BR112020012466A2 - neurotoxinas para uso na minimização de cicatriz - Google Patents

Abstract

Trata-se de métodos para minimizar cicatrização durante o processo de regeneração de ferida. Métodos para aprimorar a aparência de uma cicatriz que se forma sobre uma ferida são também descritos. Os métodos compreendem administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de subtipo de toxina botulínica E (BoNT/E) na proximidade de uma ferida.

Description

“NEUROTOXINAS PARA USO NA MINIMIZAÇÃO DE CICATRIZ” REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS

[0001] Este pedido reivindica o benefício de prioridade do Pedido de Patente Provisório no U.S. 62/599.972, depositado em 18 de dezembro de 2017, que é incorporado no presente documento a título de referências em sua totalidade.

CAMPO DA TÉCNICA

[0002] A presente revelação ao uso das neurotoxinas para minimizar cicatrização.

ANTECEDENTES

[0003] Procedimentos cirúrgicos e outros procedimentos invasivos ou lesões podem resultar na cicatrização. Embora imobilizar mecanicamente um tecido ou junta possa ser eficaz em minimizar a cicatrização, ainda há uma necessidade de métodos que podem aprimorar os resultados clínicos relacionados à formação de cicatriz associadas a feridas.

SUMÁRIO

[0004] São reveladas no presente documento composições e métodos para uso na minimização de cicatrizes. Por exemplo, modalidades reveladas compreendem o uso de uma toxina botulínica de "ação rápida" para reduzir a tensão muscular na proximidade de uma ferida, que previne ou reduz as cicatrizes.

[0005] Em um primeiro aspecto, é fornecido um método para minimizar cicatrização. O método compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma neurotoxina de atuação rápida a um paciente na proximidade de uma ferida.

[0006] Em outro aspecto, é fornecido um método para profilaxia da formação de cicatriz em pacientes que são submetidos a um procedimento cirúrgico. O método compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma neurotoxina de atuação rápida a um paciente na proximidade de uma ferida criada no procedimento cirúrgico.

[0007] Em outro aspecto, é fornecido um método para reduzir rapidamente a tensão dinâmica ao redor de uma ferida. O método compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma neurotoxina de atuação rápida e/ou de duração curta a um paciente na proximidade de a ferida.

[0008] Em outro aspecto, é fornecido um método para profilaxia de formação de cicatriz em um paciente que foi recentemente submetido a um procedimento cirúrgico e antes de uma cicatriz da ferida se tornar visível. O método compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma neurotoxina de atuação rápida a um paciente na proximidade de uma ferida criada no procedimento cirúrgico.

[0009] Em outro aspecto, é fornecido um método para tratar uma cicatriz em um paciente que já tem uma cicatriz. O método compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma neurotoxina de atuação rápida e/ou de duração curta a um paciente na proximidade de a ferida.

[0010] Em uma modalidade, a neurotoxina de atuação rápida compreende serotipo de neurotoxina botulínica E.

[0011] Em uma modalidade, a quantidade terapeuticamente eficaz compreende uma quantidade de entre cerca de 10-3 U/kg e cerca de 35 U/kg. Em outra modalidade, a quantidade terapeuticamente eficaz compreende uma quantidade de entre cerca de 101 U/kg e cerca de 25 U/kg. Em ainda outra modalidade, a quantidade terapeuticamente eficaz compreende uma quantidade de entre cerca de 5 U/kg e cerca de 15 U/kg.

[0012] Em anda outra modalidade, a quantidade terapeuticamente eficaz compreende uma quantidade de entre cerca de 0,2 nanograma e cerca de 2 nanograma.

[0013] Nas outra modalidade, a atividade muscular na proximidade de uma incisão ou laceração na pele é reduzida, reduzindo ou impedindo, dessa forma, a formação de cicatrizes.

[0014] Em outra modalidade, a toxina botulínica é uma toxina de "recuperação rápida".

[0015] Ainda em outra modalidade, a toxina botulínica de "atuação rápida" é também uma toxina de rápida recuperação.

[0016] Ainda em outra modalidade, o método compreende adicionalmente administração de uma neurotoxina botulínica de atuação rápida em combinação com, por exemplo, uma neurotoxina de atuação mais lenta. Em uma modalidade, a neurotoxina de atuação mais lenta é subtipo de toxina botulínica A (BoNT/A).

[0017] Em outras modalidades, o método compreende adicionalmente administração de uma neurotoxina botulínica de rápida recuperação em combinação com, por exemplo, uma neurotoxina de recuperação mais lenta.

[0018] Em outra modalidade, o método compreende procedimentos cirúrgicos adicionais. Por exemplo, as modalidades reveladas compreendem administração de uma neurotoxina botulínica de atuação rápida em combinação com, por exemplo, uma injeção de carga dérmica, uma elevação do olho, rinoplastia, aumento dos seios, uma fratura aberta, tratamento de uma laceração ou semelhantes.

[0019] O início rápido de efeito de relaxamento muscular com BoNT/E oferece cura aprimorada de ferida e formação de cicatriz reduzida em indivíduos, tais como aqueles que são submetidos a reparo de laceração facial. A menor duração de relaxamento muscular (2 a 4 semanas) oferecida pela BoNT/E é também desejável em comparação a 3 a 4 meses com produtos BoNT/A.

[0020] Em outro aspecto, é fornecido um método para reduzir a formação de tecido de cicatriz para aprimorar aparência de cicatriz. O método compreende administrar na proximidade de uma ferida uma formulação que compreende um tipo de toxina botulínica E em uma quantidade eficaz para diminuir tensão dinâmica na ferida e/ou a para paralisar os músculos na proximidade da ferida. Em uma modalidade, administrar BoNT/E reduz a formação de tecido de cicatriz da ferida em relação a uma ferida semelhante que não foi tratada ou tratada com tipo de toxina botulínica A (BoNT/A).

[0021] Em uma modalidade, a ferida é criada para remoção de carcinoma de célula basal ou carcinoma de células escamosas em um indivíduo. Em outra modalidade, a ferida é criada durante cirurgia de Mohs.

[0022] Ainda em outra modalidade, a ferida está na face. Em outras modalidades, a ferida está próxima dos olhos, na testa, no nariz, no couro cabeludo ou próximo de uma orelha.

[0023] Ainda em outra modalidade, a ferida é uma única ferida na testa.

[0024] Em outras modalidades, a formulação ou composição que compreende BoNT/E é administrada por via intramuscular.

[0025] Em uma modalidade, a formulação é administrada após a cirurgia de Mohs. Em outra modalidade, a formulação é administrada antes da cirurgia de Mohs.

[0026] Em outra modalidade, a formulação é administrada dentro de cerca de 10 minutos a cerca de 1 hora após a cirurgia de Mohs.

[0027] Em outras modalidades, a aparência é avaliada por um clínico com o uso de uma VAS (escala analógica visual). Em outra modalidade, a aparência da cicatriz é avaliada pelo indivíduo com o uso de uma Escala de Avaliação e Classificação de Cosmesis de Cicatriz (cicatrizes). Ainda em outra modalidade, a aparência da cicatriz é avaliada pelo indivíduo com o uso de uma Escala de Avaliação de Cicatriz de Paciente e Observador.

[0028] Em outro aspecto, é fornecido um método para aprimorar aparência da cicatriz. O método compreende administrar na proximidade de uma ferida uma formulação que compreende um tipo de toxina botulínica E em uma quantidade eficaz para reduzir vermelhidão, reduzir rigidez e/ou reduzir descoloração da cicatriz, em que a redução da vermelhidão, rigidez e/ou descoloração são observados nas primeiras 48 horas, 72 horas, 1 semana ou 1 mês de cura da ferida. Em uma modalidade, as reduções são avaliadas pelo paciente e/ou por um observador, tal como um clínico, e são em relação a uma ferida similar que não foi tratada ou foi tratada com tipo de toxina botulínica A (BoNT/A).

[0029] Em outro aspecto, é fornecido um método para reduzir formação de tecido de cicatriz em uma ferida. O método compreende administrar por via subdérmica na proximidade de uma ferida uma formulação que compreende um tipo de toxina botulínica E, em que a dita administração reduz formação de tecido de cicatriz da ferida em relação a uma ferida similar que não foi tratada ou foi tratada com tipo de toxina botulínica A.

[0030] Em uma modalidade, a ferida é perpendicular a uma linha de tensão da pele relaxada.

[0031] Em uma modalidade, o tipo de toxina botulínica E é administrado em uma quantidade eficaz para diminuir a tensão dinâmica na ferida. Em outra modalidade, a ferida é uma incisão cirúrgica.

[0032] Ainda em outro aspecto, é fornecido método para aprimorar aparência cicatriz que se forma sobre a ferida. O método compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz do subtipo de toxina botulínica E (BoNT/E) na proximidade de uma ferida.

[0033] Em uma modalidade, a ferida é uma ferida cirúrgica. Em outra modalidade, o BoNT/E é administrado antes de um procedimento cirúrgico. Ainda em outra modalidade, a BoNT/E é administrada após um procedimento cirúrgico.

[0034] Em uma modalidade, a ferida cirúrgica se sobrepõe a uma cicatriz existente no indivíduo.

[0035] Em uma modalidade, a quantidade terapeuticamente eficaz compreende uma quantidade que reduz vermelhidão da cicatriz, em relação a uma cicatriz que se forma sobre a ferida similar em um paciente não tratado com BoNT/E.

[0036] Ainda em outra modalidade, a quantidade terapeuticamente eficaz compreende uma quantidade que reduz rigidez da cicatriz, em relação a uma cicatriz que se forma sobre a ferida similar em um paciente não tratado com BoNT/E.

[0037] Ainda em outra modalidade, uma quantidade de subtipo de toxina botulínica A na proximidade da ferida é também administrada antes, durante ou após criação da ferida.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0038] A Figura 1 mostra uma representação da estrutura primária de uma neurotoxina botulínica (BoNT).

[0039] As Figuras 2A a 2D são representações esquemáticas e de fita da BoNT/E (Figuras 2A, 2C) e BoNT/B (Figuras 2B, 2D). Os domínios catalíticos, de translocação e de ligação são identificados com CD, TD e BD, respectivamente.

[0040] As Figuras 3A a 3B são ilustrações do corpo humano, vista anterior (Figura 3A) e vista posterior (Figura 3B), identificado os músculos.

[0041] A Figura 4 é uma ilustração do corpo humano com os nervos identificados.

[0042] A Figura 5 mostra sítios de injeção na testa para um estudo descrito no Exemplo 1.

[0043] A Figura 6 mostra os sítios de injeção na testa para um estudo descrito no Exemplo 4.

[0044] A Figura 7A é um gráfico de barras que mostra a mudança e média da escala analógica visual classificada pelo investigador (VAS) nos dias 2 a 8, dias 2 a 30 e dias 2 a 90 em pacientes humanos tratados com BoNT/E por via intramuscular no músculo frontal durante cirurgia de Mohs (barras com preenchimento tracejado) e em pacientes humanos não tratados com toxina botulínica como parte de uma cirurgia de Mohs (placebo, barras abertas).

[0045] A Figura 7B é um gráfico de barras que mostra a mudança em média de componente de cor reportado pelo paciente de avaliação de cicatriz com o uso da Escala de Avaliação de Cicatriz de Paciente e Observador (POSAS) nos dias 2 a 8, dias 2 a 30 e dias 2 a 90 em pacientes humanos tratados com BoNT/E por via intramuscular no músculo frontal durante cirurgia de Mohs (barras com preenchimento tracejado) e em pacientes humanos não tratados com toxina botulínica como parte de uma cirurgia de Mohs (placebo, barras abertas).

[0046] A Figura 7C é um gráfico de barras que mostra a mudança em média de componente de rigidez reportado pelo paciente de avaliação de cicatriz com o uso da Escala de Avaliação de Cicatriz de Paciente e Observador (POSAS) nos dias 2 a 8, dias 2 a 30 e dias 2 a 90 em pacientes humanos tratados com BoNT/E por via intramuscular no músculo frontal durante cirurgia de Mohs (barras com preenchimento tracejado) e em pacientes humanos não tratados com toxina botulínica como parte de uma cirurgia de Mohs (placebo, barras abertas).

