BR112015020472A2

BR112015020472A2 - novo composto de fosforamidato de nucleosídeo e seu uso

Info

Publication number: BR112015020472A2
Application number: BR112015020472A
Authority: BR
Inventors: Zhang Cang; Wang Dezhong; Zhang Di; Chen Hongyan; Zhao Liwen; Bi Sheng; Zhang Xian; Nan Yang; Gao Yiping; Wang Yong; Li Yuxiu
Original assignee: Nanjing Sanhome Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2013-03-08
Filing date: 2014-03-06
Publication date: 2020-01-28
Also published as: BR112015020472B1; CN108546277A; MX2015011473A; JP6219414B2; CN104031104B; CN108546277B; CN109503686A; EP2940031B1; US20150361123A1; CN109503686B; JP2016510043A; US9963480B2; EP2940031A4; CA2899763A1; RU2015142682A; AU2014225052A1; KR20150132230A; CN108314697A; CN108314697B; WO2014135107A1

Abstract

resumo novo composto de fosforamidato de nucleosídeo e seu uso a presente invenção oferece um novo composto de fosforamidato de nucleosídeo, ou estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, para o tratamento de infecção viral da família flaviviridae, especialmente infecção por vírus da hepatite c. a presente invenção também oferece a composição farmacêutica compreendendo um composto da presente invenção, ou estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste e um uso do composto ou composição da presente invenção no tratamento de infecção viral da família flaviviridae, especialmente infecção por vírus da hepatite c. o composto da presente invenção oferece um bom efeito anti-hcv.

Description

“COMPOSTO DE FOSFORAMIDATO DE NUCLEOSÍDEO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA E USO DO MESMO”

Campo técnico [001 ]A presente invenção pertence à área farmacêutica e está partícularmente relacionada a uma série de novos compostos de fosforamidato de nucleosídeo, composições contendo estes compostos, e o uso de tais compostos ou composições como medicamento para tratamento de doenças infecciosas virais, especialmente para o tratamento da hepatite viral.

Antecedentes da invenção [002]A infecção pelo vírus da hepatite C (HCV) é uma doença epidêmica com mais de 200 milhões de indivíduos com infecção crônica no mundo. A taxa de infecção crônica do HCV é de 15% no Egito, 4,8% no Paquistão, e 3,2% na China e estes países lideram o ranking mundial. Manifestações clínicas da infecção viral da hepatite C são diversas, variando de sintomas moderados, tais como inflamação, a doenças graves, tais como cirrose hepática ou câncer hepático. A hepatite C crônica pode também ser complicada por algumas manifestações extra-hepáticas, incluindo artrite reumatoide, ceratoconjuntivite seca, líquen plano, glomerulonefrite, crioglobulinemia mista, linfoma de células B e porfiria cutânea tardia, etc., que podem ser causadas por resposta imune corporal anormal. Além disso, várias complicações podem ocorrer durante o estágio de descompensação da cirrose HCV induzida, tais como ascites, infecções abdominais, sangramento gastrointestinal superior, encefalopatia hepática, síndrome hepatorrenal, insuficiência hepática, e outros sintomas.

[003]0 HCV pertence à família Flaviviridae, gênero hepatovirus, e sua estrutura genética é similar a dos outros gêneros desta família, isto é pestivirus e flavivirus. Atualmente, os métodos padrões de tratamento da infecção por HCV incluem somente interferon, e terapia combinada de interferon e ribavirina.

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Entretanto, somente 50% dos pacientes respondem a estes métodos, e o interferon apresenta efeitos colaterais significativos, tais como sintomas semelhantes à gripe, perda de peso, fadiga e fraqueza, e a terapia combinada de interferon e ribavirina apresenta efeitos colaterais consideráveis, incluindo hemólise, anemia e fadiga, etc.

[004]Além disso, drogas desenvolvidas para o tratamento da infecção por HCV incluem inibidores da protease, derivados da tiazolidina, tiazolidinas e Nbenzanilidas, fenan-trenequinona, inibidores da helicase, inibidores do nucleosídeo polimerase e gliotoxina, oligodesoxinucleotídeos de fosforotioato antisentido, inibidores da tradução IRES-dependente, ribozimas e análogos dos nucleosídeos, etc.

[005]Atualmente, utilizando compostos de fosfato nucleosídeo para o tratamento de infecção com o vírus da família Flaviviridae, particularmente para o tratamento da infecção por HCV é uma importante direção da pesquisa neste campo. WO 2006/065335 descreveu um composto de nucleosídeo pirrolo [2,3,d] pirimidina fluorado para inibição do vírus HCV. US 2006/0241064 descreve um composto de nucleosídeo para tratamento da infecção viral causada pelo vírus da família Flaviviridae, tal como HCV. WO 2008/121634 descreve um composto de fosforamidato nucleosídeo para tratamento da infecção viral em mamíferos.

[006]lndependentemente da descrição acima, ainda existe uma grande necessidade de compostos eficazes para o tratamento e/ou prevenção de infecção por HCV.

Resumo da invenção [007]Um objetivo da presente invenção é fornecer um novo composto de fosforamidato de nucleosídeo de fórmula geral I para o tratamento e/ou prevenção da infecção por HCV:

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ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que (1 )Ri é selecionado de alquila Ci-β;

(2) R2 é selecionado de halogênio;

(3) Rs é selecionado de OH, H, e alcóxi C1-4;

(4) R4 é selecionado de H, alquila C1-6, e alquila C1-6 halogenada;

(5) Rõ é selecionado de alquila C1-6, e alquila C1-6 halogenada;

(6) Re é selecionado das seguintes frações:

a) fenila - Y em que Y está ausente ou selecionado de alquila C1-6, alquenila C2-6, alquinila C2-6, alquenila - (CO) - C2-6, alquinil - (CO) - C2-6, O, S, amino e - N(alquila C1-6), e em que 0 radical fenila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-6, halogênio, nitro, alcóxi C1-6, ciano, alquenila C2-6, alquinila C2-6, acilamino C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6 halogenado, amino, N(alquila Ci-e)2 e alquila C1-6 NHCO, ou fenila e um anel com cinco ou seis membros unidos para formar um anel benzo com cinco ou seis membros;

b) heterociclila - Y em que Y está ausente ou selecionado de alquila C1-6, alquenila C2-6, alquinila C2-6, alquenila - (CO) - C2-6, alquinila - (CO) - C2-6, O, S, amino e - N (alquila C1-6), ou a heterociclila ligado ao Y forma um bieterociclo, e em que a heterociclila é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-6, halogênio, nitro, alcóxi C1-6 halogenado, ciano, alquenila C2-6, alquinila C2-6, acilamino C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6, amino, N

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4/89 (alquila Ci-e)2 e alquila C1-6 NHCO;

c)alquila C1-6 - O - C(O) - alquenila C2-6 - e alquila C1-6 - O -C(O) alquenila C2-6 - C(O) -, em que alquila C1-6 é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-6, halogênio, nitro, alcóxi C1-6, ciano, alquenila C2-6, alquinila C2-6, acilamino C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6 halogenado, amino, N (alquila Ci-e)2 e alquila C1-6 NHCO; e (7) R? é selecionado de H, halogênio, alquila C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6, alcóxi C1-6 halogenado, NO2, CN, alquila C1-6 - NH - CO -, hidróxi, mono C1-6 alquilamino, di - C1-6 alquilamino, alquila - S - C1-6, alquenila - S - C2-6, alquinila

- S - C2-6, alquila - SO - C1-6, alquenila - SO - C2-6, alquinila - SO - C2-6, alquil - SO2

- C1-6, alquenila - SO2 - C2-6, alquinila - SO2 - C2-6, alquila - OSO2 -C1-6, alquenila OSO2 - C2-6, alquinila - OSO2 - C2-6; ou (8) Re e R7 juntos com 0 anel benzênico ao qual estão ligados formam um anel benzo com cinco ou seis membros, em que este anel é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de halogênio, alquila C1-6, alcóxi C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6, fenila, ciano, alquila - OC(O) - C1-6 e alquila - OC(O) - CH2- C1-6.

[008]0utro objetivo da presente invenção é oferecer um método de preparação do composto de fosforamidato de nucleosídeo de fórmula geral I ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste.

[009]0utro objetivo da presente invenção é fornecer uma composição compreendendo um composto de fosforamidato de nucleosídeo de fórmula geral I da presente invenção ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste e um veículo farmaceuticamente aceitável, e uma composição compreendendo um composto de fosforamidato de nucleosídeo de fórmula geral I ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste e outra droga antiviral.

[010]0utro objetivo da presente invenção é oferecer um método de

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5/89 tratamento e/ou prevenção da infecção viral da hepatite C utilizando um composto de fosforamidato de nucleosídeo de fórmula geral I da presente invenção ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, assim como o uso de um composto de fosforamidato de nucleosídeo de fórmula geral I da presente invenção ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste na produção de um medicamento para tratamento e/ou prevenção da infecção da hepatite C viral.

[011]Para os objetivos acima, a presente invenção oferece as seguintes soluções técnicas:

[012]Em um primeiro aspecto, a presente invenção oferece um novo composto de fosforamidato de nucleosídeo de fórmula geral I:

ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que (1) Ri é selecionado de alquila C1-6; de preferência Ri é selecionado de alquila C1-3, e com maior preferência, R1 é CH3;

(2) R2 é selecionado de halogênio; de preferência R2 é F;

(3) Rs é selecionado de OH, H, e alcóxi C1-4; de preferência R3 é selecionado de OH, H, metóxi; com maior preferência, R3 é OH;

(4) R4 é selecionado de H, alquila C1-6, alquila C1-6 halogenada; de preferência R4 é selecionado de H, alquila C1-6; com maior preferência R4 é selecionado de H e alquila C1-4;

(5) Rõ é selecionado de alquila C1-6, alquila C1-6 halogenada; de preferência Rs é selecionado de alquila C1-6; com maior preferência Rs é selecionado de alquila C1-4;

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6/89 (6)Re é selecionado de:

a) fenila - Y em que Y está ausente ou selecionado de alquila C1-6, alquenila C2-6, alquinila C2-6, alquenila - (CO) - C2-6, alquinila - (CO) - C2-6, O, S, amino e - N(alquila C1-6), e em que 0 radical fenila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-6, halogênio, nitro, alcoxi C1-6, ciano, alquenila C2-6, alquinila C2-6, acilamino C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcoxi C1-6 halogenado, amino, N(alquila Ci-e)2 e alquila C1-6 NHCO, ou fenila e um anel com cinco ou seis membros unidos para formar um anel benzo com cinco ou seis membros;

b) heterociclila - Y -, em que Y está ausente ou selecionada de alquila C1-6, alquenila C2-6, alquinila C2-6, alquenila - (CO) - C2-6, alquinila - (CO) - C2-6, O, S, amino e - N (alquila C1-6), ou a heterociclila ligada ao Y formando um bieterociclo, e em que a heterociclila é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-6, halogênio, nitro, alcoxi C1-6 halogenado, ciano, alquenila C2-6, alquinila C2-6, acilamino C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcoxi C1-6, amino, N (alquila Ci-e)2 e alquila C1-6 NHCO;

c) alquila C1-6 - O - C(O) - alquenila C2-6 - e alquila C1-6 - O -C(O) alquenila C2-6 - C(O) -, em que alquila C1-6 é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-6, halogênio, nitro, alcoxi C1-6, ciano, alquenila C2-6, alquinila C2-6, acilamino C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcoxi C1-6 halogenado, amino, N (alquila Ci-e)2 e alquila C1-6 NHCO;

[013]de preferência Re é selecionado de:

a)fenila - Y -, em que Y está ausente ou selecionado de alquila C1-4, alquenila C2-4, alquinila C2-4, alquenila - (CO) - C2-4, alquinil - (CO) - C2-4, O, S, amino e - N(alquila C1-4), e em que 0 radical fenila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcoxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcoxi C1-4

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7/89 halogenado, amino, N(alquila 61-4)2 e alquila C1-4 NHCO, ou fenila e um anel com cinco ou seis membros unidos para formar um anel benzo com cinco ou seis membros;

b) heterociclila - Y -, eem que Y está ausente ou selecionada de alquila C1-4, alquenila C2-4, alquinila C2-4, alquenila - (CO) - C2-4, alquinila - (CO) - C2-4, O, S, amino e - N (alquila C1-4), ou a heterociclila ligada ao Y formando um bieterociclo, e em que a heterociclila é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4 halogenado, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4, amino, N (alquila 61-4)2 e alquila C1-4 NHCO;

c) alquila C1-4 - 0 - C(0) - alquenila C2-4 - e alquila C1-4 - 0 -C(0) alquenila C2-4 - C(0) -, em que alquila C1-4 é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4 halogenado, amino, N (alquila 61-4)2 e alquila C1-4 NHCO;

[014]com maior preferência, Re é selecionado de:

a) fenila, fenila C1-3, alquila -, fenila C2-3, alquenila -, fenila C2-3, alquinila fenila - 0 -, fenila - S-, fenila - NH -, fenila - N (alquila C1-3) -, fenila - etenila (CO)- e naftila - etenila - (CO) -, em que 0 radical fenila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi Ci4 halogenado, amino, N(alquila 61-4)2 e alquila C1-4 NHCO, ou fenila e um grupo selecionado de fenila, oxazolila, pirazinila e pirrolila juntos para formar uma naftila, benzoxazolila, benzo [b] pirazinila ou benzo [b] pirrolila];

b) 1 H - imidazolila - Y -, 1,2,4 - triazolila - Y -, 1,2,3 - triazolila - Y -, tiazolila - Y -, 1,2,3 - tiadiazolila - Y -, 1,2,4 - tiadiazolila - Y -, 1,3,4 - tiadiazolila - Y -, oxazolila - Y -, 1,2,4 - oxadiazolila - Y -, 1,2,3 - oxadiazolila - Y -, 1,3,4

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8/89 oxadiazolila - Y -, pirimidinila - Y -, pirazinila - Y -, piridazinila - Y -, quinoxalinila - Y -, 4H - cromen - 4 - ona - Y -, piridila - Υ - , tienila - Υ -, tieno [3,2 - b] tienila - Υ -, em que Υ está ausente ou selecionado de metila, etila, etenila, etinila, etenila - (CO) -, etinil - (CO) -, O, S, amino e - NCH2 -, e em que cada grupo heterociclila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4 halogenado, amino, N(alquila 61-4)2 e alquila C1-4 NHCO;

c)metil - OC(O) - =-, etil - OC(O) - = -, propil - OC(O) - = -, isopropil OC(O) - = -, butil - OC(O) - = -, isobutil - OC(O) - =-, e t - butil - OC(O) - = -.

[015]Ainda com maior preferência, Re é selecionado de:

a) fenila, benzoxazolila, benzo [b] pirazinila, benzo [b] pirrolila, fenil - (CH2) -, fenila - = -, fenila - = - C(O) - e fenila - = -, em que 0 radical fenila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4 halogenado, amino, N(alquila 61-4)2 e alquila C1-4 NHCO;

b) 1H - imidazolila, 1,2,4 - triazolila, 1,2,3 - triazolila, tiazolila, 1,2,3 tiadiazolila, 1,2,4 - tiadiazolila, 1,3,4 - tiadiazolila, oxazolila, 1,2,4 - oxadiazolila, 1,2,3

- oxadiazolila, 1,3,4 - oxadiazolila, pirimidinila, pirazinila, piridazinila, quinoxalinila, 4H

- cromen - 4 -ona, piridila, tieno [3,2 - b] tienila, 1H - imidazolila - (CH2) -, 1,2,4 triazolila - (CH2) -, 1,2,3 - triazolila - (CH2) -, tiazolila - (CH2) -, 1,2,3 - tiadiazolila (CH2) -, 1,2,4 - tiadiazolila - (CH2) -, 1,3,4 - tiadiazolila - (CH2) -, oxazolila - (CH2) -, 1,2,4 - oxadiazolila - (CH2) -, 1,2,3 - oxadiazolila - (CH2) -, 1,3,4 - oxadiazolila (CH2) -, pirimidinila - (CH2) -, pirazinila - (CH2) -, piridazinila - (CH2) -, quinoxalinila (CH2) -, 4H - cromen - 4 - one - (CH2) -, piridila -(CH2) -, tieno [3,2 - b] tienila - (CH2) -, 1H - imidazolila - = 1,2,4 -triazolila - = 1,2,3 - triazolila - = -, tiazolila = -, 1,2,3 -tiadiazolila - = -, 1,2,4 - tiadiazolila - = -, 1,3,4 - tiadiazolila - = -, oxazolila - = -, 1,2,4 - oxadiazolila - = -, 1,2,3 - oxadiazolila - = -, 1,3,4

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9/89 oxadiazolila - = -, pirimidinila - = -, pirazinila - = -, piridazinila - = -, quinoxalinila - = -, 4H - cromen - 4 - ona -, piridila - = -, tieno [3,2 - b] tienila - = -, 1H - imidazolila - = -, 1,2,4 - triazolila - = -, 1,2,3 - triazolila - = , tiazolila - = -, 1,2,3 - tiadiazolila - = -, 1,2,4 - tiadiazolila - = -, 1,3,4 tiadiazolila - = -, oxazolila - = -,1,2,4 - oxadiazolila - = -,1,2,3 - oxadiazolila = -, 1,3,4 - oxadiazolila - = -, pirimidinila - = -, pirazinila - = -, piridazinila = -, quinoxalinila - = -, 4H -cromen - 4 - ona - = -, piridila - = -, e tieno [3,2 b] tienila - = -, em que cada grupo heterociclila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcoxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcoxi C1-4 halogenado, amino, N(alquila ¢1-4)2 e alquila C1-4 NHCO;

c)metil - OC(O) - = -; e (7) R7 é selecionado de H, halogênio, alquila C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcoxi C1-6, alcoxi C1-6 halogenado, NO2, CN, C1-6 aquil - NH - CO -, hidróxi, mono C1-6 alquilamino, di - C1-6 alquilamino, alquila - S - C1-6, alquenila - S- C2-6, alquinila S - C2-6, alquila - SO - C1-6, alquenila - SO - C2-6, alquinila - SO - C2-6, alquila - SO2 - C1-6, alquenila - SO2 - C2-6, alquinila - SO2 - C2-6, alquila - OSO2 - C1-6, alquenila OSO2 - C2-6, alquinila - OSO2 - C2-6; de preferência, R7 é selecionado de H, halogênio, alquila C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcoxi C1-6, alcoxi C1-6 halogenada, NO2, CN, alquil - NH - CO - Ci-β; com maior preferência, R7 é selecionado de H, halogênio, alquila C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcoxi C1-4, alcoxi C1-4 halogenado, NO2, CN, alquila - NH - CO - C1-4; ou (8) Re e R7 juntos com 0 anel benzênico ao qual estão ligados formam um anel benzo com cinco ou seis membros, em que este anel de cinco ou seis membros é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de halogênio, alquila C1-6, alcoxi C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcoxi C1-6 halogenado, fenila, ciano, alquila - OC(O) - C1-6, alquila - OC(O) - CH2 - C-i-e; de preferência, Re e R7 juntos

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10/89 com o anel benzênico ao qual estão ligados formam um 1,2,3,4 - tetraidronaftaleno, 2,3 - diidro - 1H - indeno, indol, benzofurano, quinoxalina, 4H - cromen - 4 - ona, benzo [d] isoxazol, benzo [d] oxazol, benzo [c] [1,2,5] tiadiazol, benzo [b] tiofeno, benzodiidropiran - 4 - ona, em que cada um destes anéis fusionados é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de halogênio, alquila C1-6, alcóxi C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6 halogenado, fenila, ciano, alquila - OC(O) - C1-6, e alquila - OC(O) - CH2 - C1-6.

