16774), Lactobacillus buchneri DSM 22501, Lactobacillus buchneri LN 40177 , Lactobacillus buchneri LN4637, Lactobacillus buchneri LN 40177, Lactobacillus buchneri NCIMB 40788, Lactobacillus acidophilus CECT 4529, Lactobacillus acidophilus NBIMCC 8242, Lactobacillus rhamnosus (NCIMB 41640), Lactobacillus rhamnosus (NCIMB 30121), Lactobacillus rhamnosus DSM 29226, Lactobacillus rhamnosus DSM 7133, Lactobacillus rhamnosus (CNCM-I-3698), Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469, Lactobacillus fermentum (NCIMB 41636), Lactobacillus brevis (DSM 12835) , Lactobacillus brevis (DSM 21982), Lactobacillus brevis (DSM 12835), Lactobacillus brevis DSMZ 16680, Lactobacillus paracasei (DSM 16245), Lactobacillus paracasei (DSM 16773), e Lactobacillus paracasei NCIMB 30151, Lactococcus chungangensis, Lactococcus formosensis, Lactococcus fujiensis, Lactococcus garvieae, Lactococcus hircilactis, Lactococcus lactis, Lactococcus laudensis, Lactococcus nasutitermitis, Lactococcus piscium, Lactococcus plantarum, Lactococcus raffmolactis, e Lactococcus taiwanensis, Lactococcus lactis PCM B/00039, Lactococcus lactis (DSM 11037), Lactococcus lactis (NCIMB 30117), e Lactococcus lactis (NCIMB 30160), Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, e Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus subtilis (DSM 5750), Bacillus subtilis C-3102 (DSM 15544), Bacillus subtilis (ATCC PTA- 6737), Bacillus subtilis (LMG S-l 5136, Bacillus subtilis (DSM 28343), Bacillus subtilis (DSM 27273), Bacillus subtilis DS098, Bacillus subtilis MBS-BS-01, Bacillus subtilis (ATCC 2107), Bacillus subtilis DSM 17299, Bacillus subtilis (CBS 117162), Bacillus licheniformis (DSM 5749), Bacillus licheniformis DSM 28710, Bacillus licheniformis (DSM 19670), Bacillus licheniformis (DSM 21564), Bacillus licheniformis ATCC 53757, Bacillus amyloliquefaciens CECT 5940, Bacillus amyloliquefaciens (DSM 9553), Bacillus amyloliquefaciens (DSM 9554), Bacillus amyloliquefaciens (PTA- 6507), Bacillus amyloliquefaciens (NRRL B-50013), Bacillus amyloliquefaciens (NRRL B-50104), Bacillus amyloliquefaciens SD80, e Bacillus amyloliquefaciens (ATCC 3978), Camobacterium alterfunditum, Camobacterium divergens, Camobacterium funditium, Camobacterium gallinarum, Camobacterium iners, Camobacterium inhibens, Camobacterium jeotgali, Camobacterium maltaromaticum, Camobacterium mobile, Camobacterium piscicola, Camobacterium pleistocenium, e Camobacterium viridans, Camobacterium divergens PCM KKP 20l2p, Streptococcus thermophilus, e Streptococcus thermophilus NBIMCC 8253, Streptococcus thermophilus CNRZ1066, Streptococcus thermophilus LMG13811, Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium CECT 4515, Enterococcus faecium CCM 6226, Enterococcus faecium CNCM 1-3236, Enterococcus faecium DSM 22502, Enterococcus faecium NCIMB 10415, Enterococcus faecium SF202, Enterococcus faecium SF301, Enterococcus faecium DSM 7134, Enterococcus faecium DSM 10663, Enterococcus faecium NCIMB 11181, Enterococcus faecium DSM 21913, e/ou Enterococcus faecium NBIMCC 8270.
[0028] Em algumas modalidades, a presente composição probiótica contém um micro-organismo de levedura. Os micro-organismos de levedura incluem gêneros e espécies no Ascomycota phylum, incluindo leveduras verdadeiras e leveduras de fissão. Os micro-organismos de levedura preferenciais podem incluir o gênero Saccharomyces e combinações dos mesmos. Exemplos de levedura úteis incluem, por exemplo, Saccharomyces cerevisiae.
[0029] Em uma modalidade, uma presente composição probiótica contém um Saccharomyces cerevisiae. Em uma modalidade mais específica, a presente levedura é Saccharomyces cerevisiae CNCM 1-3060, Saccharomyces cerevisiae NCYC R397, Saccharomyces cerevisiae CNCM 1-3399,
[0030] Saccharomyces cerevisiae NCYC R646, Saccharomyces cerevisiae CBS 493.9, Saccharomyces cerevisiae CNCM 1-1077, Saccharomyces cerevisiae NCYC Sc 47, Saccharomyces cerevisiae CNCM 1-4407, Saccharomyces cerevisiae MUCL 39885, Saccharomyces cerevisiae NCYC R404, Saccharomyces cerevisiae NCYC R404, Saccharomyces cerevisiae PCM KKP 2059p, ou Saccharomyces cerevisiae CNCM 1-1079.
[0031] Preferencialmente, pelo menos um micro-organismo é incluído nas composições da invenção. Mais preferencialmente, as composições incluem consórcios de dois ou mais micro-organismos. É contemplado que quando dois ou mais micro-organismos formam a composição, os micro-organismos são cocultivados. Os micro-organismos podem ser propagados por métodos conhecidos na técnica. Por exemplo, os micro-organismos podem ser propagados em um meio líquido sob condições anaeróbicas ou aeróbicas. Os meios líquidos adequados usados para cultivar micro-organismo incluem aqueles conhecidos na técnica.
[0032] Em uma modalidade, a composição inclui num número total de microorganismos de cerca de 1 a cerca de 1 milhão de unidades formadoras de colônia (CFU) por mililitro. Preferencialmente, a composição inclui um número total de microorganismos de cerca de 100.000 a cerca de 800.000 CFU por mililitro. Mais preferencialmente, a composição inclui um número total de micro-organismos de cerca de 250.000 a cerca de 600.000 CFU por mililitro. Com máxima preferência, a composição inclui um número total de micro-organismos de cerca de 300.000 CFU por mililitro.
[0033] Em uma modalidade, a composição probiótica contém uma primeira mistura de culturas de bactérias vivas de ácido láctico em um “baixo título” coletivo, e uma ou mais bactérias gram-positivas não patogênicas adicionais da família Bacilli que têm capacidade para fermentação em um “alto título” para cada espécie/cepa individual adicional de bactérias, e uma levedura de fermentação. Por título coletivo, o que se entende são os títulos individuais de cada uma das primeiras bactérias vivas de ácido láctico que se acrescentam ao título coletivo. Por exemplo, se as bactérias de ácido láctico (LAB) consistem em 15.000 cfu/ml de um Bacillus sp., 12.000 cfu/ml de um Lactobacillus sp., e 10.000 cfu/ml de um Streptococcus sp., então, o título coletivo é 37.000 cfu/ml de LAB. Em uma modalidade, “baixo título” é < 300.000 cfu/ml, cerca de 0,001 - 299.999 cfu/ml, cerca de 1.000 a 250.000 cfu/ml, 5.000 a 200.000 cfu/ml, 10.000 a 150.000 cfu/ml, 15.000 a 100.000 cfu/ml, 20.000 a 75.000 cfu/ml, 25.000 a 60.000 cfu/ml, 30.000 a 55.000 cfu/ml, cerca de 10.000 cfu/ml, cerca de 11.000 cfu/ml, cerca de 12.000 cfu/ml, cerca de 13.000 cfu/ml, cerca de 14.000 cfu/ml, cerca de 15.000 cfu/ml, cerca de 16.000 cfu/ml, cerca de 17.000 cfu/ml, cerca de 18.000 cfu/ml, cerca de 19.000 cfu/ml, cerca de 20.000 cfu/ml, cerca de 21.000 cfu/ml, cerca de 22.000 cfu/ml, cerca de 23.000 cfu/ml, cerca de 24.000 cfu/ml, cerca de 25.000 cfu/ml, cerca de 30.000 cfu/ml, cerca de 35.000 cfu/ml, cerca de 40.000 cfu/ml, cerca de 45.000 cfu/ml, cerca de 50.000 cfu/ml, cerca de 55.000 cfu/ml, cerca de 60.000 cfu/ml, cerca de 65.000 cfu/ml, cerca de 70.000 cfu/ml, cerca de 75.000 cfu/ml, cerca de 80.000 cfu/ml, cerca de 85.000 cfu/ml, cerca de 90.000 cfu/ml, cerca de 95.000 cfu/ml, cerca de 100.000 cfu/ml, cerca de 105.000 cfu/ml, cerca de 110.000 cfu/ml, cerca de 115.000 cfu/ml, cerca de 120.000 cfu/ml, cerca de 125.000 cfu/ml, cerca de 150.000 cfu/ml, cerca de 175.000 cfu/ml, cerca de 200.000 cfu/ml, cerca de 225.000 cfu/ml, cerca de 250.000 cfu/ml, cerca de 275.000 cfu/ml, ou cerca de 299.000 cfu/ml.