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0047] Modalidades reveladas no presente documento podem reduzir a atividade muscular local e, assim, reduzir o desenvolvimento de cicatrizes, por exemplo, cicatrizes resultantes de cirurgia. Em algumas modalidades, a cirurgia pode compreender cirurgia estética, por exemplo, rinoplastia, um levantamento ocular, uma dobra "abdominal" ou similares. Em outras modalidades, a cirurgia pode compreender outros tipos de procedimentos médicos, por exemplo, remoção de apêndice, transplante de órgão, parto por cesariana e similares. Em algumas modalidades, os métodos compreendem administrar as composições reveladas próximas de uma ferida.

[0048] Os resultados cosméticos de reparos da ferida dependem de muitos fatores que incluem a qualidade do fechamento, infecções e qualidade da sutura. Um fator principal é a tensão nas bordas de ferida, o que tende a aumentar a inflamação, causando fibrose e eritema. A tensão é composta de tensão estática (o resultado da localização da ferida, tamanho, técnicas de fechamento etc.) e tensão dinâmica. Essa tensão dinâmica é causada pela ação dos músculos que são subjacentes à ferida. De modo específico, as feridas que são reparadas em paralelo às linhas de tensão de pele relaxada (RSTL) têm menos tensão dinâmica e curam com um melhor resultado cosmético. As cicatrizes que são perpendiculares a essas RSTL têm tensão aumentada, o que resulta em inflamação aumentada, deposição aumentada de colágeno e glicosaminoglicanos, resposta fibroblástica aumentada e cura da ferida insuficiente e cicatrização aumentada. A diminuição da tensão dinâmica pela desnervação do músculo subjacente com toxina botulínica oferece uma maneira intrigante de diminuir potencialmente a cicatrização.

[0049] Em algumas modalidades, a cirurgia pode compreender cirurgia para tratar câncer, por exemplo, câncer de pele, por exemplo, cirurgia de Mohs. A cirurgia micrográfica de Mohs é considerada a técnica mais eficaz para tratar muitos carcinomas de células basais (BCCs) e carcinomas de células escamosas (SCCs), incluindo aquelas em áreas cosmética e funcionalmente importantes ao redor dos olhos, nariz, lábios, orelhas, couro cabeludo, dedos, dedos ou genitais.

[0050] As BCCs são crescimento ou lesões anormais não controladas que surgem nas células basais da pele, que está na camada mais profunda da epiderme (a camada mais superior da pele). As BCCs muitas vezes parecem feridas abertas, pontos vermelhos, manchas rosas, saliências brilhantes ou cicatrizes e são normalmente causados por uma combinação de exposição ao sol ocasional cumulativa e intensa. Mais de 4 milhão de casos de carcinoma de célula basal são diagnosticados nos EUA cada ano. De fato, a BCC é a forma de câncer que ocorre mais frequência. Mais de um dentre três novos cânceres são um câncer de pele, e a vasta maioria são BCCs.

[0051] As SCCs são uma forma comum de câncer de pele que se desenvolve nas células escamosas que formam a camada intermediária e externa da pele. Geralmente, as mesmas não são letais, embora possam ser agressivas em alguns casos. O carcinoma de células escamosas não tratado da pele pode aumentar ou se espalhar para outras partes do corpo, causando sérias complicações. A maioria das SCCs resulta de exposição prolongada a radiação ultravioleta (UV), ou da luz de sol ou de leitos ou lâmpadas de bronzeamento. Evitar a luz UV ajuda a reduzir o risco de carcinoma de células escamosas da pele e outras formas de câncer de pele. As células escamosas são constatadas em muitos lugares no corpo e o carcinoma de células escamosas pode ocorrer em qualquer lugar em que há células escamosas. Carcinoma de células escamosas da pele se refere a câncer que se forma nas células escamosas constadas na pele.

[0052] Mohs é também recomendado para BCCs ou SCCs que são grandes, agressivos ou que crescem rapidamente, que têm bordas não distintas ou que recidivaram após tratamento anterior. Alguns cirurgiões também usam com êxito a cirurgia de Mohs em determinados casos de melanoma. O procedimento é feito em estágios, incluindo trabalho em laboratório, ao mesmo tempo em que o paciente aguarda. Isso permite a remoção de todas as células cancerosas para a taxa mais alta de cura ao mesmo tempo em que o tecido saudável é poupado. O procedimento tem uma taxa de cura de até 99% para um câncer de pele que não foi tratado anteriormente e uma taxa de cura de até 94% para um câncer de pele que recidivou após o tratamento anterior.

[0053] O procedimento foi usado na remoção do melanoma in situ (taxa de cura 77% a 98% dependendo do cirurgião) e determinados tipos de melanoma (taxa de cura a 52%). Outro estudo de melanoma in situ revelou taxa de cura Mohs de 95% para Mohs de seção congelada e 98 a 99% para o método de Mohs de tecido fixo.

[0054] O procedimento de Mohs é um método de corte de patologia que permite o exame completo da margem cirúrgica. É diferente é da técnica padrão de corte em série (“bread loafing”), em que as amostras aleatórias da margem cirúrgica são examinadas. Cirurgia de Mohs é realizada em quatro etapas: a. A remoção cirúrgica de tecido (Oncologia Cirúrgica). b. Mapeamento do pedaço do tecido, congelamento e corte do entre 5 e 10 micrômetros com o uso de um criostato e marcação com hematoxilina e eosina (H&E) ou outras marcações (Incluindo Azul de Toluidina). c. Interpretação de lâminas de microscópios (Patologia). d. Possível reconstrução do defeito cirúrgico (Cirurgia Reconstrutiva).

[0055] O procedimento de Mohs é realizado normalmente em um consultório médico sob anestesia local. Um bisturi pequeno é utilizado para cortar ao redor do tumor visível. Uma margem cirúrgica muito pequena é utilizada, normalmente com 1 a 1,5 mm de “margem livre” ou pele não envolvida. A quantidade de margem livre é muito menor que o normal 4 a 6 mm necessário para a excisão- padrão de cânceres de pele. Após cada remoção cirúrgica de tecido, o espécime é processado, cortado no criostato e colocado em lâminas, marcado com H&E e, em seguida, ligado pelo cirurgião/patologista Mohs que examina os cortes para células cancerosas. Caso seja encontrado câncer, sua localização é marcada no mapa (desenho do tecido) e o cirurgião remove o tecido canceroso indicado do paciente. Esse procedimento é repetido até que não seja encontrado mais nenhum câncer. A vasta maioria de casos é, então, reconstruída pelo cirurgião de Mohs.

[0056] Modalidades reveladas no presente documento podem reduzir a atividade muscular local e, assim, reduzir o desenvolvimento de cicatrizes, por exemplo, cicatrizes resultantes de trauma. Por exemplo, após uma lesão traumática, as modalidades reveladas podem compreender a administração de composições reveladas próximas ao trauma, por exemplo, uma laceração ou amputação.

[0057] Em algumas modalidades, a cirurgia pode compreender cirurgia estética, por exemplo, rinoplastia, um levantamento ocular, uma dobra "abdominal" ou similares. Em outras modalidades, a cirurgia pode compreender outros tipos de procedimentos médicos, por exemplo, remoção de apêndice, transplante de órgão, parto por cesariana e similares. Em algumas modalidades, os métodos compreendem administrar as composições reveladas próximas de uma ferida.

[0058] Os locais de administração úteis para a prática de modalidades reveladas podem compreender qualquer área em que a atividade muscular deve ser reduzida. Por exemplo, quando empregadas em combinação com procedimentos de cirurgia estética facial, modalidades reveladas podem incluir administração ao complexo glabelar, incluindo os supercílios corrugadores e o procério; o orbicular dos olhos; as fibras superolaterais do orbicular dos olhos; o frontal; o nasal; o levantador do lábio superior e da asa do nariz; o orbicular da boca; o masseter; o abaixador do ângulo da boca; e o platisma.

[0059] Quando empregadas em combinação com outros procedimentos cirúrgicos, as modalidades reveladas podem incluir administração em, por exemplo, músculos do braço, perna, tronco e similares.

[0060] Modalidades reveladas podem compreender métodos para preparar um local cirúrgico antes do procedimento, a fim de reduzir a tensão muscular na proximidade de uma incisão.

[0061] Em algumas modalidades, as composições reveladas no presente documento podem compreender toxinas botulínicas de ação rápida, por exemplo, botulinum tipo E.

[0062] Em algumas modalidades, as composições reveladas no presente documento podem compreender toxinas botulínicas de recuperação rápida, por exemplo, botulinum tipo E.

[0063] Em algumas modalidades, as composições reveladas no presente documento podem compreender toxinas botulínicas de atuação rápida, recuperação rápida, por exemplo, botulinum tipo E.

DEFINIÇÕES

[0064] "Administração" ou "administrar" significa a etapa de dar (isto é, administrar) uma composição farmacêutica ou ingrediente ativo a um indivíduo. As composições farmacêuticas reveladas no presente documento podem ser administradas por meio de rotas adequadas. Por exemplo, administração intramuscular, intradérmica, subcutânea, administração intratecal, intraperitoneal, tópica (transdérmica), instilação e implantação (por exemplo, de um dispositivo de liberação lenta, tal como implante polimórfico ou bomba miniosmótico) podem ser todas rotas apropriadas de administração.

[0065] “Aliviar” significa uma redução na ocorrência de uma dor, de uma dor de cabeça ou qualquer sintoma ou causa de uma afecção ou distúrbio. Desse modo, melhorar inclui alguma redução, redução significativa, redução quase total e redução total.

[0066] O termo “aminoácido” significa um aminoácido sintético ou de ocorrência natural, assim como análogos de aminoácidos, estereoisômeros e miméticos de aminoácido que funcionam de maneira semelhante aos aminoácidos de ocorrência natural. Incluídos por essa definição são aminoácidos naturais tais como: (1) histidina (His; H) (2) isoleucina (Ile; I) (3) leucina (Leu; L) (4) Lisina (Lys; K) (5) metionina (Met; M) (6) fenilalanina (Phe; F) (7) treonina (Thr; T) (8) triptofano (Trp; W) (9) valina (Val; V) (10) arginina (Arg; R) (11) cisteína (Cys; C) (12) glutamina (Gln; Q) (13) glicina (Gly; G) (14) prolina (Pro; P) (15) serina (Ser; S) (16) tirosina (Tyr; Y) (17) alanina (Ala; A) (18) asparagina (Asn; N) (19) ácido aspártico (Asp; D) (20) ácido glutâmico (Glu; E) (21)

selenocisteína (Sec; U); incluindo aminoácidos não naturais: (a) citrulina (Cit); (b) cistina; (c) ácido gama- amino butírico (GABA); (d) ornitina (Orn); (f) teanina; (g) homocisteína (Hey); (h) tiroxina (Thx); e derivados de aminoácido, tais como betaína; carnitina; carnosina creatina; hidroxitriptofano; hidroxiprolina (Hyp); N- acetilcisteína; S-Adenosil metionina (SAM-e); taurina; tiramina.

[0067] “Livre de proteína animal" significa a ausência de produtos ou compostos de derivados de sangue, produzidos a partir ou outros produtos ou compostos derivados de animais. “Animal” significa um mamífero (tal como, um ser humano), pássaro, réptil, peixe, inseto, aranha ou outras espécies animais. “Animal" exclui micro- organismos, tais como bactérias. Desse modo, uma composição farmacêutica livre de proteína animal pode incluir uma neurotoxina botulínica. Por exemplo, uma composição farmacêutica "livre de proteína animal" significa uma composição farmacêutica que é ou substancialmente livre ou essencialmente livre ou completamente livre de uma albumina derivada de soro, gelatina e outras proteínas derivadas de animal, tais como imunoglobulinas. Um exemplo de uma composição farmacêutica livre de proteína animal é uma composição farmacêutica que compreende ou que consiste em uma toxina botulínica (como um ingrediente ativo) e um polissacarídeo adequado como um estabilizante ou excipiente.