[016]Em uma modalidade de preferência, a presente invenção oferece um composto de formula geral I ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que R1 é metila, etila, propila ou isopropila; R2 é F; R3 é OH, H ou metóxi; R4 é H, metila, etila, n - propila ou isopropila; Rs é metila, etila, n - propila, isopropila, n - butila, isobutila ou t - butila; Re é fenila - Y - ou heterociclila - Y -, em que Y está ausente ou selecionado de alquila C1-3, alquenila C2-3, alquinila C2-3, alquenila - (CO) - C2-3, alquinila - (CO) - C2-3, O, S, amino e - N (alquila C1-3), e em que a fenila ou heterociclila é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-3, halogênio, nitro, alcóxi C1-3, ciano, alquenila C2-3, alquinila C2-3, acilamino C1-3, alquila C1-3 halogenada, alcóxi C1-3, amino, N(alquila C13)2 e alquila C1-3 NHCO, ou a fenila e um anel com cinco ou seis membros juntos formam um anel benzo com cinco ou seis membros.

[017]Surpreendentemente, os inventores da presente invenção descobriram que quando 0 grupo Re e 0 grupo oxigênio estão ligados ao anel benzênico, estão na posição para ou meta, e especialmente quando Re é selecionado de fenila - Y - e de heterociclila - Y -, 0 composto de fórmula geral I apresenta uma excelente atividade anti-HCV. Sem estar ligado a qualquer teoria existente, os inventores da presente invenção acreditam que 0 composto de fórmula geral I, em que 0 grupo Re é particularmente selecionado de fenila - Y, e fenila - Y ou heterociclila - Y está posicionada para ou meta em relação ao grupo - O - ligado ao anel benzênico na

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11/89 estrutura de fenila - Y - fenila - Ο - ou hterociclila - Y - fenila - O exibe excelente atividade anti-HCV.

[018]Em outra modalidade de preferência, a presente invenção oferece um composto de fórmula geral I ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que Ri é metila ou etila; R2 é F; R3 é OH ou H; R4 é H, metila ou etila; Rs é metila, etila, n - propila ou isopropila; Re é fenila - Y em que Y está ausente ou selecionado de alquila C1-3, alquenila C2-3, alquinila C2-3, alquenila - (CO) - C2-3 e alquinila - (CO) - C2-3, e em que fenila é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-3, halogênio, nitro, alcoxi C1-3, ciano, alquenila C23, alquinila C2-3, acilamino C1-3, alquila C1-3 halogenada, alcoxi C1-3 halogenado, amino, N(alquila 61-3)2 e alquila NHCO C1-3, ou 0 grupo fenila e um grupo selecionado de oxazolila, pirazinila e pirrolila juntos formam uma benzoxazolila, benzo [b] pirazinila ou benzo [b] pirrolila, em que 0 grupo Re “fenila - Y e 0 grupo oxigênio estão ligados ao anel benzênico na posição para- ou meta-.

[019]Em outra modalidade de preferência, a presente invenção oferece um composto de fórmula geral I ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que R1 é metila; R2 é F; R3 é OH; R4 é H, metila ou etila; Rs é metila, etila, n - propila ou isopropila; Re é fenila - Y -, em que Y está ausente ou selecionado de alquila C1-3, alquenila C2-3, alquinila C2-3, alquenila - (CO) - C2-3 e alquinila - (CO) C2-3, e em que fenila é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-3, halogênio, nitro, alcoxi C1-3, alquila C1-3 halogenada, alcoxi C1-3 halogenado, ciano, alquenila C2-3, alquinila C2-3, acilamino C1-3, amino e alquila NHCO C1-3, ou 0 grupo fenila e um grupo selecionado de oxazolila, pirazinila e pirrolila juntos forma uma benzoxazolila, benzo [b] pirazinila ou benzo [b] pirrolila, em que 0 grupo Re “fenila - Y -” e 0 grupo oxigênio estão ligados ao anel benzênico na posição para- ou meta-.

[020]Em outra modalidade de preferência, a presente invenção oferece um

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12/89 composto de fórmula geral I ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que Ri é metila; R2 é F; R3 é OH; R4 é H ou metila; Rs é isopropila; Re é fenila - Y em que Y está ausente ou selecionado de alquila C1-3, alquenila C2-3, alquinila C2-3, alquenila - (CO) - C2-3 e alquinila - (CO) - C2-3, e em que fenila é opcíonalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-3, halogênio, nitro, alcóxi C1-3, alquila C1-3 halogenada, alcóxi C1-3 halogenado, ciano e alquila NHCO C1-3, ou 0 grupo fenila e um grupo selecionado de oxazolila, pirazinila e pirrolila juntos forma uma benzoxazolila, benzo [b] pirazinila ou benzo [b] pirrolila, em que 0 grupo Re “fenila - Y e 0 grupo oxigênio estão ligados ao anel benzênico na posição para- ou meta-.

[021 ]Em outra modalidade de preferência, a presente invenção oferece um composto de fórmula geral I ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que Re é fenila ou benzila, de preferência, 0 grupo fenila ou benzila e 0 grupo oxigênio estão ligados ao anel benzênico na posição para- ou meta-.

[022]Em outras modalidades, a presente invenção oferece um composto de fórmula geral I ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que Re é heterociclila - Y em que a heterociclila pode ser também furila, pirrolila, tetrazolila, furazanila, dioxadiazolila, piranila, tiopranila, piperidinila, triazinila, oxazinila, etc.

[023]Em algumas modalidades, com maior preferência, a presente invenção oferece um composto de fórmula Ia:

CH₃ O

IXL .NH ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste,

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13/89 em que (1)R₆ é selecionado de:

a) fenila - Y em que Y está ausente ou selecionado de alquila C1-6, alquenila C2-6, alquinila C2-6, alquenila - (CO) - C2-6, alquinila - (CO) - C2-6, O, S, amino e - N(alquila C1-6), e em que 0 radical fenila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-6, halogênio, nitro, alcóxi C1-6, ciano, alquenila C2-6, alquinila C2-6, acilamino C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6 halogenado, amino, N(alquila Ci-e)2 e alquila C1-6 NHCO, ou fenila e um anel com cinco ou seis membros unidos para formar um anel benzo com cinco ou seis membros;

b) heterociclila - Y -, em que Y está ausente ou selecionada de alquila C1-6, alquenila C2-6, alquinila C2-6, alquenila - (CO) - C2-6, alquinila - (CO) - C2-6, O, S, amino e - N (alquila C1-6), ou a heterociclila ligada ao Y formando um bieterociclo, e em que a heterociclila é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-6, halogênio, nitro, alcóxi C1-6 halogenado, ciano, alquenila C2-6, alquinila C2-6, acilamino C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6, amino, N (alquila Ci-e)2 e alquila C1-6 NHCO;

c) alquila C1-6 - O - C(O) - alquenila C2-6 - e alquila C1-6 - O -C(O) alquenila C2-6 - C(O) -, em que alquila C1-6 é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-6, halogênio, nitro, alcóxi C1-6, ciano, alquenila C2-6, alquinila C2-6, acilamino C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6 halogenado, amino, N (alquila Ci-e)2 e alquila C1-6 NHCO;

[024]de preferência Re é selecionado de:

a)fenila - Y -, em que Y está ausente ou selecionado de alquila C1-4, alquenila C2-4, alquinila C2-4, alquenila - (CO) - C2-4, alquinil - (CO) - C2-4, O, S, amino e - N(alquila C1-4), e em que 0 radical fenila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4, ciano,

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14/89 alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4 halogenado, amino, N(alquila 61-4)2 e alquila C1-4 NHCO, ou fenila e um anel com cinco ou seis membros unidos para formar um anel benzo com cinco ou seis membros;

b) heterociclila - Y -, em que Y está ausente ou selecionada de alquila C1-4, alquenila C2-4, alquinila C2-4, alquenila - (CO) - C2-4, alquinila - (CO) - C2-4, O, S, amino e - N (alquila C1-4), ou a heterociclila ligada ao Y formando um bieterociclo, e em que a heterociclila é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4 halogenado, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4, amino, N (alquila 61-4)2 e alquila C1-4 NHCO; e

[025]com maior preferência, Re é selecionado de:

b) 1 H - imidazolila - Y -, 1,2,4 - triazolila - Y -, 1,2,3 - triazolila - Y -, tiazolila - Y -, 1,2,3 - tiadiazolila - Y -, 1,2,4 - tiadiazolila - Y -, 1,3,4 - tiadiazolila - Y -,

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15/89 oxazolila - Y -, 1,2,4 - oxadiazolila - Y -, 1,2,3 - oxadiazolila - Y -, 1,3,4 oxadiazolila - Y -, pirimidinila - Y -, pirazinila - Y -, piridazinila - Y -, quinoxalinila - Y -, 4H - cromen - 4 - ona - Y -, piridila - Υ - , tienila - Υ -, tieno [3,2 - b] tienila - Υ -, em que Υ está ausente ou selecionado de metila, etila, etenila, etinila, etenila - (CO) -, etinil - (CO) -, O, S, amino e - NCH2 -, e em que cada grupo heterociclila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4 halogenado, amino, N(alquila Ci-4)2 e alquila C1-4 NHCO; e

[026]Ainda com maior preferência, Re é selecionado de:

a) fenila, fenila - (CH2) -, fenila - = -, fenila - = - C(O) - e fenila - = -, em que 0 radical fenila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4 halogenado, amino, N(alquila Ci-4)2 e alquila C1-4 NHCO, ou fenila ou um grupo selecionado de oxazolila, pirazinila e pirrolila juntos para formar uma benzoxazolila, benzo [b] pirazinila ou benzo [b] pirrolila;

- cromen - 4 -ona, piridila, tieno [3,2 - b] tienila, 1H - imidazolila - (CH2) -, 1,2,4 triazolila - (CH2) -, 1,2,3 - triazolila - (CH2) -, tiazolila - (CH2) -, 1,2,3 - tiadiazolila (CH2) -, 1,2,4 - tiadiazolila - (CH2) -, 1,3,4 - tiadiazolila - (CH2) -, oxazolila - (CH2) -,

1,2,4 - oxadiazolila - (CH2) -, 1,2,3 - oxadiazolila - (CH2) -, 1,3,4 - oxadiazolila (CH2) -, pirimidinila - (CH2) -, pirazinila - (CH2) -, piridazinila - (CH2) -, quinoxalinila

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16/89 (CH₂) -, 4H - cromen - 4 - one - (CH2) -, piridila -(CH2) -, tieno [3,2 - b] tienila - (CH₂) -, 1H - imidazolila - = -, 1,2,4 -triazolila - = -, 1,2,3 - triazolila - = -, tiazolila = -, 1,2,3 -tiadiazolila - = -,1,2,4 - tiadiazolila - = -,1,3,4 - tiadiazolila - = -, oxazolila - = -, 1,2,4 - oxadiazolila - = -, 1,2,3 - oxadiazolila - = -, 1,3,4 oxadiazolila - = -, pirimidinila - = -, pirazinila - = -, piridazinila - = -, quinoxalinila - = -, 4H - cromen - 4 - ona -, piridila - = -, tieno [3,2 - b] tienila - = -, 1H - imidazolila - = -, 1,2,4 - triazolila - = -, 1,2,3 - triazolila - = , tiazolila - = -, 1,2,3 - tiadiazolila - = -, 1,2,4 - tiadiazolila - = -, 1,3,4 tiadiazolila - = -, oxazolila - = -,1,2,4 - oxadiazolila - = -,1,2,3 - oxadiazolila = -, 1,3,4 - oxadiazolila - = -, pirimidinila - = -, pirazinila - = -, piridazinila = -, quinoxalinila - = -, 4H -cromen - 4 - ona - = -, piridila - = -, e tieno [3,2 b] tienila - = -, em que cada grupo heterociclila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4 halogenado, amino, N(alquila Ci-4)₂ e alquila C1-4 NHCO; e

c)metil - OC(O) - = -; e (2) R? é selecionado de H, halogênio, alquila C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6, alcóxi C1-6 halogenado, NO2, CN e C1-6 aquil - NH - CO -; de preferência, R7 é selecionado de H, halogênio, alquila C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4, alcóxi C1-4 halogenada, NO2, CN, alquil - NH - CO - C1-4; com maior preferência, R7 é selecionado de H, flúor, cloro, metila, etila, n-propila, isopropila, fluorometila, difluorometila, trifluorometila, fluoroetila, difluoroetila, trifluoroetila, metóxi, etóxi, npropóxi, isopropóxi, fluorometóxi, difluorometóxi, trifluorometóxi, fluoroetóxi, difluoroetóxi, trifluoroetóxi, NO2, CN e alquila - NH - CO - C1-4; ou (3) Re e R7 juntos com 0 anel benzênico ao qual estão ligados formam um anel benzo com cinco ou seis membros, em que este anel benzo de cinco ou seis membros é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de

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17/89 halogênio, alquila C1-6, alcóxi C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6 halogenado, fenila, ciano, alquila - OC(O) - C1-6, alquila - OC(O) - CH2- Ci-β; de preferência, Re e R7 juntos com 0 anel benzênico ao qual estão ligados formam um 1,2,3,4 tetraidronaftaleno, 2,3 - diidro - 1H - indeno, indol, benzofurano, quinoxalina, 4H cromen - 4 - ona, benzo [d] isoxazol, benzo [d] oxazol, benzo [c] [1,2,5] tiadiazol, benzo [b] tiofeno, benzodiidropiran - 4 - ona, em que cada um destes anéis fusionados é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de halogênio, alquila C1-6, alcóxi C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6 halogenado, fenila, ciano, alquila - OC(O) - C1-6, alquila - OC(O) - CH2 - C1-6.

[027]Em uma modalidade de preferência, a presente invenção oferece um composto de formula geral Ia ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que Re é fenila - Y - ou heterociclila - Y -, em que Y está ausente ou selecionado de alquila C1-3, alquenila C2-3, alquinila C2-3, alquenila - (CO) - C2-3, alquinila - (CO) - C2-3, O, S, amino e - N (alquila C1-3), e em que a fenila ou heterociclila é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-3, halogênio, nitro, alcóxi C1-3, ciano, alquenila C2-3, alquinila C2-3, acilamino C1-3, alquila C1-3 halogenada, alcóxi C1-3, amino, N(alquila 0-1-3)2 e alquila C1-3 NHCO, ou a fenila e um anel com cinco ou seis membros juntos formam um anel benzo com cinco ou anel benzo com seis membros. De preferência, a presente invenção oferece um composto de fórmula geral Ia ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que Re é fenila - Y - ou heterociclila - Y - e 0 grupo oxigênio estão ligados ao anel benzênico na posição para- ou meta-.

[028]A presente invenção oferece um composto de fórmula geral Ia ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que Re é 1H - imidazolila,

1.2.4 - triazolila -, 1,2,3 - triazolila, tiazolila, 1,2,3 - tiadiazolila, 1,2,4 - tiadiazolila,

1.3.4 - tiadiazolila, oxazolila-, 1,2,4 - oxadiazolila, 1,2,3 - oxadiazolila, 1,3,4 oxadiazolila, pirimidinila, pirazinila, piridazinila, quinoxalinila, 4H - cromen - 4 - ona,

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18/89 tieno [3,2 - b] tienila, 1H - imidazolila - (CH2) -, 1,2,4 - triazolila - (CH2)-, 1,2,3 triazolila - (CH2) -, tiazolila - (CH2) -, 1,2,3 - tiadiazolila - (CH2) -, 1,2,4 - tiadiazolila

- (CH2) -, 1,3,4 - tiadiazolila - (CH2) -, oxazolila - (CH2) -, 1,2,4 - oxadiazolila (CH2) -, 1,2,3 - oxadiazolila - (CH2) -, 1,3,4 - oxodiazolila - (CH2) -,pirimidinila (CH2) -,pirazinila - (CH2) -, piridazinila - (CH2) -, quinoxalinila - (CH2) -, 4H - cromen

- 4 - ona - (CH2) -, piridila -(CH2) -, tieno [3,2 - b] tienila - (CH2) -, 1H - imidazolila = -, 1,2,4 -triazolila - = -, 1,2,3 - triazolila - = -, tiazolila - = -, 1,2,3 tiadiazolila - = -, 1,2,4 - tiadiazolila - = -, 1,3,4 - tiadiazolila - = -, oxazolila = -, 1,2,4 - oxadiazolila - = -, 1,2,3 - oxadiazolila - = -, 1,3,4 - oxadiazolila = -, pirimidinila - = -, pirazinila - = -, piridazinila - = -, quinoxalinila - = -, 4H

- cromen - 4 - ona -= -, piridila - = -, tieno [3,2 - b] tienila - = -, 1H imidazolila - = -, 1,2,4 - triazolila - = -, 1,2,3 - triazolila - = -, tiazolila - = -, 1,2,3 - tiadiazolila - = -, 1,2,4 - tiadiazolila - = -, 1,3,4 - tiadiazolila - = -, oxazolila - = -, 1,2,4 - oxadiazolila - = -, 1,2,3 - oxadiazolila - = -, 1,3,4 oxadiazolila - = -, pirimidinila - = -, pirazinila - = -, piridazinila - = -, quinoxalinila - = -, 4H -cromen - 4 - ona - = -, piridila - = -, ou tieno [3,2 - b] tienila - = -, em que cada grupo heterociclila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-3, halogênio, nitro, alcóxi C1-3, ciano, alquila C1-3 halogenada, alcóxi C1-3 halogenado, alquenila C2-3, alquinila C2-3, acilamino C1-3, amino, NH (alquila C1-3), N(alquila 61-3)2 e alquila C1-4 NHCO, em que a heterociclila e 0 grupo oxigênio estão ligados ao anel benzênico na posição paraou meta-.

[029]Em outra modalidade de preferência, a presente invenção oferece um composto de fórmula geral Ia ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que Re é fenila - Y -, em que Y está ausente ou selecionado de alquila C13, alquenila C2-3, alquinila C2-3, alquenila - (CO) - C2-3 e alquinila - (CO) - C2-3, e em que 0 radical fenila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos

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19/89 selecionados de alquila C1-3, halogênio, nitro, alcóxi C1-3, ciano, alquenila C2-3, alquinila C2-3, acilamino C1-3, alquila C1-3 halogenada, alcóxi C1-3 halogenado, amino, NH (alquila C1-3), N(alquila 61-3)2 e alquila C1-3 NHCO, ou fenila e um grupo selecionado de oxazolila, pirazinila e pirrolila juntos formando uma benzoxazolila, benzo [b] pirazinila ou benzo [b] pirrolila, em que 0 grupo Re e 0 grupo oxigênio são ligados ao anel benzênico na posição para- ou meta-.

[030]Em outra modalidade de preferência, a presente invenção oferece um composto de fórmula geral Ia ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que Re é fenila - Y -, em que Y está ausente ou selecionado de alquila C13, alquenila C2-3, alquinila C2-3, alquenila - (CO) - C2-3 e alquinila - (CO) - C2-3, e em que 0 radical fenila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-3, halogênio, nitro, alcóxi C1-3, ciano, alquenila C2-3, alquinila C2-3, alquila C1-3 halogenada, alcóxi C1-3 halogenado, acilamino C1-3, amino e alquila C1-3 NHCO, ou fenila e um grupo selecionado de oxazolila, pirazinila e pirrolila juntos formando uma benzoxazolila, benzo [b] pirazinila ou benzo [b] pirrolila, em que 0 grupo Re e 0 grupo oxigênio são ligados ao anel benzênico na posição para- ou meta-.

[031 ]Em outra modalidade de preferência, a presente invenção oferece um composto de fórmula geral Ia ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que Re é fenila - Y -, em que Y está ausente ou selecionado de alquila C13, alquenila C2-3, alquinila C2-3, alquenila - (CO) - C2-3 e alquinila - (CO) - C2-3, e em que 0 radical fenila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-3, halogênio, nitro, alcóxi C1-3, ciano, alquila C1-3 halogenada, alcóxi C1-3 halogenado e alquila C1-3 NHCO, ou fenila e um grupo selecionado de oxazolila, pirazinila e pirrolila juntos formando uma benzoxazolila, benzo [b] pirazinila ou benzo [b] pirrolila, em que 0 grupo Re e 0 grupo oxigênio são ligados ao anel benzênico na posição para- ou meta-.

