BR112014018355B1 - Composto inibidor de quinase reguladora de sinal de apoptose, composição farmacêutica compreendendo o referido composto, uso e compostos intermediários do mesmo - Google Patents

Composto inibidor de quinase reguladora de sinal de apoptose, composição farmacêutica compreendendo o referido composto, uso e compostos intermediários do mesmo Download PDF

Info

Publication number
BR112014018355B1
BR112014018355B1 BR112014018355-4A BR112014018355A BR112014018355B1 BR 112014018355 B1 BR112014018355 B1 BR 112014018355B1 BR 112014018355 A BR112014018355 A BR 112014018355A BR 112014018355 B1 BR112014018355 B1 BR 112014018355B1
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
compound
pharmaceutical composition
formula
composition according
kidney disease
Prior art date
Application number
BR112014018355-4A
Other languages
English (en)
Other versions
BR112014018355A2 (pt
BR112014018355A8 (pt
Inventor
Gregory Notte
Original Assignee
Gilead Sciences, Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Gilead Sciences, Inc filed Critical Gilead Sciences, Inc
Publication of BR112014018355A2 publication Critical patent/BR112014018355A2/pt
Publication of BR112014018355A8 publication Critical patent/BR112014018355A8/pt
Publication of BR112014018355B1 publication Critical patent/BR112014018355B1/pt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4436—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a heterocyclic ring having sulfur as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/04—Drugs for skeletal disorders for non-specific disorders of the connective tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/56—Amides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/56—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