[0068] “Toxina botulínica" ou “neurotoxina botulínica” significa uma neurotoxina produzida pela Clostridium botulinum, assim como uma toxina botulínica (ou a cadeia leve ou a cadeia pesada do mesmo) produzida recombinante por uma espécie não clostrídica. O sintagma “toxina botulínica”, conforme usado no presente documento, abrange os serotipos de toxina botulínica A, B, C, D, E, F,

G, H e X e seus subtipos, toxinas de mosaico, tais como BoNT/DC e BoNT/CD e quaisquer outros tipos de subtipos dos mesmos ou quaisquer proteínas pré-modificadas, análogos, derivados, homólogos, partes, subpartes, variantes ou versões, em cada caso, de qualquer um dentre os supracitados. “Toxina botulínica”, conforme usado no presente documento, também abrange uma “toxina botulínica modificada”. Além disso, a “toxina botulínica”, conforme usado no presente documento, também abrange um complexo de toxina botulínica, (por exemplo, os complexos de 300, 600 e 900 kDa), assim como o componente neurotóxico da toxina botulínica (150 kDa) que é dissociado das proteínas do complexo. “Toxina botulínica purificada" significa uma toxina botulínica pura ou um complexo de toxina botulínica que é isolado ou substancialmente isolado de outras proteínas e impurezas que podem acompanhar a toxina botulínica quando obtida de um processo de cultura ou fermentação. Dessa forma, uma toxina botulínica purificada pode ter pelo menos 95% e, com mais preferência pelo menos, 99% das proteínas e impurezas da toxina não botulínica removidas.

[0069] “Neurotoxina clostrídica” se refere a qualquer toxina produzida por uma cepa da toxina clostrídica que pode executar o mecanismo celular geral, por meio do qual, uma toxina clostrídica intoxica uma célula e abrange a ligação de uma toxina clostrídica a um receptor de toxina clostrídica de alta ou baixa afinidade, a internalização da do complexo toxina/receptor, a translocação da cadeia leve de toxina clostrídica no citoplasma e a modificação enzimática de um substrato de toxina clostrídica. Os exemplos não limitativos de toxinas clostridiais incluem toxinas botulínicas, tais como uma BoNT/A, uma BoNT/B, uma BoNT/C1, uma BoNT/D, uma BoNT/CD, uma BoNT/DC, uma BoNT/E, uma BoNT/F, uma BoNT/G, uma BoNT/H

(também conhecido como tipo FA ou HA), uma BoNT/X, uma toxina Tetanus (TeNT), uma toxina Baratii (BaNT) e uma toxina Butyricum (BuNT). A citotoxina BoNT/C2 e citotoxina BoNT/C3, não sendo neurotoxinas, são excluídas do termo “toxina clostrídica”. O termo toxina clostrídica também inclui apenas a toxina clostrídica a aproximadamente 150 kDa (isto é, sem as NAPs). Uma toxina clostrídica inclui variantes de toxina clostrídica de ocorrência natural, tais como, por exemplo, isoformas da toxina clostrídica e subtipos da toxina clostrídica; variantes de toxina clostrídica de ocorrência não natural, tais como, por exemplo, variantes conservativas de toxina clostrídica, variantes de toxina clostrídica não conservativas, variantes quiméricas da toxina clostrídica e fragmentos de toxina clostrídica ativa da mesma ou uma combinação dos mesmos. Uma toxina clostrídica também inclui complexos de toxina clostrídica, que se refere a um complexo que compreende uma toxina clostrídica e proteínas não associadas à toxina (NAPs), tal como, por exemplo, um complexo de toxina botulínica, um complexo de toxina Tetanus, um complexo de toxina Baratiie um complexo de toxina Butyricum. Os exemplos não limitantes dos complexos de toxina clostrídica incluem aqueles produzidos por uma Clostridium botulinum, tal como, por exemplo, um complexo BoNT/A de 900-kDa, um complexo BoNT/A de 500-kDa, um complexo BoNT/A de 300-kDa, um complexo BoNT/B de 500-kDa, um complexo BoNT/C1 de 500-kDa, um complexo BoNT/D de 500- kDa, um complexo BoNT/D 300-kDa, um complexo BoNT/E de 300- kDa e um complexo BoNT/F de 300-kDa.

[0070] “A quantidade eficaz", conforme aplicado, ao ingrediente biologicamente ativo significa a quantidade do ingrediente que é geralmente suficiente para afetar uma mudança desejada no indivíduo. Por exemplo, quando o efeito desejado é uma redução da formação de cicatriz, uma quantidade eficaz do ingrediente é o fato de que a quantidade que causa pelo menos uma redução substancial de formação de cicatriz e sem resultar em toxicidade significativa. Em outros aspectos dessa modalidade, uma concentração terapeuticamente eficaz de um ingrediente ativo de toxina clostrídica reduz um sintoma associado ao alimento que é tratado, por exemplo, com no máximo 10%, no máximo 20%, no máximo 30%, no máximo 40%, no máximo 50%, no máximo 60%, no máximo 70%, no máximo 80%, no máximo 90% ou no máximo 100%.

[0071] “Atuação rápida”, conforme usado no presente documento, se refere a uma toxina botulínica que produz efeitos no paciente mais rapidamente que aqueles produzidos, por exemplo, por um tipo de neurotoxina botulínica A, tal como onabotulinumtoxinA. Por exemplo, os efeitos de uma toxina botulínica de atuação rápida podem ser produzidos dentro de 12 horas, 24 horas ou 36 horas. Desse modo, em relação a uma toxina de atual rápida, tal como tipo E, o tipo de toxina botulínica A pode ser classificados como toxina botulínica de “atuação mais lenta”. Em alguns casos, uma toxina botulínica de atuação mais lenta é denominado de toxina “de atuação intermediária”. Em algumas modalidades, a toxina botulínica de atuação rápida produz um efeito terapêutico mensurável dentro de 6 horas, 12 horas, 24 horas ou 36 horas após sua administração e/ou seu efeito é observado pelo menos cerca de 50% mais cedo que o efeito terapêutico produzido pela onabotulinumtoxinA.

[0072] “Recuperação rápida”, conforme usado no presente documento, se refere a uma toxina botulínica cujos efeitos diminuem em um paciente mais rapidamente que aqueles produzidos, por exemplo, por um tipo de neurotoxina botulínica A, tal como onabotulinumtoxinA. Em algumas modalidades, o efeito terapêutico da toxina de rápida recuperação botulínica diminui dentro de cerca de 3 meses, 2 meses ou 6 semanas após sua administração e seus efeitos diminuem cerca de 50% mais rápido que os efeitos produzidos por onabotulinumtoxinA. Por exemplo, os efeitos de uma toxina de rápida recuperação botulínica podem diminuir, por exemplo, em 120 horas, 150 horas, 300 horas, 350 horas, 400 horas, 500 horas, 600 horas, 700 horas, 800 horas ou semelhantes. Sabe-se que o tipo de toxina botulínica A pode ter uma eficácia por até 12 meses (European J. Neurology 6 (Supp 4): S111-S1150:1999) e, em algumas circunstâncias por 27 meses, quando usado para tratar glândulas, tal como no tratamento de hiperidrose. Consultar, por exemplo, Bushara K., toxina botulínica e rhinorrhea, Otolaryngol Head Neck Surg 1996; 114(3):507 e The Laryngoscope 109:1344- 1346:1999. No entanto, a duração habitual de uma injeção intramuscular de uma neurotoxina botulínica tipo A é tipicamente cerca de 3 a 4 meses. Desse modo, em relação a uma toxina de rápida recuperação, tal como tipo E, o tipo de toxina botulínica A, tal como onabotulinumtoxinA, pode ser classificada como uma “recuperação mais lenta” ou toxina botulínica “de atuação mais longa”.

[0073] “Ação intermediária", conforme usada no presente documento, se refere a uma toxina botulínica que produz efeitos mais lentamente que uma toxina de ação rápida.

[0074] “Administração local” significa administração direta de um produto farmacêutico em um local, ou próximo do mesmo, ou dentro de um corpo de animal, em que nesse local um efeito biológico do produto farmacêutico é desejado, tal como, por exemplo, injeção por via intramuscular ou intra ou subdérmica ou administração tópica. Administração local exclui rotas sistêmicas de administração, tais como administração oral ou intravenosa. A administração tópica é um tipo de administração local na qual um agente farmacêutico é aplicado a um paciente.

[0075] “Neurotoxina" significa uma molécula biologicamente ativa com uma afinidade específica para um receptor da superfície celular neuronal. A neurotoxina inclui toxinas de Clostridial como toxina pura e complexada com uma a mais proteínas associadas a toxinas, não toxinas.

[0076] "Paciente" significa um indivíduo humano ou não humano que recebe atendimento médico ou veterinário.

[0077] “Composição farmacêutica" significa uma composição que compreende um ingrediente farmacêutico ativo, tal como, por exemplo, um ingrediente ativo de toxina clostrídica, tal como uma toxina botulínica e pelo menos um ingrediente adicional, tal como, por exemplo, um estabilizante ou excipiente ou semelhantes. Portanto, uma composição farmacêutica é uma formulação que é adequada para administração diagnóstica ou terapêutica a um indivíduo, tal como um paciente humano. A composição farmacêutica pode ser, por exemplo, em uma condição seca liofilizada ou a vácuo, uma solução formada após reconstituição da composição farmacêutica seca a vácuo ou liofilizada ou como uma solução ou sólido que não exige reconstituição. Conforme declarado, uma composição farmacêutica pode ser líquida ou sólida. Uma composição farmacêutica pode ser livre de proteínas animais.

[0078] “Preparação” de um local cirúrgico se refere a administrar uma composição revelada no presente documento para reduzir tensão muscular na área de incisão.

[0079] “Administração suplementar", conforme usada no presente documento, se refere a uma administração botulínica que segue uma administração inicial de neurotoxina.

[0080] “Formulação terapêutica" significa uma formulação que pode ser usada para tratar e, assim, aliviar um distúrbio ou uma doença e/ou sintoma associado ao mesmo, como um distúrbio ou uma doença caracterizada por uma atividade de um músculo periférico.

[0081] “Concentração terapeuticamente eficaz”, “quantidade terapeuticamente eficaz”, “quantidade eficaz”, “dose eficaz” e “dose terapeuticamente eficaz” se refere à dose mínima de um agente (por exemplo, tal como uma toxina botulínica ou composição farmacêutica que compreende toxina botulínica) necessário para obter o efeito terapêutico desejado e inclui uma dose suficiente para reduzir um sintoma associado a uma doença, distúrbio ou afecção que é tratado sem causar efeitos colaterais adversos ou negativos significativos.

[0082] “Tratar", "que trata" ou "tratamento" significa um alívio ou redução (que inclui alguma redução, uma redução significativa, uma redução quase total e uma redução total), resolução ou prevenção (temporária ou permanentemente) de uma doença, distúrbio ou condição, de modo a alcançar um resultado terapêutico ou cosmético desejado, como pela cicatrização de tecidos lesionados ou danificados, ou alterando-se, mudando-se, aprimorando-se, melhorando-se, amenizando-se e/ou embelezando-se uma doença, distúrbio ou condição existente ou percebida.

[0083] “Unidade" ou "U" significa uma quantidade de neurotoxina botulínica ativo padronizado para ter efeito de bloqueio neuromuscular equivalente como uma Unidade de neurotoxina botulínica tipo A comercialmente disponível.

[0084] “Ferida”, conforme usado no presente documento, se refere a uma perturbação à pele, por exemplo, causado por lesão ou intencionalmente.

[0085] Agrupamentos de modalidades alternativas, elementos ou etapas da presente revelação não devem ser interpretados como limitações. Cada membro do grupo pode ser chamado e reivindicado individualmente ou em qualquer combinação com outros membros do grupo revelados no presente documento. Prevê-se que um ou mais membros de um grupo possam ser compreendidos ou excluídos de um grupo por razões de conveniência e/ou patenteabilidade. Quando qualquer inclusão ou exclusão ocorre, considera-se que a relatório descritivo contém o grupo modificado, cumprindo assim a descrição por escrito de todos os grupos Markush usados nas reivindicações anexas.