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20/89 [032]Em outra modalidade de preferência, a presente invenção oferece um composto de fórmula geral Ia ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que Re é fenila - Y - ou benzila (isto é, fenila - CH2 de preferência, com fenila ou benzila e o grupo ligados ao anel benzênico na posição para- ou meta[033]Em outras modalidades, a presente invenção oferece um composto de fórmula geral Ia ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que Re é heterociclila - Y, em que a heterociclila pode também ser furila, pirrolila, tetrazolila, furazanila, dioxadiazolila, piranila, tiopiranila, piperidinila, triazinila, oxazinila, etc.

[034]A presente invenção oferece os seguintes compostos específicos:

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21/89

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22/89

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23/89

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24/89

[035]Em outro aspecto, a presente invenção oferece um método de preparação de um composto de fórmula geral ou Ia, de acordo com a presente invenção, compreendendo as seguintes etapas:

Esquema Sintético

a) reação do composto (1) com oxicloreto de fósforo sob condição alcalina seguida pela adição do composto (2), e então adição do pentafluorofenol para obter o composto (3);

b) reação do composto (3) com o composto (4) em baixa temperatura para

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25/89 fornecer o composto (5) em que Ri, R2, R3, R4, Rs, Re e Rzsão conforme definidos na fórmula I geral acima.

[036]Em um terceiro aspecto, a presente invenção oferece uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula geral I ou Ia de acordo com a presente invenção, ou um estereoisôomero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste.

[037]Em algumas modalidades, a presente invenção oferece uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula geral I ou Ia, ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, e agentes terapêuticos antiHCV adicionais selecionados de um ou mais dos seguintes: inibidores da protease NS3 HCV, inibidores da RNA polimerase NS5B RNA dependente, análogos de nucleosídeos, interferon cc, interferon pequilado, ribavirina, levovirina, viramidina, agonistas do TLR7, agonistas do TLR9, inibidores da ciclofilina, inibidores da ccglicosidase, inibidores NS5A e inibidores da helicase NS3.

[038]Uma formulação farmacêutica adequada para administração oral ou parenteral pode ser formulada pela mistura do composto de fórmula I ou Ia da presente invenção, ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste com um veículo farmaceuticamente aceitável, diluente ou excipiente. Métodos de administração incluem, mas não estão limitados a via intradérmica, intramuscular, intraperitoneal, intravenosa, subcutânea, intranasal e oral. As formulações podem ser administradas por qualquer via, por exemplo, por infusão ou injeção em bolo, ou por absorção cutânea ou mucocutânea (tal como oral ou mucosa retal, etc.). A administração pode ser sistemática ou tópica. Exemplos de formulações para administração oral incluem formas de dosagem sólida ou líquida, especificamente, compreendendo comprimidos, pílulas, grânulos, pós, cápsulas, xaropes, emulsões, suspensões e semelhantes. As formulações podem ser preparadas por métodos bem conhecidos na área, e podem compreender veículos convencionais, diluentes

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26/89 ou excipientes na área farmacêutica.

[039]Em um quarto aspecto, a presente invenção oferece um método de tratamento de um indivíduo infectado com vírus da família Flaviviridae utilizando um composto de fórmula geral I ou Ia da presente invenção, ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, ou uma composição farmacêutica da presente invenção, compreendendo a administração de um composto de fórmula geral I ou Ia, ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, ou uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula geral I ou Ia, ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste a um indivíduo em uma quantidade para reduzir efetivamente a carga viral do citado vírus no citado indivíduo. Numa modalidade, a presente invenção fornece um método para tratar ou prevenir a infecção viral de RNA, por exemplo, infecção viral da família Flaviviridae, compreendendo a administração de um composto da presente invenção ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal ou uma composição farmacêutica deste em um indivíduo em necessidade do mesmo. Em uma outra modalidade, a presente invenção fornece um método para inibir a infecção viral de RNA, por exemplo, infecção viral da família Flaviviridae, compreendendo colocar em contato o referido vírus com uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, ou uma composição farmacêutica deste.

[040]“Vírus flaviviridae” significa qualquer vírus da família Flaviviridae, incluindo os que infectam humanos ou não humanos, tais como flavivírus, pestivírus e vírus da hepatite C. Os compostos e composições da presente invenção podem ser utilizados particularmente no tratamento ou prevenção de infecção por HCV.

[041 ]Em outro aspecto, a presente invenção oferece um uso de um composto de fórmula geral I ou Ia da presente invenção, ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste para prevenção ou tratamento de doenças

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27/89 infecciosas virais, especialmente as causadas por vírus da família Flaviviridae, assim como um uso de um composto de fórmula geral I ou Ia da presente invenção, ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste na produção de um medicamento para prevenção e/ou tratamento de doenças infecciosas virais, especialmente para prevenção e/ou tratamento de doenças causadas pelo HCV, tais como hepatite viral. Exemplos e tais doenças incluem hepatite C aguda, hepatite C crônica, e infecção mista de hepatite C e hepatite B ou hepatite D.

Definição [042]A menos que definido ao contrário, todos os termos técnicos e científicos utilizados na presente invenção apresentam o mesmo significado que o comumente utilizado pelos versados na área.

[043]O termo “estereoisômero” se refere a isômeros criados por um dispositivo espacial diferente de átomos em moléculas, incluindo isômeros cis e trans, e enanciômeros e isômeros conformacionais. Todos os estereoisômeros estão dentro do escopo da presente invenção. Um estereoisômero simples do composto da presente invenção pode ser substancialmente livre de outros isômeros, ou misturado, por exemplo, em racematos, ou misturado com todos os outros estereoisômeros.

[044]O termo “sal” se refere a um sal farmaceuticamente aceitável formado pelos compostos da presente invenção com um ácido. O citado ácido pode ser selecionado de ácido fosfórico, ácido sulfúrico, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido cítrico, ácido maléico, ácido malônico, ácido mandélico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido acético, ácido lático, ácido nítrico, ácido sulfônico, ácido ptoluenossulfônico, ácido málico, ácido metanossulfônico e semelhantes.

[045]O termo “solvato” se refere a um complexo sólido ou líquido formado pela coordenação do composto da presente invenção com uma molécula do solvente. O hidrato é uma forma especial de solvato, em que o composto é

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28/89 coordenado com água. No contexto da presente invenção, hidrato é o solvato de preferência.

[046]O termo “cristal” se refere a todas as formas sólidas formadas pelo composto da presente invenção, compreendendo as formas cristalina e amorfa.

[047]O termo “alquila” se refere a um grupo de hidrocarbonetos saturados de cadeia simples, ramificada ou cíclica, de preferência com 6 ou menos átomos de carbono. Exemplos de grupos alquila incluem metila, etila, n-propila, isopropila, ciclopropila, n-butila, isobutila, t-butila, ciclobutila, n-pentila, isopentila, neopentila, cicloexila, n-exila, isoexila, 2,2 - dimetilbutila e 2,3 - dimetilbutila. O termo “alquila C1-6” significa um grupo de hidrocarboneto saturado de cadeia simples, ramificada ou cíclica com 1-6 átomos de carbono. O termo “alquila C1-4” significa um grupo de hidrocarboneto saturado de cadeia simples, ramificada ou cíclica com 1-4 átomos de carbono.

[048]O termo “alquenila” significa um grupo de hidrocarboneto insaturado de cadeia simples ou ramificada contendo uma ou mais ligações duplas carbonocarbono (C=C), de preferência com 2 a 6 átomos de carbono, com maior preferência com 2 a 4 átomos de carbono e ainda com maior preferência com 2 átomos de carbono. O termo “alquenila C2-6” se refere a um grupo de hidrocarboneto insaturado com 2 a 6 átomos de carbono contendo 1 ou 2 ligações duplas carbono-carbono. O termo “alquenila C2-4” se refere a um grupo de hidrocarboneto insaturado com 2 a 4 átomos de carbono contendo 1 ou 2 ligações duplas carbono-carbono.

[049]O termo “alquinila” significa um grupo de hidrocarboneto insaturado de cadeia simples ou ramificada contendo uma ou mais ligações triplas carbonocarbono (C=C), de preferência com 2 a 6 átomos de carbono, com maior preferência com 2 a 4 átomos de carbono e ainda com maior preferência com 2 átomos de carbono. O termo “alquinila C2-6” se refere a um grupo de hidrocarboneto insaturado com 2 a 6 átomos de carbono contendo 1 ou 2 ligações triplas carbono-carbono. O

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29/89 termo “alquinila C2-4” se refere a um grupo de hidrocarboneto insaturado com 2 a 4 átomos de carbono contendo 1 ou 2 ligações triplas carbono-carbono.

[050]O termo “alcóxi” se refere a -O-alquila.

[051 ]O termo “halogênio” se refere a flúor, cloro, bromo e iodo.

[052]O termo “alquila halogenada” significa uma alquila substituída com no mínimo um átomo de halogênio.

[053]O termo “heterociclila” se refere a um grupo cíclico contendo no mínimo um heteroátomo, podendo ser N, O ou S, incluindo heterociclila simples ou cíclica. O grupo heterociclila simples inclui, mas não está limitado a furano, tiofeno, pirrol, tiazol, imidazol, 1,2,3 - triazol, 1,2,4 - triazol, 1,2,3 - tiadiazol, oxazol, 1,2,4 oxadiazol, 1,3,4 - oxadiazol, piridina, pirimidina, piridazina, pirazina, tetraidrofurano, pirrolidina, piperazina, morfolina, isoxazolina, etc. O grupo heterociclila cíclico inclui, mas não está limitado a quinolina, isoquinolina, indol, benzofurano, benzotiofeno, purina, acridina, carbazol, fluoreno, cromeno cetona, fluorenona, quinoxalina, 3,4 diidronaftalenona, dibenzofurano, hidreto de dibenzofurano, benzoxaxolila e semelhantes.

[054]O termo “anel benzo com cinco membros” e “anel benzo com seis membros” significa um grupo de anel fusionado.

Descrição detalhada da invenção [055]Os seguintes exemplos são fornecidos para ilustrar a presente invenção sem limitar a invenção a estes exemplos. Os reagentes e materiais iniciais utilizados na presente invenção são obtidos comercialmente.

Exemplo 1: Éster isopropílico do ácido (2(2S) - 2 - ((([1,1' -bifenil] - 4 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 -diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 hidróxi - 4 -metiltetraidrofuran - 2 -il) metoxi) fosforil) amino) propanóico

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Etapa 1: Preparação do éster isopropílico do ácido (2S) - 2 -((((S) pentafluorofenóxi) ([1,1'- bifenil] - 4 -iloxi) fosforil) amino) propanóico [056]A um frasco da reação, foram adicionados 0,9 g de oxicloreto de fósforo (5,87 mmol) e 30 mL de diclorometano. A mistura foi resfriada para a temperatura 60°C, e uma solução de 1 g de p - fenilfenol (5,87 mmol) e 0,6 g de trietilamina (5,87 mmol) em diclorometano foram adicionados gota a gota lentamente. Após o término da adição, a mistura reagiu durante a noite, à temperatura ambiente, foi resfriada para a temperatura de 0°C, e 0,9 g de cloridrato de éster isopropílico de L-alanina (5,3 mmol) foram adicionados. A mistura foi resfriada para -60°C e uma solução de 1,34 g de trietilamina (13 mmol) em diclorometano (20 mL) foi adicionada gota a gota. Após o final da adição, a temperatura foi aumentada para -5°C, então uma solução de pentafluorofenol (5,3 mmol) e 0,8 g de trietilamina (8 mmol) em diclorometano (15 mL) foi adicionada gota a gota à solução da mistura acima. A mistura resultante foi agitada por 1 hora à temperatura de -5°C. Após o final da reação, água foi adicionada para extração, então a mistura foi seca, concentrada e separada por cromatografia de coluna de silica gel para produzir o composto título.

Etapa 2: Preparação do éster isopropílico do ácido (2S) - 2 -((([1,1' - bifenil]

- 4 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 -diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 fluoro - 3 - hidróxi - 4 -metiltetraidrofuran - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanóico [057]A um frasco de reação foram adicionados (2'R) - 2' - desoxi - 2' - fluoro

- 2' - metiluridina (26 mg, 0,1 mmol) e 1 mL de tetraidrofurano. Uma solução de cloreto de cloreto de terc-butil magnésio 1M (0,25 mmol) em THF (0,25mL) foi adicionada

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31/89 gota a gota sob proteção de nitrogênio em um banho de gelo. Após o término da adição, a mistura foi reagida por 4 horas, à temperatura ambiente, e uma solução intermediária de fosfato de p-fenilfeno obtida acima (70 mg, 0,13 mmol) em tetraidrofurano (1,5 mL) foi adicionada gota a gota em banho de gelo. Após a adição, a mistura reagiu durante a noite à temperatura ambiente. Após o término da reação, ela foi resfriada pela adição de 6 mL de HCL 2N em banho de gelo. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila, lavada com solução de bicarbonato de sódio saturado, seca, concentrada, separada e purificada por cromatografia de coluna de silica para produzir o composto título.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,51 (s,1 H,pirimidina N - H), 7,68 - 7,62 (m,4H,Ar

- H,pirimidina - H),7,60 - 7,56 (d,1H,Ar - H), 7,48 -7,43 (t,2H,Ar - H), 7,38 - 7,30 (m,3H,Ar - H), 6,12 - 6,00 (m,2H,tetraidrofurano - H), 5,84 (d,1 H, pirimidina - H), 5,56 (d,1 H,P -NH),4,90 - 4,82 (m,1 H, - (CH3)₂C - H), 4,62 - 4,34 (m,1 H,tetraidrofurano OH), 4,30 - 4,2 (m,1 H,(CH3)C(NH) - H), 4,06 - 4,00 (m,1 H,tetraidrofurano - H), 3,88

- 3,77 (m,2H,P - O -CH₂ - H),1,30 - 1,20 (m,9H,3xCH₃),1 „8(d,3H,CH₃).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ = 606,2.

Exemplo 2: Éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - ((([1,1' - bifenil] - 3 -iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3

- hidroxi - 4 - metiltetraidrofurano -2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

[058]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando m- fenilfenol, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L-alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2' - desoxi - 2' - fluoro - 2 'metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ: 11,50(s,1 H,pirimidina N - H), 7,68 -7,55 (m,3H,Ar

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- H, pirimidina - Η), 7,50 - 7,36 (m,6H, Ar -Η), 7,21 (d,1 H,Ar - Η), 6,13 - 6,00 (m,2H, tetraidrofurano - H), 5,88 -5,84 (d,1 H, pirimidina - H), 5,57 - 5,52 (d,1 H,P - NH), 4,86

- 4,82 (m,1H, -(CH₃)₂C - H), 4,40 - 4,38 (m,1H, tetraidrofurano - OH), 4,28 -4,26 (m,1 H,(CH₃)C(NH) - H), 4,04 - 4,02 (m,1 H, tetraidrofurano - H), 3,88 - 3,80 (m,2H,P

- O - CH₂ - H), 1,28 - 1,20 (m,6H,2xCH₃),1,14 -1,11 (d,6H, 2xCH₃).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ = 606,2.

Exemplo 3: Éster isopropilico do ácido (2S) - 2 - ((([1,1' -bifenil] - 2 iloxi)(((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 —diidorpirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro 3 - hidróxi - 4 -metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

[059]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando o - fenilfenol, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropilico de L-alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2' - desoxi - 2' - fluoro - 2' metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,49 (s,1 H,pirimidina - N - H), 7,56 -7,05 (m,10H,Ar - H,pirimidina - H), 6,38 - 5,89 (m,2H,tetraidrofurano - H), 5.80 (d,1H,pirimidina - H), 5,42 (d,1H,P-NH), 4,86 - 4,75(m,1H, -(CH₃)₂C - H),4,24 4,18(m,1H,tetraidorfurano - OH), 4,14 -4,08 (m,1 H,(CH₃)C(NH) - H),3.99 3.89(m,1H,tetraidrofurano - H),3,85 -3,72 (m,2H,P - O - CH₂ - H),1,27 - 1,23 (m,3H,CH₃),1,19 - 1,07 (d,9H, 3xCH₃).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ =606,2.

Exemplo 4: Éster isopropilico do ácido (2S) - 2 - (((2 - benzil fen - 1 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 -diidropirimidin - 1 - (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

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[060]0 composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando o - benzilfenol, oxicloreto, cloridrato de éster isopropílico de Lalanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,48(s,1 H,pirimidina - N - H), 7,53 -7,05 (m,10H,Ar - H, pirimidina - H), 6,36 - 5,88 (m,2H,tetraidrofurano -H), 5,81 (d,1 H,pirimidina - H), 5,43 (d,1 H,P - NH), 4,85 - 4,71 (m,1 H, -(CH₃)₂C - H), 4,21 4,15 (m,1H,tetraidrofurano - OH), 4,12 -4,01 (m,1 H,(CH₃)C(NH)-H),3,92 - 3,89 (m,1 H,tetraidrofurano - H), 3,81 -3,73 (m,2H,P- O - CH₂ - H),1,32 - 1,31 (m,2H, CH₂) 1,23 - 1,21 (m,3 H,CH₃),1,11-1,01 (d,9H, 3xCH₃).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ = 620,2.

Exemplo 5: Éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - ((([4' - fluoro - 1,1' - bifenil] - 4 -il) oxi)(((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) -il) - 4 fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 -il) metóxi) fosforil) amino) propanóico

[061 ]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - fluoro - 4’ - hidroxibifenil, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L-alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

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34/89 ¹HNMR(300MHz,CDCI3)õ:8,09(s,1 H,pirimidinaN - Η),7,55 -7,49(m,6H,Ar H,),7,32(d,1H,Ar - Η),7,17 - 7,11 (d,1 H,pirimidina -H), 6,23 - 6,18 (m,1 H,tetraidrofurano - H), 5,76 (d,1 H,pirimidina -H), 5,09 - 5,00 (m,1 H,P - NH), 4,62

- 4,49 (m,2H, - (CH₃)2C - H), 4,16 -4,12 (m,1 H,tetraidrofurano - OH), 4,04 3,97(m,2H,(CH₃)C(NH) -H), 3,78 - 3,71 (m,1 H,tetraidrofurano - H),1,49(m,2H,P - O CH₂ -H),1,42 - 1,39(m,6H,2xCH₃),1,30 - 1,24(d,6H, 2xCH₃).

ESI- MS m/z: [M+H]⁺ = 624,3.

Exemplo 6: Éster isopropílico de ácido (2S) - 2 - ((([4' - nitro -1,1' - bifenil] - 4

- il)oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 —diidropirimidin - 1(2H) - il) - 4 fluoro - 3 - hidróxi - 4 -metiltetraidrofurano - 2 - il) métoxi) fosforil) amino) propanoico

[062]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - hidróxi - 4’ - nitro bifenila, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L-alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi - 2' - fluoro 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,48(s,1 H,pirimidina N - H),8,29 (d,2H,Ar H,),7,94 (d,2H,Ar - H), 7,82(d,2H,Ar -H),7,56 (d,1 H,pirimidina - H), 7,38 - 7,34 (m,2H,Ar - H), 6,13 -6,04 (m,2H,tetraidrofurano - H), 5,83 (d,1H, pirimidina - H), 5,56 (d,1H,P -NH), 4,88 - 4,85 (m,1H, - (CH₃)₂C - H), 4,40 (m,1H, tetraidrofurano -OH), 4,28 (m,1H,(CH3)C(NH) - H), 4,04 - 4,02 (m,1 H,tetraidrofurano - H) 3,86 - 3,84 (m,2H,P-O- CH₂- H),1,28 -1,25 (m,6H,2xCH₃),1,18 - 1,15(m,6H,2xCH₃).

ESI-MS m/z: [M+H]⁺ =651,4.