apoptose reguladora de sinal de inibidor de quinase. a presente invenção refere-se a um composto de fórmula (i): o composto tem uma atividade de inibição de quinase apoptose reguladora de sinal ("ask 1"), e, assim, é útil no tratamento de doenças, tais como a doença renal, a nefropatia diabética e a fibrose renal.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO
[001] A presente invenção se relaciona com um novo composto para uso no tratamento de doenças mediadas por ASK1. A invenção também se refere à sua preparação e a composições farmacêuticas contendo o referido novo composto.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
[002] Quinase 1 reguladora de sinal de apoptose (ASK1) é um membro da família de proteínas quinase quinase quinase (“MAP3K”) ativada por mitógeno que ativa a quinase proteica N-terminal c-Jun (“JNK”) e a quinase MAP p38 (Ichijo, H., Nishida, E., Irie, K., Dijke, P. T., Saitoh, M., Moriguchi, Y., Matsumoto, K., Miyazono, K., e Gotoh, Y. (1997) Science, 275, 90-94). ASK1 é ativada por uma variedade de estímulos incluindo estresse oxidativo, espécies reativas de oxigênio (ROS), LPS, TNF-α, FasL, estresse de ER e concentrações aumentadas de cálcio intracelular (Hattori, K., Naguro, I., Runchel, C., e Ichijo, H. (2009) Cell Comm. Signal. 7:1-10; Takeda, K., Noguchi, T., Naguro, I., e Ichijo, H. (2007) Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 48: 1-8.27; Nagai, H., Noguchi, T., Takeda, K., e Ichijo, I, (2007) J. Biochem. Mol. Biol. 40:1-6). Fosforilação da proteína ASK1 pode resultar em apoptose ou em outras respostas celulares dependendo do tipo celular. Foi relatado que ativação e sinalização de ASK1 desempenham um importante papel em um amplo grupo de doenças incluindo distúrbios neurodegenerativos, cardiovasculares, inflamatórios, autoimunes e metabólicos. Além disso, ASK1 foi implicada em mediação de lesão de órgãos após isquemia e reperfusão do coração, do cérebro e dos rins (Watanabe et al. (2005) BBRC 333, 562-567; Zhang et al. (2003) Life Sci 74-37-43; Terada et al. (2007) BBRC 364: 1043-49).
[003] Foi relatado que ROS estão associadas a aumentos na produção de citocinas inflamatórias, fibrose, apoptose e necrose renal (Singh DK, Winocour P, Farrington K. Oxidative stress in early diabetic nephropathy: fueling the fire. Nat Rev Endocrinol 2011 Mar; 7(3): 176-184; Brownlee M. Biochemistry and molecular cell biology of diabetic complications. Nature 2001 Dec 13; 414 (6865): 813-820; Mimura I, Nangaku M. The suffocating kidney: tubulointersticial hypoxia in end-stage renal disease. Nat Rev Nephrol 2010 Nov; 6 (11): 667-678).
[004] Além disso, o estresse oxidativo facilita a formação de produtos finais de glicação avançada (AGEs) que causam lesão renal adicional e produção de ROS (Hung KY, et al. N-acetylcysteine-mediated antioxidation prevents hyperglycemia-induced apoptosis and collagen synthesis in rat mesangial cells. Am J Nephrol 2009; 29(3): 192-202).
[005] Fibrose tubulointersticial no rim é um forte indicador de progressão para insuficiência renal em pacientes com doença renal crônica (Schainuck LI, et al. Structural-functional correlations in renal disease. Part II: The correlations. Hum Pathol 1970; 1: 632-641). Obstrução ureteral unilateral (UUO) em ratos é um modelo amplamente usado de fibrose tubulointersticial. UUO causa inflamação tubulointersticial, expressão aumentada de fator beta de transformação do crescimento (TGF-β) e acúmulo de miofibroblastos, que secretam proteínas da matriz tais como colágeno e fibronectina. O modelo UUO pode ser usado para testar o potencial de um fármaco para tratar doença renal crônica mediante inibição de fibrose renal (Chevalier et al., Ureteral obstruction as a model of renal interstitial fibrosis and obstructive nephropathy, Kidney International (2009) 75, 1145-1152).
[006] Por conseguinte, agentes terapêuticos que agem como inibidores de sinalização da ASK1 têm o potencial de aliviar ou melhorar a sobrevida de pacientes em necessidade de tratamento para doenças ou condições tais como distúrbios neurodegenerativos, cardiovasculares, inflamatórios, autoimunes e metabólicos. Em particular, inibidores da ASK1 têm o potencial para tratar doenças cardiorrenais, incluindo doença renal, doença renal diabética, doença renal crônica, doenças fibróticas (incluindo fibrose pulmonar e renal), doenças respiratórias (incluindo doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) e lesão pulmonar aguda) e hepatopatias agudas e crônicas.
[007] A publicação U.S. N° 2007/0276050 descreve métodos para identificação de inibidores da ASK1 úteis na prevenção e/ou no tratamento de doença cardiovascular e métodos de prevenção e/ou tratamento de doença cardiovascular em um animal.
[008] WO2009027283 descreve compostos triazolopiridínicos, métodos para preparação dos mesmos e métodos para tratamento de distúrbios autoimunes, doenças inflamatórias, doenças cardiovasculares e doenças neurodegenerativas.
[009] A publicação U.S. N° 2001/00095410A1, publicada em 13 de janeiro de 2011, descreve compostos úteis como inibidores da ASK1. U.S. A publicação N° 2001/00095410A1 refere-se a compostos da Fórmula (I):
Figure img0001
em que: R1 é alquila, alquenila, alquinila, cicloalquila, arila, heteroarila ou heterociclila, todos os quais são substituídos com 1, 2 ou 3 substituintes selecionados a partir de halo, oxo, alquila, cicloalquila, heterociclila, arila, 6 6 6 6 67 arilóxi, -NO2, R , -C(O)-R , -OC(O)-R , -C(O)-O-R , -C(O)-N(R )(R ), -OC(O)- 67 6 6 6 67 6 67 N(R )(R ), -S-R , -S(=O)-R , -S(=O)2R , -S(=O)2-N(R )(R ), -S(=O)2-O-R , -N(R )(R ), - 6 7 6 7 6 67 6 6 N(R )-C(O)-R , -N(R )-C(O)-O-R , -N(R )-C(O)-N(R )(R ), -N(R )-S(=O)2-R , -CN e - O-R6, em que alquila, cicloalquila, heterociclila, fenila e fenóxi são opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 substituintes selecionados a partir de alquila, cicloalquil, alcóxi, hidroxila e halo; em que R6 e R7 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em hidrogênio, alquila C1-C15, cicloalquila, heterociclila, arila e heteroarila, todos os quais são opcionalmente substituídos com 1 a 3 substituintes selecionados a partir de halo, alquila, mono- ou dialquilamino, amida alquílica ou arílica ou heteroarílica, -CN, alcóxi inferior, -CF3, arila e heteroarila; ou R6 e R7 quando juntamente com o nitrogênio a que eles estão ligados formam um heterociclo; R2 é hidrogênio, halo, ciano, alcóxi ou alquila opcionalmente substituído com halo; R3 é arila, heteroarila ou heterociclila, todos os quais são substituídos com um ou mais substituintes selecionados de alquila, alcóxi, cicloalquila, cicloalquilalquila, arila, arilalquila, heteroarila, heteroarilalquila, heterociclila, heterociclilalquila, halo, oxo, -NO2, haloalquila, haloalcóxi, -CN, -O-R6, -O-C(O)- R6 67 6 67 6 6 67 , -O-C(O)-N(R )(R ), -S-R , -N(R )(R ), -S(=O)-R , -S(=O)2R , -S(=O)2-N(R )(R ), - 6 6 7 6 7 6 6 7 6, S(=O)2-O-R , -N(R )-C(O)-R , -N(R )-C(O)-O-R , -N(R )-C(O)-N(R )(R ), -C(O)-R , - C(O)-O-R6, -C(O)-N(R6)(R7) e -N(R6)-S(=O)2-R7, em que alquila, alcóxi, cicloalquila, arila, heteroarila ou heterociclila é ainda opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir de halo, oxo, - NO2, alquila, haloalquila, haloalcóxi, -N(R6)(R7), -C(O)-R6, -C(O)-O-R6, -C(O)- N(R6)(R7), -CN, -O-R6, cicloalquila, arila, heteroarila e heterociclila; com a condição de que o grupamento heteroarila ou heterociclila inclui pelo menos um átomo de nitrogênio no anel; 1234567 8 4 X , X , X , X , X , X , X e X são independentemente C(R ) ou N, em que cada R4 é independentemente hidrogênio, alquila, alcóxi, cicloalquila, arila, heteroarila, heterociclila, halo, -NO2, haloalquila, haloalcóxi, -CN, -O-R6, -S-R6, - 67 6 6 67 6 6 7 N(R )(R ), -S(=O)-R , -S(=O)2R , -S(=O)2-N(R )(R ), -S(=O)2-O-R , -N(R )-C(O)-R , - 6 7 6 67 6 6 67 N(R )-C(O)-O-R , -N(R )-C(O)-N(R )(R ), -C(O)-R , -C(O)-O-R , -C(O)-N(R )(R ) OU — N(R6)-S(=O)2-R7, em que alquila, cicloalquila, arila, heteroarila e heterociclila são ainda opcionalmente substituídas com um ou mais substituintes selecionados de halo, oxo, -NO2, -CF3, -O-CF3, -N(R6)(R7), -C(O)-R6, -C(O)-O-R7, -C(O)-N(R6)(R7), -CN, -O-R6; ou X5 e X6 ou X6 e X7 são unidos para fornecer opcionalmente arila fundida substituída ou opcionalmente heteroarila fundida substituído; e com a condição de que pelo menos um de X2, X3 e X4 seja C(R4); pelo menos dois de X5, X6, X7 e X8 sejam C(R4); e pelo menos um de X2, X3, X4, X5, X6, X7 e X8 seja N.
[010] Não obstante o referido anteriormente, existe uma demanda para compostos que sejam potentes e exibam perfis melhorados de farmacocinética e/ou farmacodinâmica destinados ao tratamento de doenças relacionadas com ativação de ASK1.
[011] Surpreendentemente, os reivindicantes descobriram um novo composto dentro do campo da publicação U.S. US2011/0009410A que exibe boa potência e perfis melhorados de farmacocinética e/ou farmacodinâmica, em termos agregados, quando comparado com compostos descritos nesse particular. SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[012] A presente invenção refere-se a um composto da fórmula:
Figure img0002
ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[013] Em uma modalidade, a invenção refere-se ao uso de um composto da fórmula (I) no tratamento de uma doença em um paciente em necessidade de tratamento com um inibidor da ASK1.
[014] Em outra modalidade, a invenção refere-se a uma composição farmacêutica compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um ou mais carreadores farmaceuticamente aceitáveis.
[015] Em outra modalidade, a invenção consiste em um método de tratamento de nefropatia diabética, ou complicações de diabetess, compreendendo administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo a um paciente em necessidade do mesmo.
[016] Em outra modalidade, a invenção refere-se a um método de tratamento de doença renal ou doença renal diabética compreendendo administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo a um paciente em necessidade do mesmo.
[017] Em outra modalidade, a invenção refere-se a um método de tratamento de fibrose renal, fibrose pulmonar ou fibrose pulmonar idiopática (IPF) compreendendo administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo a um paciente em necessidade do mesmo.
[018] Em outra modalidade, a invenção refere-se a um método de tratamento de doença renal diabética, nefropatia diabética, fibrose renal, fibrose hepática ou fibrose pulmonar compreendendo administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto ou sal da fórmula (I) a um paciente em necessidade do mesmo.
[019] Em outra modalidade, a invenção refere-se a intermediários úteis para a síntese do composto da fórmula (I).
[020] Em outra modalidade, a invenção refere-se ao uso de um composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para o tratamento de doença renal crônica.
[021] Em outra modalidade, a invenção refere-se ao uso de um composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para o tratamento de doença renal diabética.
[022] Em outra modalidade, a invenção refere-se ao uso de um composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo na fabricação de um medicamento para o tratamento de doença renal crônica.
[023] Em ainda outra modalidade, a invenção refere-se ao composto da formula (I) para uso em terapia.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO Figuras
[024] A Figura 1 é um gráfico de barras mostrando os níveis de Colágeno IV no córtex renal de ratos submetidos a sete dias de obstrução ureteral unilateral e tratados com veículo ou o composto da fórmula (I) na dose de 1, 3, 10 ou 30 mg/kg duas vezes ao dia.
[025] A Figura 2 mostra imagens representativas de secções do córtex renal com alfa-actina do músculo liso (um marcador de miofibroblastos ativados) de ratos submetidos a sete dias de obstrução ureteral unilateral e tratados com veículo ou o composto da fórmula (I) na dose de 1, 3, 10 ou 30 mg/kg duas vezes ao dia.
Definições e Parâmetros Gerais
[026] Conforme usadas na presente invenção, as seguintes palavras e expressões destinam-se a ter os significados demonstrados abaixo, exceto quando o contexto em que eles são usados indicar o contrário. Onde nenhuma indicação ou definição for fornecida, o significado habitual do termo ou da expressão conforme encontrado em um dicionário relevante ou em uso comum conhecido por especialistas no assunto é subentendido.
[027] A terminologia “doença renal crônica” conforme usada na presente invenção refere-se à perda progressiva de função renal com o decorrer do tempo, geralmente meses ou mesmo anos. Doença renal crônica (CKD) é diagnosticada por um profissional de saúde competente que utiliza informação apropriada, testes ou marcadores conhecidos por especialistas no assunto. Doença renal crônica inclui doença renal implícita.
[028] A terminologia “doença renal diabética” conforme usada na presente invenção refere-se a doença renal causada por diabetes, exacerbada por diabetes ou presente concomitantemente com diabetes. É uma forma de doença renal crônica que ocorre em aproximadamente 30% de pacientes com diabetes. É definida como diabetes com a presença de albuminúria e/ou função renal comprometida (i.e., taxa de filtração glomerular reduzida (ver de B, I et al. Temporal trends in the prevalence of diabetic kidney disease in the United States. JAMA 2011 Jun 22; 305(24): 2532-2539).
[029] A terminologia “sal farmaceuticamente aceitável” refere-se a sais de compostos farmacêuticos, tais como o composto da fórmula (I), que mantêm a eficácia e as propriedades biológicas do composto básico e que não são biologicamente ou sob os demais aspectos indesejáveis. Há sais com adição de ácido e sais com adição de base. Sais com adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis podem ser preparados a partir de ácidos inorgânicos e orgânicos.
[030] Ácidos e bases úteis para reação com um composto básico destinados a formar sais farmaceuticamente aceitáveis (sais com adição de ácido ou com adição de base respectivamente) são conhecidos por técnicos no assunto. De modo similar, métodos de preparação de sais farmaceuticamente aceitáveis a partir de um composto básico (de acordo com a descrição) são conhecidos por técnicos no assunto e são descritos em, por exemplo, Berge, et al. Journal of Pharmaceutical Science, Jan. 1977 vol. 66, No. 1, e outras fontes. Sais derivados de ácidos inorgânicos incluem, mas não se limitam a, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico e o equivalente. Sais derivados de ácidos orgânicos incluem, mas não se limitam a, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido p-tolueno-sulfônico e similares. Bases úteis para formação de sais com adição de base são conhecidas por técnicos no assunto. Um exemplo de um sal farmaceuticamente aceitável do composto da fórmula (I) é o sal cloridrato do composto da fórmula (I).
[031] Conforme usado na presente invenção, “carreador farmaceuticamente aceitável” inclui excipientes ou agentes como solventes, diluentes, meios de dispersão, revestimentos, agentes antibacterianos e antifúngicos, agentes isotônicos e de retardo da absorção e o equivalente que não são prejudiciais para o composto da invenção ou para seu uso. O uso de tais carreadores e agentes para preparar composições de substâncias farmaceuticamente ativas é bem conhecido na técnica (ver, e.g., Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mace Publishing Co., Philadelphia, PA 17th Ed. (1985); e Modern Pharmaceutics, Marcel Dekker, Inc. 3rd Ed. (G.S. Banker & C.T. Rhodes, Eds.)).
[032] A terminologia “doenças cardiorrenais” conforme usada na presente invenção refere-se a doenças, relacionadas com a função dos rins, que são causadas ou exacerbadas por problemas cardiovasculares tais como, por exemplo, pressão arterial elevada ou hipertensão. Acredita-se que hipertensão é o principal distúrbio que contribui para doença renal.
[033] A terminologia “doenças respiratórias” conforme usada na presente invenção refere-se a doenças que incluem doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD) e fibrose pulmonar idiopática (IPF).
[034] A terminologia “quantidade terapeuticamente eficaz” refere-se a uma quantidade do composto da fórmula (I) que é suficiente para efetuar tratamento conforme definido abaixo, quando administrada a um paciente (particularmente um indivíduo humano) em necessidade de tal tratamento em uma ou mais doses. A quantidade terapeuticamente eficaz irá variar dependendo do paciente, da doença que está sendo tratada, do peso e/ou da idade do paciente, da gravidade da doença ou do modo de administração, conforme determinado por um médico ou profissional de saúde qualificado.
[035] O termo “tratamento” ou “tratar” significa administração de um composto ou sal farmaceuticamente aceitável da fórmula (I) com a finalidade de: (i) retardar o início de uma doença, isto é, impedir que os sintomas clínicos da doença se desenvolvam, ou retardar o seu desenvolvimento; (ii) inibir a doença, isto é, impedir o desenvolvimento de sintomas clínicos; e/ou (iii) abrandar a doença, isto é, causar regressão de sintomas clínicos ou da sua gravidade.
[036] Em uma modalidade preferida, a invenção refere-se ao uso do composto da fórmula (I) para tratar doença renal crônica compreendendo administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz a um paciente em necessidade do mesmo.
[037] Em outra modalidade preferida, a invenção refere-se ao uso do composto da fórmula (I) para tratar doença renal diabética compreendendo administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz a um paciente em necessidade do mesmo.