[0086] Salvo indicação em contrário, todos os números que expressam uma característica, item, quantidade, parâmetro, propriedade, termo e assim por diante usados no presente relatório descritivo e reivindicações devem ser entendidos como modificados em todas as instâncias pelo termo "sobre". Conforme usado no presente documento, o termo "sobre" significa que a característica, item, quantidade, parâmetro, propriedade ou termo assim qualificado abrange um intervalo de mais ou menos dez por cento acima e abaixo do valor da característica, item, quantidade, parâmetro, propriedade ou termo declarado. Consequentemente, a menos que seja indicado o contrário, os parâmetros numéricos apresentados no relatório descritivo e nas reivindicações anexas são aproximações que podem variar. No mínimo, e não como uma tentativa de limitar a aplicação da doutrina de equivalentes ao escopo das reivindicações, cada indicação numérica deve pelo menos ser interpretada à luz do número de dígitos significativos relatados e aplicando-se técnicas de arredondamento comuns. Não obstante os intervalos e valores numéricos que apresentam o amplo escopo da revelação são aproximações, os intervalos e valores numéricos apresentados nos exemplos específicos são relatados tão precisamente quanto possível. Qualquer intervalo ou valor numérico, no entanto, contém inerentemente certos erros que necessariamente resultam do desvio padrão encontrado em suas respectivas medições de teste. A referência aos intervalos numéricos de valores no presente documento é meramente destinada a servir como um método prático de se fazer referência individualmente a cada valor numérico separado que está dentro do intervalo. A menos que indicado de outra forma no presente documento, cada valor individual de um intervalo numérico é incorporado no presente relatório descritivo como se fosse recitado individualmente no presente documento.

[0087] Os termos "um", "uma" e "o/a" e referentes similares usados no contexto da descrição da revelação (especificamente no contexto das seguintes reivindicações) devem ser compreendidos de modo a cobrir tanto o singular quanto o plural, salvo indicação em contrário no presente documento ou claramente contradito pelo contexto. Todos os métodos descritos no presente documento podem ser realizados em qualquer ordem adequada, a menos que indicado de outra forma no presente documento ou claramente contradito pelo contexto. O uso de qualquer e todos os exemplos, ou linguagem exemplificativa (por exemplo, "como”) fornecida no presente documento, destina- se a meramente esclarecer de forma a melhorar a revelação e não impor uma limitação ao escopo de outro modo reivindicado. Nenhuma linguagem no presente relatório descritivo deve ser interpretada como indicando qualquer elemento não reivindicado essencial para a prática das modalidades reveladas no presente documento.

COMPOSIÇÕES DE NEUROTOXINA

[0088] Modalidades reveladas no presente documento compreendem composições de neurotoxinas, por exemplo, neurotoxinas de recuperação rápida. Tais neurotoxinas podem ser formuladas em qualquer formulação farmaceuticamente aceitável, em qualquer forma farmaceuticamente aceitável. A neurotoxina também pode ser usada em qualquer forma farmaceuticamente aceitável fornecida por qualquer fabricante.

[0089] A neurotoxina pode ser produzida por uma bactéria Clostridial, como por uma Clostridium botulinum, Clostridium butyricum ou bactéria Clostridium beratti. Além disso, a neurotoxina pode ser uma neurotoxina modificada; é uma neurotoxina que tem pelo menos um de seus aminoácidos excluídos, modificados ou substituídos, em comparação com a neurotoxina nativa ou tipo selvagem. Além disso, a neurotoxina pode ser uma neurotoxina produzida de maneira recombinante ou um derivado ou fragmento da mesma.

[0090] A Figura 1 retrata a estrutura primária de uma neurotoxina botulínica (BoNT). As Figuras 2A a 2D são representações esquemáticas e de fita da BoNT/E (Figuras 2A, 2C) e BoNT/B (Figuras 2B, 2D). Os domínios catalíticos, de translocação e de ligação são identificados com CD, TD e BD, respectivamente.

[0091] Em algumas modalidades, uma composição de tipo de neurotoxina botulínica E (BoNT/E) revelada tem 40% de homologia de aminoácido em comparação ao tipo A e compartilha a mesma estrutura de domínio básica que consiste em 2 cadeias, uma cadeia pesada de 100 kDa (HC) e uma cadeia leve 50 kDa (LC), ligado por uma ligação de dissulfeto, por exemplo, por exemplo, Whelan et al., The complete aminoacid sequence of the Clostridium botulinum type-E neurotoxin, derived by nucleotide-sequence analysis of the encoding gene, Eur. J. Biochem. 204(2): 657 a 667 (1992). O HC contém o domínio de ligação de receptor e o domínio de translocação, enquanto o LC contém a atividade enzimática da proteína sinaptossomal associada (SNAP). A estrutura do domínio é a mesma estrutura compartilhada por todos os serotipos de neurotoxina botulínica.

[0092] Nas modalidades reveladas, a neurotoxina é formulada na forma de dosagem unitária; por exemplo, pode ser fornecido como uma solução estéril em um frasco para injetáveis ou como um frasco para injetáveis ou sachê que contém um pó liofilizado para reconstituir um veículo adequado, como solução salina para injeção.

[0093] Nas algumas modalidades, a toxina botulínica é formulada em uma solução que contém soro fisiológico e albumina de soro humano pasteurizado, que estabiliza a toxina e minimiza a perda por adsorção inespecífica. A solução pode ser filtrada estéril (filtro de 0,2 µ), preenchida em frascos individuais e depois seca a vácuo para render um pó liofilizado estéril. Em uso, o pó pode ser reconstituído pela adição de solução salina estéril não preservada normal (cloreto de sódio a 0,9% para injeção).

[0094] Em uma modalidade, o tipo botulínico E é fornecido em uma solução estéril para injeção com uma concentração nominal de 5 ml em frasco de 20 ng/ml em fosfato de sódio 0,03 m, cloreto de sódio 0,12 m e albumina de soro humano (HSA) 1 mg/ml, em pH 6,0. Em outra modalidade, o tipo botulínico E é fornecido como uma formulação líquida compreendida de fosfato de sódio, cloreto de sódio e HSA. Ainda em outra modalidade, o tipo botulínico E é alimentado como uma formulação liofilizada ou líquida que compreende um tensoativo e um dissacarídeo.

[0095] Embora a composição possa conter apenas um único tipo de neurotoxina, por exemplo, o tipo botulínico E, as composições reveladas podem incluir dois ou mais tipos de neurotoxinas, que podem fornecer efeitos terapêuticos aprimorados dos distúrbios. Por exemplo, uma composição administrada a um paciente pode incluir tipos botulínicos A e E. A administração de uma única composição que contém duas neurotoxinas diferentes pode permitir que a concentração eficaz de cada uma das neurotoxinas seja menor do que se uma única neurotoxina for administrada ao paciente enquanto ainda alcançar os efeitos terapêuticos desejados. A composição administrada ao paciente também pode conter outros ingredientes farmaceuticamente ativos, como moduladores de receptores de proteínas ou canais de íons, em combinação com a neurotoxina ou neurotoxinas. Esses moduladores podem contribuir para a redução da neurotransmissão entre os vários neurônios. Por exemplo, uma composição pode conter moduladores de receptores tipo A do ácido gama-aminobutírico (GABA) que aumentam os efeitos inibitórios mediados pelo receptor GABAA. O receptor GABAA inibe a atividade neuronal ao desviar efetivamente o fluxo de corrente através da membrana celular. Os moduladores do receptor GABAA podem aumentar os efeitos inibitórios do receptor GABAA e reduzir a transmissão de sinal elétrico ou químico dos neurônios. Exemplos de moduladores do receptor GABAA incluem benzodiazepínicos, como diazepam, oxaxepam, lorazepam, prazepam, alprazolam, halazeapam, cordiazepóxido e clorazepato. As composições também podem conter moduladores do receptor de glutamato que diminuem os efeitos excitatórios mediados pelos receptores de glutamato. Exemplos de moduladores de receptor de glutamato incluem agentes que inibem o fluxo de corrente através dos tipos de receptores de glutamato AMPA, NMDA e/ou cainato.

MÉTODOS DE TRATAMENTO

[0096] Os métodos revelados no presente documento podem compreender a administração de uma neurotoxina de ação rápida a um paciente. Em uma modalidade preferencial, a neurotoxina é botulínica tipo E.

[0097] Os métodos revelados no presente documento podem compreender a administração complementar de uma neurotoxina de ação rápida a um paciente. Modalidades que compreendem administração suplementar podem ainda compreender avaliação de médico ou paciente dos resultados de uma administração prévia de neurotoxina.

[0098] Em algumas modalidades, a administração da neurotoxina de ação rápida é realizada antes de um procedimento cirúrgico. Em algumas modalidades, a administração é realizada, por exemplo, dentro de 6 horas antes do procedimento, dentro de 5 horas antes do procedimento, dentro de 4 horas antes do procedimento, dentro de 3 horas antes do procedimento, dentro de 2 horas antes do procedimento, dentro de 60 minutos antes do procedimento, dentro de 50 minutos antes do procedimento, dentro de 40 minutos antes do procedimento, dentro de 30 minutos antes do procedimento, dentro de 20 minutos antes do procedimento, dentro de 10 minutos antes do procedimento, dentro de 5 minutos antes do procedimento, dentro de 2 minutos antes do procedimento ou semelhantes.

[0099] Nas modalidades alternativas, a administração da neurotoxina de ação rápida é realizada simultaneamente com um procedimento cirúrgico.

[0100] Em outras modalidades, a administração da neurotoxina de ação rápida é realizada após um procedimento cirúrgico. Por exemplo, a administração pode ser realizada, dentro de 1 minuto após o procedimento, dentro de 2 minutos após o procedimento, dentro de 3 após o procedimento, dentro de 4 minutos após o procedimento, dentro de 5 minutos após o procedimento, dentro de 6 minutos após o procedimento, dentro de 7 minutos após o procedimento, dentro de 8 minutos após o procedimento, dentro de 9 minutos após o procedimento, dentro de 10 minutos após o procedimento, dentro de 20 minutos após o procedimento, dentro de 30 minutos após o procedimento, dentro de 40 minutos após o procedimento, dentro de 50 minutos após o procedimento, dentro de 60 minutos após o procedimento, dentro de 90 minutos após o procedimento, dentro de 120 minutos após o procedimento, dentro de 180 minutos após o procedimento, dentro de 240 minutos após o procedimento, dentro de 300 minutos após o procedimento ou semelhantes. Em algumas outras modalidades, a administração pode ser realizada dentro de 1 a 3 dias após o procedimento. Em ainda outras modalidades, a administração pode ser realizada dentro de 3 meses após o procedimento.

[0101] Em modalidades que compreendem uma administração suplementar, a avaliação dos resultados da administração de neurotoxina inicial pode ser realizada dentro de, por exemplo, 6 horas da administração inicial, 8 horas da administração inicial, 10 horas da administração inicial, 12 horas da administração inicial, 14 horas da administração inicial, 16 horas da administração inicial, 18 horas da administração inicial, 24 horas da administração inicial, 30 horas da administração inicial, 36 horas da administração inicial, 42 horas da administração inicial, 48 horas da administração inicial, 54 horas da administração inicial, 60 horas da administração inicial, 66 horas da administração inicial, 72 horas da administração inicial, 78 horas da administração inicial, 84 horas da administração inicial, 90 horas da administração inicial, 96 horas da administração inicial, 102 horas da administração inicial, 108 horas da administração inicial, 114 horas da administração inicial, 120 horas da administração inicial, 1 semana da administração inicial, 2 semanas da administração inicial, 3 semanas da administração inicial, 4 semanas da administração inicial, 5 semanas da administração inicial, 6 semanas da administração inicial, 7 semanas da administração inicial, 8 semanas da administração inicial, 9 semanas da administração inicial, 10 semanas da administração inicial, 11 semanas da administração inicial, 12 semanas da administração inicial ou semelhantes.

[0102] Em modalidades compreendendo uma administração suplementar, a administração da dose suplementar pode ser realizada, dentro de, por exemplo, 6 horas da avaliação, 8 horas da avaliação, 10 horas da avaliação, 12 horas da avaliação, 14 horas da avaliação, 16 horas da avaliação, 18 horas da avaliação, 24 horas da avaliação, 30 horas da avaliação, 36 horas da avaliação, 42 horas da avaliação, 48 horas da avaliação, 54 horas da avaliação, 60 horas da avaliação, 66 horas da avaliação, 72 horas da avaliação, 78 horas da avaliação, 84 horas da avaliação, 90 horas da avaliação, 96 horas da avaliação, 102 horas da avaliação, 108 horas da avaliação a avaliação, 114 horas da avaliação, 120 horas da avaliação, 1 semana da avaliação, 2 semanas da avaliação, 3 semanas da avaliação, 4 semanas da avaliação, 5 semanas da avaliação, 6 semanas da avaliação, 7 semanas da avaliação, 8 semanas da avaliação, 9 semanas da avaliação, 10 semanas da avaliação, 11 semanas da avaliação, 12 semanas da avaliação ou similares.