Exemplo 7: Éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((2 - metóxi - 4 Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 48/113

35/89 metoxicarbonil - (E) - etenilfen - 1 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidroxi -4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanóico

MeOOC [063]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando éster metílico do ácido (E) - 3 - (4 - hidroxi - 3 - metoxifenil) acrílico, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L-alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,48 (s,1H, pirimidina - N - H), 7,62 -7,57 (m,2 H,Ar - H, pirimidina - 1 - H),7,46 (s,1 H,CH=CH),7,31 -7,22 (m,2H,Ar -H), 6,63 (d,1 H,CH=CH), 6,03 -5,93 (m,2H,tetraidrofurano - H), 5,88 - 5,79 (m,1 H, pirimidina H), 5,57 - 5,50 (m,1 H,P -NH), 4,87 - 4,78 (m,1 H, - (CH3)2C - H), 4,40 - 4,34 (m,1 H, tetraidofurano - OH), 4,25 - 4,20 (m,1 H,(CH₃)C(NH) - H), 4,05 -3,96 (m,1H,tetraidrofurano - H), 3,75 - 3,82 (m,2H,P - O - CH₂ -H), 3,80 (s,3H,OCH₃), 3,70 (s,3H, - COOCH3) 1,26 - 1,1 (m,9H,3xCH₃),1,13-1,10 (m,3H,CH₃).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ = 644,2.

Exemplo 8: Éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - ((((E) - 4 - (3,5 dimetoxifeniletenil) fen - 1 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidroxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanóico

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[064]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando (E) - 4 - (3,5 - dimetoxifeniletenil) fenol, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L-alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR (300MHz,DMSO)õ: 11,51(s,1H,N - H), 8,19 (d,1H,Ar -H), 7,59 (t,2H,Ar - H), 7,20 (m,4H,Ar - H), 6,76 (s,2H,Ar -H), 6,41 (s,1 H,Ar - H), 6,10 (s,1 H,Ar H), 6,06 (m,1H, - CH 5,85 (d,1H,N -H), 5,57 (d,1H,- CH -),4,85 (q,1H,- CH -),4,37 (m,2H,- CH -), 4,27 (m,1H,- OH), 4,01 (m,1H, - CH2-), 3,78 (s,6H,- CH₃), 1,29 (s,3H, -CH3), 1,25 (s,3H,- CH₃), 1,15 (d,6H, - CH₃).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ = 692,2.

Exemplo 9: Éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((4 - metoxicarbonil - (E) etenilfen - 1 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

[065]O composto título foi preparado de acordo com 0 método descrito no exemplo 1 utilizando éster metílico do ácido (E) - 3 - (4 - hidroxifenil) acrílico, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L-alanina, pentafluorofenol e

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37/89 (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR (300MHz,DMSO)õ:11,50 (s,1H, pirimidina - N - H), 7,63 -7,59 (m,2 H,Ar - H, pirimidina - H), 7,48 (s,1 H,CH=CH), 7,32 -7,21 (m,2H,Ar - H), 6,65 (d,1 H,CH=CH), 6,01 -5,94 (m,2H,tetraidrofurano - H), 5,84 - 5,78 (m,1 H,pirimidina H), 5,51 - 5,50 (m,1H,P -NH), 4,88 - 4,79 (m,1H, - (CH₃)₂C - H), 4,42 - 4,33 (m,1 H,tetraidrofurano - OH), 4,25 - 4,18 (m,1 H,(CH₃)C(NH) - H), 4,05 -3,95 (m,1 H,tetraidrofurano - H), 3,75 - 3,82 (m,2H,P - O - CH₂ -H), 3,72 (s,3H, COOCH₃) 1,28 - 1,12 (m,9H,3xCH₃), 1,12 - 1,10 (m, 3H, CH₃).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ = 644,2.

Exemplo 10: Éster do isopropílico ácido (2S) - 2 - (((3 - cinamoilfen - 1 iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

[066]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 3 - cinamoilfenol, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L-alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi - 2' - fluoro - 2' metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,52(s,1 H, pirimidina N -H), 7,88 -7,82 (m,1H, pirimidina - H), 7,78 - 7,72 (m,3H,Ar - H), 7,60 -7,56 (d,1H,Ar - H), 7,46 (s,1 H,CH=CH), 7,31 - 7,22 (m,4H,Ar -H), 6,63 (d,1 H,CH=CH), 6,12 - 6,00 (m,2H, tetraidfrofurano -H), 5,82 (d,1H, pirimidina - H), 5,53 (d,1H,P - NH), 4,91 - 4,82 (m,1H, - (CH₃)₂C -H), 4,63 - 4,34 (m,1H, tetraidrofurano - OH), 4,30 -4,22 (m,1 H,(CH₃)C(NH) - H), 4,06 - 4,00 (m,1 H,tetraidrofurano - H), 3,88 - 3,77 (m,2H,P

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 51/113

38/89

- Ο - CH2 - Η), 1,30 - 1,20 (m,9H,3xCH₃), 1,58(d,3H,CH₃).

ESI - MS m/z: [M+Na]⁺ = 682,1.

Exemplo 11: Éster isopropilico do ácido (2S) - 2 - (((4 - (feniletinil) fen - 1 il)oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

[067]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 1-(4- hidroxifenil) - 2 - fenil acetileno, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropilico de L-alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2'

- fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,49(s,1 H,pirimidina N - H), 7,71 (d,2H,Ar - H,), 7,56 (m,4H,Ar - H, pirimidina - H), 7,42 (s,2H,Ar -H,),7,27 (m,1 H),7,04 (m,1 H), 6,16 6,03 (m,2H,tetraidrofurano -H), 5,84 (d,1 H,pirimidina - H), 5,66 - 5,52 (m,1 H,P - NH), 4,87 -4,83 (m,1H,- (CH₃)₂C - H), 4,38 (m,1 H,tetraidrofurano -OH), 4,25 (m,1H,(CH3)C(NH) - H), 4,02 (m,1 H,tetraidrofurano -H), 3,79 (m,2H,P - O - CH2 H), 1,27 - 1,23 (m,6H,2xCH₃), 1,16 -1,14 (m,6H,2xCH₃).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ = 630,3.

Exemplo 12: Éster isopropilico do ácido (2S) - 2 - (((4 - (1,2,3 - tiadiazol - 4

- il) fen - 1 - il)oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H)

- il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 52/113

39/89

[068]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - (1,2,3 - tiadiazol - 4 - il) fenol, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L-alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,50 (s,1H, pirimidina N -H), 9,59 (s,1H,tiadiazol), 8,14 - 8,17 (m,2H,Ar - H), 7,57 (m,1H, pirimidina -H), 7,36 - 7,42 (m,2H,Ar - H), 6,10 - 6,17 (m,2H, tetraidrofurano -H), 5,90 (d,1 H,pirimidina - H), 5,59 (d,1 H,P - NH), 4,90 - 4,82 (m,1 H,- (CH₃)₂C - H), 4,68 - 4,36 (m,1 H,tetraidrofurano OH), 4,31 -4,23 (m,1 H,(CH₃)C(NH) - H), 4,06 - 4,02 (m,1 H,tetraidrofurano -H), 3,89 3,77 (m,2H,P - O - CH₂ - H), 1,30 -1,20 (m,9H,3xCH₃),1,58 (d,3H,CH₃).

ESI-MS m/z: [M+H]⁺= 614,5.

Exemplo 13: Éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((2 - (quinoxalin - 5 il) fen - 1 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

[069]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 2 - (quinoxalin - 5 il) fenol, oxicloreto de fósforo, cloridrato de

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40/89 éster isopropílico de L-alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2'

- metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,48 (s,1H, pirimidina N - H), 7,69 -7,61 (m,1H, pirimidina - H), 7,69 - 7,61 (m,3H,Ar - H), 7,61 -7,58 (d,1H,Ar - H), 7,49 - 7,45 (t,2H,quinoxalina - H), 7,37 - 7,32 (m,3H,Ar -H), 6,11 - 6,03 (m,2H, tetraidrofurano H), 5,82 (d,1 H, pirimidina -H), 5,53 (d,1 H,P - NH), 4,90 - 4,83 (m,1 H,- (CH₃)₂C -H), 4,62 -4,32 (m,1H,tetraidrofurano - OH), 4,30 - 4,21 (m,1 H,(CH₃)C(NH) -H),4,04 4,01 (m,1H,tetraidrofurano - H), 3,83 - 3,74 (m,2H,P - O - CH₂ -H),1,34 - 1,21 (m,9H,3xCH₃),1,53 (d,3H,CH₃).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ = 658,2.

Exemplo 14: Éster metílico do ácido (2S) - 2 - (((25,6,7,8 - tetraidronaftalen

- 1 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 fluoro - 3 - hidroxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) acético

[070]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 5,6,7,8 - tetraidro - 2 - naftol, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster metílico do ácido L - amino acético, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi - 2'

- fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,49 (s,1H, pirimidina N - H), 7,58 -7,52 (m,1H, pirimidina - H), 7,46 - 7,42 (m,2H,Ar - H) 7,40 - 7,36 (d,1H,Ar - H), 6,11 - 6,00 (m,2H, tetraidrofurano - H), 5,82 (d,1H, pirimidina - H), 5,55 (d,1H,P - NH), 4,91 4,83 (m,1H,- (CH3)2C -H), 4,64 - 4,31 (m,1 H,tetraidrofurano - OH), 4,31 -4,23 (m,2H,(CH₃)CH₂(NH)),4,06 - 4,00 (m,1 H,tetraidrofurano - H), 3,88 -3,77 (m,2H,P - O

- CH₂ - H), 1,30 - 1,20 (m,3H, CH₃),1,5 (d,3H,CH₃).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ =542,2.

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 54/113

41/89

Exemplo 15: Éster t-butílico do ácido (2S) - (((5,6,7,8 - tetraidronaftalen - 1 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanóico

[071 ]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 5,6,7,8 - tetraidro - 2 - naftol, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster t-butílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi - 2' - fluoro 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,49 (s,1 H,pirimidina N - H), 7,58 -7,52 (m,1 H,pirimidina - H), 7,46 - 7,42 (m,2H,Ar - H )7,40 - 7,36 (d,1H,Ar - H), 6,11 6,00 (m,2H,tetraidrofurano -H), 5,82 (d,1 H,pirimidina - H), 5,55 (d,1H,P - NH), 4,64 -

4.31 (m,1H,tetraidrofurano - OH), 4,31 - 4,23 (m,1 H,(CH₃)C(NH) -H), 4,06 - 4,00 (m,1H,tetraidrofurano - H), 3,88 - 3,77 (m,2H,P - O -CH₂ - H), 1,33 -

1.31 (m,8H,4xCH₂)1,30 -1,20 (m,12H,4xCH₃),1,5(d,3H,CH₃).

ESI - MS m/z: [M-H]⁺ = 596,3.

Exemplo 16: Éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((4 - (tiazol - 2 - il) fen 1 - il)oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 55/113

42/89

Etapa 1: Preparação do 2 - (4 - metoxifenil) tiazol [072]A um frasco de gargalo único de 100 mL foram adicionados 2,2 g de ácido p-metoxifenil borônico (0,014 mol), 2 g de 4 - bromotiazol (0,012 mol), 7,8 g de carbonato de césio (0,024 mol) e 0,4 g de dicloreto de bis (trifenilfosfina) paládio (0,6 mmol), então adicionados 30 mL de 1,4 - dioxano e 8 mL de água. A mistura foi aquecida para a temperatura de 90°C sob proteção de nitrogênio, e deixada reagir durante a noite. A reação foi interrompida com a reação quase completa de todos os materiais iniciais. A mistura foi resfriada para temperatura ambiente, concentrada e extraída com água e acetato de etila. As fases orgânicas foram combinadas, secas, concentradas e separadas por cromatografia de coluna de silica gel para produzir o composto título.

¹HNMR(300MHz,CDCI3)õ:7,90 - 7,95 (m,2H,Ar - H), 7,83 (d,1H,Ar -H), 7,26 (d,1 H,Ar - H), 6,95 - 7,00 (m,2H, Ar - H), 3,88 (s,3H,OCH₃).

ESI-MS m/z: [M+H]⁺ =192,2.

Etapa 2: Preparação do 4 - (tiazol - 2 il) fenol [073]A um frasco de gargalo único de 100 mL foram adicionados o produto obtido da etapa 1 (0,9 g, 4,7 mmol) e HBr 40%. O produto da etapa 1 foi completamente dissolvido, e a solução resultante foi amarelo transparente. O volume de 6 mL de ácido acético foi adicionado, e a solução foi aquecida para a temperatura de 115°C e reagida por 20 h. A reação foi interrompida após os materiais iniciais terem desaparecido. A mistura foi concentrada até secura e separada por cromatografia de coluna de silica gel para produzir 0,42 g de um sólido amarelo

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 56/113

43/89 claro.

¹HNMR(300MHz,CDCI3)õ:7,83 - 7,88 (m,3H,Ar - H),7,30 (d,1H,Ar - H), 6,92 (d,2H,Ar- H).

ESI-MS m/z: [M+H]⁺= 178,2.

Etapa 3: Preparação do Éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((4 - (tiazol 2 - il) fen - 1 - il)oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [074]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - (tiazol - 2 - il) fenol, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi - 2' - fluoro 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(500MHz,DMSO)õ:11,47(s,1 H,pirimidina N - H) ,7,97 -7,90 (m,3H,Ar 2H,tiazol - 1H), 7,76 (d,1H,tiazol -H), 7,56 (d,1 H,pirimidina - H), 7,35 (d,2H,Ar - H), 6,12 -6,04 (m,2H,tetraidrofurano - H), 5,82 (d,1 H,pirimidina - H), 5,58 -5,56 (m,1 H,P NH), 4,88 - 4,83 (m,1 H,- (CH₃)2C -H), 4,39 (m,1 H,tetraidrofurano - OH), 4,28 - 4,27 (m,1 H,(CH₃)C(NH) -H), 4,05 - 4,01 (m,1 H,tetraidrofurano - H), 3,84 - 3,83 (m,2H,P O -CH₂ - H), 1,28 - 1,24 (m,6H,2xCH₃),1,16-1,14 (m,6H,2xCH₃).

ESI-MS m/z: [M+H]⁺= 613,3.

Exemplo 17: Éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((4 - (tiazol - 5 - il) fen 1 - il)oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 57/113

44/89

Etapa 1: Preparação do 5 - (4 - metoxifenil) tiazol [075]A um frasco de gargalo único de 100 mL foram adicionados 2,2 g de ácido p-metoxifenil borônico (0,014 mol), 2 g de 5 -bromotiazol (0,012 mol), 7,8 g de carbonato de césio (0,024 mol) e 0,4 g de dicloreto de bis (trifenilfosfina) paládio (0,6 mmol), então adicionados 30 mL de 1,4 - dioxano e 8 mL de água. A mistura foi aquecida para a temperatura de 90°C sob proteção de nitrogênio, e deixada reagir durante a noite. A reação foi interrompida com a reação quase completa de todos os materiais iniciais. A mistura foi resfriada para temperatura ambiente, concentrada e extraída com água e acetato de etila. As fases orgânicas foram combinadas, secas, concentradas e separadas por cromatografia de coluna de silica gel para produzir um produto sólido amarelo claro.

¹HNMR(300MHz,CDCI₃)õ:8,74 (s,1H,Ar - H), 8,00 (s,1H,Ar - H), 7,51 - 7,54 (m,2H, Ar - H), 6,95 - 6,99 (m,2H, Ar - H), 3,87 (s,3H,OCH₃).

ESI-MS m/z: [M+H]⁺= 192,2.

Etapa 2: Preparação do 4 - (tiazol - 5 - il) fenol [076]A um frasco de gargalo único de 100 mL foram adicionados o produto obtido da etapa 1 (0,9 g, 4,7 mmol) e HBr 40%. O produto da etapa 1 foi completamente dissolvido, e a solução resultante foi amarelo transparente. O volume de 6 mL de ácido acético foi adicionado, e a mistura foi aquecida para a temperatura de 115°C e reagida por 20 h. A reação foi interrompida após os materiais iniciais terem desaparecido. A mistura foi concentrada até secura e separada por cromatografia de coluna de silica gel para produzir 0,66 g de um sólido amarelo

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 58/113

45/89 claro.

¹HNMR(300MHz,CDCI₃)õ: 8,72 (s,1H,Ar - H), 7,99 (s,1H,Ar -H), 7,43 - 7,49 (m,2H,Ar - H), 6,87 - 6,90 (m,2H, Ar - H).

ESI-MS m/z: [M+H]⁺= 178,2.

Etapa 3: Preparação do Éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((4 - (tiazol 5 - il) fen - 1 - il)oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [077]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - (tiazol - 5 - il) fenol, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi - 2' - fluoro 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(500MHz,DMSO) 0:11,48 (s,1 H,pirimidina N - H), 9,06 (s,1H, tiazol H), 7,97 (d,1 H,tiazol - 1H), 7,70 (d,2H,Ar -H), 7,56 (d,1 H,pirimidina - H), 7,31 (d,2H,Ar - H), 6,09 -6,01 (m,2H,tetraidrofurano - H), 5,81 (d,1 H,pirimidina - H), 5,57 -5,56 (m,1H,P - NH), 4,88 - 4,83 (m,1H,- (CH₃)2C -H), 4,38 (m,1 H,tetraidrofurano - OH), 4,28 - 4,27 (m,1 H,(CH₃)C(NH) - H), 4,05 - 4,02 (m,1 H,tetraidrofurano - H), 3,85 3,83 (m,2H,P - O - CH₂ - H),1,28 - 1.23 (m,6H,2xCH₃), 1,18-1,14 (m,6H,2xCH₃).

ESI-MS m/z: [M+H]⁺= 613,4.

Exemplo 18: Éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((4’ - ciano - 1,1’ bifenil] - 4 - i) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4) dioxo - 3,4 - didropirimidin - 1 (2H) il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 59/113

46/89 [078]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4’ - ciano - 4 - hidróxibifenil, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro 2' - metiluridina como materiais iniciais.

HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,50 (s,1H, pirimidina N - H), 7,98 -7,82 (m,8H,Ar - H), 7,57 (m,1 H,pirimidina - H), 6,18 6,15 (m,2H,tetraidrofurano - H), 5,91 (d,1 H,pirimidina - H), 5,59 (d,1 H,P -NH), 4,92 - 4,87 (m,1 H,- (CH₃)2C - H), 4,68 -4,36 (m,2H,tetraidrofurano - OH, (CH3)C(NH) - H), 4,03 -4,01 (m,1 H,tetraidrofurano - H), 3,85 - 3,82 (m,2H,P - O - CH₂ - H),1,40 -1,29 (m,9H,3xCH₃),1,15-1,13 (d,3H,CH₃).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺= 631,2.

Exemplo 19: Éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((4 - ((E) - 4 fluorofeniletenilfenil)- 1 - iloxi) (((2R, 3R, 4R, 5R) - 5 - (2,4 - idoxo - 3,4 diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

Etapa 1: Preparação de (E) - 4 - (4 - fluorofeniletenil) fenol [079]A um frasco com três gargalos de 50 mL foram adicionados p iodofenol (1,32 g, 6 mmol), p - fluoroestireno (610 mg, 5 mmol), tetraquis (trifenilfosfina) paládio (622 mg, 0,5 mmol) e carbonato de césio (4,89 g, 15 mmol), e 20 mL de 1,4 - dioxano. O gás argônio foi passado através da solução, e a mistura reagiu à temperatura de 80°C durante a noite (cerca de 10 h) até que a solução se tornou escura. Após 24 h, a reação foi finalizada por monitoramento TLC. O ácido clorídrico diluído foi lentamente adicionado gota a gota à temperatura de 0°C, e a mistura foi extraída com acetato de etila e separada por cromatografia de coluna em

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 60/113

47/89 silica gel para produzir um sólido branco.

ESI - MS m/z: [M+H]⁺= 215,2.