[0034] Em uma modalidade, “alto título” é > 300.000 cfu/ml, 300.000 a 10.000.000 cfu/ml, 500.000 a 1.000.000 cfu/ml, cerca de 300.000 cfu/ml, cerca de 325.000 cfu/ml, cerca de 350.000 cfu/ml, cerca de 375.000 cfu/ml, cerca de 400.000 cfu/ml, cerca de 425.000 cfu/ml, cerca de 450.000 cfu/ml, cerca de 475.000 cfu/ml, cerca de 500.000 cfu/ml, cerca de 525.000 cfu/ml, cerca de 550.000 cfu/ml, cerca de 575.000 cfu/ml, cerca de 600.000 cfu/ml, cerca de 625.000 cfu/ml, cerca de 650.000 cfu/ml, cerca de 675.000 cfu/ml, cerca de 700.000 cfu/ml, cerca de 725.000 cfu/ml, cerca de 750.000 cfu/ml, cerca de 775.000 cfu/ml, cerca de 800.000 cfu/ml, cerca de 825.000 cfu/ml, cerca de 850.000 cfu/ml, cerca de 875.000 cfu/ml, cerca de 900.000 cfu/ml, cerca de 925.000 cfu/ml, cerca de 950.000 cfu/ml, cerca de 975.000 cfu/ml, cerca de 9.000.000 cfu/ml, cerca de 9.500.000 cfu/ml, cerca de 10.000.000 cfu/ml, cerca de 1,5E+7, cerca de 2E+7, cerca de 2,5+7, cerca de 3E+7, cerca de 3,5E+7, cerca de 4E+7, cerca de 4,5E+7, cerca de 5E+7, cerca de 5,5E+7, cerca de 6E+7, cerca de 6,52E+7, cerca de 7E+7, cerca de 7,5E+7, cerca de 8E+7, cerca de 8,5E+7, cerca de 9E+7, cerca de 9,5E+7, cerca de 1E+8, cerca de 2E+8, cerca de 3E+8, cerca de 4E+8, cerca de 5E+8, cerca de 6E+8, cerca de 7E+8, cerca de 8E+8, cerca de 9E+8, cerca de 1E+9, cerca de 3E+9, cerca de 4E+9, cerca de 5E+9, cerca de 6E+9, cerca de 7E+9, cerca de 8E+9, cerca de 9E+9, cerca de 1E+10, cerca de 2E+10, cerca de 3E+10, cerca de 4E+10, cerca de 5E+10, cerca de 6E+10, cerca de 7E+10, cerca de 8E+10, cerca de 9E+10, ou 1E+11 cfu/ml.
[0035] Nessas modalidades em que a composição probiótica está em uma forma seca, as composições probióticas líquidas descritas no presente documento são secadas. “Forma seca” se refere a uma composição que contém < 15% de água em peso, < 14% de água em peso, < 13% de água em peso, < 12% de água em peso, < 11% de água em peso, < 10% de água em peso, < 9% de água em peso, < 8% de água em peso, < 7% de água em peso, < 6% de água em peso, < 5% de água em peso, < 4% de água em peso, < 3% de água em peso, < 2% de água em peso, < 1% de água em peso, 1% a 5% de água em peso, 2% a 6% de água em peso, cerca de 3% de água em peso, cerca de 4% de água em peso, cerca de 5% de água em peso, cerca de 6% de água em peso, cerca de 7% de água em peso, ou cerca de 8% de água em peso. Em uma modalidade, a forma seca da composição probiótica é produzida por evaporação, secagem por aspersão, liofilização ou semelhantes. Em algumas modalidades, a composição probiótica seca é encapsulada ou combinada com um excipiente para promover a estabilidade e viabilidade dos micróbios ao longo do tempo e sob condições de temperatura variáveis. Em algumas modalidades, a composição probiótica seca é dividida em partículas de escala em mícrons que são subsequentemente revestidas com polímeros biocompatíveis, como polietileno glicol (PEG), quitina, dextrina, copolímero de ácido poliláctico glicólico (PLGA), ácido poliláctico (PLA), ácido poliglicólico (PGA), ou semelhantes.
[0036] Em uma modalidade, a composição inclui micro-organismos vivos e não vivos. Em outra modalidade, a composição inclui micro-organismos vivos e não vivos. As composições que contêm micro-organismos não vivos podem conter extratos dos micro-organismos. Tais extratos podem ser considerados um produto de fermentação líquida dos micro-organismos vivos. Os extratos de micro-organismos incluem, a título de exemplo, enzimas, metabólitos, proteínas e outras substâncias que são produzidas por micro-organismos e têm capacidade para elicitar um efeito em um ambiente independentemente da situação de vida do micro-organismo.
[0037] Em uma modalidade, a composição é fermentada para produzir um produto de fermentação. A composição pode ser fermentada por cerca de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25 ou mais dias. Preferencialmente, a composição é fermentada por pelo menos cerca de 15 a cerca de 23 dias. Mais preferencialmente, a composição é fermentada por pelo menos 21 dias. Mais preferencialmente, a composição é fermentada por pelo menos 15 dias.
[0038] As composições também podem incluir aditivos. Os aditivos adequados incluem substâncias conhecidas na técnica que podem sustentar o crescimento, a produção de metabólitos específicos pelo micro-organismo, alterar o pH, enriquecer os metabólitos-alvo, intensificar os efeitos inseticidas, e combinações dos mesmos.
[0039] Os aditivos exemplificativos incluem fontes de carbono, fontes de nitrogênio, sal inorgânico, ácido orgânico, meios de crescimento, vitaminas, minerais, ácido acético, aminoácidos e semelhantes.
[0040] Exemplos de fontes de carbono adequadas incluem, sem limitação, amido, peptona, extrato de levedura, aminoácidos, açúcares, como glicose, arabinose, manose, glucosamina, maltose, cana-de-açúcar, melaço, rum, e semelhantes; sais de ácidos orgânicos, como ácido acético, ácido fumárico, ácido adípico, ácido propiônico, ácido cítrico, ácido glucônico, ácido málico, ácido pirúvico, ácido malônico e semelhantes; álcoois, como etanol, glicerol e semelhantes; óleo ou gordura, como óleo de soja, óleo de farelo de arroz, óleo de oliva, óleo de milho e óleo de gergelim.
[0041] A quantidade da fonte de carbono adicionada varia de acordo com o tipo de fonte de carbono e está tipicamente entre 1 a 100 gramas por litro de meio. A fração de peso da fonte de carbono na composição pode ser cerca de 98% ou menos, cerca de 95% ou menos, cerca de 90% ou menos, cerca de 85% ou menos, cerca de 80% ou menos, cerca de 75% ou menos, cerca de 70% ou menos, cerca de 65% ou menos, cerca de 60% ou menos, cerca de 55% ou menos, cerca de 50% ou menos, cerca de 45% ou menos, cerca de 40% ou menos, cerca de 35% ou menos, cerca de 30% ou menos, cerca de 25% ou menos, cerca de 20% ou menos, cerca de 15% ou menos, cerca de 10% ou menos, cerca de 5% ou menos, cerca de 2%, ou cerca de 1% ou menos do peso total da composição. Preferencialmente, o melaço é contido no meio como uma fonte de carbono, em uma concentração de cerca de 2 a 20% (p/v). Mais preferencialmente, o melaço está a uma concentração de cerca de 8 a 12% (p/v).
[0042] Os exemplos de fontes de nitrogênio adequadas incluem, sem limitação, aminoácidos, extrato de levedura, triptona, extrato de carne, peptona, nitrato de potássio, nitrato de amônio, cloreto de amônio, sulfato de amônio, fosfato de amônio, amônia ou combinações dos mesmos. A quantidade de fonte de nitrogênio varia de acordo com a fonte de nitrogênio, tipicamente entre 0,1 a 30 gramas por litro de meio. A fração de peso da fonte de nitrogênio na composição pode ser cerca de 98% ou menos, cerca de 95% ou menos, cerca de 90% ou menos, cerca de 85% ou menos, cerca de 80% ou menos, cerca de 75% ou menos, cerca de 70% ou menos, cerca de 65% ou menos, cerca de 60% ou menos, cerca de 55% ou menos, cerca de 50% ou menos, cerca de 45% ou menos, cerca de 40% ou menos, cerca de 35% ou menos, cerca de 30% ou menos, cerca de 25% ou menos, cerca de 20% ou menos, cerca de 15% ou menos, cerca de 10% ou menos, cerca de 5% ou menos, cerca de 2%, ou cerca de 1% ou menos do peso total da composição.