[038] Em outra modalidade preferida, a invenção relaciona-se com o uso do composto da fórmula (I) para tratar fibrose pulmonar ou renal compreendendo administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz a um paciente em necessidade do mesmo.
[039] Concentração inibitória semimáxima (IC50) de um agente terapêutico é a concentração de um agente terapêutico necessária para produzir 50% da inibição máxima contra uma enzima alvo. Constitui um objetivo desejável descobrir um agente terapêutico, tal como um composto, que iniba a quinase reguladora do sinal de apoptose (ASK1) com baixa IC50. Desse modo, efeitos colaterais indesejáveis são reduzidos ao mínimo pela capacidade do emprego de uma dose baixa do agente terapêutico para inibir a enzima ASK1.
[040] Similarmente, constitui um objetivo desejável descobrir um agente terapêutico que possua uma baixa constante de dissociação (Kd). Kd é usada para descrever a afinidade entre um ligante (tal como um agente terapêutico) e a quinase ou o receptor correspondente, isto é, uma medida do grau de coesão com que um agente terapêutico se liga a determinada quinase - por exemplo, a quinase reguladora do sinal de apoptose ASK1. Assim, uma Kd mais baixa é geralmente preferida no desenvolvimento do fármaco.
[041] De modo semelhante, constitui um objetivo desejável descobrir um composto com baixa EC50. EC50 é a concentração de um fármaco que alcança 50% de eficácia máxima na célula. O valor da EC50 exprime a concentração de um composto no meio de ensaio necessária para alcançar 50% da eficácia máxima. Desse modo, uma EC50 mais baixa é geralmente preferida para desenvolvimento do fármaco. Uma unidade útil de mensuração associada a EC50 é a EC50 ajustada de ligação a proteína (EC50 para PBadj, conforme usado na presente invenção). Esse valor determina a quantidade de um fármaco, tal como o composto da fórmula (I), correlacionada com a fração do fármaco não ligado a proteína que proporciona eficácia máxima de 50%. Esse valor determina a eficácia do fármaco corrigido para, ou correlacionada com, a quantidade de fármaco que está disponível no local alvo de ação.
[042] Outra peculiaridade desejável é a obtenção de um composto com baixa taxa de efluxo da membrana celular conforme determinado por estudos de permeabilidade de células do tipo CACO. Uma taxa de efluxo ((B/A)/(A/B)) inferior a 3,0 é preferida. Pressupõe-se que um composto com uma taxa superior a 3 sofre efluxo rápido ativo da célula e pode não ter duração suficiente na célula para alcançar eficácia máxima.
[043] Outro objetivo desejável é descobrir um fármaco que exiba inibição mínima fora da área alvo. Ou seja, um fármaco que iniba minimamente as enzimas Cyp450 (citocromo P450). Mais particularmente, é desejado um fármaco que seja um inibidor fraco do Cyp3A4, a mais importante das enzimas P450. Um inibidor fraco é um composto que causa aumento de pelo menos 1,25 vez, porém menor que 2 vezes, nos valores da AUC plasmática ou redução de 20 a 50% na depuração (wikipedia.org/wiki/cyp3A4, visitado em 12/11/2011). Em geral, um composto que exibe uma IC50 do Cyp3A4 superior a 10 μM é considerado um inibidor fraco.
[044] Uma medida útil para comparar inibição do Cyp3A4 dentre fármacos candidatos é a proporção entre inibição de Cyp3A4 e a EC50 ajustada de ligação a proteína. Esse valor fornece uma indicação do potencial relativo para inibição de Cyp corrigida para a EC50 ajustada de ligação a proteína que é específica de cada fármaco. Uma proporção elevada nessa medida é preferida como indicativa de baixo potencial para inibição de Cyp3A4.
[045] Surpreendentemente e de modo vantajoso, os depositantes descobriram um composto (de fórmula (I) na presente invenção) dentro do campo de ação da publicação U.S. N° 2001/00095410A1 que proporciona vantagens em comparação com compostos estruturalmente próximos (designados na presente invenção como compostos A e B) descritos na publicação U.S. N° 2001/00095410A1.
Figure img0003
[046] Portanto, objetivos da presente invenção incluem, mas não se limitam a, fornecimento de um composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e métodos de uso do composto da fórmula (I) para o tratamento de doença renal, doença renal crônica, doença renal diabética, nefropatia diabética, fibrose renal ou fibrose pulmonar. Terapia de Combinação
[047] Pacientes em tratamento de doenças cardiorrenais tais como doença renal crônica podem beneficiar-se de tratamento com fármacos de combinação. Por exemplo, o composto da presente invenção pode ser combinado com um ou mais inibidores da enzima de conversão da angiotensina (ACE) a exemplo de enalapril, captopril, ramipril e quinapril; ou bloqueadores do receptor da angiotensina II (ARBs) tais como losartan, olmesartan e irbesartan; ou agentes anti-hipertensivos como anlodipina, nifedipina e felodipina. O benefício da combinação pode ser eficácia aumentada e/ou efeitos colaterais reduzidos em relação a um componente uma vez que a dose desse componente pode ser ajustada descendentemente para reduzir seus efeitos colaterais ao mesmo tempo em que há benefício de sua eficácia aumentada pela eficácia do composto da fórmula (I) e/ou outro(s) componente(s) ativo(s).
[048] Pacientes que apresentam com doença renal crônica tratável por inibidores da ASK1 como o composto da fórmula (I) podem também exibir condições que se beneficiam de administração concomitante (de acordo com prescrição por um profissional de saúde) de um agente terapêutico ou agentes terapêuticos que consistem em antibióticos, analgésicos, antidepressivos e/ou agentes antiansiedade em combinação com o composto da fórmula (I). Tratamentos de combinação podem ser administrados simultaneamente ou um após o outro dentro de intervalos de acordo com prescrição por um profissional de saúde qualificado ou mediante apresentação em uma dose fixa (todos os ingredientes ativos são combinados em uma forma de apresentação única tal como comprimido) de dois ou mais agentes ativos. Composições Farmacêuticas e Administração
[049] O composto da presente invenção pode ser administrado na forma de uma composição farmacêutica. A presente invenção, portanto, fornece composições farmacêuticas que contêm, como princípio ativo, o composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um ou mais excipientes e/ou carreadores farmaceuticamente aceitáveis, incluindo diluentes e agentes de preenchimento sólidos inertes, diluentes, incluindo solução aquosa estéril e vários solventes orgânicos, promotores de penetração, solubilizantes e adjuvantes. As composições farmacêuticas podem ser administradas isoladamente ou em combinação com outros agentes terapêuticos. As composições podem ser preparadas para liberação como comprimidos sólidos, cápsulas, comprimidos revestidos, unguentos, emplastros cutâneos, comprimidos de liberação contínua, comprimidos de desintegração rápida, preparações para inalação etc. As composições farmacêuticas usuais são preparadas e/ou administradas usando-se métodos e/ou processos bem conhecidos na arte farmacêutica (ver, e.g., Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mace Publishing Co., Philadelphia, PA 17th Ed. (1985); e Modern Pharmaceuticals, Marcel Dekker, Inc. 3rd Ed. (G.S. Banker & C.T. Rhodes, Eds.)).
[050] As formulações para tratamentos de combinação compreendendo o composto da fórmula (I) podem ser apresentadas como formulações de dose fixada tais como comprimidos, elixires, líquidos, unguentos, inalantes, géis etc. usando-se procedimentos conhecidos por técnicos no assunto.
[051] As composições farmacêuticas do composto da fórmula (I) podem ser administradas em doses únicas ou múltiplas por vias que incluem, por exemplo, as vias retal, bucal, intranasal e transdérmica; por injeção intraarterial, pelas vias intravenosa, intraperitoneal, parenteral, intramuscular, subcutânea, oral e tópica, como um inalante ou mediante um dispositivo impregnado ou revestido como um cateter, por exemplo, ou um polímero cilíndrico inserido em uma artéria. As vias de administração mais preferidas incluem administração oral, parenteral e intravenosa.
[052] O composto da fórmula (I) pode ser administrado em uma quantidade farmaceuticamente eficaz. No caso de administração oral, cada unidade de administração preferivelmente contém 1 mg a 500 mg do composto da fórmula (I). Uma dose mais preferida é de 1 mg a 250 mg do composto da fórmula (I). Uma dose particularmente preferida do composto da fórmula (I) varia de cerca de 20 mg duas vezes ao dia a cerca de 50 mg duas vezes ao dia. Entretanto, será compreensível que a quantidade do composto efetivamente administrada em geral será determinada por um médico com base nas circunstâncias relevantes incluindo a condição a ser tratada, a via de administração escolhida, coadministração do composto se aplicável, a idade, o peso, a resposta de cada paciente, a gravidade dos sintomas do paciente e afins. Nomenclatura
[053] O nome do composto da presente invenção de acordo com uso generalizado de ChemBioDraw Ultra 11
Figure img0004
é 5-(4-ciclopropil-1H-imidazol-1-il)-N-(6-(4-isopropil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin- 2-il)-2-fluoro-4-metilbenzamida também conhecido como 5-((4-ciclopropil-1H- imidazol-1-il)-2-fluoro-N-(6-(4-isopropil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il)-4- metilbenzamida. Síntese do Composto da Fórmula (I)
[054] O composto da invenção pode ser preparado usando-se métodos descritos na presente invenção ou modificações deles que serão perceptíveis com base na descrição fornecida na presente invenção. A síntese do composto da invenção pode ser realizada conforme descrito no exemplo a seguir. Se disponíveis, reagentes podem ser adquiridos comercialmente - por exemplo, de Sigma Aldrich ou outros fornecedores químicos. Alternativamente, reagentes podem ser preparados usando-se esquemas de reação e métodos conhecidos por técnicos no assunto. Parâmetros de Reação Sintética
[055] A terminologia “solvente”, “solvente orgânico inerte” ou “solvente inerte” refere-se a um solvente inativo de acordo com as condições da reação que está sendo descrita juntamente com o mesmo (incluindo, por exemplo, benzeno, tolueno, acetonitrila, tetra-hidrofurano (THF) dimetilformamida (DMF), clorofórmio, cloreto de metileno (ou diclorometano), éter dietílico, éter de petróleo (PE), metanol, piridina, acetato de etila (EA) e similares. A menos que especificado de modo contrário, os solventes usados nas reações da presente invenção são solventes orgânicos inertes, e as reações são conduzidas sob um gás inerte, preferivelmente nitrogênio.
[056] Um método de preparação de compostos da fórmula (I) é mostrado nos Esquemas de Reação 1 e 2 abaixo.
Figure img0005
Preparação do Composto A
[057] A uma solução de 6-aminopicolinato de metila (432 g, 2,84 mol) em MeOH (5 L) foi adicionado NH2NH2.H2O (284 g, 5,68 mol, 2,0 eq.). A mistura da reação foi aquecida sob refluxo por 3 horas e então resfriada a temperatura ambiente. O precipitado formado na mistura foi coletado por filtração, lavado com EA (2 L x 2) e em seguida dessecado in vacuo para fornecer o composto A (405 g, rendimento de 94%) como sólido branco. Preparação do Composto B
[058] Uma mistura do composto A (405 g, 2,66 mol) em dimetilformamida-dimetilacetal (DMF-DMA) (3,54 L) foi aquecida sob refluxo por 18 horas, resfriada a temperatura ambiente e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi absorvido em EA (700 mL) e aquecido a 50°C por 20 minutos. Após ser resfriado a temperatura ambiente, o sólido foi coletado por filtração e dessecado in vacuo para fornecer o composto B (572 g, rendimento de 82%) como sólido branco. Preparação de C
[059] A uma solução do composto B (572 g, 2,18 mol) em uma mistura de CH3CN-AcOH (3,6 L, 4:1) foi adicionado propan-2-amina (646 g, 5,0 eq.). A mistura resultante foi aquecida sob refluxo por 24 horas e então resfriada a temperatura ambiente, e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água (2,8 L) e NaOH aquoso 1 N foi adicionado a um pH de 8,0. O precipitado foi coletado por filtração e o filtrado foi extraído com EA (500 mL x 3). As camadas orgânicas combinadas foram dessecadas sobre Na2SO4 anidro e então concentradas para um volume de 150 mL. A essa mistura a 0°C foi lentamente adicionado PE (400 mL) e a suspensão resultante foi filtrada. O sólido combinado foi recristalizado a partir de EA-PE para fornecer o composto C (253 g, rendimento de 57%) como sólido branco-amarelado.
[060] 1H-NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8,24 (s, 1 H), 7,52 (m, 2 H), 6,51 (dd, J = 1,6, 7,2 Hz, 1 H), 5,55 (m, 1 H), 4,46 (bs, 2 H), 1,45 (d, J = 6,8 Hz, 6 H). MS (ESI+) m/z: 204 (M+1)+.
[061] O composto C é um intermediário essencial para a síntese do composto da fórmula (I). Assim, um objetivo da presente invenção é também o fornecimento do composto C intermediário,
Figure img0006
sais ou formas auxiliares do mesmo, para a preparação do composto da fórmula (I). Um exemplo de um sal do composto C é o sal com adição de HCl. Um exemplo de uma forma auxiliar do composto C é o composto carbamato tal como obtido com Cbz-Cl. Grupos auxiliares, sua preparação e seus usos são mostrados em Peter G.M. Wuts and Theodora W. Greene, Protective Groups in Organic Chemistry, 2.a edição, 1991, Wiley and Sons, Publishers. Esquema 2 Preparação contínua do Composto de Fórmula (I):
Figure img0007
[062] O composto 6 é um intermediário essencial para a síntese do composto da fórmula (I). Assim, um objetivo da presente invenção é também o fornecimento do composto 6 intermediário,
Figure img0008
sais ou formas auxiliares do mesmo, para a preparação do composto da fórmula (I). Um exemplo de um sal do composto 6 é o sal com adição de HCl. Um exemplo de uma forma auxiliar do composto 6 é um éster (por exemplo, éster metílico, etílico ou benzílico) ou o composto carbamato tal como obtido com Cbz-Cl. Grupos auxiliares, sua preparação e seus usos são mostrados em Peter G.M. Wuts and Theodora W. Greene, Protective Groups in Organic Chemistry, 2.a edição, 1991, Wiley and Sons, Publishers. Etapa 1 - Preparação de 5-amino-2-fluoro-4-metilbenzonitrila - Composto (2)
[063] A substância de base 5-bromo-4-fluoro-2-metilanilina (1) (20 g, 98 mmol) foi dissolvida em 1-metilpirrolidinona anidra (100 mL) e cianeto de cobre (I) (17,6 g, 196 mmol) foi adicionado. A reação foi aquecida a 180°C por 3 horas, resfriada a temperatura ambiente e água (300 mL) e hidróxido de amônio concentrado (300 mL) foram adicionados. A mistura foi agitada por 30 minutos e extraída com EA (3 x 200 mL). Os extratos combinados foram dessecados sobre sulfato de magnésio, e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo oleoso foi lavado com hexanos (2 x 100 mL) e o sólido dissolvido em diclorometano e carregado em uma coluna de sílica gel. Eluição com EA a 0 a 25% em gradiente de hexanos forneceu 5-amino-2-fluoro-4- metilbenzonitrila (10,06 g, 67,1 mmol). LC/MS (m/z: 151 M+1). Etapa 2 - Preparação de 5-(2-ciclopropil-2-oxoetilamino)-2-fluoro-4- metilbenzonitrila - Composto (3)
[064] 5-Amino-2-fluoro-4-metilbenzonitrila (12 g, 80 mmol) foi dissolvida em N,N-dimetilformamida (160 mL) sob nitrogênio, e carbonato de potássio (13,27 g, 96 mmol) e iodeto de potássio (14,61 g, 88 mmol) foram adicionados como sólidos com agitação. A reação foi agitada por 5 minutos a temperatura ambiente, e em seguida ciclopropilcetona bromometílica (20,24 mL, 180 mmol) foi adicionada. A mistura da reação foi aquecida a 60°C por 3 horas e então os solventes foram removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em EA (400 mL) e lavado com 400 mL de água. A camada orgânica foi dessecada sobre sulfato de magnésio e solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi novamente dissolvido em uma quantidade mínima de EA, e hexanos foram adicionados com a finalidade de conduzir a solução para uma proporção de hexanos:EA de 3:1 em volume. O produto precipitou para fora da solução e foi coletado por filtração para fornecer 5-(2-ciclopropil-2-oxoetilamino)-2- fluoro-4- metilbenzonitrila (14,19 g, 61,2 mmol). LC/MS (m/z: 233, M+1). Etapa 3 - Preparação de 5-(4-ciclopropil-2-mercapto-1 H-imidazol-1-il)-2- fluoro-4-metilbenzonitrila - Composto (4)
[065] 5-(2-Ciclopropil-2-oxoetilamino)-2-fluoro-4-metilbenzonitrila (14,19 g, 61,2 mmol) foi dissolvido em ácido acético glacial (300 mL). Tiocianato de potássio (11,9 g, 122,4 mmol) foi adicionado como um sólido com agitação. A mistura da reação foi aquecida a 110°C por 4 horas, período em que o solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi absorvido em diclorometano (200 mL) e lavado com 200 mL de água. O extrato aquoso foi extraído com diclorometano adicional (2 x 200 mL) e os extratos orgânicos foram combinados e dessecados sobre sulfato de magnésio. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo oleoso foi dissolvido novamente em EA (50 mL), e 150 mL de hexanos foram adicionados. Uma camada escura se formou e uma barra de agitação foi adicionada ao balão. Agitação vigorosa causou precipitação do produto como um sólido da cor de pêssego. O produto foi coletado por filtração, produzindo 5-(4-ciclopropil-2-mercapto-1H-imidazol- 1-il)-2-fluoro-4-metilbenzonitrila (14,26 g, 52,23 mmol). Anal. LC/MS (m/z: 274, M+1). Etapa 4 - Preparação de 5-(4-ciclopropil-1 H-imidazol-1-il)-2-fluoro-4- metilbenzonitrila - Composto (5)