Etapa 2: Preparação do éster isopropilico do ácido (2S) - 2 - ((((E) -4-(4fluorofeniletenilfenil) - 1 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [080]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando (E) - 4 - (4 - fluorofeniletenil) fenol, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropilico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,46 (s,1H, pirimidina N - H), 7,64 -7,58 (m,5H,Ar -H, pirimidina - H), 7,23 - 7,15 (m,6H,Ar-H,- CH=CH -), 6,10 - 6,15 (m,2H,tetraidrofurano - H), 5,91 (d,1H, pirimidina - H), 5,79 (d,1H,P - NH), 4,91 -

4,88 (m,1 H, - (CH3)2C -H), 4,66 - 4,32 (m,2H,tetraidrofurano - OH,(CH3)C(NH) - H), 4,03 -4,01 (m,1 H,tetraidrofurano - H), 3,85 - 3,82 (m,2H,P - O - CH2 - H), 1,40 -1,29 (m,9H,3xCH3), 1,15 - 1,13(d,3H,CH3).

ESI - MS m/z: [M+H]+ = 650,4.

Exemplo 20: éster isopropilico do ácido (2S) - 2 - ((((1 H - indol - 5 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

[081 ]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 5 - hidróxi - 1H - indol, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropilico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi - 2' - fluoro - 2'

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48/89 metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,54 (s,1H, pirimidina - N - H), 11,14 (s,1H, Indol - N - H), 7,55 (d,1H,pirimidina - H),7,37 - 7,32 (m,3H, Indol - H), 6,96 (d,1H,Indol - H), 6,38 (s,1H, Indol - H), 6,05 -5,84 (m,3H,tetraidrofurano - H, pirimidina - H), 5,55 - 5,48 (m,1 H, P - NH), 4,88 - 4,80 (m,1 H,- (CH₃)2C - H), 4,38 4,33 (m,1H,tetraidrofurano - OH), 4,25 - 4,20 (m,1 H,(CH₃)C(NH) - H), 4,03 - 4,00 (m,1H,tetraidrofurano - H), 3,82 - 3,74 (m,2H,P - O -CH₂ - H), 1,28 - 1,21 (m,3H, CH₃),1,17- 1,15 (m, 3H, CH₃), 1,15-1,12 (m, 6H,2xCH₃).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ = 569,2.

Exemplo 21: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((4 - fluoro - 2 - metil - 1 H - indol - 5 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidroxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

[082]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - fluoro - 5 - hidroxi - 2 - metil -1H - indol, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 'desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(500MHz,DMSO)õ:11,48 (s,1 H,pirimidina - N -H),11,19 (s,1H,Indol N- H), 7,55 (d,1H,pirimidina - H), 7,02 (s,2H,Ar -H), 6,17 (d,1H,Ar - H), 5,97 - 5,85 (m,3H,tetraidrofurano - H, pirimidina - H), 5,56 - 5,49 (m,1H,P - NH), 4,86 (m,1H,(CH₃)₂C - H), 4,41 -4,35 (m,1 H,tetraidrofurano - OH), 4,25 - 4,20 (m,1 H,(CH₃)C(NH) -H), 4,04 - 4,00 (m,1 H,tetraidrofurano - H), 3,82 - 3,78 (m,2H,P - O -CH₂ - H), 2,37 (s,3H,CH₃), 1,25 - 1,22 (m,6H,2xCH₃),1,16-1,14 (m, 6H,2xCH₃).

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49/89

ESI-MS m/z: [M+H]⁺= 601,3.

Exemplo 22: éster isopropilico do ácido (2S) - 2 - (((3 - metoxicarbonilmetil - benzofurano - 7 -iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

[083]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 7 - hidróxi - 3 - metoxicarbonilmetilbenzofurano, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropilico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 'desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(500MHz,DMSO)õ:11,48 (s,1 H, pirimidina - N -H), 7,95 (s,1 H,Furan H), 7,56 (d,1 H,pirimidina - H), 7,40 (d,1 H,Ar -H), 7,28 (s,1 H,Ar - H), 7,20 (t,1 H,Ar - H),

6.13 (m,1 H,tetraidrofurano -H), 6,01 (m,1 H,pirimidina - H), 5,82 (m,1 H,tetraidrofurano

- H,), 5,50 (m,1H,P - NH), 4,86 (m,1H,- (CH₃)₂C - H), 4,42 (m,1 H,tetraidrofurano OH), 4,31 (m,1H,(CH₃)C(NH) - H), 4,02 (m,1 H,tetraidrofurano - H), 3,84 -3,82 (m,4H,P - O - CH₂ - H,- CH₂ -), 3,65 (s,3H,CH₃), 1,27 -1,22 (m,6H, 2xCH₃),1,16 -

1.14 (m, 6H,2xCH₃).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺= 642,2.

Exemplo 23: éster isopropilico do ácido (2S) - 2 - (((4 - oxo - 2 - fenil - 4H

- benzopiran - 6- il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

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50/89

[084]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 6 - hidroxiflavona, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:13,22 (s,1H,N - H), 8,59 (s,1H,Ar -H), 8,50 (d,2H,Ar - H), 8,30 (s,1H,Ar - H), 8,20 (d,1H,Ar -H), 8,03 (d,1H,Ar - H), 7,70 (dd,2H,Ar - H), 7,61 (d,1H,Ar - H), 7,48 (m,1H,Ar - H), 7,38 (d,1H,Ar - H), 7,36 (d,1H,N - H), 7,34 (d,1H,- CH 7,26 (m,1H,- CH 5,62 (s,2H,- CH2-), 5,54 (s,1H,OH), 5,32 (m,1H, -CH -), 4,59 (m,1H,- CH -), 4,05 (m,1H,- CH -), 2,01 (s,3H,CH₃),1,35 (s,3H,- CH₃), 1,16 (d,6H, - CH₃).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ = 674,2.

Exemplo 24: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((quinoxalin - 5 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

[085]O composto título foi preparado de acordo com 0 método descrito no exemplo 1 utilizando 5 - hidroxiquinoxalina, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi - 2' - fluoro - 2' metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,52 (s,1 H, pirimidina - N -H), 7,54

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 64/113

51/89 (d,1H,pirimidina - Η), 7,36 - 7,31 (m,3H,Ar - Η), 6,95 (d,1H,Ar -Η), 6,36 (d,1H,Ar Η), 6,03 - 5,82 (m,3H,tetraidrofurano - H, pirimidina - Η), 5,55 - 5,48 (m,1 Η,Ρ - NH),

4,88 -4,80 (m,1H,- (CH₃)₂C -H), 4,38 - 4,33 (m,1 H,tetraidrofurano - OH), 4,25 -4,20 (m,1 H,(CH₃)C(NH) - H), 4,03 - 4,01 (m,1 H,tetraidrofurano - H), 3,82 - 3,74 (m,2H,P - O - CH2 - H), 1,27 - 1,25 (m,3H,CH₃), 1,18 -1,16 (m,3H,CH₃), 1,15 - 1,12 (m, 6H,2xCH₃).

ESI - MS m/z: [M+Na]⁺ = 604,1.

Exemplo 25: éster isopropilico do ácido (2S) - 2 - (((4 - oxo - 2 fenilbenzodiidropiran - 7 - il)oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metoxi) fosforil) amino) propanoico

[086]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 7 - hidroxiflavanona, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropilico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi - 2' - fluoro - 2' metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,DMSO)õ:11,59 (s,1H, pirimidina N - H), 8,06 -8,02 (m,1H,Ar

- H), 7,89 - 7,86 (m,3H,Ar - H) 7,69 -7,61 (m,1 H,pirimidina - H), 7,42 - 7,41 (m,2H,Ar

- H), 7,36 - 7,34 (d,2H,Ar - H), 6,12 -6,03 (m,2H,tetraidrofurano - H), 5,84 (d,1 H,pirimidina - H), 5,43 (d,1 H,P -NH), 4,90 - 4,83 (m,1 H,- (CH₃)₂C - H), 4,63 -4,32 (m,1H,tetraidrofurano - OH), 4,30 - 4,21 (m,1 H,(CH₃)C(NH) -H), 4,14 - 4,11 (m,1H,tetraidrofurano - H), 4,10 - 4,08 (m,2H,P - O -CH₂ - H), 3,98 - 3,96 (m,4H,CH₂) 1,98 - 1,95 (m,1 H,CH) 1,34 -1.21 (m,6H,2xCH₃),1,53(d,6H,2xCH₃).

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 65/113

52/89

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ = 676,2.

Exemplo 26: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((4 -(1 Η - 1,2,4 - triazol

- 1 - il) fenil oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il)

- 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

[087]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - (1H - 1,2,4 - triazol - 1 - il) fenol, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ ppm: 11,48 (s,1H), 9,18-9,21 (m,2H), 8,15 8,18 (m, 1H), 8,05 - 8,07 (m,1 H), 7,98 -8,02 (m,1 H), 7,56 - 7,58 (m,1 H), 7,15 - 7,21 (m,1 H), 6,11 -6,15 (m,2H), 5,92 (m,1 H), 5,88 (m,1 H), 4,88 - 4,92 (m,1 H), 4,32 - 4,65 (m,2H), 4,01 -4,04 (m,1 H), 3,82 - 3,86 (m,2H),1,13 - 1,40 (m,12H).

LC-MS m/z:[M+H]⁺= 597.

Exemplo 27: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((4’ - cloro - [1,1’ bifenil] - 4 - il)oxi (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

[088]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4’ - cloro - 4 - hidróxi [1,1’ - bifenil], oxicloreto de fósforo,

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53/89 cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹H NMR (300 MHz, DMSO-cfe) δ ppm: 11,54 (s,1 H), 7,66 -7,69 (d,3H), 7,55 7,59 (d, 1H), 7,49 - 7,52 (d,2H), 7,29 -7,33 (m,3H), 6,12 - 6,16 (m,2H), 5,96 - 5,99 (m,1H), 5,34 (m,1H), 4,81 - 4,89 (m,1H), 4,38 - 4,42 (m,2H), 3,84 (m,1H), 3,82 3,84 (m,2H), 1,05 -1,14 (m,12H).

LC - MS m/z [M+H]⁺= 640.

Exemplo 28: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((2 - fluoro - [1,1’ bifenil] - 4 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

Etapa 1: Preparação do 2 - fluoro - 4 - hidróxi - [1,1’ - bifenil] [089]Em um frasco com forma de berinjela de 250 mL foram adicionados 1,06 g de ácido fenilborônico, 2,38 g de 3 - fluoro - 4 - iodofenol, 0,4 g de Pd (dppf) CI2 e 9 g de carbonato de césio, e então adicionados 50 mL de 1,4 - dioxano e 5 mL de água. A mistura foi agitada à temperatura de 90°C por 1,5 h sob proteção de nitrogênio, e então a reação foi interrompida. A solução da reação foi extraída com 100 mL de acetato de etila e 50 mL de solução de cloreto de sódio saturada, e lavada com água (3x50 mL). As fases orgânicas foram coletadas, secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas, concentradas e purificadas por cromatografia de coluna para obter 0 composto título.

LC-MS m/z: [M+H] = 189.

Etapa 2: Preparação do éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((2 - fluoro [1,1’ - bifenil] - 4 - iloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1

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54/89 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [090]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 2 - fluoro - 4 - hidróxi - [1,1’ - bifenil], preparado na etapa 1, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm: 11,49 (s,1H), 7,51 -7,82 (m,6H), 7,15 7,29 (m,3H), 6,12 - 6,15 (m,1 H), 6,03 (m,1 H), 5,97 -5,99 (m,1 H), 5,58 (m,1 H), 4,80 -

4,89 (m,1H), 4,38 -4,41 (m,2H), 4,01 (m,1H), 3,82 - 3,84 (m,2H), 1,05 - 1,14 (m, 12H).

LC-MS m/z: [M+H]⁺= 624.

Exemplo 29: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((4 - (pirimidin - 2 - il) fenil oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

N

HO* o y-^N \—n r

Etapal: Preparação da 2 - (4 - metoxifenil) pirimidina [091 ]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito na etapa 1 do exemplo 28 utilizando ácido 4 - metoxifenil borônico, 2 bromopirimidina, Pd(dppf)Cl2 e carbonato de césio como materiais iniciais.

LC-MS m/z [M+H] = 187.

Etapa 2: Preparação do 4 - (pirimidin - 2 - il) fenol [092]Em um frasco com fundo redondo de 50 mL foram adicionados 830 mg de 2 - (4 - metoxifenil) piridina preparada da etapa 1 em diclorometano (10 mL). O volume de 8 mL de BBr₃1N foi adicionado lentamente gota a gota à temperatura de

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-20°C sob proteção de nitrogênio. Após o final da adição, a mistura foi agitada à temperatura de 0°C. Após o término da reação, a mistura foi resfriada pela adição de 10 mL de água, e extraída com diclorometano (2x20mL). As fases orgânicas foram coletadas, lavadas com água e salmoura saturada, secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas, concentradas e purificadas por cromatografia de coluna para obter o composto título.

LC-MS m/z [M+H] = 173.

Etapa 3: Preparação do éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((4 - (pirimidin

- 2 il) fenil oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) 4 - fluoro - 3 - hidroxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [093]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - (pirimidin - 2 il) fenol preparado da etapa 2, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(500MHz,DMSO-d₆)õppm: 11,48 (s,1H), 8,88 -8,89 (m,2H), 8,38 8,40 (m,2H), 7,57 - 7,59 (m,1 H), 7,43 - 7,44 (m,1 H), 7,35 -7,28 (m,2H), 6,13 - 6,15 (m,1 H), 6,04 (m,1 H), 5,86 -5,88 (m,1 H), 5,59 (m,1 H), 4,81 - 4,89 (m,1 H), 4,38 - 4,41 (m,2H), 4,02 (m,1H), 3,81 -3,84 (m,2H), 1,10-1,18 (m,12H).

LC-MS m/z: [M+Na]⁺= 630.

Exemplo 30: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((3’ - (N - metilcarbamoil)

- [1 ,T - bifenil] - 4 -il)oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidroxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

HN._p/,° Hó ^x°' o 'W \—N /=

HN—

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56/89

Etapa 1: 4’ - hidróxi - N - metil - [1 ,T - bifenil] - 3 - formamida [094]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito na etapa 1 do exemplo 28 utilizando 4 - iodofenol, ácido 3 - (N - metilcarbamoil) fenilborônico, Pd(dppf)Cl2 e carbonato de césio como materiais iniciais.

LC-MS m/z [M+H] = 228.

Etapa 2: Preparação do éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((3’ - (N metilcarbamoil) - [1 ,T - bifenil] - 4 - il)oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [095]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4’ - hidróxi - N - metil -[1,1’- bifenil] - 3 formamida preparado da etapa 1, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹H NMR(400 MHz,DMSO-d₆) δ ppm:11,46 - 11,50 (s,1H), 7,95 -7,96 (m,1H),7,70 - 7,73 (m,1H), 7,57 - 7,59 (m,1H), 7,35 -7,37 (m,2H), 7,30 -7,32 (m,1H), 7,28 - 7,31 (m,1H), 7,22 - 7,26 (m,1H), 7,18 -7,20 (m,1H), 7,15 -7,17 (m,1H), 6,08 - 6,10 (m,1H), 6,01 (m,1H), 5,97 - 6,02 (m,1H), 5,58 (m,1H), 4,81 4,88 (m,1H), 4,38 -4,42 (m,2H), 4,05(m,1H), 3,89 - 3,92 (m,5H), 1,16 -1,28 (m,12H).

LC-MS m/z: [M-H]⁺= 661.

Exemplo 31: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((3’ - fluoro - [1,1’ bifenil] - 4 -il)oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

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Etapa 1: Preparação do 4 - (3 - fluorofenil) fenol [096]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito na etapa 1 do exemplo 28 utilizando o ácido 4 - hidroxifenil borônico, 3 fluoroiodobenzeno, Pd(dppf)Cl2 e carbonato de césio como materiais iniciais.

LC-MS m/z [M+H] = 189.

Etapa 2: Preparação do éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((3’ - fluoro [1 ,T - bifenil] - 4 - il)oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidroxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [097]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - (3 - fluorofenil) fenol preparado da etapa 1, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm: 11,49 (s,1 H), 7,95 -7,97 (m,1 H), 7,70 7,72 (m, 1H), 7,56 - 7,58 (m,1 H), 7,36 -7,38 (m,2H), 7,31 - 7,32 (m,1 H), 7,28 - 7,30 (m,1 H), 7,19 - 7,20 (m,1 H), 7,16-7,17 (m,1 H), 6,07 - 6,10 (m,1 H), 6,03 (m,1 H), 5,97 -6,01 (m,1 H), 5,56 (m,1 H), 4,80 - 4,88 (m,1 H), 4,38 - 4,41 (m,2H), 4,06 (m,1 H), 3,82 -3,86 (m,2H), 1,16-1,27 (m,12H).

L - MS m/z: [M+H]⁺= 624.

Exemplo 32: Éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((3’ - cloro - [1,T bifenil] - 4 -il)oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) il) - 4 - fluoro - 3 - hidroxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

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Cl

Etapa 1: Preparação do 4 - (3 - clorofenil) fenol [098]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito na etapa 1 do exemplo 28 utilizando o ácido 4 - hidroxifenil borônico, 3 cloroiodobenzeno, Pd(dppf)Cl2 e carbonato de césio como materiais iniciais.

LC-MS m/z [M+H] = 205.

Etapa 2: Preparação do éster isopropilico do ácido (2S) - 2 - (((3’ - cloro [1,1’- bifenil] - 4 - il)oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [099]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - (3 - clorofenil) fenol preparado da etapa 1, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropilico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ ppm: 11,49 (s,1 H), 7,51 -7,82 (m,6H), 7,26 7,35 (m, 3H), 6,12-6,14 (m,1H), 6,11 (m,1H), 5,96 -5,98 (m,1H), 5,88 (m,1H), 4,80

- 4,88 (m,1H), 4,38 - 4,42 (m,2H), 4,01 (m,1H), 3,82 - 3,87 (m,2H), 1,11 - 1,29 (m,12H).

LC-MS m/z: [M+H]⁺= 640.

Exemplo 33: Éster isopropilico do ácido (2S) - 2 - (((4 - fluoro - 1,2 - dimetil

- 1H - indol - 5 il)) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

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Etapa 1: Preparação do éster etílico do ácido 2 - (2,3 - difluoro - 6 nitrofenil) - 3 - oxobutanóico [0100]Em um frasco com fundo redondo de 100 mL foram adicionados 35mL de tetraidrofurano, 1150 mg de hidreto de sódio adicionados lentamente com agitação em banho de gelo, e 1,43 mL de acetoacetato de etila adicionados lentamente. Após o final da adição, uma solução de 2,3 mL de 2,3,4 trifluoronitrobenzeno em tetraidrofurano (4 mL) foi adicionada lentamente. Após o término da adição, a mistura foi deixada reagir por 24 horas à temperatura ambiente, e então a reação foi interrompida por resfriamento com água. O volume de 35 mL de HCI foi adicionado para ajustar o pH para neutro, e a mistura foi extraída com acetato de etila. As fases orgânicas foram coletadas, secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas, concentradas e purificadas por cromatografia de coluna para obter o composto título, que foi utilizado diretamente na próxima etapa.

Etapa 2: Preparação do 1 - (2,3 - difluoro - 6 - nitrofenil) propano - 2 - ona [0101]O éster etílico do ácido 2 - (2,3 - difluoro - 6 - nitrofenil) - 3 oxobutanóico preparado da etapa 1 foi transferido para um frasco de reação, e a mistura de 10 mL de ácido clorídrico concentrado e 100 mL de ácido acético glacial foi adicionada. A solução reagiu por 12 h à temperatura de 100°C antes do término da reação. A solução foi diluída com água e acetato de etila, e as camadas de acetato de etila foram obtidas. Uma solução de NaHCOa saturada aquosa foi adicionada para ajustar o pH para neutro, a camada de acetato de etila foi separada, e a fase aquosa foi extraída com acetato de etila. As fases orgânicas foram

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60/89 combinadas, secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas, concentradas e purificadas por cromatografia de coluna para obter o composto título.

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)õppm: 8,04 - 8,08 (m,1 H), 7,66 -7,7 (m,1 H), 4,26 -4,26 (d,2H), 2,30 (s,3H).