[0043] Exemplos de sais inorgânicos adequados incluem, sem limitação, di- hidrogenofosfato de potássio, fosfato de hidrogênio dipotássico, hidrogenofosfato dissódico, sulfato de magnésio, cloreto de magnésio, sulfato férrico, sulfato ferroso, cloreto férrico, cloreto ferroso, sulfato manganoso, cloreto manganoso, sulfato de zinco, cloreto de zinco, sulfato cúprico, cloreto de cálcio, cloreto de sódio, carbonato de cálcio, carbonato de sódio, e combinações dos mesmos. A fração de peso do sal inorgânico na composição pode ser cerca de 98% ou menos, cerca de 95% ou menos, cerca de 90% ou menos, cerca de 85% ou menos, cerca de 80% ou menos, cerca de 75% ou menos, cerca de 70% ou menos, cerca de 65% ou menos, cerca de 60% ou menos, cerca de 55% ou menos, cerca de 50% ou menos, cerca de 45% ou menos, cerca de 40% ou menos, cerca de 35% ou menos, cerca de 30% ou menos, cerca de 25% ou menos, cerca de 20% ou menos, cerca de 15% ou menos, cerca de 10% ou menos, cerca de 5% ou menos, cerca de 2%, ou cerca de 1% ou menos do peso total da composição.
[0044] Em uma modalidade, as composições da presente invenção podem compreender adicionalmente álcool. Álcoois adequados incluem qualquer um conhecido na técnica incluindo, sem limitação, metanol, etanol, n-propanol, álcool alílico, n-propanol, isopropanol, sec-propanol, n-butanol, sec-butanol, isobutanol, t- butanol, e álcool terc-amílico. A fração de peso do álcool na composição pode ser cerca de 98% ou menos, cerca de 95% ou menos, cerca de 90% ou menos, cerca de 85% ou menos, cerca de 80% ou menos, cerca de 75% ou menos, cerca de 70% ou menos, cerca de 65% ou menos, cerca de 60% ou menos, cerca de 55% ou menos, cerca de 50% ou menos, cerca de 45% ou menos, cerca de 40% ou menos, cerca de 35% ou menos, cerca de 30% ou menos, cerca de 25% ou menos, cerca de 20% ou menos, cerca de 15% ou menos, cerca de 10% ou menos, cerca de 5% ou menos, cerca de 2%, ou cerca de 1% ou menos do peso total da composição.
[0045] Em outra modalidade, as composições da presente invenção podem compreender adicionalmente ácido acético, ácido carboxílico, ou outros ácidos orgânicos. Os ácidos orgânicos adequados incluem qualquer um conhecido na técnica incluindo, sem limitação, ácido láctico, ácido fórmico, ácido acético, ácido propiônico, ácido butanoico, ácido isobutírico, ácido 3-metil butanoico, acetato de metila, acetato de etila, acetato de propila, acetato de butila, acetato de isobutila e acetato de 2-metil butila. Em uma modalidade, o ácido acético é incluído usando-se vinagre. A fração de peso do ácido acético na composição pode ser cerca de 98% ou menos, cerca de 95% ou menos, cerca de 90% ou menos, cerca de 85% ou menos, cerca de 80% ou menos, cerca de 75% ou menos, cerca de 70% ou menos, cerca de 65% ou menos, cerca de 60% ou menos, cerca de 55% ou menos, cerca de 50% ou menos, cerca de 45% ou menos, cerca de 40% ou menos, cerca de 35% ou menos, cerca de 30% ou menos, cerca de 25% ou menos, cerca de 20% ou menos, cerca de 15% ou menos, cerca de 10% ou menos, cerca de 5% ou menos, cerca de 2%, ou
[0046] Em ainda outra modalidade, as composições da presente invenção podem compreender adicionalmente quaisquer repelentes de insetos conhecidos na técnica.
[0047] Tais repelentes de insetos incluem, sem limitação, N,N-dietil-m-toluamida (DEET), N,N-dietil-benzamida, 2-pirrolidona-5-carboxilato de mentila, neoalcanamidas de N-arila e N-cicloalquila, neoalcanamidas de N-alquila inferior, nepetalactona e combinações dos mesmos. As composições também podem compreender óleos naturais conhecidos por suas características de repelente de insetos. Tais óleos naturais incluem, sem limitação, óleo de citronela, óleo de erva- gateira, óleo de eucalipto, óleo de cipreste, óleo de gálbano, bálsamo-de-tolu, bálsamo-do-Peru e combinações dos mesmos. A fração de peso dos repelentes de insetos na composição pode ser cerca de 98% ou menos, cerca de 95% ou menos, cerca de 90% ou menos, cerca de 85% ou menos, cerca de 80% ou menos, cerca de 75% ou menos, cerca de 70% ou menos, cerca de 65% ou menos, cerca de 60% ou menos, cerca de 55% ou menos, cerca de 50% ou menos, cerca de 45% ou menos, cerca de 40% ou menos, cerca de 35% ou menos, cerca de 30% ou menos, cerca de 25% ou menos, cerca de 20% ou menos, cerca de 15% ou menos, cerca de 10% ou menos, cerca de 5% ou menos, cerca de 2%, ou cerca de 1% ou menos do peso total da composição. cerca de 1% ou menos do peso total da composição.
[0048] As composições da invenção podem estar em forma líquida ou seca. A composição pode compreender uma suspensão aquosa de componentes. Esta suspensão aquosa pode ser fornecida como uma solução de estoque concentrada que é diluída antes da aplicação ou como uma solução diluída pronta para uso. Adicionalmente, a composição pode ser um pó molhável, grânulos, poeira, grânulo ou concentrado coloidal. Tais formas secas podem ser formuladas para dissolver imediatamente mediante umectação ou dissolver em liberação controlada, liberação sustentada ou outra maneira dependente de tempo. Adicionalmente, a composição pode estar em uma forma seca que não depende da umectação ou dissolução para ser eficaz.
[0049] As composições podem ser adicionalmente fornecidas em uma formulação com capacidade para aspersão. A aspersão pode ser um líquido ou um aerossol.
[0050] As composições da presente invenção também podem ser formuladas em uma composição nutricional (por exemplo, alimentos, aditivo alimentício, suplemento dietético ou aditivo de rações). Por exemplo, as composições podem ser incluídas em produtos alimentícios feitos com o uso de técnicas de fermentação, como vinho, cerveja e queijo.
[0051] Uma composição nutricional da presente invenção pode incluir qualquer uma dentre uma variedade de agentes nutricionais, os quais são bem conhecidos na técnica, incluindo vitaminas, minerais, aminoácidos essenciais e não essenciais, carboidratos, lipídios, alimentos, suplementos dietéticos e semelhantes. Desse modo, as composições da presente invenção podem incluir fibra, enzimas e outros nutrientes. As fibras preferenciais incluem, mas sem limitação: psyllium, farelo de arroz, farelo de aveia, farelo de milho, farelo de trigo, fibra de frutas e semelhantes. As enzimas dietéticas e suplementares, como lactase, amilase, glucanase, catalase e semelhantes também podem ser incluídas. As vitaminas para uso nas composições da presente invenção incluem vitaminas B, C, D, E, ácido fólico, K, niacina e semelhantes. As vitaminas típicas são aquelas recomendadas para consumo diário e na quantidade diária recomendada (RDA).
[0052] As composições da presente invenção podem ser formuladas em uma composição farmacêutica, em que as mesmas são misturadas com um carreador farmaceuticamente aceitável para qualquer tipo de rota de administração, selecionada de acordo com o uso pretendido.
[0053] Em algumas modalidades, a combinação da invenção pode compreender pelo menos um excipiente opcional. Os exemplos não limitantes de excipientes adequados incluem antioxidantes, aditivos, diluentes, ligantes, cargas, agentes tamponantes, sais minerais, agentes modificadores de pH, desintegrantes, agentes dispersantes, agentes aromatizantes, agentes nutritivos, agentes oncóticos e osmóticos, estabilizadores, conservadores, intensificadores de palatabilidade e agentes de coloração. A quantidade e os tipos de excipientes utilizados para formar a combinação podem ser selecionados de acordo com os princípios conhecidos de ciência farmacêutica.