[066] Em um balão de fundo redondo com três gargalos de 500 mL foram colocados ácido acético (96 mL), água (19 mL) e peróxido de hidrogênio (30%, 7,47 mL, 65,88 mmol). A mistura foi aquecida a 45°C com agitação sob nitrogênio e monitoração simultânea da temperatura interna. 5-(4-Ciclopropil- 2-mercapto-1H-imidazol-1-il)-2-fluoro-4-metilbenzonitrila (6,00 g, 21,96 mmol) foi então adicionada como um sólido em pequenas porções no decorrer de 30 minutos mantendo-se uma temperatura interna abaixo de 55°C. Quando a adição do tioimidazol foi concluída, a reação foi agitada por 30 minutos a uma temperatura de 45°C e então resfriada a temperatura ambiente, e uma solução de sulfito de sódio a 20% p/p em água (6 mL) foi adicionada lentamente. A mistura foi agitada por 30 minutos e solventes foram removidos sob pressão reduzida. O resíduo foi suspenso em 250 mL de água, e hidróxido de amônio aquoso 4 N foi adicionado com a finalidade de conduzir o pH para ~10. A mistura foi extraída com diclorometano (3 x 200 mL), os extratos orgânicos foram combinados e dessecados sobre sulfato de magnésio e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em 20 mL de EA, tendo sido adicionados 80 mL de hexanos com agitação. Os solventes foram transvasados e um resíduo oleoso foi deixado de reserva. Esse processo foi repetido e o produto, 5-(4-ciclopropil-1H-imidazol-1-il)-2-fluoro-4- metilbenzonitrila, foi obtido como um óleo viscoso (5,14 g, 21,33 mmol). Anal. LC/MS (m/z: 242, M+1). Etapa 5 - Preparação de 5-(4-ciclopropil-1H-imidazol-1-il)-2-fluoro-4- cloridrato de ácido metilbenzoico (6)
[067] 5-(4-Ciclopropil-1H-imidazol-1-il)-2-fluoro-4-metilbenzonitrila (11,21 g, 46,50 mmol) foi colocado em um balão de fundo redondo adaptado com um condensador de refluxo e suspenso em ácido clorídrico a 38% (200 mL). A mistura foi aquecida a 100°C por 4,5 horas e então resfriada a temperatura ambiente. Solvente foi removido sob pressão reduzida fornecendo um sólido de cor rosa, ao qual foram adicionados 100 mL de EA. O produto sólido foi coletado por filtração e lavado com 3 x 100 mL de EA. Ao produto sólido foram adicionados 100 mL de metanol a 10% em diclorometano, e a mistura foi agitada e o filtrado coletado. Isto foi repetido com mais 2 porções de 100 mL de metanol a 10% em diclorometano. Os filtrados foram combinados e o solvente foi removido sob pressão reduzida, fornecendo 5-(4-ciclopropil-1H-imidazol-1-il)-2-fluoro-4-cloridrato de ácido metilbenzoico bruto. Nenhuma purificação adicional foi realizada (11,13 g, 37,54 mmol). Anal. LC/MS (m/z: 261, M+1). Etapa 6 - Preparação de 5-(4-ciclopropil-1H-imidazol-1-il)-2-fluoro-N-(6-(4- isopropil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il)-4-metilbenzamida - fórmula (I)
[068] 5-(4-Ciclopropil-1H-imidazol-1-il)-2-fluoro-4-cloridrato de ácido metilbenzoico (1,5 g, 5,07 mmol) foi suspenso em 1,2-diclorometano anidro (25 mL) a temperatura ambiente. Cloreto de oxalila (0,575 mL, 6,59 mmol) foi adicionado com agitação sob nitrogênio, seguido por N,N-dimetilformamida (0,044 mL, 0,507 mmol). A mistura foi agitada por 4 horas a temperatura ambiente, e então o solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em 25 mL de diclorometano anidro. 6-(4-Isopropil-4H-1,2,4-triazol-3- il)piridin-2-amina (1,13 g, 5,58 mmol) (composto C) e 4-dimetilaminopiridina (0,62 g, 5,07 mmol) foram rapidamente adicionadas com agitação sob nitrogênio. A reação foi agitada por 2 horas a temperatura ambiente e NaHCO3 saturado aquoso (15 mL) foi adicionado. A mistura foi agitada por 10 minutos e as camadas separadas, tendo sido a camada aquosa lavada com 1 x 20 mL de diclorometano. Os extratos orgânicos combinados foram dessecados (MgSO4), filtrados e concentrados. O resíduo foi dissolvido em uma quantidade mínima de CH3CN e água foi lentamente adicionada até que os sólidos precipitaram da mistura. O sólido foi coletado por filtração e dessecado fornecendo 5-(4- ciclopropil-1H-imidazol-1-il)-2-fluoro-N-(6-(4-isopropil-4H-1,2,4-triazol-3- il)piridin-2-il)-4-metilbenzamida com pureza de ~96% (1,28 g, 2,88 mmol). Anal. LC/MS (m/z: 446, M+1). O material foi ainda purificado por RP-HPLC (HPLC de fase reversa) para se obter uma amostra pura do ponto de vista analítico como o sal de HCl.
Figure img0009
[069] C24H24FN7O-HCl. 446,2 (M+1). 1H-NMR (DMSO): δ 11,12 (s, 1H), 9,41 (s, 1H), 9,32 (s, 1H), 8,20 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,07 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 7,95 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,59 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 5,72 (sept, J = 6,8 Hz, 1 H), 2,29 (s, 3H), 2,00-2,05 (m, 1H), 1,44 (d, J = 6,8 Hz, 6H), 1,01-1,06 (m, 2H), 0,85-0,89 (m, 2H). Ensaios Biológicos Ensaio com Quinase (IC50 Bioquímica) por TR-FRET da ASK1 (Quinase 1 Reguladora do Sinal de Apoptose)
[070] A capacidade de compostos de inibir atividade da quinase ASK1 foi determinada por meio de um ensaio de transferência de energia de ressonância por fluorescência em tempo determinado [TR-FRET] utilizando-se a proteína básica mielina biotinilada [biotina-MBP] como o substrato proteico. Foi utilizado um robô de manipulação de líquido Beckman Biomek FX com a finalidade de transferir 2 μL/poço de compostos em DMSO aquoso a 2,44% para placas de polipropileno com 384 poços de baixo volume [Nunc, n° 267460] visando-se a assegurar um composto com concentração final entre 100 μM e 0,5 nM no ensaio de quinase. Foi usado um Deerac Fluidics Equator para verter 3 μL/poço de 0,667 ng/μL [Upstate Biotechnologies, n° 14-606, ou a proteína equivalente de preparação caseira] e 0,1665 ng/mL de biotina-MBP [Upstate Biotechnologies, n° 13-111] em tampão (85 mM de MOPS, pH de 7,0, 8,5 mM de Mg-acetato, glicerol a 5%, NP-40 a 0,085%, 1.7 mM de DTT e 1,7 mg/mL de BSA) nas placas contendo os compostos transferidos.
[071] Foi permitida pré-incubação da enzima com o composto por 20 minutos antes do início da reação da quinase com a adição de 5 μL/poço de 300 μM de ATP em tampão (50 mM de MOPS, pH de 7,0, 5 mM de Mg-acetato, 1 mM de DTT, 5% de DMSO) usando-se o Deerac Fluidics Equator. Foi permitido que as reações da quinase prosseguissem por 20 minutos a temperatura ambiente, tendo sido subsequentemente interrompidas com a adição de 5 μL/poço de 25 mM de EDTA usando-se o Deerac Fluidics Equator. O Biomek FX foi então usado para transferir 1 μL/poço de cada reação da quinase concluída para os poços de uma lâmina de poliestireno branco OptiPlate-1536 [PerkinElmer, n° 6004299] que continha 5 μL/poço de reagentes de detecção (1,11 nM de anticorpo antifosfotreonina marcado com Eu-W1024 [PerkinElmer, n° AD0094] e 55,56 nM de estreptavidina-aloficocianina [PerkinElmer, n° CR130-100] em tampão 1x de detecção LANCE [PerkinElmer, n° CR97-100]). O sinal de TR-FRET foi então registrado em um leitor de lâmina Perkin Elmer Envision após incubação das placas a temperatura ambiente por 2 horas.
[072] Os poços de controle positivo para 100% de inibição foram gerados por permuta da ordem de adição das soluções de EDTA e ATP descrita acima. Esses poços e poços com 0% de inibição contendo transferências (spots) de 2,44% de DMSO no início do ensaio foram usados no cálculo da % de inibição para os compostos em teste. Resultado
[073] O composto da fórmula (I) inibiu ASK1 com uma IC50 de 3,0 nM. Esses dados sugerem que o composto da fórmula (I) é um inibidor potente da ASK1 na presença do ligante competitivo ATP.
[074] Em uma versão atualizada do ensaio acima, a atividade inibidora do composto da invenção contra ASK1 foi examinada usando-se um ensaio de ASK1 por TR-FRET que determinou a quantidade de fosfato transferida para um substrato peptídico a partir de ATP. Materiais e Métodos Reagentes
[075] Quinase ASK1 humana recombinante desfosforilada foi obtida de Gilead Sciences. Estaurosporina (n° de catálogo S6942) e ditiotreitol (DTT, n° de catálogo 43815-5G) inibidores de quinase de molécula pequena foram obtidos de Sigma Chemicals (St. Louis, MO). ATP (Catalogue n° 7724) foi obtido de Affymetrix (Santa Clara, CA) e o composto da fórmula (I) foi obtido de Gilead Sciences. O kit HTRF KinEASETM-STK S3 foi obtido de Cisbio (Bedford, Mass). Todos os outros reagentes foram obtidos do mais elevado grau comercialmente disponível. Ensaios
[076] O ensaio determina o nível de fosforilação de um substrato peptídico biotinilado pela quinase ASK1 usando-se detecção por HTRF (6.1). Trata-se de um imunoensaio de transferência de energia de ressonância por fluorescência em tempo determinado, com base no manual de HTRF® KinEASETM-STK de Cisbio (6.1). O composto de teste, 1 μM de substrato peptídico STK3 e 4 nM de quinase ASK1 são incubados com 10 mM de tampão MOP, pH de 7,0, contendo 10 mM de Mg-Acetato, NP-40 a 0,025%, 1 mM de DTT, BSA a 0,05% e glicerol a 1,5% por 30 minutos, e então 100 μM de ATP são adicionados para iniciar a reação da quinase e incubados por 3 horas. Anticorpo peptídico marcado com tampão IX Eu3+ Cryptate contendo 10 mM de EDTA e 125 nM de Streptavidin XL665 são adicionados para interromper a reação, e substrato peptídico fosforilado é detectado usando-se leitor Envision 2103 Multilabeled de PerkinElmer. A fluorescência é medida a 615 nm (Cryptate) e 665 nm (XL665) e uma razão de 665 nm/615 nm é calculada para cada poço. O nível de TR-FRET resultante (uma razão de 665 nm/615 nm) é proporcional ao nível de fosforilação. Nas condições desse ensaio, o grau de fosforilação do substrato peptídico foi linear com o tempo e a concentração para a enzima. O sistema do ensaio produziu resultados consistentes no que diz respeito a Km e atividades específicas para a enzima. No caso de experimentos de inibição (valores de IC50), atividades foram realizadas com concentrações constantes de ATP, peptídeos e diversas concentrações fixadas de inibidores. Estaurosporina, o inibidor não seletivo de quinase, foi usada como o controle positivo. Todos os dados de atividade enzimática são relatados como uma média de determinação quadruplicada. Análise de Dados
[077] Os valores de IC50 foram calculados pela seguinte equação: y = Variação/{1 + (x/IC50)s} + Fundo Onde x e y representam a concentração de inibidores e atividade enzimática, respectivamente. Atividade enzimática é expressa como a quantidade de fosfato incorporada ao peptídeo substrato a partir de ATP. Variação é a variação y máxima (sem inibidor, DMSO controle) e s é um fator de inclinação (6.2). Resultados
[078] O composto da fórmula (I) exibiu uma IC50 de 3,2 nM nessa condição do teste. Os dados demonstram que o composto da fórmula (I) é um potente inibidor do receptor 1 da ASK1. Ensaio Baseado em Célula 293 (EC50 Celular) da ASK1 (Quinase 1 Reguladora do Sinal de Apoptose)
[079] A potência celular dos compostos foi avaliada em células que expressam estavelmente um construto indicador de AP-1:luciferase (293/AP1 - Luc cells - Panomics Inc., 6519 Dumbarton Circle, Fremont, CA). Células foram infectadas com um adenovírus que expressa quinase ASK1 ativa (631-1381 de cDNA de ASK1 de rato), que irá ativar o fator de transcrição de AP-1 e aumentar a expressão de luciferase. Inibidores da ASK1 irão reduzir a atividade enzimática de ASK1 e, portanto, diminuir a atividade do fator de transcrição de AP-1 e a expressão de luciferase. 1. MATERIAIS REQUERIDOS PARA ESTE PROTOCOLO
Figure img0010
Figure img0011
2. MATERIAIS DE REFERÊNCIA Folheto informativo do produto de linhagem celular estável Panomics 293/AP1- Luc Folheto informativo do produto Promega Steady-Glo Luciferase Assay System 3. MEIOS REQUERIDOS Meio de Crescimento Completo, “CGM” DMEM (MediaTech) 10% FBS 1% PSG 100 μg/mL Higromicina B Meio de Ensaio, “AM” DMEM (Invitrogen) 25 mM HEPES 1 mM Piruvato de Sódio 1% PSG 4. MÉTODOS Manutenção:
[080] 293/AP1-Luc Maintain 293/Acells conforme instruções do fabricante; coletar células em confluência de ~80% em frascos T150 como se segue:
[081] Aspirar o meio, lavar suavemente com ~12 mL de D-PBS estéril, aspirar.
[082] Adicionar 5 mL de Tripsina-EDTA, inclinar suavemente para revestir o frasco e incubar por ~5 minutos a 37°C.
[083] Não tocar no frasco; adicionar 5 mL de CGM, lavar o balão 4X com suspensão de células, transferir para frasco cônico de 50 mL, centrifugar por 5 minutos a 1200 rpm.
[084] Aspirar o meio do agregado de células, adicionar 20 a 30 mL de CGM, ressuspender o agregado por pipetagem 6X, passar através de filtro de células para dispersar aglomerados (se necessário) e contar as células com hemocitômetro. Dia 1 do Ensaio:
[085] Coletar as células como acima, exceto agregados de células ressuspensas.
[086] Contar células e diluir para 1,5 x 105 células por mL; adicionar adenovírus de modo que haja 5 unidades formadoras infecciosas por célula.
[087] Preparar (20 a 30 mL) e semear células em placas Greiner de 384 poços revestidas com poli-D-lisina numa concentração de 1,2 x 104 células por poço usando-se Bio Tek uFill (80 μL por poço).
[088] Imediatamente, dosar as placas com 0,4 μL da série de doses do composto (em DMSO a 100%) e incubar por 24 horas em incubadora umidificada (37°C, CO2 a 5%). Dia 2 do Ensaio:
[089] Processar as placas (de acordo com as instruções do fabricante) conforme se segue:
[090] Colocar as placas em fluxo laminar e deixar descoberto por 30 minutos a temperatura ambiente para resfriar.
[091] Remover 60 μL de AM dos poços do ensaio.
[092] Adicionar 20 μL do substrato Steady-Glo Firefly por poço e deixar repousar por 10a a 20 minutos a temperatura ambiente.
[093] Cobrir o fundo das placas com fita branca de revestimento.
[094] Obter dados em um leitor de placa por fluorescência.
[095] Os poços de controle positivo para 100% de inibição foram gerados por células infectantes com um adenovírus que expressa mutante de ASK1 cataliticamente inativo com mutação de lisina para arginina no resíduo 709. Resultado
[096] O composto da fórmula (I) exibe uma EC50 de 2,0 nM. Determinação de Kd Ensaios com quinase
[097] Cepas do fago T7 marcadas com quinase foram preparadas em um hospedeiro de E. coli derivado da cepa BL21. E. coli foram cultivadas em fase logarítmica, infectadas com fago T7 e incubadas com agitação a 32°C até a ocorrência de lise. Os lisados foram centrifugados e filtrados para remover restos celulares. As quinases remanescentes foram produzidas em células HEK- 293 e subsequentemente marcadas com DNA para detecção por qPCR. Microesferas magnéticas revestidas com estreptavidina foram tratadas com ligantes de moléculas pequenas biotinilados por 30 minutos a temperatura ambiente com a finalidade de gerar resinas de afinidade para ensaios com quinase.
[098] As microesferas fixadas ao ligante foram bloqueadas com excesso de biotina e lavadas com tampão de bloqueio (SeaBlock (Pierce), 1% de albumina sérica bovina, 0,05% de Tween 20 e 1 mM de DTT (ditiotreitol)) para remover ligante não ligado e para reduzir ligação não específica. Reações de ligação foram montadas mediante combinação de quinases, microesferas com afinidade por ligante e compostos do teste em 1x tampão de ligação (20% de SeaBlock, 0,7x PBS, 0,05% de Tween 20, 6 mM de DTT). Todas as reações foram realizadas em placas de poliestireno com 96 poços em um volume final de 0,135 mL. As placas do ensaio foram incubadas a temperatura ambiente com agitação por 1 hora e as microesferas de afinidade foram lavadas com solução tampão de lavagem (1x PBS, 0,05% de Tween 20). As microesferas foram então ressuspensas em solução tampão de eluição (1x PBS, 0,05% de Tween 20, 0,5 μM de ligante de afinidade não biotinilado) e incubadas a temperatura ambiente com agitação por 30 minutos. A concentração de quinases nos eluatos foi determinada por qPCR.
[099] Constantes de ligação (Kd) foram calculadas com uma curva padrão de resposta a dose usando-se a equação de Hill. Resultado
[0100] O composto da fórmula (I) exibiu uma Kd de 0,24 nM. Esses dados sugerem que o composto da fórmula (I) se liga potentemente ao receptor de ASK1 na ausência de ATP. Determinação do Percentual de Ligação do Composto ao Plasma Modelo Experimental:
[0101] Células de diálise de teflon de 1 mL provenientes de Harvard Apparatus (HOLLISTON, Mass, USA) foram usadas nesses experimentos. Antes do estudo, a membrana de diálise foi embebida durante aproximadamente uma hora em 0,133 M de tampão de fosfato com pH de 7,4. Uma concentração nominal de 2 μM do composto foi inoculada em 1 mL de plasma ou 1 mL de meio de cultura celular. O volume total de líquido em cada lado da célula foi de 1 mL. Após 3 horas de equilibração em banho-maria a 37°C, amostras de cada lado da célula foram separadas em alíquotas e adicionadas nos frascos apropriados contendo ou 1 mL de plasma humano (meio de cultura celular) ou solução tampão. Os frascos com as amostras foram pesados e registrados. Uma alíquota de 100 μL foi removida e adicionada a 400 μL de solução de resfriamento (50% de metanol, 25% de acetonitrila, 25% de água e padrão interno). As amostras foram agitadas em vórtice e centrifugadas por 15 minutos a 12000 G. 200 μL do sobrenadante foram removidos e colocados em uma nova placa de 96 poços. Um adicional de 200 μL de ACN:água a 1:1 foi adicionado. A placa foi então agitada por vórtice e submetida a análise por LC- MS. A percentagem não ligada para um analito no plasma foi calculada usando- se as seguintes equações: % Não ligada = 100 (Cf/Ct) em que Cf e Ct são as concentrações de tampão e de plasma, respectivamente, pós-diálise. Resultados
[0102] A percentagem não ligada determinada no plasma humano para o composto da fórmula (I) é de 11,94%. Determinação da Proporção de Efluxo de CACO-2 Procedimento Experimental:
[0103] Células Caco-2 foram mantidas em Meio de Eagle Modificado por Dulbecco (DMEM) com piruvato de sódio, Glutmax suplementado com 1% de Pen/Strep, 1% de NEAA e 10% de soro bovino fetal em uma incubadora fixada a 37°C com 90% de umidade e 5% de CO2. Células Caco-2 entre 62 e 72 passagens foram semeadas na concentração de 2100 células/poço e cresceram até atingir confluência durante pelo menos 21 dias em placas de PET (polietileno-tereftalato) com 24 poços (BD Biosciences). O poço receptor continha tampão HBSS (10 mM de HEPES e 15 mM de glicose com pH ajustado para pH de 6,5) suplementado com 1% de BSA e pH ajustado para pH de 7,4. Após uma equilibração inicial com tampão de transporte, os valores de TEER foram registrados para se testar integridade da membrana. Soluções tampões contendo compostos do teste foram adicionadas e 100 μL de solução foram obtidos em 1 e 2 horas do compartimento receptor. A solução tampão removida foi substituída por solução tampão fresca, e uma correção é aplicada a todos os cálculos para o material removido. O experimento foi conduzido com produção de uma cópia exata. Todas as amostras foram imediatamente coletadas em 400 μL de ácido de acetonitrila a 100% para precipitar proteína e estabilizar os compostos do teste. As células foram dosadas no lado apical ou basolateral para determinação de permeabilidade anterógrada (A para B) e reversa (B para A). Permeabilidade através de um poço isento de célula é também determinada como uma medida de permeabilidade celular através da membrana e de ligação não específica. Para testar ligação não específica e instabilidade do composto, percentual de recuperação é determinado. As amostras foram analisadas por LC/MS/MS.
[0104] A permeabilidade aparente, Papp e a % de recuperação são calculadas como se segue:
Figure img0012
Resultado
[0105] Foi observado que o composto da fórmula (I) possui um valor de A^B de CACO de 27; e um valor de B^A de CACO de 35 que resulta em uma proporção de efluxo (B^A)/(A^B) de 1,3. Determinação de Estabilidade Metabólica na Fração Microssômica Hepática: Procedimento Experimental:
[0106] Estabilidade metabólica foi avaliada usando-se cofatores tanto para metabolismo oxidativo (NADPH) quanto para conjugação (UDP-ácido glicurônico (UDPGA)). Alíquotas duplicadas do composto da fórmula (I) (3 μL de 0,5 mM de DMSO de estoque) ou modelos de estabilidade metabólica (buspirona) foram adicionados a microssomos de estoque diluídos com tampão de fosfato de potássio, pH de 7,4, para obtenção de uma concentração proteica de 1,0 mg/mL e contendo alameticina como agente de permeabilidade. Reações metabólicas foram iniciadas pela adição de sistema regenerador de NADPH e cofator UDPGA. A composição final de cada mistura da reação foi: 3 μM de composto do teste, 1 mg de proteína microssômica/mL, 5 mM de UDPGA, 23,4 μg/mL de alameticina, 1,25 mM de NADP, 3,3 mM de glicose-6- fosfato, 0,4 U/mL de glicose-6-fosfato-desidrogenase e 3,3 mM de MgCl2 em 50 mM de tampão de fosfato de potássio com pH de 7,4. Aos 0, 2, 5, 10, 15, 30, 45 e 60 minutos, alíquotas de 25 μL da mistura da reação foram transferidas para placas contendo 250 μL de IS/Q (solução de resfriamento contendo padrão interno). Após resfriamento, as placas foram centrifugadas a 3000 x g por 30 minutos, e alíquotas de 10 μL do sobrenadante foram analisadas usando-se LC/MS para obtenção de proporções da área máxima padrão analítica/interna.
[0107] Estabilidade metabólica em frações microssômicas foi determinada por mensuração da taxa de desaparecimento do composto da fórmula (I). Dados (% do remanescente de origem) foram representados graficamente em uma escala semilogarítmica e ajustados usando-se um ajuste exponencial: Ct = Co • ek,t e T1/2 = 1n 2/K, em que Ct % do remanescente de origem no tempo = t C0 % do remanescente de origem no tempo = 0 T tempo (h) K Primeira ordem da constante da taxa de eliminação (hr-1) T1/2 Meia-vida in vitro (h) A depuração hepática prevista foi calculada como se segue {referência 1}: CLint = K'V'Yp/P OU CLint = K'V'Yh/H CLh = (CLint • Qh)/(CLint + Qh), em que CLh Depuração hepática prevista (L/h/kg de peso corpóreo) CLint Depuração hepática intrínseca (L/h/kg de peso corpóreo) V Volume de incubação (L) Yp Produção de proteína microssômica (mg de proteína/peso corpóreo) YH Produção do hepatócito (milhões de células/peso corpóreo) P Massa de proteína na incubação (mg) H Número de hepatócitos na incubação (milhões) Qh Fluxo sanguíneo hepático (L/h/kg de peso corpóreo)
[0108] Extração hepática prevista foi então calculada por comparação de depuração hepática prevista com fluxo sanguíneo hepático. Um composto foi considerado estável quando a redução da concentração do substrato foi < 10% durante o curso da incubação (correspondendo a uma meia-vida extrapolada > 395 minutos em frações microssômicas e > 39,5 horas em hepatócitos).
[0109] Os valores usados para cálculo da depuração hepática prevista são mostrados nas tabelas abaixo: Tabela 1. Valores Usados para Cálculo da Depuração Hepática Prevista a partir de Estabilidade Microssômica
Figure img0013
Resultado:
[0110] A depuração hepática prevista no homem conforme determinado por experimentos in vitro em frações microssômicas é de 0,1 L/h/kg. Determinação de CL e Vss para Compostos do Teste em Rato Farmacocinética de Compostos do Teste após uma dose de 1 mg/kg por infusão IV e 5,0 mg/kg VO em Ratos Produto em estudo do teste e formulação
[0111] Para administração IV, o composto do teste foi formulado numa proporção PEG 400:água de 60:40 com 1 equivalente de HCl a 0,5 mg/mL. A formulação foi uma solução.
[0112] Para administração VO (oral), o composto do teste foi formulado numa proporção etanol/PG/soluto/água de 5/75/10/10 a 2,5 mg/mL. A formulação foi uma solução. Animais Usados
[0113] Cada grupo de administração da dose IV e VO consistiu em 3 ratos SD do sexo masculino. Por ocasião da administração, o peso dos animais oscilou entre 0,317 e 0,355 kg. Os animais foram submetidos a jejum por uma noite antes da administração da dose e até 4 horas após a administração. Administração da Dose
[0114] No grupo de infusão IV, o composto do teste foi administrado por infusão intravenosa durante 30 minutos. A taxa de infusão foi ajustada de acordo com o peso corpóreo de cada animal para liberar uma dose de 1 mg/kg em 2 mL/kg. No grupo de administração oral, o produto em estudo do teste foi administrado por gavagem a 2 mL/kg para uma dose de 5,0 mg/kg. Coleta da Amostra
[0115] Amostras seriadas de sangue venoso (aproximadamente 0,4 mL cada) foram obtidas em pontos temporais específicos após administração a cada animal. As amostras de sangue foram coletadas em tubos VacutainerTM (Becton-Disckinson Corp., New Jersey, USA) contendo EDTA como o anticoagulante e foram imediatamente colocadas em gelo úmido aguardando centrifugação para obtenção de plasma. Determinação das Concentrações do Composto da Fórmula (I) no Plasma
[0116] Um método de LC/MS/MS foi usado para determinar a concentração do composto do teste no plasma. Cálculos
[0117] Análise farmacocinética não compartimental foi realizada nos dados temporais de concentração plasmática. Resultados
[0118] O composto da fórmula (I) exibiu uma CL de 0,09 L/h/kg, biodisponibilidade oral de 75%, t1/2 de 5,07 horas e Vss de 0,55 L/kg em ratos. Ensaio de Inibição da Cyp Objetivo
[0119] Avaliar o potencial do composto do teste para inibir as principais formas do citocromo P450, CYP1A, CYP1A2, CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6 e CYP3A4 (2 substratos). Determinação da IC50 de inibição do Citocromo P450 (8 Isoformas, 9 Substratos) Sumário do Protocolo
[0120] O composto do teste (0,1 μM - 25 μM) é incubado com microssomos hepáticos humanos e NADPH na presença de um substrato do tipo sonda específico da isoforma do citocromo P450. Para as reações específicas de CYP2B6, CYP2C8, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6 e CYP3A4, os metabólitos são monitorados por espectroscopia de massa. Atividade de CYP1A é monitorada por determinação da formação de um metabólito fluorescente. Uma diminuição na formação do metabólito em comparação com o controle veículo é usada para calcular um valor de IC50 (concentração do composto do teste que produz 50% de inibição). Exigências do Ensaio
[0121] 500 μL de uma solução 10 mM do composto do teste em DMSO. Procedimento Experimental: Inibição de CYP1A
[0122] Seis concentrações do composto do teste (0,1, 0,25, 1, 2,5, 10, 25 μM em DMSO; concentração final de DMSO = 0,3%) são incubadas com microssomos hepáticos humanos (0,25 mg/mL) e NADPH (1 mM) na presença do substrato do tipo sonda etoxirresorufina (0,5 μM) por 5 minutos a 37°C. O inibidor seletivo do CYP1A, alfa-naftoflavona, é analisado ao lado do composto do teste como um controle positivo. Inibição de CYP2B6
[0123] Seis concentrações do composto do teste (0,1, 0,25, 1, 2,5, 10, 25 μM em DMSO; concentração final de DMSO = 0,3%) são incubadas com microssomos hepáticos humanos (0,1 mg/mL) e NADPH (1 mM) na presença do substrato do tipo sonda bupropiona (110 μM) por 5 minutos a 37°C. O inibidor seletivo do CYP2B6, ticlopidina, é analisado ao lado do composto do teste como um controle positivo. Inibição de CYP2C8
[0124] Seis concentrações do composto do teste (0,1, 0,25, 1, 2,5, 10, 25 μM em DMSO; concentração final de DMSO = 0,3%) são incubadas com microssomos hepáticos humanos (0,25 mg/mL) e NADPH (1 mM) na presença do substrato do tipo sonda paclitaxel (7,5 μM) por 30 minutos a 37°C. O inibidor seletivo do CYP2C8, montelucaste, é analisado ao lado do composto do teste como um controle positivo. Inibição de CYP2C9
[0125] Seis concentrações do composto do teste (0,1, 0,25, 1, 2,5, 10, 25 μM em DMSO; concentração final de DMSO = 0,25%) são incubadas com microssomos hepáticos humanos (1 mg/mL) e NADPH (1 mM) na presença do substrato do tipo sonda tolbutamida (120 μM) por 60 minutos a 37°C. O inibidor seletivo do CYP2C9, sulfafenazol, é analisado ao lado do composto do teste como um controle positivo. Inibição de CYP2C19
[0126] Seis concentrações do composto do teste (0,1, 0,25, 1, 2,5, 10, 25 μM em DMSO; concentração final de DMSO = 0,25%) são incubadas com microssomos hepáticos humanos (0,5 mg/mL) e NADPH (1 mM) na presença do substrato do tipo sonda mefenitoína (25 μM) por 60 minutos a 37°C. O inibidor seletivo do CYP2C19, tranilcipromina, é analisado ao lado do composto do teste como um controle positivo. Inibição de CYP2D6
[0127] Seis concentrações do composto do teste (0,1, 0,25, 1, 2,5, 10, 25 μM em DMSO; concentração final de DMSO = 0.25%) são incubadas com microssomos hepáticos humanos (0,5 mg/mL) e NADPH (1 mM) na presença do substrato do tipo sonda dextrometorfan (5 μM) por 5 minutos a 37°C. O inibidor seletivo do CYP2D6, quinidina, é analisado ao lado do composto do teste como um controle positivo. Inibição do CYP3A4 (Midazolam)
[0128] Seis concentrações do composto do teste (0,1, 0,25, 1, 2,5, 10, 25 μM em DMSO; concentração final de DMSO = 0,26%) são incubadas com microssomos hepáticos humanos (0,1 mg/mL) e NADPH (1 mM) na presença do substrato do tipo sonda midazolam (2,5 μM) por 5 minutos a 37°C. O inibidor seletivo do CYP3A4, cetoconazol, é analisado ao lado do composto do teste como um controle positivo. Inibição do CYP3A4 (Testosterona)
[0129] Seis concentrações do composto do teste (0,1, 0,25, 1, 2,5, 10, 25 μM em DMSO; concentração final de DMSO = 0,275%) são incubadas com microssomos hepáticos humanos (0,5 mg/mL) e NADPH (1 mM) na presença do substrato do tipo sonda testosterona (50 μM) por 5 minutos a 37°C. O inibidor seletivo do CYP3A4, cetoconazol, é analisado ao lado do composto do teste como um controle positivo.
[0130] Para incubações do CYP1A, as reações são terminadas por metanol, e a formação do metabólito, resorrufina, é monitorada por fluorescência (comprimento de onda de excitação = 535 nm, comprimento de onda de emissão = 595 nm). Para incubações do CYP2B6, CYP2C9, CYP2C19, CYP2D6 e CYP3A4, as reações são terminadas por metanol. As amostras são então centrifugadas e os sobrenadantes são combinados, para a análise simultânea de 4-hidroxitolbutamida, 4-hidroximefenitoína, dextrorfan e 1- hidroximidazolam por LC-MS/MS. Hidroxibupropiona, 6α-hidroxipaclitaxel e 6β- hidroxitestosterona são analisados separadamente por LC-MS/MS. Ácido fórmico em água desionizada (concentração final = 0,1%) contendo padrão interno é adicionado à amostra final antes de análise. Uma redução na formação dos metabólitos em comparação com controle veículo é usada para calcular um valor da IC50 (concentração do composto do teste que produz 50% de inibição). Resultados:
Figure img0014
Plano de estudo geral para o modelo de fibrose renal por obstrução de ureter unilateral (UUO) de rato
[0131] Ratos Sprague-Dawley do sexo masculino foram alimentados com comida normal, abrigados em condições padrões e deixados em adaptação por pelo menos 7 dias antes de cirurgia. No princípio do estudo, os ratos foram colocados em grupos pareados por peso e administrados (2 mL/kg VO duas vezes ao dia), por meio de veículo de gavagem, com um de quatro níveis da dose dos compostos (1, 3, 10 ou 30 mg/kg). Os ratos foram anestesiados com anestesia à base de isoflurano em um cone nasal, e laparotomia foi realizada. Os ratos foram submetidos a obstrução completa do ureter direito (UUO) usando-se instrumentos esterilizados por calor e técnica cirúrgica asséptica. Os ratos foram administrados com 50 μL de penicilina G (por via intramuscular) imediatamente após a cirurgia. Os ratos foram deixados em recuperação em uma gaiola limpa e aquecida antes de retornarem a condições normais de viveiro. Os ratos foram administrados com compostos na dose descrita acima duas vezes ao dia (com 12 horas de intervalo) pelos 7 dias subsequentes. No dia 7 após cirurgia, os ratos foram anestesiados com isoflurano, e soro, plasma e urina foram coletados. Os animais foram então submetidos a eutanásia, os rins foram coletados e espécimes de biopsia obtidas para análise morfológica, histológica e bioquímica. Todos os tecidos para análise bioquímica foram submetidos a congelamento rápido em nitrogênio líquido e armazenados a - 80°C e os tecidos para análise histológica foram fixados em formalina tamponada neutra a 10%.
[0132] Fibrose renal foi avaliada por determinação da quantidade de colágeno IV no rim por um método ELISA e por exame de acúmulo de miofibroblastos positivos para alfa-actina de músculo liso no rim mediante imuno-histoquímica. Para isso, um pequeno fragmento de córtex renal congelado foi removido, homogeneizado em tampão de RIPA e em seguida centrifugado a 14000 x g por 10 minutos a 4°C. O sobrenadante foi coletado em tubos pré-refrigerados e a concentração proteica foi determinada. Quantidade equivalente de proteína total foi submetida a um ensaio Col IV ELISA (Exocell) de acordo com as instruções do fabricante.
[0133] Tecido renal fixado em formalina e embebido em parafina foi corado com uma alfa-actina de músculo liso conforme previamente descrito (Stambe et al., The Role of p38 Mitogen-Activated Protein Kinase Activation in Renal Fibrosis. J Am Soc Nephrol 15: 370-379, 2004). Resultados
[0134] Foi constatado que o composto da fórmula (I) reduz significativamente indução de colágeno IV renal (Figura 1) e acúmulo de miofibroblastos positivos para alfa-actina de músculo liso (Figura 2) em doses de 3 a 30 mg/kg. Dados Comparativos para o Composto da Fórmula (I) e Compostos de Referência
[0135] A tabela a seguir fornece resultados comparativos para o composto da fórmula (I) e os compostos de referência A e B descritos em U.S. N° 2001/00095410A1, publicada em 13 de janeiro de 2011. Os depositantes mencionam que os experimentos para os quais os resultados são comparados abaixo foram realizados em condições similares mas não necessariamente de modo simultâneo. Tabela
Figure img0015
( ) Os valores entre parênteses representam o número de vezes que o composto da fórmula (I) exibe uma melhora sobre o composto indicado para o parâmetro indicado.
[0136] O que se segue pode ser deduzido dos dados comparativos acima:
[0137] O composto da fórmula (I) tem uma EC50 que é comparável à do composto A.
[0138] O composto da fórmula (I) tem uma IC50 funcional que é comparável às IC50 para os compostos A e B.
[0139] O composto da fórmula (I) tem uma EC50 ajustada de ligação a proteína que é 4 vezes menor que a do composto A e 33 vezes menor que a do composto B.
[0140] O composto da fórmula (I) é um inibidor fraco da CYP3A4 em comparação com os compostos A e B.
[0141] O composto da fórmula (I) possui um valor de IC50 para CYP3A4/EC50 para PBadj que é 43 vezes mais elevado que o do composto da fórmula A e 92 vezes mais elevado que o do composto da fórmula B.
[0142] O composto da fórmula (I) possui um valor de CL para ratos que é 2,7 vezes menor que o do composto da fórmula A e 3,6 vezes menor que o do composto da fórmula B.
[0143] O composto da fórmula (I) tem uma percentagem de biodisponibilidade em ratos que é 6,8 vezes mais elevada que a do composto A e 1,5 vez mais elevada que a do composto B.
[0144] O composto da fórmula (I) tem uma meia-vida em ratos que é 8,6 vezes maior que a do composto A e 3,9 vezes maior que a do composto B.
[0145] Os dados acima sugerem consideravelmente que o composto da fórmula (I) possui propriedades surpreendentes e vantajosas em comparação com os compostos das fórmulas A e B e que o composto da fórmula (I) é provavelmente um melhor candidato para favorecer o desenvolvimento de tratamento de doença renal crônica, fibrose pulmonar e/ou renal e/ou doenças cardiorrenais.