Etapa 3: Preparação da 1 - (2 - fluoro - 3 - metóxi - 6 - nitrofenil) propano

- 2 - ona [0102]Em um frasco com fundo redondo de 100 mL, 2 g de 1 - (2,3 -difluoro

- 6 - nitrofenil) propano - 2 - ona, preparado da etapa 2, foram adicionados a uma solução de metóxido de sódio em metanol (40 mL), em que a solução de metóxido de sódio em metanol foi preparada pela adição lenta de 2,27 g de Na ao metanol com agitação em banho de gelo e agitação por 1 h à temperatura de 50°C após a adição. A mistura reagiu por 1 h à temperatura ambiente antes do término da reação, e foi resfriada pela adição de 1 mL de água e extraída com diclorometano. As camadas orgânicas foram lavadas com salmoura saturada, secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas, concentradas e purificadas por cromatografia de coluna para obter o composto título.

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆) δ ppm: 8,04 - 8,07 (m,1H), 7,31 -7,35 (m,1H), 4,20-4,21 (d, 2H), 3,98 (s,3H), 2,28 (s,3H).

Etapa 4: Preparação do 2 - metil - 4 - fluoro - 5 - metóxi - 1H - indol [0103]Em um frasco com fundo redondo de 100 mL, 1,9 g de 1 - (2 - fluoro

- 3 - metóxi - 6 - nitrofenil) propano - 2 - ona, preparado da etapa 3, foram adicionados a 15 mL de metanol e dissolvidos, e 190 mg de paládio em carbono foram adicionados. A mistura reagiu por 36 h à temperatura ambiente, e então a reação foi interrompida. A mistura foi filtrada e concentrada para obter o composto título.

¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆) δ ppm: 11,01 (br,1H), 6,99 -7,01 (d,1H), 6,853 (m,1 H), 6,10 - 6,11 (t,1 H), 3,79 (s,3H), 2,35(s,3H).

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Etapa 5: Preparação de 1,2 - dimetil - 4 - fluoro - 5 - metóxi - 1H - indol [0104]Em um frasco com fundo redondo de 100 mL, 950 mg de 2 - metil - 4

- fluoro - 5 - metóxi - 1H - indol, preparado da etapa 4, foram dissolvidos em 6 mL de tetraidrofurano, e 87,2 mg de hidreto foram adicionados lentamente à temperatura de 0°C. após o término da adição, a solução foi mantida em agitação por 30 minutos, e 0,14 mL de iodometano foram adicionados lentamente à temperatura de 0°C. A mistura reagiu por 1 h antes do término da reação, então foi resfriada pela adição de água lentamente à temperatura de 0°C, extraída com acetato de etila, lavada com salmoura saturada, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada, concentrada e purificada por cromatografia de coluna para obter o composto título.

Etapa 6: Preparação de 1,2 - dimetil - 4 - fluoro - 5 - hidróxi - 1H - indol [0105]Em um frasco com fundo redondo de 100 mL, 210 mg de 1,2 - dimetil

- 4 - fluoro - 5 - metóxi - 1H - indol, preparado da etapa 5, foram dissolvidos em 4 mL de diclorometano anidro, e 0,2 mL de BBr₃ foram adicionados lentamente à temperatura de -70°C. A reação foi mantida por 2 h à temperatura de -70°C antes de sua finalização. A solução da reação foi colocada lentamente em água com gelo, e o diclorometano foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi filtrado, e a massa do filtro foi dissolvida em metanol, e concentrada para obter o composto título.

¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆) δ: 8,82 (s,1 H), 6,97 - 6,99 (d,1 H), 6,68 - 6,72 (t,1 H), 8,12 (s, 1H), 3,59 (s,3H), 2,35 (s,3H).

Etapa 7: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - ((((S) - ((4 - ffluoro - 1,2 dimetil - 1H - indol - 5 - il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [0106]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 1,2 - dimetil - 4 - fluoro - 5 - hidróxi - 1H - indol preparado da

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62/89 etapa 6, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropilico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆) 0:11,48 (s,1H), 7,52 - 7,54 (d,1H), 7,08 - 7,19 (m,2H), 6,29 (s,1 H), 5,86 - 6,08 (m,3H), 5,47 -5,49 (d,1 H), 4,84 - 4,87 (t,1 H), 4,24 4,36 (m,2H), 3,77 -3,86 (m,3H), 3,65 (s,3H), 2,40 (s,3H), 1,21 - 1,27 (m,6H), 1,14 1,16 (m,6H).

LC -MS m/z: [M+H]⁺ = 615.

Exemplo 34: éster isopropilico do ácido (2S) - 2 - ((((6- fluoro - 3 metilbenzo [d] isoxazol - 5 - il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

Etapa 1: Preparação do 3 - fluoro - 4 - metoxibenzaldeído [0107]Em um frasco com fundo redondo de 100 mL, 1,3 mL de 3,4 difluorobenzaldeído foram dissolvidos em 30 mL de metanol, e 2,2 g de metóxido de sódio foram adicionados lentamente à temperatura ambiente. A mistura reagiu por 12 h antes da reação ser finalizada e resfriada pela adição de 3 mL de água. O metanol foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi extraído com diclorometano. As fases orgânicas foram coletadas, lavadas com salmoura saturada, secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas, concentradas e purificadas por cromatografia de coluna para obter o composto título.

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)õppm: 9,87 - 9,88 (d,1H), 7,81 -7,82 (m,1H),

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7,79 (m,1 Η), 7,40 - 7,42 (t,1 Η), 3,96 (s,3H).

Etapa 2: Preparação do (3 - fluoro - 4 - metoxifenil) formato [0108]Em um frasco com fundo redondo de 100 mL, 2,5 g de 3 - fluoro - 4 metoxibenzaldeído preparado da etapa 1, foram dissolvidos em 20 mL de diclorometano anidro, e 4,7 g do ácido m - cloroperbenzóico foram adicionados. A mistura reagiu por 4 h à temperatura de 50°C antes do final da reação. A mistura foi diluída com 30 mL de diclorometano, lavada com água, salmoura, seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentrada para obter o composto título, que foi utilizado na próxima etapa.

Etapa 3: Preparação do 3 - fluoro - 4 - metoxifenol [0109]Em um frasco com fundo redondo de 100 mL, 2,4 g de (3 - fluoro - 4 - metoxifenil) formato preparado da etapa 2 foram adicionados, e 10 mL de solução de hidróxido de sódio 5% e 20 mL de metanol foram adicionados. A mistura reagiu por 1 h à temperatura ambiente antes do término da reação. O ácido clorídrico 2N foi adicionado para ajustar o pH para cerca de 5, e o metanol foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi extraído com acetato de etila, e lavado com água e salmoura saturada. As fases orgânicas foram coletadas, secas sobre sulfato de sódio anidro, filtradas, concentradas e purificadas por cromatografia de coluna para obter o composto título.

¹HNMR(400MHz,DMSQ-d₆)õppm: 9,36 (s,1H), 6,93 -6,98 (m,1H) , 6,59 6,62 (m,1 H), 6,50 - 6,51 (m,1 H), 3,73 (s, 3H).

Etapa 4: Preparação de (3 - fluoro - 4 - metoxifenil) acetato [0110]A quantidade de 1,8 g de 3 - fluoro - 4 - metoxifenol preparada da etapa 3 foi adicionada a um frasco de fundo redondo de 100 mL e dissolvido pela adição de 25 mL de diclorometano. O volume de 1 mL de cloreto de acetila e de 1,9 mL de trietilamina foram adicionados em um banho de gelo, e a mistura reagiu por 10 minutos antes do término da reação. Quarenta militros (40 mL) de éter dietílico

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64/89 foram adicionados para produzir um sólido amarelo, com adição de 30 mL de éter dietílico. A solução foi filtrada, e o filtrado foi seco por evaporação rotatória para produzir o composto título, que foi utilizado diretamente na próxima etapa.

Etapa 5: Preparação de 1 - (4 - fluoro - 2 - hidróxi - 5 - metoxifenil) etanona [0111]A quantidade de 2 g de (3 - fluoro - 4 - metoxifenil) acetato preparado da etapa 4 foi adicionada a um frasco de fundo redondo de 100 mL, e 6,5 mL de ácido trifluorometanosulfônico foram adicionados lentamente à temperatura de 0°C. A mistura foi agitada por mais 5 minutos, e reagiu por 75 minutos à temperatura de 70°C antes do final da reação. A mistura foi resfriada para a temperatura de 0°C, e 20 mL de água com gelo foram adicionados. A solução da reação foi filtrada e a massa do filtro foi lavada com água. A massa foi coletada, e seca em vácuo para produzir o composto título.

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)õppm:11,95 - 11,95 (d,1H), 7,51 -7,54 (d,1H), 6,89 - 6,92 (d,1 H), 3,85 (s,3H), 2,65 (s,3H).

LC-MS m/z: [M+H]⁺=185.

Etapa 6: Preparação de (E) - 1 - (4 - fluoro - 2 - hidróxi - 5 - metoxifenil) etil cetoxima [0112]A quantidade de 2,4 g de 1 - (4 - fluoro - 2 - hidróxi - 5 - metoxifenil) etanona preparada da etapa 5 e de 1,08 g de cloridrato de hidroxilamina foram adicionadas a um frasco de fundo redondo de 50 mL, e dissolvidas pela adição de 15 mL de etanol, e 0,6 g de hidróxido de sódio foram lentamente adicionados à temperatura de 50°C. Após o final da adição, a mistura foi submetida a refluxo por cerca de 1h antes do término da reação. A solução da reação foi vigorosamente agitada à temperatura de 0-4°C, e 20 mL de água foram adicionados. A solução da reação foi filtrada e a massa do filtro foi lavada com água. A solução da reação foi filtrada, e a massa foi lavada com água fria, e seca em vácuo para produzir o

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65/89 composto título.

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)õppm:11,53 (s,1H),11,49 (s,1H), 7,14 -7,17 (d,1 H), 6,75 - 6,782 (d,1 H), 3,81 (s,3H), 2,23 (s,3H).

LC - MS m/z: [M+H]⁺ = 200.

Etapa 7: Preparação do 6 - fluoro - 5 - metóxi - 3 - metilbenzo [d] isoxazol [0113]800 mg de (E) - 1 - (4 - fluoro - 2 - hidróxi - 5 - metoxifenil) etil cetoxima preparada da etapa 6 e 332 mg de carbonato de potássio foram adicionados a um frasco de fundo redondo de 25 mL. O volume de 5,8 mL de N metilpirrolidona (NMP) e 0,4 mL de anidrido acético foram adicionados. A mistura reagiu por 3 horas, à temperatura de 120°C, sob proteção de nitrogênio antes do término da reação. A solução da reação foi filtrada, e a massa do filtro foi dissolvida com diclorometanto, e seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e concentração para produzir o composto título.

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)õ ppm: 7,73 - 7,76 (d,1H), 7,55 -7,57 (d,1H), 3,39 (s,3H), 2,53 (s,3H).

LC-MS m/z: [M+H]⁺=182.

Etapa 8: Preparação do 3 - metil - 5 - hidróxi - 6 - fluoro - benzo [d] isoxazol [0114]400 mg de 6 - fluoro - 5 - metóxi - 3 - metilbenzo [d] isoxazol, preparado da etapa 7, foram adicionados a um frasco de fundo redondo de 25 mL e dissolvidos pela adição de 6 mL de diclorometano anidro. O volume de 0,5 mL de tribrometo de boro foi adicionado lentamente gota a gota à temperatura de -70°C sob proteção de nitrogênio. Após o final da adição, a mistura reagiu por mais 30 minutos e então a reação foi terminada. A solução da reação foi colocada em gelo triturado, e diclorometano foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi filtrado, e purificado por cromatografia de coluna para produzir o composto título.

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)õppm: 10,11 (s,1H), 7,64 -7,67 (d,1H), 7,21 Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 79/113

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7,23(d,1H), 2,50(s,3H).

LC-MS m/z: [M+H]⁺=168.

Etapa 9: Preparação do éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - ((((6 - fluoro 3 - metilbenzo [d] isoxazol - 5 - il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [0115]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 3 - metil - 5 - hidróxi - 6 - fluoro - benzo [d] isoxazol, preparado da etapa 8, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)õppm: 11, 53 (s,1H), 7,86 (m,2H), 7,57 (s,1H), 6,28 - 6,32 (m,1 H), 5,91 (m,2H), 5,56 - 5,602 (m,1 H), 4,82 -4,86 (m,1 H), 4,31 - 4,42 (m,2H), 4,01 - 4,04 (m,1 H), 3,80 -3,85 (m,2H), 2,52 (s,3H),1,22 - 1,29 (m,6H), 1,121,15 (m,6H).

LC - MS m/z: [M+H]⁺ = 603.

Exemplo 35: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - ((((6- fluorobenzo [c] [1,2,5] tiadiazol - 5 - il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

Etapa 1: Preparação de 4 - fluoro - 5 - metóxi - 2 - nitroanilina [0116]A quantidade de 3,4 g de 2 - amino - 4,5 - difluoronitrobenzeno foi

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67/89 adicionada a um frasco de fundo redondo de 100 mL e dissolvida pela adição de MeOH 30 mL. A quantidade de 2,16 g de metóxido de sódio foi lentamente adicionada à temperatura ambiente. A mistura reagiu por mais de 12 h à temperatura ambiente antes do final da reação. A solução da reação foi filtrada e a massa de filtro foi lavada com 10 mL de MeOH frio, e seca a vácuo para produzir o composto título, que foi utilizado diretamente na próxima etapa.

LC-MS m/z [M+H]⁺= 187.

Etapa 2: Preparação de 4 - fluoro - 5 - metóxi - 1,2 - fenilenodiamina [0117]A quantidade de 2,7 g de 4 - fluoro - 5 - metóxi - 2 - nitroanilina preparada da etapa 1 foi adicionada a um frasco de fundo redondo de 100 mL, 30 mL de MeOH foram adicionados, e 270 mg Pd/C foram lentamente adicionados à temperatura ambiente. A mistura reagiu por 3 h à temperatura de 50°C sob atmosfera de hidrogênio antes do término da reação. A solução da reação foi filtrada e a massa do filtro foi lavada com MeOH frio (10 mLX2). O filtrado foi concentrado para produzir o composto título, que foi utilizado diretamente na próxima etapa.

LC-MS m/z: [M+H] = 157.

Etapa 3: Preparação de 5 - fluoro - 6 - metoxibenzo [c] [1,2,5] tiadiazol [0118]A quantidade de 1,5 g de 4 - fluoro - 5 - metóxi - 1,2 fenilenodiamina, preparada da etapa 2, foi adicionada a um frasco de fundo redondo de 100 mL e dissolvida pela adição de 20 mL de piridina. A quantidade de 2,36 g de SOCI2 foi lentamente adicionada à temperatura de 0°C. A mistura reagiu por 12 h à temperatura de 50°C sob proteção de nitrogênio antes do término da reação. A solução da reação foi colocada em 10 g de gelo e extraída com acetato de etila. As camadas orgânicas foram coletadas, lavadas sucessivamente com água, ácido clorídrico diluído frio 0,5 N e salmoura saturada, secas, concentradas e purificadas por cromatografia de coluna para produzir 0 composto título.

¹H NMR(400MHz,DMSO - d₆)õ ppm: 7,99 - 8,02 (d,1H), 7,65 -7,67 (d,1H),

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68/89

4,02 (s,3H).

LC-MS m/z: [M+H] = 185.

Etapa 4: Preparação de 5 - hidroxi - 6 - fluorobenzo [c] [1,2,5] tiadiazol [0119]A quantidade de 500 mg de 5 - fluoro - 6 - metoxibenzo [c] [1,2,5] tiadiazol, preparado da etapa 3, foi adicionada a um frasco de reação, e 4 mL de solução aquosa de HBr 40% foram adicionados. A mistura reagiu por 12 h à temperatura de 90°C sob condição hermética antes do término da reação. A solução da reação foi resfriada para a temperatura ambiente e filtrada. A massa do filtro foi lavada com água e seca a vácuo para produzir o composto título.

LC-MS m/z: [M+H]⁺= 171.

Etapa 5: Preparação do éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - ((((6 fluorobenzo [c] [1,2,5] tiadiazol- 5 - il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidroxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [0120]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 5 - hidroxi - 6 - fluorobenzo [c] [1,2,5] tiadiazol, preparado da etapa 4, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)õppm: 11,54 - 11,56 (m,1H), 8,08 -8,20 (m,2H), 7,57 (m,1 H), 6,48 - 6,54 (m,1 H), 5,91 -6,10 (m,2H), 5,52 - 5,18 (m,1 H), 4,78 - 4,85 (m,1H), 4,35 - 4,38 (m,2H), 3,81 -4,07 (m,3H),1,16 - 1,30 (m,6H), 1,11 - 1,13 (m,6H).

LC-MS m/z: [M+H]⁺=606.

Exemplo 36: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - ((((4’ - metóxi - [1,1’ bifenil] - 4 il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) il) - 4 - fluoro - 3 - hidroxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino)

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69/89 propanoico

[0121]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - hidróxi - 4’ - metóxi - 1,1’ - bifenila, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(500MHz,DMSO)õ:11,49 (s,1H), 7,61 - 7,55 (m,5H), 7,28 -7,23 (m,2H), 7,01 (d,2H), 6,05 - 6,01 (m,2H), 5,84 -5,82 (m,1 H), 5,57 - 5,55 (m,1 H), 4,88

- 4,84 (m,1 H), 4,41 - 4,37 (m,1 H), 4,27 -4,25 (m,1 H), 4,05 - 4,01 (m,1 H) 3,84 -3,82 (m,2H), 2,333,79 (s,3H) 1,28 - 1,22 (m,6H), 1,18-1,15 (m,6H).

ESI-MS m/z: [M+H]⁺= 636,1.

Exemplo 37: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - ((((4’ - trifluorometil - [1,1’

- bifenil] - 4 - il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H)

Etapa 1: preparação do 4 - hidróxi - 4’ - trifluorometil - [1 ,T - bifenil] [0122]A quantidade de 2g de 4 - iodobenzotrifluoreto e de 1,2 g de ácido phidroxifenil borônico foram adicionadas a um frasco de gargalo único de 100 mL e 2g de carbonato de potássio, 0,26 g de PdCl2(PPh3)2, 30 mL de 1,4 - dioxano e 10 mL de água foram adicionados. A mistura reagiu por 4 horas à temperatura de 70°C sob proteção de nitrogênio antes do término da reação. A mistura da reação foi

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70/89 concentrada e 100 mL de água foram adicionados. A mistura foi extraída com acetato de etila (2X10 mL), seca, filtrada, concentrada e purificada por cromatografia de coluna para produzir o composto título.

Etapa 2: Preparação do éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((((4’ trifluorometil - [1,1’ - bifenil] - 4 il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidroxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [0123]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - hidroxi - 4’ - trifluorometil - [1,1’ - bifenil], preparado da etapa 1, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(500MHz,DMSO)õ:11,49 (s,1H), 7,87 (d,2H), 7,80 (d,2H), 7,76 (d,2H), 7,57 (d,1H), 7,36 (d,2H), 6,11 - 6,01 (m,2H), 5,88 -5,83 (m,1H), 5,60 - 5,55 (m,1H), 4,89 - 4.84 (m,1H), 4,42 -4,39 (m,1H), 4,28 - 4,26 (m,1H), 4,04 - 4,02 (m,1 H), 3,85 - 3,84 (m,2H), 1,28 -1,24 (m,6H), 1,16-1,14 (m,6H).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ = 674.

Exemplo 38: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((4 - tiazol - 4 - il) feniloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 fluoro - 3 - hidroxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

Etapa 1: Preparação de 4 - (tiazol - 4 - il) fenol [0124]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito na etapa 1 do exemplo 37 utilizando o ácido p - hidroxifenil borônico, 4 - bromotiazol,

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71/89 carbonato de potássio e dicloreto de bis (trifenilfosfina) paládio como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,CDCL3-d₆)õppm: 8,65 (s,1H), 7,83 (s,12H), 7,39 (s,1H), 6,90 (d,2H), 5,00 (S,1H).