[0054] Em uma modalidade, o excipiente pode incluir pelo menos um diluente. Os exemplos não limitantes de diluentes adequados incluem celulose microcristalina (MCC), derivados de celulose, pó de celulose, ésteres de celulose (isto é, ésteres misturados de acetato e butirato), etil celulose, metil celulose, hidroxipropil celulose, hidroxipropil metilcelulose, carboximetilcelulose sódica, amido de milho, amido de milho fosfatado, amido de milho pré-gelatinizado, amido de arroz, amido de batata, amido de tapioca, amido-lactose, amido-carbonato de cálcio, glicolato de amido de sódio, glicose, frutose, lactose, lactose mono-hidratada, sacarose, xilose, lacitol, manitol, malitol, sorbitol, xilitol, maltodextrina e trealose.
[0055] Em outra modalidade, o excipiente pode compreender um ligante. Os ligantes adequados incluem, mas sem limitação, amidos, amidos pré-gelatinizados, gelatina, polivinilpirrolidona, celulose, metilcelulose, carboximetilcelulose sódica, etilcelulose, poliacrilamidas, poliviniloxoazolidona, álcoois polivinílicos, álcool de C12C18 ácido graxo, polietileno glicol, polióis, sacarídeos, oligossacarídeos, polipeptídeos, oligopeptídeos, e combinações dos mesmos.
[0056] Em outra modalidade, o excipiente pode incluir uma carga. As cargas adequadas incluem, mas sem limitação, carboidratos, compostos inorgânicos e polivinilpirrolidona. A título de exemplo não limitante, a carga pode ser sulfato de cálcio, tanto di quanto tribásica, amido, carbonato de cálcio, carbonato de magnésio, celulose microcristalina, fosfato de cálcio dibásico, carbonato de magnésio, óxido de magnésio, silicato de cálcio, talco, amidos modificados, lactose, sacarose, manitol ou sorbitol.
[0057] Em ainda outra modalidade, o excipiente pode compreender um agente tamponante.
[0058] Exemplos representativos de agentes tamponantes adequados incluem, mas sem limitação, MOPS, HEPES, TAPS, Bicina, Tricina, TES, PIPES, MES, tampões Tris ou sais de solução salina tamponada (por exemplo, solução salina tamponada de Tris ou solução salina tamponada de fosfato).
[0059] Em uma modalidade adicional, o excipiente pode incluir um desintegrante. Desintegrantes adequados incluem, mas sem limitação, amidos, como amido de milho, amido de batata, amidos pré-gelatinizados e modificados dos mesmos, adoçantes, argilas, como bentonita, celulose microcristalina, alginatos, glicolato de amido de sódio, gomas, como ágar, guar, alfarroba, karaya, pecitina e tragacanto.
[0060] Em ainda outra modalidade, o excipiente pode incluir um intensificador de dispersão. Dispersantes adequados podem incluir, mas sem limitação, amido, ácido algínico, polivinilpirrolidonas, goma guar, caulim, bentonita, celulose de madeira purificada, glicolato de amido de sódio, silicato isoamorfo e celulose microcristalina.
[0061] Em uma modalidade adicional, o excipiente pode incluir um lubrificante. Os exemplos não limitantes de lubrificantes adequados incluem minerais, como talco ou sílica; e gorduras, como estearina vegetal, estearato de magnésio ou ácido esteárico.
[0062] Em ainda outra modalidade, pode ser desejável fornecer um agente colorante. Os aditivos de cor incluem, mas sem limitação, corantes alimentícios, fármaco e cosméticos (FD&C), corantes de fármaco e cosméticos (D&C), ou corantes de fármaco ou cosméticos externos (D&C Ext.).
[0063] A fração de peso do excipiente (ou excipientes) na combinação podem ser cerca de 98% ou menos, cerca de 95% ou menos, cerca de 90% ou menos, cerca de 85% ou menos, cerca de 80% ou menos, cerca de 75% ou menos, cerca de 70% ou menos, cerca de 65% ou menos, cerca de 60% ou menos, cerca de 55% ou menos, cerca de 50% ou menos, cerca de 45% ou menos, cerca de 40% ou menos, cerca de 35% ou menos, cerca de 30% ou menos, cerca de 25% ou menos, cerca de 20% ou menos, cerca de 15% ou menos, cerca de 10% ou menos, cerca de 5% ou menos, cerca de 2%, ou cerca de 1% ou menos do peso total da combinação.
[0064] As composições da presente invenção são estáveis sob várias condições, como uma forma líquida ou seca. Preferencialmente, as composições da presente invenção são estáveis em temperatura ambiente.
[0065] As composições reveladas no presente documento são na agricultura, saúde humana e animal, alimentação e/ou rações, e como substituintes químicos. A presente invenção abrange métodos para beneficiar um ambiente ou indivíduo que se beneficiaria de uma composição de micro-organismo. Os métodos podem ser usados para substituir composições químicas, como inseticidas, pesticidas ou produtos químicos. Os métodos podem ser usados para beneficiar um ambiente, como controlar populações de insetos, intensificar o solo com propósitos agrícolas, e reduzir o odor associado aos resíduos. Adicionalmente, os métodos podem ser usados para sustentar ou intensificar a saúde em um indivíduo humano ou animal.
[0066] Os métodos podem ser usados para tratar um indivíduo que tem uma afecção que se beneficiaria da terapia com base em micro-organismos ou que tem risco de desenvolver uma afecção que se beneficiaria de terapia com base em microorganismos.
[0067] As composições reveladas no presente documento são úteis nos métodos agrícolas. Os métodos invenção incluem enriquecimento de solo, enriquecimento vegetal e intensificação de biodegradação.
[0068] Os métodos de enriquecimento de solo incluem aplicar a composição ao solo a ser enriquecido. A composição pode estar em forma líquida ou seca e aplicada ao solo por métodos conhecidos na técnica. Os métodos exemplificativos incluem aspersão, gotejamento, dispersão e varredura no solo-alvo. Adicionalmente, a composição pode ser aplicada a uma fonte de água que alimenta o solo-alvo.
[0069] Em outra modalidade, a composição pode ser usada para enriquecimento vegetal. Os métodos para enriquecimento vegetal incluem aplicar as composições da invenção ao solo ou fonte de água da planta conforme descrito no presente documento. Adicionalmente, a composição pode ser adicionada à água para cortar flores ou plantas. Em outra modalidade, as sementes podem ser umedecidas em uma composição da invenção antes do plantio. Será reconhecido que pode ser benéfico combinar qualquer um dos métodos descritos no presente documento para enriquecimento de solo e vegetal.
[0070] A adição de uma composição de micro-organismo tem o efeito de intensificar a biodegradação de vários resíduos. Tais resíduos incluem, sem limitação, resíduo alimentício, resíduo produzido por seres humanos ou animais, e resíduo de aterro. Uma composição de micro-organismo também tem o efeito de intensificar a compostagem.
[0071] A composição de micro-organismo pode ser fornecida secada ou em forma líquida a um produto residual. A composição de micro-organismo pode ser fornecida em uma variedade de quantidades em relação ao peso do produto residual dependendo do produto residual. Em algumas modalidades, a composição de microorganismo é fornecida em uma quantidade na faixa de cerca de 0,5 a 50% em peso do peso total do produto residual. Em outra modalidade, a composição de microorganismo é fornecida em uma quantidade na faixa de cerca de 1 a cerca de 3% em peso do peso total do produto residual. Em outra modalidade, a quantidade de composição de micro-organismo fornecida ao resíduo é cerca de 2% em peso da quantidade total de resíduo.
[0072] O micro-organismo pode ser fornecido em forma seca, forma líquida ou através da aspersão. Os métodos para tratar produtos de resíduo incluem, sem limitação, aspersão, varredura, pulverização, inoculação líquida, nebulização, fumigação, aerossolização e outros métodos conhecidos na técnica.
[0073] Os métodos da invenção incluem administrar composições aos indivíduos receptores para sustentar e promover a saúde. Os métodos da invenção incluem administrar composições aos indivíduos receptores para tratar afecções incluindo afecções gastrointestinais e extraintestinais.
[0074] Exemplos de afecções gastrointestinais incluem, sem limitação, diarreia aguda, diarreia do viajante, intolerância à lactose, diarreia associada a HIV, deficiência de sacarose isomaltase, doença de intestino inflamatório, pouchite, carcinogênese, diarreia associada à alimentação enteral, diarreia associada ao antibiótico, supercrescimento bacteriano de intestino delgado, síndrome do intestino irritável e afecções associadas aos enteropatógenos. Tais enteropatógenos incluem, sem limitação, Helicobacter pilori, Campilobacter jejuni, Campilobacter coli, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus pyogenes, Streptococcus pneumoniae, Enterococcus faecalis, Haemophilus influenzae, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae, Citrobacter freundii, Serratia marcescens, Pseudomonas aeruginosa e Pseudomonas maltophilia, Salmonella sp., Gasterophilus sp., Habronema sp., Crascia sp., Trichostrongvlus sp., Parascaris sp., Stroncrulus sp., Triodontophorus sp., Oxvuris sp., Stroncivloides sp., Anonlocephala sp., Paranonlocephala sp., Haemonchus sp., Hvostroncmulus sp., Spirocerca sp., Physoloptera sp., vírus, como rotavírus, fungos, como Candida albicans e Aspergillus fumigatus, outras espécies conhecidas ou constatadas como associadas às infecções gastrointestinais, e combinações destas espécies. Também são contemplados patógenos conhecidos na técnica por causar afecções gastrointestinais, como aquelas descritas em “Merck's Veterinary Manual” por Cynthia M. Kahn ou “The Merck Manual of Diagnosis and Therapy” por Mark H. Beers, ambos incorporados ao presente documento, a título de referência.