Claims (25)

1. Composto, caracterizado pelo fato de ser de fórmula (I):
Figure img0016
isto é, 5-(4-ciclopropil-1H-imidazol-1-il)-N-(6-(4-isopropil-4H-1,2,4-triazol- 3-il)piridin-2-il)-2-fluoro-4-metilbenzamida, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser um sal cloridrato do composto de fórmula (I).
3. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende o composto ou sal definido na reivindicação 1 ou 2 e um veículo farmaceuticamente aceitável.
4. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade de 1 mg a 500 mg do composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
5. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade de 1 mg a 250 mg do composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
6. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 3 a 5, caracterizada pelo fato de estar na forma de dose unitária.
7. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a dose unitária é uma forma de dose unitária oral.
8. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que a forma de dose unitária oral é um comprimido.
9. Uso de um composto ou sal definido na reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de um medicamento para o tratamento de doença renal crônica.
10. Uso de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de ser de uma quantidade de 1 mg a 500 mg do composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo em uma dose única ou em doses múltiplas.
11. Uso de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de ser de uma quantidade de 1 mg a 250 mg do composto de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo em uma dose única ou em doses múltiplas.
12. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 9 a 11, caracterizado pelo fato de que o medicamento é formulado para ser administrado oralmente.
13. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 9 a 12, caracterizado pelo fato de que o medicamento ainda compreende pelo menos um agente terapêutico adicional.
14. Uso de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um agente terapêutico adicional é selecionado a partir do grupo que consiste em um inibidor da enzima de conversão da angiotensina, um bloqueador do receptor da angiotensina II, um agente anti-hipertensivo, um antibiótico, um analgésico, um antidepressivo e um ansiolítico.
15. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 3 a 8, caracterizada pelo fato de ser para uso na inibição da quinase reguladora do sinal de apoptose 1.
16. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 3 a 8, caracterizada pelo fato de ser para uso no tratamento ou inibição de uma doença renal.
17. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 16, caracterizada pelo fato de que a doença renal é associada a doença renal diabética.
18. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 3 a 8, caracterizada pelo fato de ser para uso no tratamento de doença renal crônica.
19. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 3 a 8, caracterizada pelo fato de ser para uso no tratamento de doença renal diabética, nefropatia diabética, fibrose renal, fibrose hepática ou fibrose pulmonar.
20. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 19, caracterizada pelo fato de ser para uso no tratamento de fibrose renal.
21. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 19, caracterizada pelo fato de ser para uso no tratamento de fibrose hepática.
22. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 21, caracterizada pelo fato de que a fibrose hepática é fibrose hepática crônica ou fibrose hepática aguda.
23. Composição farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 3 a 8 e 15 a 22, caracterizada pelo fato de que compreende ainda pelo menos um agente terapêutico adicional selecionado a partir do grupo que consiste em inibidores da enzima de conversão da angiotensina, bloqueadores do receptor da angiotensina II, agentes anti-hipertensivos, antibióticos, analgésicos, antidepressivos e ansiolíticos.
24. Intermediário, caracterizado pelo fato de ser de fórmula:
Figure img0017
isto é, 2-amino,5-(4-isopropil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridina, ou um sal ou forma protegida do mesmo.
25. Intermediário, caracterizado pelo fato de ser de fórmula:
Figure img0018
isto é, 5-(4-ciclopropil-1H-imidazol-1-il)-2-fluoro-4-ácido metilbenzóico, ou um sal ou forma protegida do mesmo.
BR112014018355-4A 2012-01-27 2013-01-24 Composto inibidor de quinase reguladora de sinal de apoptose, composição farmacêutica compreendendo o referido composto, uso e compostos intermediários do mesmo BR112014018355B1 (pt)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261591710P 2012-01-27 2012-01-27
US61/591,710 2012-01-27
PCT/US2013/022997 WO2013112741A1 (en) 2012-01-27 2013-01-24 Apoptosis signal-regulating kinase inhibitor