[0103] Em algumas modalidades, a administração suplementar por si só pode ser realizada, por exemplo, dentro de, por exemplo, 6 horas da administração inicial da neurotoxina de atuação rápida, 8 horas da administração inicial, 10 horas da administração inicial, 12 horas da administração inicial, 14 horas da administração inicial, 16 horas da administração inicial, 18 horas da administração inicial, 24 horas da administração inicial, 30 horas da administração inicial, 36 horas da administração inicial, 42 horas da administração inicial, 48 horas da administração inicial, 54 horas da administração inicial, 60 horas da administração inicial, 66 horas da administração inicial, 72 horas da administração inicial, 78 horas da administração inicial, 84 horas da administração inicial, 90 horas da administração inicial, 96 horas da administração inicial,

102 horas da administração inicial, 108 horas da administração inicial, 114 horas da administração inicial, 120 horas da administração inicial, 1 semana da administração inicial, 2 semanas da administração inicial, 3 semanas da administração inicial, 4 semanas da administração inicial, 5 semanas da administração inicial, 6 semanas da administração inicial, 7 semanas da administração inicial, 8 semanas da administração inicial, 9 semanas da administração inicial, 10 semanas da administração inicial, 11 semanas da administração inicial, 12 semanas da administração inicial ou semelhantes. Em algumas modalidades, a administração suplementar pode ser realizada, por exemplo, dentro de, por exemplo, 3 a 6 meses da administração inicial. Em algumas modalidades, a administração suplementar pode ser realizada concomitantemente à administração inicial.

[0104] Os métodos revelados no presente documento podem fornecer efeitos de início rápido (por exemplo, com uso de uma neurotoxina de ação rápida). Por exemplo, as modalidades reveladas podem reduzir atividade muscular na proximidade de a incisão cirúrgica dentro de, por exemplo, 30 minutos após a administração, 45 minutos após a administração, 60 minutos após a administração, 75 minutos após a administração, 90 minutos após a administração, 2 horas após a administração, 3 horas após a administração, 4 horas após a administração, 5 horas após a administração, 6 horas após a administração, 7 horas após a administração, 8 horas após a administração, 9 horas após a administração, 10 horas após a administração, 11 horas após a administração, 12 horas após a administração, 13 horas após a administração, 14 horas após a administração, 15 horas após a administração, 16 horas após a administração, 17 horas após a administração, 18 horas após a administração, 19 horas após a administração, 20 horas após a administração, 21 horas após a administração, 22 horas após a administração, 23 horas após a administração, 24 horas após a administração, 30 horas após a administração, 36 horas após a administração, 42 horas após a administração, 48 horas após a administração, 3 dias após a administração, 4 dias após a administração, 5 dias após a administração, 6 dias após a administração, 7 dias após a administração ou semelhantes.

[0105] Os métodos revelados no presente documento podem fornecer redução em atividade muscular por uma duração menor (por exemplo, com o uso de uma neurotoxina de recuperação rápida). Por exemplo, as modalidades reveladas podem fornecer uma redução na atividade muscular que permanece dentro de, por exemplo, 3 dias após a administração, 4 dias após a administração, 5 dias após a administração, 6 dias após a administração, 7 dias após a administração, 8 dias após a administração, 9 dias após a administração, 10 dias após a administração, 11 dias após a administração, 12 dias após a administração, 13 dias após a administração, 14 dias após a administração, 15 dias após a administração, 16 dias após a administração, 17 dias após a administração, 18 dias após a administração, 19 dias após a administração, 20 dias após a administração, 21 dias após a administração, 22 dias após a administração, 23 dias após a administração, 24 dias após a administração, 25 dias após a administração, 26 dias após a administração, 27 dias após a administração, 28 dias após a administração, 29 dias após a administração, 30 dias após a administração, 45 dias após a administração, 60 dias após a administração, 75 dias após a administração, 90 dias após a administração, 105 dias após a administração ou semelhantes.

[0106] Os efeitos colaterais podem estar associados a injeções de botulínico. As modalidades reveladas podem fornecer tratamentos com neurotoxina que resultam em menos efeitos colaterais ou efeitos colaterais de uma duração encurtada, que os tratamentos convencionais com neurotoxina, por exemplo, tratamento com o uso de uma neurotoxina de atuação mais longa, tal como o tipo A.

[0107] Por exemplo, as modalidades reveladas podem resultar em menos (ou menor duração) casos de visão dupla ou visão embaçada, paralisia palpebral (o indivíduo não consegue levantar a pálpebra completamente), perda de movimento do músculo facial, rouquidão, perda do controle da bexiga, falta de respiração, dificuldade em engolir, dificuldade em falar, morte e coisas do gênero.

[0108] Os métodos revelados compreendem administração a uma área propensa à cicatrização, por exemplo, uma área na proximidade de uma incisão cirúrgica, ou uma área na proximidade de uma lesão à pele, por exemplo, uma lesão traumática. As modalidades reveladas compreendem administração aos músculos próximos de uma área propensa à cicatrização, por exemplo, um tecido muscular esquelético ou tecido muscular liso.

[0109] Além disso, as modalidades reveladas podem fornecer atividade muscular reduzida de duração mais certa. Por exemplo, com uma neurotoxina de ação mais prolongada, uma variação de 20% na duração dos efeitos pode resultar na diferença de um mês na duração eficaz. Com as neurotoxinas de recuperação rápida reveladas, essa variação de 20% produz uma diferença muito menos drástica na duração eficaz.

[0110] As composições de neurotoxina de atuação rápida podem ser injetadas no indivíduo com o uso de um dispositivo com agulha ou sem agulha. Em certas modalidades, o método compreende injetar de forma subcutânea a composição no indivíduo. Por exemplo, a administração pode compreender injetar a composição através de uma agulha com calibre de, no máximo, cerca de 30. Em determinadas modalidades, o método compreende administrar uma composição que compreende uma toxina botulínica tipo E.

[0111] A injeção das composições pode ser realizada por seringa, cateteres, agulhas e outros meios de injeção. A injeção pode ser realizada em qualquer área do corpo do mamífero que necessite de tratamento, incluindo, entre outros, rosto, pescoço, tronco, braços, mãos, pernas e pés. A injeção pode estar em qualquer posição na área específica, como epiderme, derme, gordura, músculo ou camada subcutânea.

[0112] Por exemplo, os músculos esqueléticos adequados para administração das composições reveladas podem compreender qualquer dos músculos, das ilustrações mostradas nas Figuras 3A a 3B.

[0113] A administração pode compreender injeção em um ou mais dentre os nervos mostrados, ou próximo dos mesmos, na esquemática da Figura 4.

[0114] Músculos lisos adequados para administração das composições reveladas podem compreender qualquer parede de vasos sanguíneos, paredes do estômago, ureteres, intestinos, na aorta (camada da túnica média), íris do olho, próstata, trato gastrointestinal, trato respiratório, artérias pequenas, arteríolas, tratos reprodutivos (ambos os sexos), veias, glomérulos dos rins (chamados células mesangiais), bexiga, útero, células- tronco da pele, músculo ciliar, esfíncter, traqueia, ductos biliares e similares.

[0115] A frequência e a quantidade de injeção, de acordo com os métodos revelados, podem ser determinadas com base na natureza e localização da área específica que foi tratada. Em certos casos, no entanto, a injeção repetida pode ser desejada para obter melhores resultados. A frequência e a quantidade da injeção para cada caso particular podem ser determinadas pelo especialista na técnica.

[0116] Embora sejam fornecidos exemplos de vias de administração e dosagens, a via de administração e dosagem apropriada é geralmente determinada caso a caso pelo médico assistente. Tais determinações são rotinas para uma pessoa de habilidade comum na técnica (consultar, por exemplo, Harrison's Principles of Internal Medicine (1998), editado por Anthony Fauci et al., 14ª edição, publicado por McGraw Hill). Por exemplo, a rota e a dosagem para administração de uma neurotoxina clostridial, de acordo com a presente invenção revelada, podem ser selecionadas com base em critérios como as características de solubilidade da neurotoxina escolhida, bem como a intensidade e o escopo da afecção a ser tratada.

[0117] A neurotoxina de atuação rápida pode ser administrada em uma quantidade entre cerca de 10-3 u/kg e cerca de 35 u/kg de peso corporal. Em uma modalidade, a neurotoxina é administrada em uma quantidade entre cerca de 102 u/kg e cerca de 25 u/kg. Em outra modalidade, a neurotoxina é administrada em uma quantidade entre cerca de 10-1 u/kg e cerca de 15 u/kg. Em outra modalidade, a neurotoxina é administrada em uma quantidade entre cerca de 1 u/kg e cerca de 10 u/kg. Em muitos casos, uma administração de cerca de 1 unidade a cerca de 500 unidades de uma neurotoxina, como um tipo botulínico E, proporciona alívio terapêutico eficaz. Em uma modalidade, de cerca de 5 unidades a cerca de 200 unidades de uma neurotoxina, como um tipo botulínico E, pode ser usada e em outra modalidade, de cerca de 10 unidades a cerca de 100 unidades de uma neurotoxina, como um tipo botulínico E, pode ser administrado localmente em um tecido alvo, como um músculo.

[0118] Em algumas modalidades, a administração pode compreender uma dose de cerca de 10 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 20 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 30 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 40 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 50 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 60 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 70 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 80 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 90 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 100 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 110 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 120 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 130 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 140 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 150 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 160 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 170 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 180 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 190 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 200 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 210 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 220 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 230 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 240 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 250 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 260 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 270 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 280 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 290 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 290 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 300 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 310 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 320 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 330 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 340 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 350 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 360 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 370 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 380 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 390 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 400 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 410 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 420 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 430 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 440 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 450 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 460 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 470 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 480 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 490 unidades de uma neurotoxina ou cerca de 500 unidades de uma neurotoxina ou semelhantes.

[0119] Em algumas modalidades, a administração pode compreender uma dose de cerca de 0,1 nanograma (ng) de uma neurotoxina, 0,2 ng de uma neurotoxina, 0,3 ng de uma neurotoxina, 0,4 ng de uma neurotoxina, 0,5 ng de uma neurotoxina, 0,6 ng de uma neurotoxina, 0,7 ng de uma neurotoxina, 0,8 ng de uma neurotoxina, 0,9 ng de uma neurotoxina, 1,0 ng de uma neurotoxina, 1,1 ng de uma neurotoxina, 1,2 ng de uma neurotoxina, 1,3 ng de uma neurotoxina, 1,4 ng de uma neurotoxina, 1,5 ng de uma neurotoxina, 1,6 ng de uma neurotoxina, 1,7 ng de uma neurotoxina, 1,8 ng de uma neurotoxina, 1,9 ng de uma neurotoxina, 2,0 ng de uma neurotoxina, 2,1 ng de uma neurotoxina, 2,2 ng de uma neurotoxina, 2,3 ng de uma neurotoxina, 2,4 ng de uma neurotoxina, 2,5 ng de uma neurotoxina, 2,6 ng de uma neurotoxina, 2,7 ng de uma neurotoxina, 2,8 ng de uma neurotoxina, 2,9 ng de uma neurotoxina, 3,0 ng de uma neurotoxina, 3,1 ng de uma neurotoxina, 3,2 ng de uma neurotoxina, 3,3 n de uma neurotoxina, 3,4 ng de uma neurotoxina, 3,5 ng de uma neurotoxina, 3,6 ng de uma neurotoxina, 3,7 ng de uma neurotoxina, 3,8 ng de uma neurotoxina, 3,9 ng de uma neurotoxina, 4,0 ng de uma neurotoxina, 4,1 ng de uma neurotoxina, 4,2 ng de uma neurotoxina, 4,3 ng de uma neurotoxina, 4,4 ng de uma neurotoxina, 4,5 ng de uma neurotoxina, 5 ng de uma neurotoxina, 6 ng de uma neurotoxina, 7 ng de uma neurotoxina, 8 ng de uma neurotoxina, 9 ng de uma neurotoxina, 10 ng de uma neurotoxina ou semelhantes.