[0075] Também é contemplado o uso de composições de micro-organismo para tratar afecções extraintestinais. Sem se atrelar à teoria, as afecções extraintestinais podem ser tratadas com micro-organismos, extratos de micro-organismo, ou produtos de micro-organismo que podem estimular múltiplos mecanismos de defesa incluindo promoção de uma barreira de defesa intestinal não imunológica. Esta barreira pode inibir a translocação de patógenos potenciais e prevenir, desse modo, as infecções da corrente sanguínea e outros tecidos ou órgãos. Outro mecanismo de defesa inclui intensificar a barreira imunológica do intestino.
[0076] Exemplos de afecções extraintestinais incluem, sem limitação, apendicite, doenças autoimunes, esclerose múltipla, doença de Alzheimer, artrite reumatoide, doença celíaca, diabetes mellitus, transplante de órgãos, doença periodontal, doenças urogenitalis (vaginais, uretrais e perineais), doenças sexualmente transmitidas, infecção por HIV, replicação por HIV, trauma associado cirúrgico, doença metastática induzida cirúrgica, sepse, perda de peso, anorexia, controle de febre, caquexia, cicatrização de ferimento, úlceras, função de barreira intestinal, alergia, asma, distúrbios respiratórios, doenças associadas ao rinovírus, otite média, sinusite, doença pulmonar, doenças circulatórias, doença cardíaca coronária, anemia, distúrbios do sistema de coagulação sanguínea, doença renal, distúrbios do sistema nervoso central, doenças hepáticas, constipação, isquemia, distúrbios nutricionais, osteoporose, doença endócrina, distúrbios epidérmicos, psoríase, antraz, e acne, assim como outras afecções conhecidas na técnica ou que ainda não foram constatadas que podem se beneficiar do tratamento com micro-organismos, extratos de micro-organismos ou produtos de micro-organismos.
[0077] Em uso, a composição de micro-organismo pode ser implantada de várias maneiras diferentes dependendo da parte dos indivíduos alvejados e do objetivo da aplicação. Uma solução líquida que contém uma composição de micro-organismo pode ser simplesmente aplicada diretamente na boca do sujeito ou no alimento ou bebida que o sujeito consumirá. Por exemplo, uma formulação de aspersão líquida exemplificativa que contém uma composição de micro-organismo pode ser aspergida, por exemplo, no alimento do indivíduo antes do consumo.
[0078] Deve ser entendido que a mistura de micro-organismo usada pode ser fornecida na forma de concentrado puro (100% de concentração) ou uma composição diluída com excipientes adicionais na forma de dosagem (isto é, a quantidade de ingrediente ativo na composição é menor do que ou igual a 99,99%, e o restante consiste em excipientes inativos). Se diluída, a quantidade de composição de micro-organismo dispensada nas várias formas de dosagem podem estar na faixa de cerca de 1 a 30%, mais preferencialmente entre cerca de 4 a 8%. Uma pessoa versada na técnica observará que o volume de componente ativo adicionado à composição precisará ser ajustado em consideração à diluição e para garantir que a composição final compreenda a concentração final apropriada de composição de micro-organismo. Uma pessoa versada na técnica também observará que os vários componentes da composição podem ser fornecidos em uma variedade de formas de dosagem incluindo, mas sem limitação, a solução líquida ou suspensão, emulsão, aerossol, matrizes de liberação lenta e semelhantes.
[0079] A faixa de concentração típica de micro-organismos administrada é 1E+3 a 1E+13 células por dia. Preferencialmente, pelo menos cerca de 1E+6, pelo menos cerca de 1E+7, pelo menos cerca de 1E+8 células por dia são administradas. Entretanto, será observado que o número de bactérias a serem administradas variará de acordo com vários parâmetros incluindo o tamanho do indivíduo, tipo de distúrbio e severidade de sintomas.
[0080] Os métodos da invenção incluem usar composições na preparação de alimentos que necessitam de fermentação. Os alimentos adequados incluem aqueles conhecidos na técnica, como cerveja, vinho, sidra, produtos com à base de massa, pães e produtos laticínios. Também são contemplados métodos com o uso de composições para técnicas de preservação.
[0081] A composição de micro-organismo pode ser fornecida para alimentos fermentáveis juntamente com micro-organismos de fermentação. Em algumas modalidades, a composição de micro-organismo pode substituir os micro-organismos tipicamente usados na fermentação, em outras modalidades, os mesmos adicionam o efeito dos micro-organismos de fermentação.
[0082] A quantidade de composição de micro-organismo adicionada ao produto alimentício variará dependendo do produto alimentício, em algumas modalidades, a composição de micro-organismo é fornecida como um pó seco e, em outras modalidades, a composição de micro-organismo é fornecida como um líquido. As formulações secas das composições podem ser de cerca de 1% a cerca de 99% ou mais em peso da composição, embora as formulações líquidas possam compreender geralmente de cerca de 1% a cerca de 99% ou mais da composição de micro-organismo em peso.
[0083] Em um aspecto, a invenção fornece um adjunto dietético que contém uma composição probiótica, útil para tratar e/ou prevenir distúrbios e melhorar a eficácia alimentícia e microflora intestinal em animais domésticos (por exemplo, gado, carneiros e cabras, porcos e semelhantes), e aves (por exemplo, frangos, perus, patos e semelhantes). A presente composição probiótica pode ser usada como um aditivo de ração animal, ou como um produto direto a ser fornecido aos animais. Em uma modalidade, a composição probiótica que contém culturas vivas é adicionada diretamente à ração animal ou água. Em outra modalidade, a composição probiótica é administrada ao animal como um grânulo ou bolo. Em ainda outra modalidade, a composição probiótica é formulada com um excipiente que estabiliza, reveste ou estende de outro modo a vida útil das bactérias vivas e levedura. Em uma modalidade, a formulação de ração probiótica contém a presente composição probiótica combinada com uma comida animal, milho de ração, soja, farelo, farelo de glúten de milho, compósito mineral, pó de cálcio, pó de folha, farelo de alfafa, e/ou sal e semelhantes.
[0084] Os métodos da invenção incluem usar composições em vez de produtos químicos. Devido ao fato de que as composições da presente invenção são unicamente adequadas para uso em uma ampla variedade de aplicações de substituição química como para inseticidas, pesticidas, e soluções de limpeza, uma ampla variedade de produtos químicos pode ser substituída por uso da invenção e tais substituições são incorporadas ao presente documento. 1. Controle de Vetor
[0085] As composições de micro-organismo reveladas no presente documento são particularmente úteis como inseticidas para aplicação tópica ou sistêmica a um ambiente. Tais ambientes incluem, sem limitação, safras de campo, gramas, frutas e vegetais, gramados, árvores, plantas ornamentais, areia, seres humanos, animais, e outros ambientes que podem se beneficiar de aplicação inseticida. As composições podem ser formuladas para aplicação preventiva ou profilática a uma área, e podem, em certas circunstâncias, ser aplicadas a animais de estimação, animais domésticos, leito animal, seres humanos, ou em e em torno de equipamento de fazenda, fazendas, domicílios, instalações agrícolas, instalações industriais e outras áreas que se beneficiariam de aplicação de inseticida.
[0086] As composições de micro-organismo são aplicadas a uma área ou ambiente do inseto-alvo por métodos convencionais. Tais métodos incluem, sem limitação, aspersão, varredura, pulverização, umedecimento de solo, injeção de solo, revestimento de semente, revestimento de muda, aspersão foliar, aeração, nebulização, atomização, fumigação, aerossolização e outros métodos conhecidos na técnica.