Publications (3)

Publication Number Publication Date
BR112014018355A2 BR112014018355A2 (pt) 2017-06-20
BR112014018355A8 BR112014018355A8 (pt) 2017-07-11
BR112014018355B1 true BR112014018355B1 (pt) 2021-10-05

Family

ID=47684038

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR112014018355-4A BR112014018355B1 (pt) 2012-01-27 2013-01-24 Composto inibidor de quinase reguladora de sinal de apoptose, composição farmacêutica compreendendo o referido composto, uso e compostos intermediários do mesmo

Country Status (40)

Country Link
US (7) US8742126B2 (pt)
EP (1) EP2807151B1 (pt)
JP (1) JP5770950B2 (pt)
KR (5) KR101799739B1 (pt)
CN (2) CN104080771B (pt)
AP (1) AP2014007836A0 (pt)
AR (2) AR089818A1 (pt)
AU (1) AU2013201586C1 (pt)
BR (1) BR112014018355B1 (pt)
CA (3) CA2862030C (pt)
CL (1) CL2014001988A1 (pt)
CO (1) CO7061073A2 (pt)
CR (1) CR20140405A (pt)
CY (1) CY1117201T1 (pt)
DK (1) DK2807151T3 (pt)
EA (1) EA024746B1 (pt)
ES (1) ES2558203T3 (pt)
HK (1) HK1204324A1 (pt)
HR (1) HRP20151399T1 (pt)
HU (1) HUE028641T2 (pt)
IL (3) IL233598A (pt)
IN (1) IN2014DN06174A (pt)
MA (1) MA35861B1 (pt)
MD (1) MD4601B1 (pt)
ME (1) ME02322B (pt)
MX (3) MX365954B (pt)
NZ (1) NZ739339A (pt)
PE (1) PE20141822A1 (pt)
PH (1) PH12014501697B1 (pt)
PL (1) PL2807151T3 (pt)
PT (1) PT2807151E (pt)
RS (1) RS54492B1 (pt)
SG (1) SG11201404348UA (pt)
SI (1) SI2807151T1 (pt)
SM (1) SMT201600047B (pt)
TW (4) TWI561514B (pt)
UA (1) UA112098C2 (pt)
UY (1) UY34573A (pt)
WO (1) WO2013112741A1 (pt)
ZA (1) ZA201405260B (pt)