[0120] Em algumas modalidades, a administração pode compreender uma dose entre cerca de 0,1 nanograma (ng) de uma neurotoxina e 20 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 1 ng de uma neurotoxina e 19 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 2 ng de uma neurotoxina e 18 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 3 ng de uma neurotoxina e 17 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 4 ng de uma neurotoxina e 16 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 5 ng de uma neurotoxina e 15 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 6 ng de uma neurotoxina e 14 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 7 ng de uma neurotoxina e 13 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 8 ng de uma neurotoxina e 12 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 9 ng de uma neurotoxina e 11 ng de uma neurotoxina ou semelhantes.

Nas modalidades, administração pode compreender uma ou mais injeções de cerca de 0,1 nanograma (ng) de uma neurotoxina, 0,2 ng de uma neurotoxina, 0,3 ng de uma neurotoxina, 0,4 ng de uma neurotoxina, 0,5 ng de uma neurotoxina, 0,6 ng de uma neurotoxina, 0,7 ng de uma neurotoxina, 0,8 ng de uma neurotoxina, 0,9 ng de uma neurotoxina, 1,0 ng de uma neurotoxina, 1,1 ng de uma neurotoxina, 1,2 ng de uma neurotoxina, 1,3 ng de uma neurotoxina, 1,4 ng de uma neurotoxina, 1,5 ng de uma neurotoxina, 1,6 ng de uma neurotoxina, 1,7 ng de uma neurotoxina, 1,8 ng de uma neurotoxina, 1,9 ng de uma neurotoxina, 2,0 ng de uma neurotoxina, 2,1 ng de uma neurotoxina, 2,2 ng de uma neurotoxina, 2,3 ng de uma neurotoxina, 2,4 ng de uma neurotoxina, 2,5 ng de uma neurotoxina, 2,6 ng de uma neurotoxina, 2,7 ng de uma neurotoxina, 2,8 ng de uma neurotoxina, 2,9 ng de uma neurotoxina, 3,0 ng de uma neurotoxina, 3,1 ng de uma neurotoxina, 3,2 ng de uma neurotoxina, 3,3 n de uma neurotoxina, 3,4 ng de uma neurotoxina, 3,5 ng de uma neurotoxina, 3,6 ng de uma neurotoxina, 3,7 ng de uma neurotoxina, 3,8 ng de uma neurotoxina, 3,9 ng de uma neurotoxina, 4,0 ng de uma neurotoxina, 4,1 ng de uma neurotoxina, 4,2 ng de uma neurotoxina, 4,3 ng de uma neurotoxina, 4,4 ng de uma neurotoxina, 4,5 ng de uma neurotoxina, 5 ng de uma neurotoxina, 6 ng de uma neurotoxina, 7 ng de uma neurotoxina, 8 ng de uma neurotoxina, 9 ng de uma neurotoxina, 10 ng de uma neurotoxina ou semelhantes.

[0121] Em algumas modalidades, a administração pode compreender um ou mais injeções entre cerca de 0,1 nanograma (ng) de uma neurotoxina e 20 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 1 ng de uma neurotoxina e 19 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 2 ng de uma neurotoxina e 18 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 3 ng de uma neurotoxina e 17 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 4 ng de uma neurotoxina e 16 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 5 ng de uma neurotoxina e 15 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 6 ng de uma neurotoxina e 14 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 7 ng de uma neurotoxina e 13 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 8 ng de uma neurotoxina e 12 ng de uma neurotoxina, entre cerca de 9 ng de uma neurotoxina e 11 ng de uma neurotoxina ou semelhantes.

[0122] Por fim, no entanto, tanto a quantidade de toxina administrada quanto à frequência de sua administração ficarão a critério do médico responsável pelo tratamento e serão proporcionais às questões de segurança e aos efeitos produzidos pela toxina.

[0123] Em algumas modalidades, a administração pode compreender um ou mais injeções, por exemplo, injeções substancialmente ao longo do sítio ou linha ou linhas de incisão. Em algumas modalidades, administração pode compreender injeções em um padrão específico, por exemplo, um padrão W e um padrão X, um padrão Z, um padrão em estrela, um padrão circular, padrão em meio círculo, um padrão quadrado, um padrão retangular, um padrão crescente ou combinações dos mesmos.

[0124] Foi conduzido um estudo em que BoNT/E foi administrado a pacientes humanos que são submetidos a linhas glabelares, a fim de avaliar o início da ação, segurança tolerabilidade de BoNT/E em seres humanos. O estudo é descrito no Exemplo 1. O BoNT/E foi administrado no músculo prócero em cinco pontos de injeção, conforme ilustrado na Figura 5. O BoNT/E forneceu aprimoramento na gravidade das linhas glabelares com rápido início de ação, e com um perfil favorável de segurança e tolerabilidade.

[0125] Foi conduzido outro estudo em que BoNT/E foi administrado a pacientes humanos que foram submetidos a tratamento cirúrgico de carcinoma de célula basal. Conforme descrito no Exemplo 5, doze indivíduos humanos agendados para cirurgia de Mohs para remover uma única lesão de carcinoma de célula basal na testa foram aleatorizados em um grupo de tratamento (n=8) e um grupo placebo (n=4). Os indivíduos em ambos os grupos receberam uma única injeção intramuscular no músculo frontal próximo do sítio cirúrgico, o grupo de tratamento que recebe uma dose de BoNT/E e o grupo placebo que recebe solução salina. No início do Dia 2 do estudo, 24 horas após a cirurgia, cada indivíduo foi avaliado com o uso das escaladas VAS, SCAR e POSAS (consultar o Exemplo 4). Os indivíduos foram avaliados novamente com o uso de várias escalas nos dias 8, 30 e 90 do estudo. Os resultados são mostrados nas Figuras 7A a 7C, em que o instante no tempo ao longo do eixo geométrico x em cada gráfico de barras, indicado como Dia x a y, é calculado como a mudança na pontuação de avaliação Dia y a Dia x.

[0126] A Figura 7A é um gráfico de barras que mostra a mudança média da escala analógica visual classificada pelo investigador (VAS) no dia 2 a 8, dia 2 a 30 e dia 2 a 90. A VAS é uma escala numérica 0 a 10, em que 0 é a prior cicatriz possível e 10 é a melhor cicatriz possível. No gráfico, as barras com preenchimento tracejado correspondem aos pacientes tratados com BoNT/E por via intramuscular no músculo frontal durante cirurgia de Mohs, as barras abertas (sem preenchimento) correspondem azos pacientes no grupo placebo tratados com solução salina. Os indivíduos tratados com BoNT/E tiveram uma mudança média maior de pontuação VAS para as avaliações conduzidas no dia 2 e no dia 30, durante a fase aguda de formação de cicatriz durante a cura da ferida cirúrgica, em relação aos indivíduos não tratados com BoNT/E.

[0127] Com o uso da Escala de Avaliação de Cicatriz de Paciente e Observador (POSAS), os pacientes avaliaram a cor de suas cicatrizes nos dias 2, 8, 30 e 90. O componente de cor é uma escala 1 a 10, em que uma pontuação igual a 1 correspondente à cor da pele normal do indivíduo e uma pontuação de 10 corresponde a uma cor “muito diferente” da cicatriz em relação à pele normal do indivíduo. O gráfico de barras na Figura 7B mostra que a administração de BoNT/E por via intramuscular no músculo frontal durante cirurgia de Mohs aprimora a descoloração observada pelos pacientes durante os primeiros 30 dias em após a cirurgia.

[0128] Os pacientes no estudo também usaram a POSAS para avaliar a rigidez do tecido no loca da ferida. Com o uso de uma escala de 1 a 10, em que uma pontuação de 1 corresponde à rigidez da pele normal do indivíduo e uma pontuação de 10 corresponde a uma rigidez “muito diferente” em relação à pele normal do indivíduo, os pacientes realizaram uma avaliação nos dias 2, 8, 30 e 90. A Figura 7C é um gráfico de barras que mostra a mudança média do componente de rigidez relatado pelo paciente da avaliação de cicatriz com o uso da Escala de Avaliação de Cicatriz de Paciente e Observador (POSAS) no dia 2 a 8, dia 2 a 30 e dia 2 a 90. Os pacientes tratados com BoNT/E por via intramuscular no músculo frontal durante cirurgia de Mohs (barras com preenchimento tracejado) relataram características físicas aprimoradas da cicatriz em comparação aos pacientes não tratados com toxina botulínica como parte de uma cirurgia de Mohs (placebo, barras abertas).

[0129] Os indivíduos no estudo do exemplo 5 foram questionados sobre coceira e dor associados à cicatriz. Os indivíduos fora perguntados nos dias 2, 8, 30 e 90: “Você sentiu coceira da cicatriz nas últimas 24 horas?” Os indivíduos também foram perguntados nos dias 2, 8, 30 e 90 “Você sentiu alguma dor na cicatriz nas últimas 24 horas?” Um sumário dos indivíduos que responderam afirmativamente às perguntas está nas tabelas a seguir. NÚMERO E PORCENTAGEM DOS INDIVÍDUOS QUE RESPONDERAM “SIM”

ÀS PERGUNTAS EM RELAÇÃO À COCEIRA Grupo Dia 2 Dia 8 Dia 30 Dia 90 Placebo (n=4) 3 (75%) 2 (50%) 0 0 BoNT/E (n=8) 0 0 0 0 NÚMERO E PORCENTAGEM DOS INDIVÍDUOS QUE RESPONDERAM “SIM”

ÀS PERGUNTAS EM RELAÇÃO À DOR Grupo Dia 2 Dia 8 Dia 30 Dia 90 Placebo (n=4) 4 (100%) 2 (50%) 0 0 BoNT/E (n=8) 6 (75%) 2 (25%) 0 0

[0130] Indivíduos tratados com BoNT/E relataram uma redução na coceira e uma redução na dor associada à cicatriz durante a fase aguda da formação de cicatriz durante cura da ferida com início após a criação da ferida através de cerca de dia 21, dia 25, ou dia 30 após criação da ferida. Consequentemente, em uma modalidade, um método para minimizar formação de cicatriz e aprimorar aparência da cicatriz associada à cura de uma ferida é acompanhada por um método para reduzir coceira e/ou dor associada à cicatriz. Isto é, o tratamento da ferida ou o músculo (ou músculos) que é subjacente à ferida com BoNT/E fornece uma aparência da cicatriz aprimorada e reduz coceira ou dor associada à formação de cicatriz (ou cura da ferida). Em uma modalidade, a administração de BoNT/E reduz a sensação de coceira por 24 a 48 horas associadas à cicatriz em 75% ou mais dos pacientes que recebem o tratamento com BoNT/E. Em outra modalidade, a administração de BoNT/E reduz a dor 2 a 8 dias ou por 1 semana após a criação de ferida e durante cura da ferida em pelo menos cerca de 25% ou 50% de pacientes que recebem tratamento com BoNT/E.

[0131] As fotografias da ferida cirúrgica foram tomadas antes da cirurgia no Dia 1 do estudo e no Dia 2 (24 horas após cirurgia) e no Dia 30 e dia 90. As fotografias (não mostradas no presente documento) revelam que os indivíduos tratados com BoNT/E têm menos vermelhidão da cicatriz no dia 30 e no dia 90 em relação a indivíduos não tratados com BoNT/E.

[0132] Consequentemente, em um aspecto, um método para minimizar cicatrização de uma ferida é fornecido administrando-se o tipo de neurotoxina botulínica E toxina na proximidade da ferida. Conforme evidenciado pelos dados do Exemplo 5, BoNT/E administrado a uma ferida ou aos músculos na proximidade da ferida aprimora o resultado da aparência da cicatriz em relação ao placebo e gera benefícios adicionais de redução de coceira e menos dor, particularmente, durante a fase aguda de formação de cicatriz na primeira semana ou 10 dias após a criação de ferida.

[0133] Em outro aspecto, um método para minimizar cicatrização de uma ferida ou um método para aprimorar aparência de uma cicatriz é fornecido. O método compreende administrar BoNT/E à ferida, ou próximo da mesma, durante ou após a criação da ferida. A administração de BoNT/E aprimora a aparência da cicatriz e/ou minimiza a formação de cicatriz e aprimora adicionalmente a descoloração da cicatriz dentro de 2 a 8 dias após a administração de BoNT/E. Em uma modalidade, o método de tratamento fornece uma vermelhidão da cicatriz reduzida 30 dias, 60 dias ou 90 dias após o tratamento com BoNT/E. Em outra modalidade, o método de tratamento reduz rigidez da cicatriz durante os primeiros 30 dias após o tratamento em relação a indivíduos não tratados com BoNT/E.