[0087] As composições de micro-organismo podem ser usadas em aplicação consecutiva ou simultânea a um sítio ambiental sozinho ou em combinação com um ou mais inseticidas, pesticidas, produtos químicos, fertilizantes ou outros compostos adicionais. As composições também podem ser usadas em combinação com outros tratamentos, como fertilizantes, exterminadores de gramíneas, crioprotetores, tensoativos, detergentes, sabões inseticidas, óleos dormentes, polímeros, formulações de carreador de liberação de tempo ou biodegradáveis que permitem a dosagem a longo prazo de uma área-alvo que segue uma aplicação única da formulação. De modo semelhante, as formulações podem ser preparadas em “iscas” comestíveis ou personalizadas em inseto “armadilhas” de insetos para permitir a alimentação ou ingestão por um inseto-alvo.
[0088] Um inseto conforme repelido pela composição desta invenção inclui qualquer membro de um grande grupo de animais invertebrados caracterizados, no estado adulto (estados de inseto não adulto incluem larvas e pupas), pela divisão do corpo em cabeça, tórax e abdômen, três pares de pernas, e, frequentemente, mas nem sempre, dois pares de asas membranosas. Essa definição inclui, portanto, mas sem limitação, uma variedade de insetos mordedores (por exemplo, formigas, abelhas, borrachudos, níguas, pulgas, moscas verdes (“greenhead flies”), mosquitos, moscas- de-estábulo, carrapatos, vespas), brocas-de-madeira (por exemplo, termites), insetos nocivos (por exemplo, moscas-domésticas, baratas, piolhos, tatuzinhos-de-jardim), e pragas domésticas (por exemplo, besouros de farinha e feijão, ácaros de poeira, mariposas, peixinho-de-prata, gorgulhos). As composições da presente invenção são repelentes de insetos eficazes contra espectros amplos de pragas de inseto comuns, como aqueles mencionados acima e também incluindo insetos mordedores, brocas- de-madeira, insetos nocivos e pragas domésticas, com o máximo de particularidade, mosquitos, mosquitos-palha, moscas-de-estábulo e carrapatos. A invenção também inclui a eficácia contra todos os estágios de animais invertebrados incluindo estágios adulto, larvas e pupas.
[0089] Independentemente do método de aplicação, a quantidade da composição é aplicada em uma quantidade eficaz como inseticida, o que variará dependendo de tais fatores como, por exemplo, os insetos-alvo específicos a serem controlados, o ambiente específico, localização, planta, safra ou sítio agrícola a ser tratado, as condições ambientais, e o método, taxa, concentração, estabilidade e quantidade de aplicação da composição. As formulações também podem variar com em relação a condições climáticas, considerações ambientais, frequência de aplicação, e severidade de infestação de inseto.
[0090] A concentração de composição inseticida que é usada para aplicação ambiental, sistêmica, tópica ou foliar variará dependendo amplamente da natureza da formulação particular, meios de aplicação, condições ambientais e grau de atividade. Tipicamente, a composição inseticida estará presente na formulação aplicada a uma concentração de pelo menos cerca de % em peso e pode ser até e incluindo cerca de 99% em peso. As formulações secas das composições podem ser de cerca de 1% a cerca de 99% ou mais em peso da composição, embora as formulações líquidas possam compreender geralmente de cerca de 1% a cerca de 99% ou mais da composição em peso. Como tal, uma variedade de formulações são preparáveis, incluindo aquelas formulações que compreendem de cerca de 5% a cerca de 95% ou mais em peso da mistura de composição, incluindo aquelas formulações que compreendem de cerca de 10% a cerca de 90% ou mais em peso da composição. Naturalmente, as formulações podem compreender de cerca de 15% a cerca de 85% ou mais em peso da composição, e formulações que compreendem de cerca de 20% a cerca de 80% ou mais em peso da composição também são consideradas como dentro do escopo da presente divulgação.
[0091] Nas composições em que os micro-organismos intactos são incluídos, as preparações conterão geralmente de cerca de 1E+4 a cerca de 1E+8 células/mg, embora, em certas modalidades, possa ser desejável utilizar formulações que compreendem de cerca de 1E+2 a cerca de 1E+4 células/mg, ou quando formulações mais concentradas são desejáveis, as composições que compreendem de cerca de 1E+8 a cerca de 1E+10 ou 1E+11 células/mg também podem ser formuladas.
[0092] A formulação inseticida da invenção pode ser administrada a uma área ou ambiente particular em uma ou mais aplicações conforme necessário, com uma taxa de aplicação de campo típica por hectare na faixa da ordem de cerca de 50 g/hectare a cerca de 500 g/hectare de composição, ou alternativamente, de cerca de 500 g/hectare a cerca de 1.000 g/hectare podem ser utilizados. Em certos casos, pode ser até mesmo desejável aplicar a composição a uma área-alvo em uma taxa de aplicação de cerca de 1.000 g/hectare a cerca de 5.000 g/hectare ou mais de composição. De fato, todas as taxas de aplicação na faixa de cerca de 50 g de composição por hectare a cerca de 10.000 g/hectare são contempladas como úteis no gerenciamento, controle, e extermínio de pragas de inseto alvo com o uso de tais formulações inseticidas. Como tais, as taxas de cerca de 100 g/hectare, cerca de 200 g/hectare, cerca de 300 g/hectare, cerca de 400 g/hectare, cerca de 500 g/hectare, cerca de 600 g/hectare, cerca de 700 g/hectare, cerca de 800 g/hectare, cerca de 900 g/hectare, cerca de 1 kg/hectare, cerca de 1,1 kg/hectare, cerca de 1,2 kg/hectare, cerca de 1,3 kg/hectare, cerca de 1,4 kg/hectare, cerca de 1,5 kg/hectare, cerca de 1,6 kg/hectare, cerca de 1,7 kg/hectare, cerca de 1,8 kg/hectare, cerca de 1,9 kg/hectare, cerca de 2,0 kg/hectare, cerca de 2,5 kg/hectare, cerca de 3,0 kg/hectare, cerca de 3,5 kg/hectare, cerca de 4,0 kg/hectare, cerca de 4,5 kg/hectare, cerca de 6,0 kg/hectare, cerca de 7,0 kg/hectare, cerca de 8,0 kg/hectare, cerca de 8,5 kg/hectare, cerca de 9,0 kg/hectare, e até e incluindo cerca de 10,0 kg/hectare ou mais da composição podem ser utilizas em certas aplicações agrícolas, industriais, e domésticas das formulações inseticidas descritas no presente documento.
[0093] As soluções de limpeza que usam as composições da invenção são contempladas. Em particular, as soluções de limpeza que substituem todos ou parte do componente químico tipicamente incluído em soluções de limpeza são contempladas. Os métodos para limpeza incluem fazer contato com uma superfície a ser limpa com uma composição da invenção. Os métodos da invenção podem ser usados para controlar odor, controlar patógenos causadores de doença e degradar lama, espuma, poeira, graxa e fuligem. Em outra modalidade, uma composição da invenção pode ser adicionada à água para limpar a água de impurezas. As composições da invenção podem ser usadas em soluções de limpeza usadas para limpar uma variedade de superfícies. Tais superfícies incluem todas as superfícies laváveis e todas as superfícies rígidas, incluindo plástico, fibra de vidro, madeira, concreto, materiais sintéticos, materiais compósitos, vegetação, frutas, vegetais e outros conhecidos na técnica. As soluções de limpeza incluindo composições da presente invenção também podem ser usadas para limpar a água (isto é, poços, lagos, rios, aquários, piscinas etc.), tanques sépticos, tanques de retenção e lagoas.
[0094] A menos que definido de outro modo, todos os termos técnicos e científicos usados no presente documento têm o mesmo significado que o comumente entendido por uma pessoa de habilidade comum na técnica. Todas as patentes, pedidos, pedidos publicados e outras publicações são incorporados a título de referência, em sua totalidade. No caso de haver uma pluralidade de definições para um termo no presente documento, aqueles nesta seção prevalecerão, a menos que definido de outro modo.
[0095] O termo “cerca de” significa dentro da faixa inclusiva de ± 15% do valor numérico que modifica.
[0096] Conforme usado no presente documento, “administrar” é usado em seu sentido mais amplo para significar fazer contato de um indivíduo, superfície, líquido ou ambiente com uma composição da invenção.
[0097] O termo “cocultura” se refere a uma cultura de micro-organismos que inclui pelo menos dois micro-organismos da presente invenção, descritos no presente documento.
[0098] O termo “quantidade eficaz de modo inseticida” se refere a uma quantidade da composição que pode levar à morte de pelo menos um inseto, ou reduzir de modo notável o crescimento, alimentação ou desenvolvimento fisiológico normal de inseto.
[0099] Essa quantidade variará dependendo de tais fatores como, por exemplo, os insetos-alvo específicos a serem controlados, o ambiente específico, localização, planta, safra ou sítio agrícola a ser tratado, as condições ambientais, e o método, taxa, concentração, estabilidade e quantidade de aplicação. As formulações também podem variar com em relação a condições climáticas, considerações ambientais, frequência de aplicação, e severidade de infestação de inseto.