Etapa 2: Preparação do éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((4 - triazol 4 - il) feniloxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [0125]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - (tiazol - 4 - il) fenol, preparado da etapa 1, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 'desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(500MHz,DMSO)õ:11,48 (s,1H), 9,18 (s,1H), 8,12 (s,1H), 8,00 (d,2H), 7,58 (s,1H), 7,31 (d,2H), 6,08 -6,04 (m,2H), 5,82 (d,1H), 5,57 (m,1H), 4,87 - 4,85 (m,1H,), 4,38 -4,37 (m,1H), 4,27 (m,1H), 4,02 (m,1H), 3,84 - 3,82 (m,2H), 1,28 1,24 (m,6H),1,16 -1,14 (m,6H).

ESI-MS m/z: [M+H]⁺ = 613.

Exemplo 39: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((((4’ - cloro - 2’ - fluoro -[1,1’- bifenil] - 4 il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

Etapa 1: Preparação de 4 - hidróxi - 4’ - cloro - 2’ - fluoro -[1,1’- bifenil] [0126]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito na etapa 1 do exemplo 37 utilizando 2 - fluoro - 4 - cloroiodobenzeno, ácido p

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72/89 hidroxifenil borônico, carbonato de potássio e PdCl2(PPh3)2 como materiais iniciais. ¹HNMR(300MHz,CDCL3-d₆)õppm: 7,43 - 6,83 (m,7H), 4,94 (s,1 H).

Etapa 2: Preparação do éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((((4’ - cloro 2’ - fluoro - [1,1’ - bifenil] 4 - il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [0127]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - hidróxi - 4’ - cloro - 2’ - fluoro - [1 ,T - bifenil], preparado da etapa 1, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(500MHz,DMSO)õ:11,48 (s,1H), 7,56 - 7,52 (m,5H), 7,39 -7,30 (m,3H), 6,11 - 6,01 (m,2H), 5,86 - 5,82 (m,1H), 5,56 -5,54 (m,1H), 4,87 - 4,85 (m,1H), 4,42 - 4,39 (m,1H), 4,28 -4,26 (m,1H,), 4,04 - 4,02 (m,1H) 3,85 - 3,84 (m,2H),1,28 - 1,24 (m,6H),1,16 -1,14 (m,6H).

ESI -MS m/z: [M+Na]⁺= 680.

Exemplo 40: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((((3’ - fluoro - 4’ - metil - [1 ,T - bifenil] - 4 il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

HO

À o ^NH^oEtapa 1: Preparação de 4 - hidróxi - 3’ - fluoro - 4’ - metil - [1 ,T - bifenil] [0128]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito na etapa 1 do exemplo 37 utilizando 3 - fluoro - 4 - metil - iodobenzeno, ácido p

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73/89 hidroxifenil borônico, carbonato de potássio e PdCl2(PPh3)2 como materiais iniciais.

¹HNMR(300MHz,CDCL3-d₆)õppm: 7,45 -6,87 (m,7H), 4,77 (s,1H), 2,31 (s,3H).

Etapa 2: Preparação do éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((((3’ - fluoro - 4’ - metil - [1,1’ - bifenil] 4 - il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [0129]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - hidróxi - 3’ - fluoro - 4’ - metil -[1,1’- bifenil], preparado da etapa 1, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(500MHz,DMSO)õ:11,48 (s,1 H), 7,68 (d,2H), 7,57 (d,1 H), 7,44 - 7,29 (m,5H) 6,08 - 6,03 (m,2H), 5,85 - 5,82 (m,1H), 5,56 -5,54 (m,1H), 4,88 - 4,83 (m,1H), 4,42 - 4,38 (m,1H,), 4,28 -4,26 (m,1H), 4,04 - 4,02 (m,1H), 3,84 - 3,82 (m,2H), 2,26 (d,3H), 1,28 -1,23 (m,6H), 1,19-1,14 (m,6H).

ESI-MS m/z: [M+Na]⁺=660.

Exemplo 41: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((((4’ - fluoro - 3’ - metil -[1,1’- bifenil] - 4 il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

Etapa 1: Preparação de 4 - hidróxi - 4’ - fluoro - 3’ - metil -[1,1’- bifenil] [0130]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito na etapa 1 do exemplo 37 utilizando 4 - fluoro - 3 - metil - iodobenzeno, ácido p

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74/89 hidroxifenil borônico, carbonato de potássio e PdCl2(PPh3)2 como materiais iniciais.

¹H NMR (300 MHz, CDCL3-OQ δ ppm: 7,52 - 7,42 (m,2H), 7,34 -7,26 (m,2H), 7,06 - 6,87 (m,3H), 4,67 (s,1 H), 2,32 (s,3H).

Etapa 2: preparação do éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((((4’ - fluoro 3’ - metil - [1,1’ - bifenil] - 4 il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico [0131]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - hidróxi - 4’ - fluoro - 3’ - metil - [1,1’ - bifenil], preparado da etapa 1, oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi - 2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(500MHz,DMSO)õ:11,50 (s,1H), 7,65 - 7,55 (m,4H), 7,47 -7,45 (m,1H), 7,30 - 7,17 (m,3H), 6,11 - 5,99 (m,2H,), 5,85 -5,83 (m,1H), 5,57 - 5,54 (m,1H), 4,90 - 4,84 (m,1H,), 4,38 -4,36 (m,1H), 4,27 - 4,25 (m,1H,), 4,02 - 3,99 (m,1H,), 3,87-3,80 (m,2H), 2,30 (s,3H), 1,29-1,21 (m,6H), 1,16-1,14 (m,6H).

ESI - MS m/z: [M+Na]⁺ = 660.

Exemplo 42: éster isopropílico do ácido (2S) - 2 - (((((4’ - metil - [1,1’ bifenil] - 4 il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

HO f [0132]O composto título foi preparado de acordo com o método descrito no exemplo 1 utilizando 4 - hidróxi - 4’ - metil - [1,1’ - bifenil], oxicloreto de fósforo, cloridrato de éster isopropílico de L - alanina, pentafluorofenol e (2'R) - 2 '- desoxi Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 88/113

75/89

2' - fluoro - 2' - metiluridina como materiais iniciais.

¹HNMR(500MHz,DMSO)õ:11,49 (s,1H), 7,58 (d,1H,), 7,53 -7,51 (m,4H), 7,29

- 7,25 (m,4H), 6,10 - 6,02 (m,2H,), 5,88 -5,82 (m,1H,), 5,60 - 5,55 (m,1H), 4,88 4,84 (m,1H,), 4,41 -4,38 (m,1H), 4,27 (m,1H,), 4,04 - 4,02 (m,1H) 3,84 - 3,82 (m,2H), 2,33 (s,3H), 1,28 -1,23 (m,6H), 1,18-1,14 (m,6H).

ESI - MS m/z: [M+H]⁺ = 620.

Exemplo 43: éster isopropilico do ácido (2S) - 2 - (((((4 - fluoro - 1,2- dimetil

- 1H - indol - 5 - il) oxi) (((2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidropirimidin - 1 (2H) - il) - 4 - fluoro - 3 - hidróxi - 4 - metiltetraidrofurano - 2 - il) metóxi) fosforil) amino) propanoico

[0133]O composto título foi preparado de acordo com o método similar ao descrito no exemplo 33.

¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)õ: 11,49 (s,1H), 7,55 - 7,57 (d,1H), 7,07 -7,19 (m,2H), 6,27 (s,1 H), 5,91 - 6,11 (m,3H), 5,14 - 5,56 (d,1 H), 4,82 - 4,88 (t,1 H), 4,41 4,45 (m,1 H), 4,24 - 4,28 (m,1 H), 4,04 -4,06 (m,1 H), 3,74 - 3,82 (m,2H), 3,647 (s,3H), 2,39 (s,3H), 1,20 -1,25 (m,6H), 1,14-1,16 (m,6H).

LC-MS m/z: [M+H]⁺= 615.

Atividade farmacológica e farmacocinética:

Exemplo experimental 1: ensaio de atividade antiviral dos compostos da presente invenção no sistema replicon do HCV

1. Materiais do experimento

1.1 Reagentes:

Tabela 1: Lista de reagentes

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76/89

Nome dos reagentes	Fornecedor
Meio DMEM	Invitrogen
Soro fetal bovino (FBS)	Gibco
L-Glutamina	Invitrogen
Solução de penicilina estreptomicina	Invitrogen
DPBS/Modificado	Hyclone
Tripsina/EDTA	Invitrogen
Dimetil sulfóxido (DMSO)	Sigma
Bright-GIo™	Promega
Reagente CelITiter-Fluor™	Promega

1.2 Linhagens de células Huh7 1 b:

[0134]A linhagem de células Huh7 1b, que foi fornecida pela WuXi AppTec Co., Ltd. em Shanghai, apresentava um replicon do HCV 1b com um repórter da Luciferase (Luc) estável. Foi elaborado pela clonagem do gene da proteína não estrutural do HCV, neo (resistência a G418) e gene do repórter da luciferase no vetor pBR através da tecnologia de recombinação genética. Então, o vetor que possui o replicon do HCV foi transfectado para células Huh7, e as células de Huh7 transfectadas foram avaliadas com relação à resistência a G418. O replicon do HCV foi replicado, e a proteína e luciferase relacionadas foram expressas em células de Huh7. O modelo de células foi utilizado para pesquisa in vitro dos compostos antiHCV. A atividade anti-HCV dos compostos foi medida pela detecção do nível da expressão da luciferase. Ver Lohmann V, et al. 1999. Replication of subgenomic hepatitis C virus RNAs iin a hepatoma cell line. Science. 285 (5424): 110-113.

1.3 Controle positivo:

[0135]A droga controle utilizada neste exemplo experimental foi o composto do exemplo 25 em WO 2008/121634 (PCT/US2008/058183), isto é, éster isopropílico do ácido (S) - 2 - {[(2R,3R,4R,5R) - 5 - (2,4 - dioxo - 3,4 - diidro - 2H pirimidin - 1 il) - 4 - fluoro - 3 - hidroxi - 4 - metil - tetraidrofurano - 2 - ilmetóxi] fenóxi - fosforilamino} - propanoico. Este composto foi preparado de acordo com o

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77/89 método descrito em J. Org. Chem, 2011,76, 8311-8319, e identificado por H-NMR e espectrometria de massa.

2. Procedimentos do experimento:

2.1 preparação do composto: adicionar cada um dos compostos listados na tabela 2 em placas com 96 poços utilizando uma Plataforma Automática PCD™ (LabCyte Corporation, USA), com 10 μΜ de cada composto como uma concentração inicial e em duplicata; diluir serialmente cada composto 3X e formulando 10 concentrações com a concentração final do DMSO sendo de 0,5%;

2.2 preparação das células: semeadura das células Huh71b em placas com 96 poços com um colume de 125 pL e 8x10³ células/poço, e incubação em uma temperatura de 37°C, CO2 5% e incubadora por 72 h;

2.3 detecção da atividade celular: adição de 30 μΙ_ por células do reagente CelITiter-Fluor™; incubação em uma temperatura de 37°C, em incubadora de CO2 5% por 1 hora, medindo os valores da fluorescência com um fluorômetro, e utilizando os dados obtidos para cálculo das citotoxicidades dos compostos;

2.4 detecção Bright-GIo: adição de 100 μΙ_ por poço do substrato de Luciferase Bright-Go™, utilizando um sistema de detecção de quimioluminescência EnVision™ (PerkinElmer, USA) para detectar os valores do sinal da fluorescência dentro de 5 minutos, e utilizando os dados obtidos para cálculo das potências dos compostos.

2.5 processamento dos dados: conversão dos dados obtidos para uma porcentagem de viabilidade celular (% da viabilidade) utilizando a seguinte fórmula:

CPD

Viability % =-----x 100 % da viabilidade

ZPE [0136]CPD: valor do sinal de fluorescência do poço que recebeu 0 composto [0137]ZPE (efeito do percentual zero): valor do sinal de fluorescência do poço controle com efeito percentual zero.

[0138]Processando os dados brutos para calcular a porcentagem da inibição

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78/89 (%) utilizando a seguinte fórmula:

CPD - HPF inhibition % =-----------x 100 % da inibição

ZPE - HPE [0139]CPD: valor do sinal de fluorescência do poço que recebeu o composto;

[0140]HPE (efeito de 100%): valor do sinal de fluorescência do poço controle com efeito percentual de 100%.

[0141]ZPE (efeito do percentual zero): valor do sinal de fluorescência do poço controle com efeito percentual zero.

[0142]A porcentagem da inibição foi processada pelo software GraphPad

Prism para obter as curvas correspondentes e valores da ECso. Os dados foram listados na tabela 2.

Tabela 2

No do exemplo	Estrutura	ECso (μΜ)
Controle positivo	o _xjr° °\ /^z '' oc O [ ^x° 1 \ o o	0,1168
Exemplo 1	1 O Av HN, /,° AA*⁰ _,ó^Px° <£V^H ^Ht^ ⁰ o	0,056
Exemplo 2	1 o HN, //° Px__.O. J Γ O Hõ f ⁰	0,1051
Exemplo 3	1 O Av HN„ /,° AV° hô °	0,1232

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79/89

Exemplo 4	I 0 AoA)..- HN. /,° o' ° y^NH zx/\A -- t o u U ^H0	Não detectado
Exemplo 5	AoA o _n VV^o _ ,^P-O^í J/X-o j— _F ^{H0 ρ}	0,061
Exemplo 6	\ b o H Λοί o HN~y ^^,0 f] J AV\A HO* Γ c^N-y-U ^r	Não detectado
Exemplo 7	.. '0 ⁰ V\ \ „ N ,NH λοΑ 0 ,°v Ύ ^HNAo^AAr ° MeO Ó / F \ / HO F MeOOC	Não detectado
Exemplo 8	1 0 ^0^-' ^hnA o /^y° ó °·~Χ^;^Νγ-ΝΗ GS fU F ⁰ JAL 1 1	0,411
Exemplo 9	^Â·' o ₀ V V HN^y Γ -0 / ⁰ \ o^xzy° ho* >	Não detectado
Exemplo 10	°Y^O ^HNV /^/Vn A / ⁰ u_L ⁰ HO* F ⁰ \ O	Não detectado
Exemplo 11	O V A-U o ^H / ^O ' A-^Nx r> ^HN< AVd ⁰ )—ζ HO* p	0,189

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Exemplo 12	ω-ζ °-A o Q Thwy·—/ / V .O o	0,637
Exemplo 13	O M o	Não detectado
Exemplo 14	Γ~Λ. / / \ o }=( * )=° Ot d ° I / °'rX L ° o	0,2231
Exemplo 15	I 0 Av HN. ζθ AN*⁰ d y^NH t ⁰ Γ \|\| 1 HO F	>3,33
Exemplo 16	H₃C )-° P^H3 ^HsC M ,o 0 HN-p' ο^Ζο_Λ /=/ Vo Ho-CXt/ ^=0 N=Z f’ CHs /^~^nh Qs ⁰	3,871
Exemplo 17	H₃C >-0 Ó^H3 ^HaC M p o HN-p' ο^Ζο_Λ /=ú Vo __ y / ηο^,αΑ·ν^/ y=₀ [=( F*'CH₃ -^~^nh Μ \ ^O N<^S	0,2577
Exemplo 18	h₃c Ú~O <P^H3 ^H3^C O o HN-p'' /0 í J fVh₃ A^nh NC	0,3141

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Exemplo 19	h₃c )-o <ch₃ ^HsC λ-Λ ,0 0 HN-p/ /V °> JU ηοΛΛ_Ν-%ο íl ÓCH3/-NH	0,303
Exemplo 20	H3C )-0 £H₃ ^H3^C Μ' O 0 HN-p'' HN^T HO-V^N >=0 te f'ch_3o^~^nh	3,871
Exemplo 21	h₃c >-0 <ch₃ ^H3C M p 0 HN-p/ _F ch_3ó/~^nhh₃c	0,2577
Exemplo 22	h₃c j—0 p^H3 ^H3C M ,0 0 HN-P^ MeOOC-X 0	0,3141
Exemplo 23	h₃c )~O <PH₃ ^HaC M _zo 0 HN-p/ 1 ⁰ °> r/^f ⁰ ηο’/Ι ^N\ _Ng° F ch_3q?-^nh	4,488
Exemplo 24	0 “5 ⁰ V I ft 0 <, / ^0 te	Não detectado

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Exemplo 25	h₃c a₀ <p^h3 ^h3^c 0 0 HN-p' o^/cV O / °v /=\ ηο'Χ V 2=° F 0Η₃θΑ^ΝΗ Ο	Não detectado
Exemplo 27	AV ^ΗΝν^Ρ^ Ο Υ^ΝΗ ^=^{7 Η0} Γ	0,098
Exemplo 28	q ο Η \ λγ η V^N^O ^η7 *^F F	0,123
Exemplo 31	Αν ₀ ην V y__NH / ~ ^Η0Ά	0,102
Exemplo 32	°ν ·~νν AV-θ'^{0 Η0}* f CI	0,068
Exemplo 33	W° Ύ' - οΥν^Ν-Η ^ο\χΑ_Μ ° ο V ........ρ-ο )—4 0 Η i Ô~h ^F u ^F \2_^ν	0,033
Exemplo 36	Αν ΗΝ_Χ ,0 0 Χ^ΝΑο MeOvPVfVo⁷ Lr^NX=Z /=/ /=/ HO* jp»	0,073
Exemplo 38	À ° lí o	0,100

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Exemplo 39	0 z^o^U o ₀ A'V⁰ ΓΑγΓ y^NHhc/H Cl F	0,061
Exemplo 40	O \ JU,··'' /e) ' o On' ΝΗ^'ι Ζ^/Υ^Νν.ΝΗ Γ~ο \ / τ J ρ· ο J 1 ^Η0 F H₃cAD F	0,056
Exemplo 41	ι ο Αν _ HRA W⁰ / ί' * ο HO F	0,050
Exemplo 42	AV ο ₀ η·° ΝΗ ζ^Ζ ^υ>-^Ν^ΝΗ '° \ / ιΓ JI 1 HO F HjCW	0,126
Exemplo 43	°-Ζ Ι-Ζ -π θ''·0=Ο ο=( / ζ—4 1 °	0,069

[0143]Os resultados acima demonstraram que os compostos da presente invenção apresentam habilidade para inibir o vírus HCV eficientemente, e em comparação com o controle positivo, apresentam uma atividade igual ou superior baseada nos valores da ECso.

Exemplo experimental 2: Ensaio da atividade antiviral dos compostos da presente invenção no sistema de HCV infeccioso derivado de cultura celular (HCVcc)

1. Materiais do experimento

1.1 Compostos [0144]O composto de acordo com o exemplo 1 acima foi utilizado neste experimento. O composto foi formulado em um licor mãe 10 mM com DMSO, diluído

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84/89 para 50 nM por meio de cultura completo DMEM, contendo 0,5% de DMSO, seguido por diluição 4X sucessiva, e seis concentrações foram obtidas. O controle positivo foi diluído para 10 μΜ por meio de cultura completo DMEM contendo 0,5% de DMSO, seguido por 4X sucessivamente, e seis concentrações foram obtidas.

1.2 Células [0145]Células Huh 7.5.1, fornecidas pelo Shanghai Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Sciences.

1.3 Virus [0146]Vírus J399EM (genótipo HCV 2A), isto é, uma cepa do mutante do HCV de comprimento total, transfectada com EGFP (proteína fluorescente verde) foi utilizada, apresentando a mesma capacidade que o tipo selvagem JFH-1. A fluorescência da proteína de fusão NS5A-EGFP foi observada na região NS5A. J399EM foi fornecido pelo Shanghai Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Sciences.