[0134] O estudo no Exemplo 5 mostra que a BoNT/E de rápida atuação oferece um benefício durante cura da ferida uma vez que sua ação tem um efeito mais imediato que a toxina de atuação mais lenta. Uma toxina de atuação rápida presente no sítio ferido no sítio da ferida nas horas e dias subsequentes à criação de ferida quando a biologia da formação de cicatriz é iniciada fornece um benefício na aparência da cicatriz geral, reduzindo sua vermelhidão e rigidez e reduzindo dor e coceira. BoNT/E oferece um início rápido de ação para parar ou paralisar os músculos na proximidade da ferida nos minutos e horas após sua criação ou até mesmo se a BoNT/E é administrada antes da criação de ferida, antes de sua criação. A duração curta da BoNT/E é vantajosa visto que o processo de regeneração de ferida ocorre na ordem de semanas a um mês, o que se correlaciona à duração do efeito da BoNT/E.

[0135] Em uma modalidade, contempla-se minimizar cicatrização ou aprimorar a aparência da cicatriz de uma cicatriz que se forma sobre a ferida criada sobre uma cicatriz existente. Por exemplo, um indivíduo que tem um segundo procedimento cirúrgico um sítio igual ou semelhante as a prior procedimento cirúrgico terá uma ferida cirúrgica criada em um sítio que se sobrepõe a uma cicatriz existente da cirurgia anterior. As cicatrizes formadas sobre uma cicatriz existente pode exibir mais descoloração e/ou vermelhidão do que as cicatrizes que são formadas sobre a pele. O método de tratamento no presente documento é contemplado para pacientes com uma ferida que é está no sítio que se sobrepõe parcial ou completamente a uma cicatriz existente.

[0136] Um sistema de liberação controlada pode ser usado nas modalidades descritas no presente documento para fornecer uma neurotoxina in vivo a uma taxa predeterminada durante um período de tempo específico. De modo geral, as taxas de liberação são determinadas pelo projeto do sistema e podem ser amplamente independentes das condições ambientais, como o pH. São conhecidos sistemas de liberação controlada que podem administrar um medicamento por um período de vários anos. Por outro lado, os sistemas de liberação sustentada normalmente administram medicamentos em 24 horas ou menos e fatores ambientais podem influenciar a taxa de liberação. Assim, a taxa de liberação de uma neurotoxina de um sistema implantado de liberação controlada (um "implante") é uma função das propriedades físico-químicas do material do implante transportador e do próprio medicamento. Tipicamente, o implante é feito de um material inerte que provoca pouca ou nenhuma resposta do hospedeiro.

[0137] Um sistema de liberação controlada pode ser constituído por uma neurotoxina incorporada em um transportador. O veículo pode ser um polímero ou um material bioceânico. O sistema de liberação controlada pode ser injetado, inserido ou implantado em um local selecionado do corpo de um paciente e residir no mesmo por um período prolongado durante o qual a neurotoxina é liberada pelo implante de uma maneira e em uma concentração que fornece uma eficácia terapêutica desejada.

[0138] Os materiais poliméricos podem liberar neurotoxinas devido à difusão, reação química ou ativação do solvente, bem como por influência de fatores magnéticos, de ultrassom ou de mudança de temperatura. A difusão pode ser de um reservatório ou matriz. O controle químico pode ser devido à degradação do polímero ou à clivagem do fármaco a partir do polímero. A ativação do solvente pode envolver inchaço do polímero ou um efeito osmótico.

[0139] Os implantes podem ser preparados misturando-se uma quantidade desejada de uma neurotoxina estabilizada em uma solução de um polímero adequado dissolvido em cloreto de metileno. A solução pode ser preparada à temperatura ambiente. A solução pode então ser transferida para uma placa de Petri e o cloreto de metileno evaporado em um dessecador a vácuo. Dependendo do tamanho do implante desejado e, portanto, da quantidade de neurotoxina incorporada, uma quantidade adequada do implante incorporado de neurotoxina seca é compactada a cerca de 55,2 MPa (8.000 psi) por 5 segundos ou a 20,7 MPa (3.000 psi) por 17 segundos em um molde para formar discos de implante que encapsulam a neurotoxina.

[0140] De preferência, o material de implante usado é substancialmente não tóxico, não cancerígeno e não imunogênico. Os materiais de implante adequados incluem polímeros, tais como poli(metacrilato de 2-hidroxi etil) (p-HEMA), poli(N-vinil pirrolidona) (p-NVP)+, poli(álcool vinílico) (PVA), poli(ácido acrílico) (PM), copolímeros de polidimetilsiloxanos (PDMS), acetato de etileno-vinila (EVAc), copolímeros de polivinilpirrolidona/metilacrilato, polimetilmetacrilato (PMMA), poli(ácido lático) (PLA), poli(ácido glicólico) (PGA), polianidridos, poli(ortoésteres), derivados de colágeno e celulósicos e biocerâmicas, tais como hidroxiapatita (HPA), fosfato tricálcico (TCP) e fosfato de aliminocálcio (ALCAP). O ácido lático, o ácido glicólico e o colágeno podem ser usados para fazer implantes biodegradáveis.

[0141] Um material de implante pode ser biodegradável ou bioerodível. Uma vantagem de um implante bioerodível é que ele não precisa ser removido do paciente. Um implante bioerodível pode ter por base uma liberação de membrana ou matriz da substância bioativa. As microesferas biodegradáveis preparadas a partir de PLA-PGA são conhecidas para administração subcutânea ou intramuscular.

[0142] Um kit para a prática de modalidades reveladas também é abrangido pela presente revelação. O kit pode compreender uma agulha de calibre 30 ou menor e uma seringa correspondente. O kit também compreende uma composição de neurotoxina clostrídica, tal como uma composição do tipo de toxina botulínica E. A composição de neurotoxina pode ser fornecida na seringa. A composição é injetável através da agulha. Os kits são projetados de várias formas, com base nos tamanhos da seringa e nas agulhas e no volume da composição injetável contida na mesma, que por sua vez se baseiam nas deficiências específicas que os kits são projetados para tratar.

EXEMPLOS

[0143] Os exemplos não limitativos a seguir são fornecidos apenas para fins ilustrativos, a fim de facilitar uma compreensão mais completa das modalidades representativas. Esse exemplo não deve ser interpretado para limitar qualquer uma das modalidades descritas no presente relatório descritivo. EXEMPLO 1 USO DO TIPO DE TOXINA BOTULÍNICA E PARA TRATAR

LINHAS GLABELARES

[0144] Um estudo de Fase 2a aleatorizado, duplo-cego, controlado por placebo de coorte com dose ascendente em seres humanos foi conduzido para avaliar segurança e eficácia de um ciclo de tratamento único de uma composição do tipo E revelada de atuação rápida em indivíduos com linhas de expressão glabelares. Esse estudo foi conduzido em conformidade com esse protocolo e todas as regulações Federais e Estaduais aplicáveis. Uma composição composta do subtipo de neurotoxina botulínica E (BoNT/E, “EB-001”).

[0145] A dose total foi dividida em 5 injeções; 1 injeção no prócero na linha intermediária e uma injeção única em cada um dos corrugadores mediais e laterais bilateralmente, conforme mostrado na Figura 5. A dose total foi conforme o seguinte: Dose nos Doses nos Dose total Dose em corrugador corrugadore Coorte de BoNT/E Prócero es s mediais (ng) (ng) laterais (ng) (ng) 0,02 em 0,02 em cada um cada um dentre os dentre os 1 0,1 0,02 corrugadore corrugador s direito e es direito esquerdo e esquerdo 0,06 em 0,06 em cada um cada um dentre os dentre os 2 0,3 0,06 corrugadore corrugador s direito e es direito esquerdo e esquerdo 0,18 em 0,18 em cada um cada um dentre os dentre os 3 0,9 0,18 corrugadore corrugador s direito e es direito esquerdo e esquerdo

0,24 em 0,24 em cada um cada um dentre os dentre os 4 1,2 0,24 corrugadore corrugador s direito e es direito esquerdo e esquerdo 0,32 em 0,32 em cada um cada um dentre os dentre os 5 1,6 0,32 corrugadore corrugador s direito e es direito esquerdo e esquerdo 0,42 em 0,42 em cada um cada um dentre os dentre os 6 2,1 0,42 corrugadore corrugador s direito e es direito esquerdo e esquerdo 0,56 em 0,56 em cada um cada um dentre os dentre os 7 2,8 0,56 corrugadore corrugador s direito e es direito esquerdo e esquerdo

[0146] Cada indivíduo recebeu 5 injeções, e o volume injeto por sítio foi 0,1 ml. O espaçamento das injeções nos corrugadores laterais foi de, ou cerca de, 1 centímetro acima da arcada supracilar, que é conhecida por minimizar ptose potencial. EXEMPLO 2 USO DO TIPO DE TOXINA BOTULÍNICA E PARA

LEVANTAMENTO DA SOBRANCELHA

[0147] Uma mulher de 60 anos apresenta sobrancelhas que se estendem abaixo de seu osso da testa. O médico recomenda uma composição conforme revelada no presente documento, que é injetada de forma de forma subcutânea acima de cada olho. Cada local de injeção recebe cerca de 10 unidades de toxina botulínica tipo E, com várias injeções feitas nos dois lados do olho. A inclinação da testa é reduzida em cerca de 2 dias e é substancialmente aliviada por 3 meses após a administração. EXEMPLO 3 USO DO TIPO DE TOXINA BOTULÍNICA E PARA AUMENTO

DOS SEIOS

[0148] Uma mulher de 30 anos elege a cirurgia de aumento de mama. 4 horas antes do procedimento, a toxina botulínica tipo E é administrada nas proximidades de onde as incisões cirúrgicas serão realizadas. A administração reduz a tensão muscular na área da incisão, o que resulta em cicatrizes mínimas. Duas semanas após o procedimento, é administrada uma dose suplementar. EXEMPLO 4 USO DO TIPO DE TOXINA BOTULÍNICA E PARA REDUZIR

CICATRIZAÇÃO APÓS CIRURGIA DE MOHS

[0149] Uma mulher de 44 anos é diagnosticada com câncer de pele, especificamente carcinomas de células basais (BCCs) na área da testa. Diferentemente das BCCs, a paciente é saudável e não está grávida, não pretende engravidar tampouco está lactante. A paciente também não tem transtornos pré-existentes da junção neuromuscular (miastenia grave, síndrome de Eaton-Lambert ou Esclerose Amiotrófica Lateral). O paciente não se submeteu a qualquer procedimento cosmético, tratamento a laser de recomposição da superfície ou terapia retinoide na área da testa nos últimos 30 dias antes do procedimento de Mohs. O paciente não tem sobrancelha ou ptose da pálpebra na linha basal tampouco tem qualquer histórico de cicatrizes hipertróficas ou formação de queloide ou outras anormalidades de ferida, conforme avaliado por seu médico.

[0150] A paciente não usa tampouco usou tabaco e pesa 63 quilos (140 libras).

[0151] A paciente escolhe passar pela cirurgia de Mohs. A meta da cirurgia de Mohs é remover o máximo possível de câncer de pele, ao mesmo tempo em que causa o mínimo de danos ao tecido saudável circundante. A cirurgia de Mohs normalmente é feita com base em paciente ambulatorial com o uso de anestesia local.

[0152] As raízes de um câncer de pele pode se estender para além da posição visível do tumor. Caso essas raízes não sejam removidas, o câncer recidivará. Um procedimento de Mohs começa com o especialista do American College of Mohs Surgery (ACMS) que examina a lesão visível e planeja qual tecido deve ser removido. Em seguida, o paciente recebe anestesia local, e o procedimento começa.

[0153] O procedimento é feito em estágios, todos em uma visita, ao passo que o paciente espera cada estágio. Após remover uma camada de tecido, o cirurgião examina o mesmo sob um microscópio em um laboratório em local. Com o auxílio de técnicos, o cirurgião, então, codifica por cores cada uma das seções com cortantes e faz marcas de referência na pele para mostrar a fonte dos cortes. Um mapa do sítio cirúrgico é, então, desenhado para acompanhar exatamente onde cada porção pequena de tecido se originou. Caso permaneçam quaisquer células cancerosas, o cirurgião remove outra camada de tecido dessa localização precisa, ao mesmo tempo em que poupa a maior quantidade possível do tecido saudável. Em um laboratório, o cirurgião usa um microscópio para examinar a subsuperfície e as bordas de cada seção de tecido na busca de evidência do câncer restante. Caso o cirurgião encontre células cancerosas sob o microscópio, ele ou ela marca sua localização no “mapa” e retorna ao paciente para remover outra camada mais profunda da pele – porém precisamente apenas de onde as células cancerosas se originaram. Esse método garante que a cirurgia de Mohs resulte na menor cicatriz possível.