[00100] O termo “detectável” conforme usado no presente documento significa em ou acima do limite de detecção de uma unidade formadora de coluna de bactérias, levedura ou outros micróbios particulares em uma composição probiótica. Os métodos para determinar a presença de (detectar) uma espécie ou cepa particular de micróbio incluem técnicas de cultura e técnicas sem cultura. As técnicas de cultura incluem o uso de meios ágar seletivos e determinação de morfologia de colônia, como, por exemplo, LAMVAB e ágar Rogosa para Lactobacilli ssp., lactose de cisteína de fígado e raffmose para Bifidobacterium ssp., contagem de placa heterotrófica, e semelhantes. As técnicas sem cultura incluem, por exemplo, citometria de fluxo, contagem epifluorescente direta, PCR e outros métodos com base em DNA, como PCR quantitativa, e métodos metabólicos/químicos, como PCR de monoazida de propídio ou PCR de monoazida de etídio. Os métodos de detecção úteis na prática dessa invenção são descritos em Catherine Davis, “Enumeration of probiotic strains: Review of culture-dependent and alternative techniques to quantify viable bacteria”, Journal of Microbiological Methods, Volume 103, 2014, páginas 9 a 17; Jackson e Bird,“Comparison of two selective media for the detection and enumeration of Lactobacilli in human faeces”, Journal of Microbiological Methods 51 (2002) 313 a 321; Lu et al., “Fine Structure of Tibetan Kefir Grains and Their Yeast Distribution, Diversity, and Shift”, PLoS One. 2014; 9(6): el0l387; Rachbid et al.,“Assessment of the microbial diversity of Brazilian kefir grains by PCR-DGGE and pyrosequencing analysis”, Food Microbiology, Volume 31, edição 2, setembro de 2012, páginas 215 a 221; Furet et al.,“Molecular quantification of lactic acid bacteria in fermented milk products using real-time quantitative PCR”, International Journal of Food Microbiology, Volume 97, edição 2, 15 de dezembro de 2004, páginas 197 a 207; e Garcia-Cayuel et al.,“Simultaneous detection and enumeration of viable lactic acid bacteria and bifidobacteria in fermented milk by using propidium monoazide and real-time PCR,” International Dairy Journal, Volume 19, edições 6 a 7, junho a julho de 2009, páginas 405 a 409.
[00101] A expressão “produto de fermentação” se refere a uma mistura incluindo pelo menos um micro-organismo, produtos de expressão do micro-organismo (ou microorganismos), substâncias produzidas pelos micro-organismos, e extratos dos microorganismos. Em algumas modalidades, o produto de fermentação é um gás ou produto de composto orgânico da fermentação de um carboidrato, como um ácido orgânico, como ácido acético, ácido cítrico, ácido glucônico, ácido láctico, ácido propiônico, ácido pirúvico, ou ácido succínico, um gás, como dióxido de carbono, ou um álcool, como etanol. Em uma modalidade preferencial, o produto de fermentação é ácido láctico, etanol, ou uma combinação de ácido láctico e etanol.
[00102] O produto de fermentação se refere a ambos ou um dentre produtos químicos orgânicos de uma reação de fermentação (por exemplo, dióxido de carbono, etanol, ácido láctico, ácido propiônico), e/ou a fonte de carbono fermentada (por exemplo, melaço de cana-de-açúcar fermentado, farelo de arroz fermentado).
[00103] O termo “produto finalizado” se refere a uma mistura incluindo um produto de fermentação. O produto finalizado pode incluir aditivos adicionais.
[00104] A expressão “bactérias Bacilli gram-positivas não patogênicas” se refere àquelas bactérias que pertencem à classe taxonômica Bacilli de bactérias que contêm duas ordens, Bacillales e Lactobacillales. O termo “gram-positiva” é usado no presente documento para distinguir o presente Bacilli do grupo de bactérias em formato alongado gram-negativas que são algumas vezes denominadas como bacilos, incluindo, por exemplo, Escherichia coli e outras bactérias coliformes. O termo “não patogênico” é usado para se referir àqueles Bacilli que não causam doença ou danos a uma planta ou animal, isto é, excluir bactérias patogênicas. Por exemplo, certas espécies Bacillus (por exemplo, antrazes), Listeria, Staphylococcus e Streptococcus são patogênicas e são excluídas.
[00105] Os exemplos não limitantes de bactérias Bacilli gram-positivas não patogênicas incluem Bifidobacterium spp., Lactobacillus spp., Lactococcus spp., Carnobacterium spp., Streptococcus spp. e Bacillus spp.
[00106] O termo “composição probiótica” se refere a uma composição que contém um micro-organismo probiótico vivo sozinho, em combinação com outro microorganismo e/ou combinado com outros ingredientes, como por exemplo, fontes de energia, pré-bióticos, estabilizadores e semelhantes. Os micro-organismos probióticos são geralmente conhecidos na técnica e incluem tais bactérias, como bactérias de fermentação de ácido láctico (obrigatórias e facultativas), bactérias fototrópicas, e bacilos não patogênicos, assim como levedura de fermentação, como Saccharomycetaceae. As composições probióticas são geralmente conhecidas como úteis em melhorar a flora intestinal, remediar água residual, tratar desequilíbrios microbianos em animais e pragas, proteger animais, plantas e solo de micróbios nocivos, e melhorar a produção e o rendimento de alimentação animal e alimentação vegetal. Os micro-organismos probióticos úteis podem ser encontrados listados, por exemplo, em Probiotic Bacteria: Fundamentals, Therapy, and Technological Aspects, editado por J. Paulo Sousa e Silva, Ana Cristina Freitas, CRC Press, 2 de abril de 2014; e The European Union Register of Feed Additives nos termos da Regulação (EC) n° 1831/2003, anexo I: Lista de aditivos, disponível em https://ec.europa.eu/food/sites/food/files/safety/docs/animal-feed-eu-reg- comm_register_feed_additives_l83l-03.pdf.
[00107] O termo “composição farmacêutica” se refere a uma preparação de uma ou mais composições da invenção com componentes adicionais, como carreadores e excipientes fisiologicamente adequados. O propósito de uma composição farmacêutica é facilitar a administração de uma composição a um indivíduo receptor.
[00108] O termo “carreador fisiologicamente aceitável” se refere a um carreador ou um diluente que não causa irritação significante a um indivíduo e não revoga a atividade biológica e propriedades da composição administrada.
[00109] O termo “excipiente” se refere a uma substância inerte adicionada a uma composição farmacêutica para facilitar adicionalmente a administração de uma composição. Exemplos, sem limitação, de excipientes incluem carbonato de cálcio, fosfato de cálcio, vários açúcares e tipos de amido, derivados de celulose, gelatina, óleos vegetais e polietileno glicóis. As técnicas para formulação e administração de composições farmacêuticas são conhecidas na técnica e podem ser encontradas em “Remington's Pharmaceutical Sciences,” Mack Publishing Co., Easton, Pa., última edição, que é incorporado ao presente documento, a título de referência.
[00110] Conforme usado no presente documento, “indivíduo” se refere a um organismo vivo que tem um sistema nervoso central. Em particular, indivíduos incluem, mas sem limitação, indivíduos humanos ou pacientes e animais companheiros. Animais companheiros exemplificativos podem incluir mamíferos domesticados (por exemplo, cães, gatos, cavalos), mamíferos com valor comercial significativo (por exemplo, vacas leiteiras, gado de corte, animais para esportes), mamíferos com valores científicos significativos (por exemplo, espécimes cativos ou livres de espécies ameaçadas), ou mamíferos que têm valor de outro modo. Os indivíduos adequados também incluem: camundongos, ratos, cães, gatos, ungulados, como gado, suínos, carneiros, cavalos e cabras, lagomorfos, como coelhos e lebres, outros roedores, e primatas, como macacos, chimpanzés e gorilas.
[00111] Os indivíduos podem ser de qualquer idade incluindo recém-nascidos, adolescentes, adultos, de meia-idade ou idosos.
[00112] Visto que várias mudanças podem ser feitas nas composições e métodos acima sem se afastar do escopo da invenção, é pretendido que toda a matéria contida na descrição acima e nos Exemplos dados abaixo seja interpretada como ilustrativa e não em um sentido limitante.