1.4 Reagentes

Meio DMEM, obtido da from Invitrogen Corporation, USA;

Soro fetal bovino (FBS), obtido da from Sigma Corporation, USA;

L(+) - Glutamina, obtida da Invitrogen Corporation, USA;

Penicilina-estreptomicina (Pen-Strep), obtida from Invitrogen Corporation, USA;

Solução salina fosfato tamponada (PBS), obtida Hyclone Corporation, USA;

Tripsina, obtida da Invitrogen Corporation, USA;

Sulfóxido de dimetila (DMSO), obtido da Sigma Corporation, USA;

Tampão lise, obtido Promega Corporation, USA;

MTT, obtido da Sigma Corporation, USA.

1.4 Instrumentos

Leitor de microplacas EnVision® MultilabelPlate, obtida da Perkin-Elmer

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Corporation, USA.

2. Procedimentos experimentais

1) Preparação de células Huh 7.5.1: coleta das células Huh7.5.1 em fase logarítmica, resuspensão em meio de cultura completo DMEM, semeadura em placas com 96 poços (7x10³ células/poço), e incubação na temperatura de 37°C, com CO2 5% por 24 h;

2) Infecção viral: resuspensão dos virus J399EM em meio de cultura complete DMEM, adição do sobrenadante do vírus (MOI«0.1) às placas com 96 poços citadas acima, e lavagem com PBS após 8 h de infecção;

3) Tratamento da droga: adição de várias concentrações dos compostos às células Huh.5.1 infectadas por virus J399EM, com cada concentração em duplicata; ajuste do controle com efeito de 0% (ZPE) e 0 grupo controle com efeito de 100% (HPE); substituindo 0 composto com 0 meio de cultura completo DMEM contendo DMSO 0,5% DMSO no grupo ZPE, e utilizando as células não infectadas com vírus do grupo HPE.

4) Incubação das células: incubando as placas com 96 poços em uma incubadora à temperatura de 37°C, CO2 5% por 72 horas;

5) Detecção de atividade anti-HCV: leitura das unidades fluorescents relativas (RFU) de cada poço utilizando leitores de microplaca EnVision® após incubação e cálculo da atividade anti-HCV dos compostos utilizando os dados obtidos de acordo com a seguinte fórmula:

lnibiçâo% = (RFUzpe- RFUcpd) / (RFUzpe - RFUhpe) * 100 em que RFUzpe representa as unidades fluorescents relativas do grupo controle com efeito de 0% e RFUcpd representa as unidades fluorescentes relativas do grupo do composto correspondente, e RFUhpe representa as unidades fluorescentes relativas do grupo controle com efeito de 100%.

6) Detecção da viabilidade celular: adição da solução MTT em cada poço,

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86/89 incubação à temperatura de 37°C, em incubadora com CO2 5% por 4 h, seguido pela adição da solução de MTT dissolvida, com leitura da densidade ótica (OD) de cada poço a 570 nm com leitores de multiplacas após 6 h, calculando a citotoxicidade dos compostos utilizando os dados obtidos de acordo com a seguinte fórmula:

Viabilidade% = ODcpd/ ODzpe χ 100 em que ODzpe representa a densidade ótica do grupo controle com efeito de 0%, e ODcpd representa a densidade ótica do composto correspondente;

7) Processamento dos dados: processando a % de inibição, % de viabilidade através do software Graph Pad Prism Software respectivamente, e obtenção dos valores da metade da concentração eficaz máxima (EC50) e valores da metade da concentração citotóxica máxima (CC50) dos compostos em relaão aos vírus HCVcc GT2a. Os resultados estão listados na tabela 3.

Tabe	a3
N° do exemplo	Estrutura	EC50 (μΜ)	CC50 (μΜ)
Controle positivo	. θ , o ^H \ K/ V^N\^o HN—-fP θ-° ^H°' F	0,173	>10
Exemplo 1	I o A-V HN^ „ AA*⁰ ,o^{z NH} 4 V O ttz) HO ^F o	0,039	>10

[0147]Foi demonstrado a partir da tabela 3 que 0 composto do exemplo 1 da presente invenção apresentou excelente atividade antiviral e menos toxicidade celular em comparação ao controle positivo no sistema HCVcc.

[0148]Além disso, os experimentos da presente invenção também demonstraram que utilizando 0 sistema HCVcc in vitro, os compostos preparados pela presente invenção, tais como os compostos preparados nos exemplos 2, 5, 12,

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16, 18, 28 e 38, apresentaram metade da concentração eficaz máxima (ECso) e metade da concentração citotóxica máxima (CCso) alta em relação aos vírus HCVcc e GT2a, demonstrando boa atividade inibitória e pouca citotoxicidade.

Exemplo experimental 3: Estudos farmacocinéticos dos compostos da presente invenção em ratos SD

1. Materiais experimentais

1.1 Compostos [0149]Neste experimento, o composto do exemplo 1 foi utilizado, e a droga de controle positivo foi a mesma utilizada acima. Cada um dos compostos recebeu carboximetil celulose sódica (CMC) 0,5%, e a mistura foi agitada com vortex para preparar uma suspensão de 10 mg/mL para administração intragástrica.

[0150]A substância GS-461203 padrão foi o metabólito dos compostos testados, e o nome químico foi trifosfato de (2’R) - 2’ - desoxi - 2’ - fluoro - 2’ metiluridina, que foi obtido da TriLiink Bio Technologies Corporation, USA.

1.2 Animais [0151]Ratos machos SD, com 6-8 semanas de idade, pesando 237,0 - 268,4 g, obtidos da Shanhai Super-B&K Laboratory animal Co. Limited.

1.3 Reagentes

Metanol (puro cromatográfico), obtido da Spectrum Corporation, USA;

Acetonitrila (puro cromatográfico), obtida da Spectrum Corporation, USA.

1.4 Equipamento

API 5500 LC-MS, obtido da AB Corporation, USA.

2. Método experimental

1) Administração: divisão dos ratos SD em 4 grupos, com 18 ratos em cada grupo, com administração intragástrica do composto com uma quantidade de 50 mg/kg. Os ratos devem permanecer em jejum por 10-15 h antes da administração intragástrica, e realimentá-los quatro horas após a administração.

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2) Amostragem: com 0,5h, 1h, 2h, 4h, 6h e 12h após a administração, sacrificar os ratos (n=3 em cada ponto do tempo para cada grupo), coletando cerca de 1g do fígado de cada rato, respectivamente, adicionando 3 volumes do metanol pré-resfriado, homogeneizando por 30 s e armazenando o homogenado preparado de fígado à temperatura de 80°C antes da análise.

3) Preparação da curva padrão: retirando uma quantidade apropriada da solução GS-461203, diluir serialmente com metanol para preparar soluções padrões com concentrações de 30, 27, 10, 5, 2, 1, 0,5, 0,2 e 0,1 pg/mL, adicionando paralelamente 10 pL de cada solução padrão a 90 pL de homogenado controle de fígado de rato para preparar curvas padrões da amostra com concentrações de 3000, 2700, 1000, 500, 200, 100, 50, 20 e 10 ng/mL.

4) Processamento da amostra: adicionar 30 pL da amostra do homogenado de fígado ou amostra da curva padrão a 150 pL da solução de acetonitrila contendo o padrão interno (100 ng/mL), agitando com vórtex por 2 minutos, centrifugando por 10 min (6000 revoluções/min), e transferindo o sobrenadante para os frascos da injeção;

5) Análise dos dados da amostra: retirar 5 pL do sobrenadante, e então utilizando UPLC-MS/MS para detectar a concentração do GS-461203 nas amostras; de acordo com os dados obtidos de tempo-concentração da droga, utilizar o modelo não comportamental do software de cálculo farmacocinético WinNonlin 6.2.1 para calcular parâmetros farmacocinéticos do metabólito GS461203 de cada um dos compostos testados. Os resultados estão listados na tabela 4.

Tabela 4

GS-461203	(fígado ng/g)	(hr)	AUCfinal (ng/g*hr)
Controle positivo	753	2,00	5627
Exemplo 1	818	1,00	7106

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89/89 [0152]Foi observado a partir dos dados na tabela 4 que o composto do exemplo 1, de acordo com a presente invenção, apresentou melhor concentração pico no tecido hepático do que o controle positivo, e na área sobre a curva concentração da droga-tempo do metabólito, e apresentou maior nível de exposição in vivo.

[0153]Os resultados acima demonstraram que os compostos da presente invenção apresentam a habilidade para inibir eficientemente o vírus HCV, e comparados ao controle positivo, apresentam efeitos semelhantes ou superiores na ECõo, menos toxicidade para as células hospedeiras, maior CCso e boa segurança. Os compostos da presente invenção apresentam bons resultados no tratamento da infecção por HCV.

[0154]Embora a presente invenção tenha sido descrita em detalhes, deve ser compreendido pelos versados na área, que várias modificações e alterações podem ser realizadas sem se afastar do espírito e escopo da presente invenção. O escopo da presente invenção não está limitado à descrição acima e é definido pelas reivindicações.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1,2,4 - oxadiazolila - (CH2) -, 1,2,3 - oxadiazolila - (CH2) -, 1,3,4 - oxadiazolila (CH2) -, pirimidinila - (CH2) -, pirazinila - (CH2) -, piridazinila - (CH2) -, quinoxalinila (CH2) -, 4H - cromen - 4 - one - (CH2) -, piridila -(CH2) -, tieno [3,2 - b] tienila - (CH2) -, 1H - imidazolila - = -, 1,2,4 -triazolila - = -, 1,2,3 - triazolila - = -, tiazolila = -, 1,2,3 -tiadiazolila - = -, 1,2,4 - tiadiazolila - = -, 1,3,4 - tiadiazolila - = -, oxazolila - = -, 1,2,4 - oxadiazolila - = -, 1,2,3 - oxadiazolila - = -, 1,3,4 oxadiazolila - = -, pirimidinila - = -, pirazinila - = -, piridazinila - = -, quinoxalinila - = -, 4H - cromen - 4 - ona -, piridila - = -, tieno [3,2 - b] tienila - = -, 1H - imidazolila - = -, 1,2,4 - triazolila - = -, 1,2,3 - triazolila - = , tiazolila - = -, 1,2,3 - tiadiazolila - = -, 1,2,4 - tiadiazolila - = -, 1,3,4 tiadiazolila - = -, oxazolila - = -, 1,2,4 - oxadiazolila - = -, 1,2,3 - oxadiazolila = -, 1,3,4 - oxadiazolila - = -, pirimidinila - = -, pirazinila - = -, piridazinila = -, quinoxalinila - = -, 4H -cromen - 4 - ona - = -, piridila - = -, tieno [3,2 b] tienila - = -, em que cada dos grupos heterociclila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcoxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcoxi C14 halogenado, amino, N(alquila 61-4)2 e alquila C1-4 NHCO; e

c) metila - OC(O) - = -.

1. Composto de fosforamidato de nucleosídeo, CARACTERIZADO pelo fato de que apresenta a seguinte fórmula geral I,

r₆ ou um estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, em que (1) Ri é selecionado de alquila Ci-e;

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, CARACTERIZADO pelo fato de que R1 é selecionado de alquila C1-3, R2 é F, R3 é selecionado de OH, H, e metóxi, R4 é selecionado de H e alquila C1-6, e Rs é selecionado de alquila C1-6.

2/9 com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-6, halogênio, nitro, alcóxi C1-6, ciano, alquenila C2-6, alquinila C2-6, acilamino C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C16 halogenado, amino, N (alquila 0-6)2 e alquila C1-6 NHCO;

c) alquila C1-6 - O - C(O) - alquenileno C2-6 - e alquila C1-6 - 0 -C(O) alquenileno C2-6 - 0(0) em que a alquila C1-6 é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-6, halogênio, nitro, alcóxi C1-6, ciano, alquenila C2-6, alquinila C2-6, acilamino C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6 halogenado, amino, N (alquila Ci-e)2 e alquila C1-6 NHCO; e (7) R7 é selecionado de H, halogênio, alquila C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6, alcóxi C1-6 halogenado, NO2, CN, alquila C1-6- NH - CO hidróxi, mono C1-6 alquilamino, di - C1-6 alquilamino, alquila C1-6- S alquenila C2-6- S alquinila C2-6- S alquila C1-6- SO alquenila C2-6- SO alquinila - C2-6-SO alquila - C1-6SO2 alquenila C2-6- SO2 alquinila - C2-6- SO2-, alquila C1-6- OSO2 alquenila C26- OSO2 alquinila C2-6- OSO2

(2) R₂ é selecionado de halogênio;

3/9 cinco ou seis membros juntos formam um anel benzo com cinco membros ou anel benzo com seis membros;

b) heterociclila - Y em que Y está ausente ou é selecionado de alquileno C1-4, alquenileno C2-4, alquinileno C2-4, alquenileno C2-4- (CO) alquinileno C2-4(CO) -O-, -S-, -NH- e - N (alquila C1-4)-, ou a heterociclila juntamente com Y ligado a esta forma um bieterociclo, e em que a heterociclila é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C14 halogenado, amino, N (alquila Ci-4)₂ e alquila C1-4 NHCO; e

c) alquila C1-4 - O - C(O) - alquenileno C2-4 - e alquila C1-4 - O -C(O) alquenileno C2-4 - C(O) -, em que alquila C1-4 é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4 halogenado, amino, N (alquila Ci-4)₂ e alquila C1-4 NHCO.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, ou estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, CARACTERIZADO pelo fato de que Re é selecionado de

a) fenila - Y em que Y está ausente ou selecionado de alquileno C1-4, alquenileno C2-4, alquinileno C2-4, alquenileno C2-4- (CO) alquinileno C2-4- (CO) 0-, -S-, -NH- e - N(alquila C1-4)-, e em que a fenila é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4 halogenado, amino, N(alquila Ci-4)2 e alquila C1-4 NHCO, ou a fenila e um anel com

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(3) Rs é selecionado de OH, H, e alcóxi C1-4;

4/9

Υ -, oxazolila - Υ -, 1,2,4 - oxadiazolila - Υ -, 1,2,3 - oxadiazolila - Υ -, 1,3,4 oxadiazolila - Υ -, pirimidinila - Υ -, pirazinila - Υ -, piridazinila - Υ -, quinoxalinila - Υ -, 4Η - cromen - 4 - ona - Υ -, piridila - Υ -, tienila - Υ -, tieno [3,2 - b] tienila - Υ -, em que Υ está ausente ou selecionado de metileno, etileno, etenileno, etinileno, etenileno - (CO)-, etinileno - (CO) -, -O-, -S-, -NH- e - NCH2 -, em que cada dos grupos de heterociclila é opcionalmente substituído com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4 halogenado, amino, N(alquila Ci-4)₂ e alquila C1-4 NHCO; e

c) metila - OC(O) - =-, etila - OC(O) - = -, propila - OC(O) - = isopropila - OC(O) - = -, butila - OC(O) - = -, isobutila - OC(O) - =-, e t-butilaOC(O) - = -.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 3, ou estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, CARACTERIZADO pelo fato de que Re é selecionado de:

a) fenila, fenila- C1-3 alquileno -, fenila- C2-3 alquenileno -, fenila- C2-3 alquinileno fenila - O -, fenila - S-, fenila - NH fenila - N (alquila C1-3) -, fenila etenileno - (CO)- e naftila - etenileno - (CO) -, em que a fenila é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4 halogenado, amino, N(alquila Ci-4)₂ e alquila C1-4 NHCO, ou a fenila e um grupo selecionado de fenila, oxazolila, pirazinila e pirrolila juntos formam uma naftila, benzoxazolila, benzo [b] pirazinila ou benzo [b] pirrolila;

b) 1H - imidazolila - Y -, 1,2,4 - triazolila - Y -, 1,2,3 - triazolila - Y tiazolila - Y -, 1,2,3 - tiadiazolila - Y -, 1,2,4 - tiadiazolila - Y -, 1,3,4 - tiadiazolila

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 107/113

(4) R4 é selecionado de H, alquila C1-6, e alquila C1-6 halogenada;

5/9

5. Composto, de acordo com a reivindicação 4, ou estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, CARACTERIZADO pelo fato de que Re é selecionado de:

a) fenila, fenila - (CH2) -, fenila - = -, fenila - = - C(O) - e fenila - = -, em que a fenila é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-4, halogênio, nitro, alcóxi C1-4, ciano, alquenila C2-4, alquinila C2-4, acilamino C1-4, alquila C1-4 halogenada, alcóxi C1-4 halogenado, amino, N(alquila C14)2 e alquila C1-4 NHCO, ou a fenila e um grupo selecionado de oxazolila, pirazinila e pirrolila juntos formam uma benzoxazolila, benzo [b] pirazinila ou benzo [b] pirrolila;

b) 1H - imidazolila, 1,2,4 - triazolila, 1,2,3 - triazolila, tiazolila, 1,2,3 tiadiazolila, 1,2,4 - tiadiazolila, 1,3,4 - tiadiazolila, oxazolila, 1,2,4 - oxadiazolila, 1,2,3 -oxadiazolila, 1,3,4 - oxadiazolila, pirimidinila, pirazinila, piridazinila, quinoxalinila, 4H - cromen - 4 -ona, piridila, tieno [3,2 - b] tienila, 1H - imidazolila - (CH2) -, 1,2,4 triazolila - (CH2) -, 1,2,3 - triazolila - (CH2) -, tiazolila - (CH2) -, 1,2,3 - tiadiazolila (CH2) -, 1,2,4 - tiadiazolila - (CH2) -, 1,3,4 - tiadiazolila - (CH2) -, oxazolila - (CH2) -,

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 108/113

(5) Rs é selecionado de alquila C1-6, e alquila C1-6 halogenada;

6/9 benzila.

6. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, ou estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, CARACTERIZADO pelo fato de que o grupo Re “fenila - Y-” ou “heterociclila - Y-” e o grupo oxigênio, ambos os quais estão ligados ao anel de benzeno, estão na posição para- ou meta- entre si.

(6) Re é selecionado das seguintes frações:

a) fenila - Y -, em que -Y- está ausente ou selecionado de alquileno C1-6, alquenileno C2-6, alquinileno C2-6, alquenileno C2-6- (CO) -, alquinileno C2-6- (CO) -, O-, -S-, -NH- e - N(alquila Ci-e)-, e em que a fenila é opcionalmente substituída com um ou mais grupos selecionados de alquila C1-6, halogênio, nitro, alcóxi C1-6, ciano, alquenila C2-6, alquinila C2-6, acilamino C1-6, alquila C1-6 halogenada, alcóxi C1-6 halogenado, amino, N(alquila Ci-e)2 e alquila C1-6 NHCO, ou a fenila e um anel com cinco ou seis membros juntos formam um anel benzo com cinco membros ou anel benzo com seis membros;

b) heterociclila - Y -, em que -Y- está ausente ou selecionado de alquileno C1-6, alquenileno C2-6, alquinileno C2-6, alquenileno C2-6- (CO) -, alquinileno C2-6 (CO) -, -O-, -S-, -NH- e - N (alquila Ci-e)-, ou a heterociclila juntamente com Y ligado a esta forma um bieterociclo, e em que a heterociclila é opcionalmente substituída

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 105/113

7/9

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 111/113

7. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, ou estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, CARACTERIZADO pelo fato de que R1 é CH3, R2 é F, R3 é OH, R4 é CH3 e Rs é isopropila.

8/9

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 112/113

8. Composto, de acordo com a reivindicação 7, ou estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, CARACTERIZADO pelo fato de que Re é fenila ou

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 109/113

9/9

9. Composto, de acordo com a reivindicação 1, ou estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste, CARACTERIZADO pelo fato de que o composto é selecionado dentre

Petição 870190122576, de 25/11/2019, pág. 110/113

10. Composição farmacêutica, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende o composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste e um veículo farmaceuticamente aceitável.

11. Uso do composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou estereoisômero, sal, hidrato, solvato ou cristal deste ou da composição conforme definida na reivindicação 10, CARACTERIZADO pelo fato de que é na fabricação de um medicamento para tratamento de infecção viral da família Flaviviridae, especialmente infecção pelo vírus da hepatite C.