[0154] O doutor repete esse processo até que não permaneça nenhuma célula cancerosa.

[0155] Após a cirurgia, uma única cicatriz de 2 cm na testa do paciente é tratada com tipo de toxina botulínica E alimentado como uma solução estéril para a injeção com uma concentração nominal em frasco de 5 ml de 19,1 ng/ml de BoNT/E em fosfato de sódio 0,03 M, cloreto de sódio 0,12 M e 1 mg/ml de albumina sérica humana (HSA), pH 6,0. A dose total de BoNT/E é 2,8 ng, dividido em 5 sítios de injeção em duas fileiras (um padrão W invertido; consultar a Figura 6) no músculo frontal. A profundidade da injeção para injeções ao músculo frontal ocorre a nível subdérmico a fim de impactar o tecido frontal músculo superficial, ao mesmo tempo em que minimiza o potencial para formação de hematomas. A agulha é orientada de maneira superior e lateral durante a injeção, fornecida com a ponta da agulha com o chanfro para cima a um ângulo de 30 graus.

[0156] Visitas de acompanhamento são agendadas nos dias 2, 8, 30 e 90. Durante a pré-cirurgia (antes da dosagem) no Dia 1, pós cirurgia no Dia 1 e dias 2, 8, 30 (ET) e 90 (EOS), fotografias faciais padronizadas serão tomadas de acordo com instruções no manual de estudo (ou manuais de estudo).

[0157] As visitas de acompanhamento incluem: a. Avaliação de cicatriz com o uso do escala analógica visual (VAS). b. Escala de Avaliação e Classificação de Cosmesis de Cicatriz (cicatrizes). c. Escala de Avaliação de Cicatriz de Paciente e Observador (POSAS). d. Avaliação do Investigador das linhas da testa, em esforço máximo e em repouso, com o uso da escala a de rugas Faciais (FWS-IA).

[0158] A VAS avalia a aparência da cicatriz do pior para o melhor com o uso de uma linha horizontal reta do comprimento fixo (10 cm). As extremidades são definidas como os limites extremos da aparência da cicatriz orientados da esquerda (pior) para a direita (melhor). Classificadores farão uma marca na linha para indicar a aparência da cicatriz.

[0159] A SCARS mede a cosmesis de cicatriz pós-operatória com as pontuações totais de paciente e de observador em uma faixa de 0 (melhor cicatriz possível) a 15 (pior cicatriz possível) (Kantor, Reliability and Photographic Equivalency of the Scar Cosmesis Assessment and Rating (SCAR) Scale, an Outcome Measure for Postoperative Scars, JAMA Dermatol. 153(1):55 a 60, 2017). A pontuação da escala SCAR se baseia em 6 itens pontuados por observador e 2 itens pontuados por paciente.

[0160] A POSAS inclui sintomas subjetivos de dor e prurido e se expande nos dados objetivos capturados na Escala de Cicatriz de Vancouver (VSS). Consiste em 2 escalas numéricas: A Escala de Avaliação de Cicatriz de Paciente e a Escala de Avaliação de Cicatriz de Observador. A mesma avalia vascularidade, pigmentação, espessura, alívio, flexibilidade e área de superfície e incorpora a as avaliações do paciente de dor, coceira, cor, rigidez, espessura e alívio (Draaijers et al., The patient and observer scar assessment scale: a reliable and feasible tool for scar evaluation, Plast Reconstr. Surg. 113(7): 1960 a 1965, 2004). A POSAS é a única escala que considera sintomas subjetivos de dor e prurido, porém como outras escaladas, também carece de medições funcionais quanto à possibilidade de a dor ou prurido interferir com a qualidade de vida. A análise de regressão demonstrou que a opinião do observador é influenciada por vascularização,

espessura, pigmentação e alívio, ao passo que a opinião do paciente é influenciada principalmente pelo prurido e pela espessura da cicatriz. A POSAS foi aplicada a cicatrizes pós-cirúrgicas e usada na avaliação de cicatrizes lineares seguindo cirurgia de câncer de mama, que demonstra uma consistência interna e confiabilidade entre observadores quando em comparação à VSS com o benefício adicional de capturar as classificações do paciente.

[0161] O FWS-IA é uma escala de quatro pontos que indica gravidade das linhas de testa de acordo com o seguinte: 0 = nenhum, 1 = leve, 2 = moderado ou 3 = grave. Com base na avaliação do Investigador, a FWS-IA se baseará na elevação máxima e em repouso.

[0162] Não são observados efeitos de Dispersão de Toxina (SOT) nas visitas de acompanhamentos. EXEMPLO 5 USO DE TIPO DE TOXINA BOTULÍNICA E PARA MINIMIZAR

A CICATRIZAÇÃO E APRIMORAR APARÊNCIA DA CICATRIZ

[0163] Doze indivíduos humanos entre as idades de 58 a 75 anos e agendados para cirurgia de Mohs para remover uma única lesão de carcinoma de célula basal na testa foram aleatorizadas em um grupo de tratamento (n=8) e um grupo placebo (n=4). Os indivíduos em ambos os grupos receberam uma única injeção intramuscular no músculo frontal próximo do sítio cirúrgico, o grupo de tratamento que recebe uma dose de BoNT/E e o grupo placebo que recebe solução salina. Os indivíduos e a equipe de estudo tiveram a vista vendada; o patrocinador não estava com a vista vendada. A tabela a seguir resume a demografia dos indivíduos. Grupo Idade Distribuição Estágios de ID do Gênero Idade Média/M de Gênero Cirúrgic Tratam Indivíduo ediana (M/F) os ento

101 a 009 Feminino 67 2 Placeb 101 a 010 Macho 75 2 67/66 50/50 o 101 a 004 Feminino 60 3 101 a 001 Macho 64 1 101 a Feminino 66 2 002* 101 a 013 Macho 63 2 101 a 005 Macho 64 2 BoNT/E 101 a 003 Macho 47 59/64 62/38 2 101 a 006 Feminino 34 2 101 a 011 Macho 72 2 101 a 012 Feminino 58 3 101 a 007 Macho 71 4 *O indivíduo removeu da análise devido ao fechamento de alta tensão para deiscência da ferida.

[0164] No Dia 1 do estudo, os indivíduos foram administrados para o procedimento cirúrgico e o placebo ou o BoNT/E foi administrado por meio da injeção por via intramuscular. A cirurgia foi conduzida para remover o carcinoma, e a ferida (cerca de 2 cm de comprimento) foi fechada. No Dia 2 do estudo, 24 horas após a cirurgia, cada indivíduo foi avaliado com o uso das escaladas VAS, SCAR e POSAS (consultar o Exemplo 4). No Dia 8, os indivíduos foram avaliados novamente com o uso das várias escaladas, e as suturas externas foram removidas. No Dia 30 e no Dia 90, os indivíduos foram avaliados novamente com o uso das várias escaladas, e o estudo foi concluído formalmente no Dia. 90. Os resultados são mostrados nas Figuras 7A a 7C.

[0165] No fechamento, deve ser entendido que, embora aspectos do presente relatório descritivo sejam destacados por referência a modalidades específicas, um especialista na técnica entenderá prontamente que essas modalidades reveladas são apenas ilustrativas dos princípios da matéria revelada no presente documento. Portanto, deve ser entendido que a matéria revelada não está de forma alguma limitada a uma metodologia, protocolo e/ou reagente particular etc., descritos no presente documento. Dessa forma, várias modificações ou alterações ou configurações alternativas da matéria revelada podem ser feitas de acordo com os ensinamentos do presente documento, sem se afastar do espírito do presente relatório descritivo. Por fim, a terminologia usada no presente documento tem o objetivo de descrever apenas modalidades particulares e não se destina a limitar o escopo da presente revelação, que é definida apenas pelas reivindicações. Consequentemente, modalidades da presente revelação não se limitam àquelas precisamente conforme mostradas e descritas.

[0166] Certas modalidades são descritas no presente documento, que compreendem o melhor modo conhecido pelo inventor para realizar os métodos e dispositivos descritos no presente documento. Obviamente, variações nessas modalidades descritas serão evidentes para os versados na técnica após a leitura da descrição anteriormente mencionada. Consequentemente, essa revelação compreende todas as modificações e equivalentes da matéria recitada nas reivindicações anexas, conforme permitido pela lei vigente. Além disso, qualquer combinação das modalidades descritas acima em todas as variações possíveis é abrangida pela revelação, a menos que indicado de outra forma no presente documento ou claramente contradito pelo contexto. Modalidades específicas reveladas no presente documento podem ser ainda mais limitadas nas reivindicações com uso de que consiste ou que essencialmente consiste em linguagem. Quando usado nas reivindicações, seja conforme depositado ou adicionado por emenda, o termo de transição “que consiste em” exclui qualquer elemento, etapa ou ingrediente não especificado nas reivindicações.

O termo de transição “que essencialmente consiste em” limita o escopo de uma reivindicação aos materiais ou etapas especificados e a aqueles que não afetam materialmente a característica (ou características) básica e nova.

Modalidades da presente revelação assim reivindicadas são inerentemente ou expressamente descritas e possibilitadas no presente documento.

Claims (20)

REIVINDICAÇÕES

1. Método para minimizar cicatrização caracterizado por compreender: administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma neurotoxina de atuação rápida a um paciente na proximidade de uma ferida.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por a dita neurotoxina de atuação rápida compreender serotipo de neurotoxina botulínica E.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por a dita quantidade terapeuticamente eficaz compreender uma quantidade de entre cerca de 10-3 U/kg e cerca de 35 U/kg.

4. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por a dita quantidade terapeuticamente eficaz compreender uma quantidade de entre cerca de 0,2 nanograma e cerca de 2 nanograma.

5. Método, de acordo cm qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizado por a dita administração compreender administração por injeção.

6. Método, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por a dita administração por injeção ser uma injeção intramuscular.

7. Método, de acordo cm qualquer uma das reivindicações precedentes, sendo que o dito método é caracterizado por compreender adicionalmente a administrar um subtipo de toxina botulínica A ao paciente.

8. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, sendo que o dito método é caracterizado por compreender adicionalmente administração de uma neurotoxina de atuação mais lenta ao paciente.

9. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, sendo que o dito método é caracterizado por compreender adicionalmente a administração de uma neurotoxina de recuperação mais lenta ao paciente.

10. Método, de acordo cm qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizado por a dita ferida compreender uma incisão cirúrgica.

11. Método, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por a dita incisão cirúrgica ser um resultado de um procedimento cirúrgico cosmético.

12. Método, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por a dita incisão cirúrgica ser um resultado de um procedimento de Mohs.

13. Método para aprimorar a aparência de uma cicatriz que se forma sobre uma ferida caracterizado por compreender: administrar a quantidade terapeuticamente eficaz de subtipo de toxina botulínica E (BoNT/E) na proximidade de uma ferida.

14. Método, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado por a ferida ser uma ferida cirúrgica.

15. Método, de acordo com a reivindicação 13 ou 14, caracterizado por a dita administração ser realizada antes de um procedimento cirúrgico.

16. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 15, caracterizado por a dita administração ser realizada após um procedimento cirúrgico.

17. Método, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado por a dita ferida cirúrgica se sobrepor a uma cicatriz existente no indivíduo.

18. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 17, caracterizado por a dita quantidade terapeuticamente eficaz compreender uma quantidade que reduz a vermelhidão da cicatriz, relativa a uma cicatriz que se forma sobre uma ferida similar em um paciente não tratado com BoNT/E.

19. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 18, caracterizado por a dita quantidade terapeuticamente eficaz compreender uma quantidade que reduz a rigidez da cicatriz, relativa a uma cicatriz que se forma sobre uma ferida similar em um paciente não tratado com BoNT/E.

20. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 19, caracterizado por compreender adicionalmente administrar subtipo de toxina botulínica A na proximidade da ferida.