[00113] EXEMPLOS EXEMPLO 1 FORMULAÇÃO DE CONSÓRCIO DE MICRO-ORGANISMO As composições probióticas foram feitas conforme o seguinte de acordo com a Tabela 1. Água purificada foi adicionada a um tanque de mistura. Melaço (Brix 80+5%, pH 5,7+0,5, Sacarose 30+5% ou Açúcar Total de 75+5%) foi adicionado à água no tanque de mistura. A água e o melaço foram misturados em velocidade de 30 Hz e, então, SDA-3C, prova 199,9+0,1, etanol 95+1%, IPA 4,75+0,50% foram adicionados à mistura juntamente com vinagre (acidez titulável 120+1). A seguir, o pó mineral (Mg 0,15% (como MgO), Fe 0,6%, P 0,15% (como P2O5), K 3,2% (K2O) foi adicionado à mistura. A mistura foi bombeada em um tanque de fermentação. A mistura probiótica (Bacillus subtilis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Enterococcus lactis, Enterococcus thermophilus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus casei, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus plantarum, Rhodopseudomonas palustris, Rhodopseudomonas sphaeroides e Saccharomyces cerevisiae) foi adicionada ao tanque de mistura e unida. Então, a mistura probiótica foi bombeada no tanque de fermentação. O resíduo restante no tanque de mistura foi enxaguado com o uso de água e bombeado no tanque de fermentação. A mistura probiótica foi fermentada por 21 dias a uma temperatura de 38°C e um pH abaixo de 3,6. TABELA 1: FORMULAÇÕES
Claims (11)
1. Composição probiótica líquida caracterizada pelo fato de que compreende: a. uma fonte de carbono; b. um produto de fermentação; c. uma combinação de ácido láctico, em que a dita combinação consiste em: i. Bacillus subtilis, ii. Lactobacillus acidophilus, iii. Bifidobacterium animalis, iv. Bifidobacterium bifidum, v. Bifidobacterium longum, vi. Enterococcus lactis, vii. Enterococcus thermophilus, viii. Lactobacillus bulgaricus, ix. Lactobacillus casei, x. Lactobacillus fermentum, xi. Lactobacillus plantarum, xii. Rhodopseudomonas palustres, e xiii. Rhodopseudomonas sphaeroides; d. Saccharomyces cerevisiae, em que a dita composição probiótica líquida é livre de bactérias não Bacilli detectáveis.
2. Composição probiótica sólida produzida removendo-se água da composição probiótica líquida, de acordo com a reivindicação 1, sendo que a dita composição probiótica sólida é caracterizada pelo fato de que compreende < 10% de água (p/p).
3. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que a dita Saccharomyces cerevisiae é selecionada a partir do grupo que consiste em Saccharomyces cerevisiae CNCM 1-3060, Saccharomyces cerevisiae NCYC R397, Saccharomyces cerevisiae CNCM 1-3399, Saccharomyces cerevisiae NCYC R646, Saccharomyces cerevisiae CBS 493.9, Saccharomyces cerevisiae CNCM 1-1077, Saccharomyces cerevisiae NCYC Sc 47, Saccharomyces cerevisiae CNCM 14407, Saccharomyces cerevisiae MUCL 39885, Saccharomyces cerevisiae NCYC R404, Saccharomyces cerevisiae NCYC R404, Saccharomyces cerevisiae PCM KKP 2059p, Saccharomyces cerevisiae 140203, e Saccharomyces cerevisiae CNCM 11079.
4. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que é selecionada a partir do grupo que consiste em Bifidobacterium animalis ssp. animalis (DSM 16284), Bifidobacterium longum subsp. Suis (DSM 20211), Bifidobacterium animalis subsp. animalis (DSM 20104), Bifidobacterium animalis subsp. lactis (DSM 20105) e Bifidobacterium animalis subsp. lactis (ATCC 27536).
5. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que a referida Lactobacillus casei é selecionada a partir do grupo que consiste em Lactobacillus casei DSM 28872, Lactobacillus casei PCM B/00080, e Lactobacillus casei DSM 28872 e a referida Lactobacillus plantarum é selecionada de um grupo que consiste em Lactobacillus plantarum KKP/593/p, Lactobacillus plantarum KKP/788/p, Lactobacillus plantarum PCM B/00081, Lactobacillus plantamm (NCIMB 41638), Lactobacillus plantarum DSM 29024, Lactobacillus plantarum (ATCC 55943), Lactobacillus plantarum (ATCC 55944), Lactobacillus plantarum (ATCC PTSA-6139), Lactobacillus plantarum (CNCM 1-3235), Lactobacillus plantarum DSM 11672, Lactobacillus plantarum (DSM 12836), Lactobacillus plantarum (DSM 12837), Lactobacillus plantarum (DSM 16565), Lactobacillus plantarum (DSM 16568), Lactobacillus plantarum (DSM 18112), Lactobacillus plantarum (DSM 18113), Lactobacillus plantarum (DSM 18114), Lactobacillus plantarum (DSM 19457), Lactobacillus plantarum (DSM 21762), Lactobacillus plantarum (DSM 23375), Lactobacillus plantarum (DSM 29025), Lactobacillus plantarum (DSM 3676), Lactobacillus plantarum (DSM 3677), Lactobacillus plantarum (DSM 8862), Lactobacillus plantarum (DSM 8866), Lactobacillus plantarum (LMG- 21295), Lactobacillus plantarum (NCIMB 30083), Lactobacillus plantarum (NCIMB 30084), Lactobacillus plantarum (NCIMB 30084), Lactobacillus plantarum (NCIMB 30084), Lactobacillus plantarum (NCIMB 30236), Lactobacillus plantarum (NCIMB 41028), Lactobacillus plantarum (NCIMB 42150), Lactobacillus plantarum (VTT E-78076), Lactobacillus plantarum C KKP/788/p, Lactobacillus plantarum CECT 4528, Lactobacillus plantarum CECT 4528, Lactobacillus plantarum K KKP/593/p, Lactobacillus plantarum LP287, Lactobacillus plantarum LP329, Lactobacillus plantarum LP329, Lactobacillus plantarum NCIMB 30238.
6. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que Bacillus subtilis é selecionada a partir do grupo que consiste em Bacillus subtilis (DSM 5750), Bacillus subtilis C-3102 (DSM 15544), Bacillus subtilis (ATCC PTA-6737), Bacillus subtilis (LMG S-l 5136, Bacillus subtilis (DSM 28343), Bacillus subtilis (DSM 27273), Bacillus subtilis DS098, Bacillus subtilis MBS-BS-01, Bacillus subtilis (ATCC 2107), Bacillus subtilis DSM 17299 e Bacillus subtilis (CBS 117162).
7. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que Bifidobacterium animalis é Bifidobacterium animalis DSM 16284, a referida Lactobacillus acidophilus é Lactobacillus acidophilus CECT 4529, a referida Bacillus subtilis Bacilluis subtilis ATCC PTA 6737 e a dita Saccharomyces cerevisiae é Saccharomyces cerevisiae NCYC Sc47, ou Lactobacillus casei é Lactobacillus casei PCM B/00080, a referida Lactobacillus plantarum é Lactobacillus plantarum PCM B/00081 e Saccharomyces cerevisiae é Saccharomyces cerevisiae NCYC Sc47, ou a referida Lactobacillus casei é Lactobacillus casei PCM B/00080, a referida Lactobacillus plantarum é Lactobacillus plantarum PCM B/00081, e Saccharomyces cerevisiae é Saccharomyces cerevisiae PCM KKP 2059p.
8. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que pelo menos uma dentre as ditas pelo menos duas bactérias Bacilli gram-positivas compreende Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469, e a dita Saccharomyces cerevisiae é Saccharomyces cerevisiae IFO 0203.
9. Método para fabricar a composição probiótica, sendo que o dito método é caracterizado pelo fato de que compreende: a. combinar água purificada e/ou farelo de arroz ou melaço tendo um Brix de 80+5%, em pH 5,7+0,5 em um tanque de mistura para formar uma combinação; b. misturar a combinação a 30 Hz para formar uma mistura primária; c. adicionar etanol, isopropanol e vinagre à mistura primária para formar uma mistura secundária; d. acicionar pó mineral compreendendo 0,15% de Mg como MgO, 0,6% de Fe, 0,15% de P como P2O5 e 3,2% de K como K2O à mistura secundária para formar uma mistura terciária; e. bombear a referida mistura terciária para um tanque de fermentação; f. adicionar uma mistura probiótica ao tanque de fermentação, em que a referida mistura probiótica consiste em Bacillus subtilis, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Enterococcus lactis, Enterococcus thermophilus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus bulgaricus, Lactobacillus casei, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus plantarum, Rhodopseudomonas palustres, Rhodopseudomonas sphaeroides, e Saccharomyces cerevisiae para formar uma mistura quaternária; e g. fermentar a referida mistura quaternária durante 21 dias a um pH inferior a 3,6 para obter o produto fermentado.
10. Ração animal caracterizada pelo fato de que compreende uma composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8.
11. Método para produzir uma ração animal caracterizado pelo fato de que compreende combinar uma composição probiótica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, com uma fonte de nutrição.
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