Families Citing this family (138)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TWI625121B (zh) 2009-07-13 2018-06-01 基利科學股份有限公司 調節細胞凋亡信號之激酶的抑制劑
EP2651417B1 (en) 2010-12-16 2016-11-30 Calchan Limited Ask1 inhibiting pyrrolopyrimidine derivatives
UY34573A (es) 2012-01-27 2013-06-28 Gilead Sciences Inc Inhibidor de la quinasa que regula la señal de la apoptosis
CA2931615A1 (en) 2013-11-26 2015-06-04 Gilead Sciences, Inc. Therapies for treating myeloproliferative disorders
WO2015109286A1 (en) 2014-01-20 2015-07-23 Gilead Sciences, Inc. Therapies for treating cancers
WO2015187499A1 (en) 2014-06-03 2015-12-10 Gilead Sciences, Inc. Use of an ask1 inhibitor for the treatment of liver disease, optionally in combination with a loxl2 inhibitor
TW201618781A (zh) * 2014-08-13 2016-06-01 吉李德科學股份有限公司 治療肺高血壓之方法
SG11201701723XA (en) 2014-09-24 2017-04-27 Gilead Sciences Inc Methods of treating liver disease
EP3237404B1 (en) * 2014-12-23 2020-11-11 Gilead Sciences, Inc. Processes for preparing ask1 inhibitors
MA41252A (fr) * 2014-12-23 2017-10-31 Gilead Sciences Inc Formes solides d'un inhibiteur d'ask 1
TW201639573A (zh) 2015-02-03 2016-11-16 吉李德科學股份有限公司 有關治療癌症之合併治療
LT3321265T (lt) 2015-03-04 2020-07-27 Gilead Sciences, Inc. 4,6-diamino-pirido[3,2-d]pirimidino junginiai ir jų panaudojimas kaip toll-like receptorių moduliatorių
CR20170599A (es) 2015-07-06 2018-02-28 Gilead Sciences Inc Moduladores cot y métodos de uso de los mismos
EP3355875B1 (en) 2015-10-01 2021-09-29 Gilead Sciences, Inc. Combination of a btk inhibitor and a checkpoint inhibitor for treating cancers
CR20180320A (es) 2015-12-17 2018-08-21 Gilead Sciences Inc Compuestos inhibidores de la quinasa de union a tank
JP2019510752A (ja) 2016-03-04 2019-04-18 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド オートタキシン阻害剤の組成物及び合剤
US20170306050A1 (en) 2016-04-08 2017-10-26 Gilead Sciences, Inc. Compositions and methods for treating cancer, inflammatory diseases and autoimmune diseases
BR112018075737A2 (pt) 2016-06-13 2019-03-26 I-Mab anticorpo, composição, célula isolada, e, métodos para tratar câncer ou infecção em um paciente e para detectar expressão de pd-l1 em uma amostra.
CA3032813A1 (en) 2016-08-04 2018-02-08 Gilead Sciences, Inc. Cobicistat for use in cancer treatments
ES2826748T3 (es) 2016-09-02 2021-05-19 Gilead Sciences Inc Derivados de 4,6-diamino-pirido[3,2-d]pirimidina como moduladores de receptores de tipo Toll
AU2017318601B2 (en) 2016-09-02 2020-09-03 Gilead Sciences, Inc. Toll like receptor modulator compounds
US20180133212A1 (en) 2016-11-03 2018-05-17 Gilead Sciences, Inc. Combination of a bcl-2 inhibitor and a bromodomain inhibitor for treating cancer
JP2019533706A (ja) 2016-11-11 2019-11-21 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド 肝疾患を処置する方法
US20180141939A1 (en) 2016-11-22 2018-05-24 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of a bet inhibitor
AR110252A1 (es) 2016-11-30 2019-03-13 Gilead Sciences Inc Compuestos heterocíclicos fusionados como inhibidores de la quinasa cam
AU2018209573B2 (en) * 2017-01-22 2020-08-13 Fujian Akeylink Biotechnology Co., Ltd. ASK1 inhibitor and preparation method and use thereof
BR112019014756B1 (pt) * 2017-01-22 2021-08-10 Fujian Cosunter Pharmaceutical Co., Ltd Composto inibidor de ask1 e composição farmacêutica que o compreende
MY188386A (en) 2017-01-24 2021-12-07 I Mab Biopharma Us Ltd Anti-cd73 antibodies and uses thereof
AU2018224136B2 (en) 2017-02-24 2021-10-21 Gilead Sciences, Inc. Inhibitors of Bruton's Tyrosine Kinase
US10314844B2 (en) 2017-02-24 2019-06-11 Gilead Sciences, Inc. Inhibitors of Bruton's tyrosine kinase
WO2018157277A1 (en) * 2017-02-28 2018-09-07 Eli Lilly And Company Isoquinolin and naphthydrin compounds
US11136324B2 (en) 2017-03-03 2021-10-05 Jiangsu Hansoh Pharmaceutical Group Co., Ltd. Substituted imidazoles as apoptosis signal regulating kinase 1 inhibitors
JOP20180017A1 (ar) 2017-03-14 2019-01-30 Gilead Sciences Inc مثبط كيناز منظم لإشارة تلاشي خلايا
AU2018246209A1 (en) 2017-03-28 2019-09-19 Gilead Sciences, Inc. Methods of treating liver disease
WO2018191393A1 (en) 2017-04-12 2018-10-18 Gilead Sciences, Inc. Methods of treating liver disease
JOP20180040A1 (ar) 2017-04-20 2019-01-30 Gilead Sciences Inc مثبطات pd-1/pd-l1
US10683279B2 (en) 2017-05-12 2020-06-16 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors and methods of use thereof
US10246439B2 (en) 2017-05-25 2019-04-02 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors and methods of use thereof
US10450301B2 (en) 2017-05-25 2019-10-22 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors and methods of use thereof
WO2018218042A1 (en) * 2017-05-25 2018-11-29 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors and methods of use thereof
US10495648B2 (en) 2017-06-13 2019-12-03 Gilead Sciences, Inc. Methods of treating liver fibrosis
CN109265443B (zh) * 2017-07-18 2022-11-29 南京圣和药业股份有限公司 作为ask抑制剂的杂环化合物及其应用
US10597382B2 (en) 2017-08-28 2020-03-24 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Tetrazole containing apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors and methods of use thereof
CN109456308B (zh) * 2017-09-06 2022-11-29 南京圣和药业股份有限公司 作为ask抑制剂的杂环化合物及其应用
WO2019047094A1 (en) * 2017-09-07 2019-03-14 Eli Lilly And Company CYCLOBUTYL-IMIDAZOLIDINONE COMPOUNDS
US10370352B2 (en) 2017-09-07 2019-08-06 Eli Lilly And Company Cyclobutyl-imidazolidinone compounds
US11034671B2 (en) 2017-09-08 2021-06-15 Sichuan Haisco Pharmaceutical Co., Ltd. Apoptosis signal-regulating kinase inhibitors and uses thereof
WO2019047161A1 (en) 2017-09-08 2019-03-14 Eli Lilly And Company IMIDAZOLIDINE COMPOUNDS
CN111518080A (zh) * 2017-10-12 2020-08-11 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 一种1,2,4-三氮唑类化合物
CN107793400B (zh) * 2017-10-31 2020-01-31 武汉九州钰民医药科技有限公司 吡啶类化合物及其在制备治疗肝脏疾病的药物中的应用
WO2019094777A1 (en) 2017-11-13 2019-05-16 Gilead Sciences, Inc. Compositions and methods for identifying and treating liver diseases and monitoring treatment outcomes
AU2018392212B9 (en) 2017-12-20 2021-03-18 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the STING adaptor protein
CA3084569A1 (en) 2017-12-20 2019-06-27 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the sting adaptor protein
EP3735404B1 (en) 2018-01-02 2023-11-29 Seal Rock Therapeutics, Inc. Ask1 inhibitor compounds and uses thereof
UA126458C2 (uk) 2018-02-13 2022-10-05 Гіліад Сайєнсіз, Інк. Інгібітори pd-1/pd-l1
CN110294742B (zh) * 2018-03-21 2023-01-31 山东轩竹医药科技有限公司 并环类ask1抑制剂及其应用
TW202005654A (zh) 2018-04-06 2020-02-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 ２，２，─環二核苷酸
TWI833744B (zh) 2018-04-06 2024-03-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 3'3'-環二核苷酸
TWI818007B (zh) 2018-04-06 2023-10-11 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 2'3'-環二核苷酸
TW202012414A (zh) 2018-04-12 2020-04-01 美商拓臻股份有限公司 三環ask1抑制劑
US10899735B2 (en) 2018-04-19 2021-01-26 Gilead Sciences, Inc. PD-1/PD-L1 inhibitors
CN110407806B (zh) * 2018-04-28 2021-08-17 深圳微芯生物科技股份有限公司 甲酰胺类化合物、其制备方法及其应用
US10683289B2 (en) 2018-05-02 2020-06-16 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors and methods of use thereof
AU2019262016B2 (en) 2018-05-02 2024-07-11 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Tetrazole containing apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors and methods of use thereof
US20190359645A1 (en) 2018-05-03 2019-11-28 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3'-cyclic dinucleotides comprising carbocyclic nucleotide
CA3098873A1 (en) 2018-05-11 2019-11-14 Phosphorex, Inc. Microparticles and nanoparticles having negative surface charges
US10703733B2 (en) 2018-05-14 2020-07-07 Gilead Sciences, Inc. MCL-1 inhibitors
WO2020006429A1 (en) * 2018-06-28 2020-01-02 Hepatikos Therapeutics, Llc Ask1 isoindolin-1-one inhibitors and methods of use thereof
SI3820572T1 (sl) 2018-07-13 2023-12-29 Gilead Sciences, Inc. Inhibitorji pd-1/pd-l1
US11814382B2 (en) 2018-07-20 2023-11-14 Fujian Akeylink Biotechnology Co., Ltd. Crystal form as ASK1 inhibitor and preparation method and application thereof
WO2020041417A1 (en) 2018-08-22 2020-02-27 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Cycloalkyl-containing apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors and methods of use thereof
WO2020072656A1 (en) 2018-10-03 2020-04-09 Gilead Sciences, Inc. Imidozopyrimidine derivatives
KR102298546B1 (ko) * 2018-10-18 2021-09-08 에이치케이이노엔 주식회사 신규한 n-(이소프로필-트리아졸릴)피리디닐)-헤테로아릴-카르복사미드 유도체 및 이의 용도
WO2020086556A1 (en) 2018-10-24 2020-04-30 Gilead Sciences, Inc. Pd-1/pd-l1 inhibitors
MX2021005047A (es) 2018-10-31 2021-09-08 Gilead Sciences Inc Compuestos de 6-azabenzimidazol sustituidos como inhibidores de hpk1.
CA3116347A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Gilead Sciences, Inc. Substituted 6-azabenzimidazole compounds having hpk1 inhibitory activity
CN111170995A (zh) * 2018-11-09 2020-05-19 山东轩竹医药科技有限公司 Ask1抑制剂及其应用
WO2020106707A1 (en) 2018-11-19 2020-05-28 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors and methods of use thereof
CN109608441A (zh) * 2018-12-26 2019-04-12 都创(上海)医药科技有限公司 一种ask1抑制剂的合成工艺
WO2020150136A1 (en) 2019-01-15 2020-07-23 Gilead Sciences, Inc. Fxr (nr1h4) modulating compounds
CN109813915A (zh) * 2019-02-15 2019-05-28 浠思（上海）生物技术有限公司 利用htrf一步法筛选激酶抑制剂的方法
WO2020172075A1 (en) 2019-02-19 2020-08-27 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of fxr agonists
EP3935066A1 (en) 2019-03-07 2022-01-12 Institute of Organic Chemistry and Biochemistry ASCR, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotides and prodrugs thereof
CN113543851A (zh) 2019-03-07 2021-10-22 捷克共和国有机化学与生物化学研究所 2’3’-环二核苷酸及其前药
US11766447B2 (en) 2019-03-07 2023-09-26 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3′3′-cyclic dinucleotide analogue comprising a cyclopentanyl modified nucleotide as sting modulator
WO2020185686A1 (en) 2019-03-11 2020-09-17 Gilead Sciences, Inc. Formulations of a compound and uses thereof
WO2020198214A1 (en) 2019-03-25 2020-10-01 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors and methods of use thereof
TWI751516B (zh) 2019-04-17 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
TWI751517B (zh) 2019-04-17 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
WO2020237025A1 (en) 2019-05-23 2020-11-26 Gilead Sciences, Inc. Substituted exo-methylene-oxindoles which are hpk1/map4k1 inhibitors
TW202235416A (zh) 2019-06-14 2022-09-16 美商基利科學股份有限公司 Cot 調節劑及其使用方法
WO2020255038A1 (en) 2019-06-18 2020-12-24 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Combination of hepatitis b virus (hbv) vaccines and pyridopyrimidine derivatives
EP3990476A1 (en) 2019-06-25 2022-05-04 Gilead Sciences, Inc. Flt3l-fc fusion proteins and methods of use
WO2020261294A1 (en) * 2019-06-26 2020-12-30 Mankind Pharma Ltd. Novel apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors
AR119594A1 (es) 2019-08-09 2021-12-29 Gilead Sciences Inc Derivados de tienopirimidina como inhibidores acc y usos de los mismos
KR20220085796A (ko) 2019-10-18 2022-06-22 포티 세븐, 인코포레이티드 골수이형성 증후군 및 급성 골수성 백혈병을 치료하기 위한 조합 치료
CN114599392A (zh) 2019-10-31 2022-06-07 四十七公司 基于抗cd47和抗cd20的血癌治疗
TWI778443B (zh) 2019-11-12 2022-09-21 美商基利科學股份有限公司 Mcl1抑制劑
US11548871B2 (en) 2019-11-15 2023-01-10 Gilead Sciences, Inc. Triazole carbamate pyridyl sulfonamides as LPA receptor antagonists and uses thereof
CN111018831B (zh) * 2019-11-21 2022-05-31 中国药科大学 细胞凋亡信号调节激酶抑制剂及其应用
US20230105984A1 (en) 2019-12-23 2023-04-06 Svetlana Marukian Compositions and methods for the treatment of liver diseases and disorders
WO2021130638A1 (en) 2019-12-24 2021-07-01 Carna Biosciences, Inc. Diacylglycerol kinase modulating compounds
CN115087488A (zh) 2020-02-14 2022-09-20 震动疗法股份有限公司 与ccr8结合的抗体和融合蛋白及其用途
KR20220161438A (ko) 2020-03-30 2022-12-06 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Cot 억제제 화합물, (S)-6-(((1-(바이사이클로[1.1.1]펜탄-1-일)-1H-1,2,3-트라이아졸-4-일)2-메틸-1-옥소-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-5-일)메틸)))아미노8-클로로-(네오펜틸아미노)퀴놀린-3-카르보니트릴의 고체 형태
WO2021202688A1 (en) 2020-04-02 2021-10-07 Gilead Sciences, Inc. Process for preparing a cot inhibitor compound
CA3181922A1 (en) 2020-05-01 2021-11-04 Gilead Sciences, Inc. Cd73 inhibiting 2,4-dioxopyrimidine compounds
CN115867556A (zh) 2020-06-03 2023-03-28 吉利德科学公司 Lpa受体拮抗剂及其用途
CN111808079A (zh) * 2020-08-05 2020-10-23 中国药科大学 吲哚类ask1小分子抑制剂及其制备方法和应用
CN114470217B (zh) * 2020-11-24 2023-06-20 深圳微芯生物科技股份有限公司 预防和治疗代谢异常或炎症引起的组织损伤的药物组合物
WO2022192428A1 (en) 2021-03-11 2022-09-15 Gilead Sciences, Inc. Glp-1r modulating compounds
EP4313967A1 (en) 2021-03-29 2024-02-07 Gilead Sciences, Inc. Khk inhibitors
TW202302145A (zh) 2021-04-14 2023-01-16 美商基利科學股份有限公司 ＣＤ４７／ＳＩＲＰα結合及ＮＥＤＤ８活化酶Ｅ１調節次單元之共抑制以用於治療癌症
CN114246866B (zh) * 2021-04-28 2023-09-12 深圳微芯生物科技股份有限公司 用于治疗慢性肾病的药物及其用途
WO2022240879A1 (en) 2021-05-11 2022-11-17 Gilead Sciences, Inc. Lpa receptor antagonists and uses thereof
EP4337654A1 (en) 2021-05-13 2024-03-20 Gilead Sciences, Inc. Lpa receptor antagonists and uses thereof
US20220389394A1 (en) 2021-05-18 2022-12-08 Gilead Sciences, Inc. METHODS OF USING FLT3L-Fc FUSION PROTEINS
TW202345826A (zh) 2021-06-04 2023-12-01 美商基利科學股份有限公司 治療nash之方法
TW202311256A (zh) 2021-06-18 2023-03-16 美商基利科學股份有限公司 用於治療ｆｘｒ誘發之搔癢之ｉｌ－３１調節劑
EP4359411A1 (en) 2021-06-23 2024-05-01 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
JP2024522698A (ja) 2021-06-23 2024-06-21 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ジアシルグリセロールキナーゼ調節化合物
KR20240005901A (ko) 2021-06-23 2024-01-12 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 디아실글리세롤 키나제 조절 화합물
IL309378A (en) 2021-06-23 2024-02-01 Gilead Sciences Inc DIACYLGLYERCOL KINASE MODULATING COMPOUNDS
US20230183216A1 (en) 2021-10-28 2023-06-15 Gilead Sciences, Inc. Pyridizin-3(2h)-one derivatives
IL312107A (en) 2021-10-29 2024-06-01 Gilead Sciences Inc CD73 compounds
WO2023107954A1 (en) 2021-12-08 2023-06-15 Dragonfly Therapeutics, Inc. Antibodies targeting 5t4 and uses thereof
CN118541360A (zh) 2021-12-08 2024-08-23 吉利德科学公司 Lpa受体拮抗剂及其用途
WO2023107956A1 (en) 2021-12-08 2023-06-15 Dragonfly Therapeutics, Inc. Proteins binding nkg2d, cd16 and 5t4
AU2022419982A1 (en) 2021-12-22 2024-06-06 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
AU2022417491A1 (en) 2021-12-22 2024-05-23 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
TW202340168A (zh) 2022-01-28 2023-10-16 美商基利科學股份有限公司 Ｐａｒｐ７抑制劑
TW202346277A (zh) 2022-03-17 2023-12-01 美商基利科學股份有限公司 Ｉｋａｒｏｓ鋅指家族降解劑及其用途
WO2023183817A1 (en) 2022-03-24 2023-09-28 Gilead Sciences, Inc. Combination therapy for treating trop-2 expressing cancers
TW202345901A (zh) 2022-04-05 2023-12-01 美商基利科學股份有限公司 用於治療結腸直腸癌之組合療法
TW202400138A (zh) 2022-04-21 2024-01-01 美商基利科學股份有限公司 Ｋｒａｓ ｇ１２ｄ調節化合物
US20240116928A1 (en) 2022-07-01 2024-04-11 Gilead Sciences, Inc. Cd73 compounds
US20240091351A1 (en) 2022-09-21 2024-03-21 Gilead Sciences, Inc. FOCAL IONIZING RADIATION AND CD47/SIRPa DISRUPTION ANTICANCER COMBINATION THERAPY
WO2024137852A1 (en) 2022-12-22 2024-06-27 Gilead Sciences, Inc. Prmt5 inhibitors and uses thereof
CN115844887B (zh) * 2022-12-28 2023-09-08 中国人民解放军空军军医大学 Selonsertib在制备治疗癌症的药物中的用途

Family Cites Families (37)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6159731A (en) 1997-02-12 2000-12-12 Massachusetts Institute Of Technology Daxx, a Fas-binding protein that activates JNK and apoptosis
AU782448B2 (en) 1999-03-19 2005-07-28 Aventis Pharmaceuticals Inc. Akt nucleic acids, polypeptides, and uses thereof
US6881555B2 (en) 1999-03-19 2005-04-19 Aventis Pharmaceuticals Inc. AKT nucleic acids, polypeptides, and uses thereof
AU2001275330A1 (en) * 2000-06-07 2001-12-17 Marc D. Andelman Fluid and electrical connected flow-through electrochemical cells, system and method
US20070237770A1 (en) 2001-11-30 2007-10-11 Albert Lai Novel compositions and methods in cancer
EP1661581A1 (en) 2003-07-28 2006-05-31 Osaka Industrial Promotion Organization Remedy for cardiac failure comprising ask1 inhibitor as the active ingredient and method of screening the same
WO2006036941A2 (en) 2004-09-27 2006-04-06 Kosan Biosciences Incorporated Specific kinase inhibitors
AU2005304393B2 (en) 2004-11-10 2012-09-27 Synta Pharmaceuticals Corp. IL-12 modulatory compounds
EP1677113A1 (en) 2004-12-29 2006-07-05 Max-Delbrück-Centrum für Molekulare Medizin (MDC) Method for the identification of protein-protein interactions in disease related protein networks
US20070276050A1 (en) 2006-02-27 2007-11-29 Gilead Sciences, Inc. Methods for identifying ASK1 inhibitors useful for preventing and/or treating cardiovascular diseases
JPWO2008016131A1 (ja) 2006-08-04 2009-12-24 武田薬品工業株式会社 縮合複素環化合物
WO2008042867A2 (en) 2006-09-29 2008-04-10 Emiliem Inc. Modulators of multiple kinases
EP2104734A2 (en) 2006-12-08 2009-09-30 Asuragen, INC. Mir-20 regulated genes and pathways as targets for therapeutic intervention
EP1942104A1 (en) 2006-12-20 2008-07-09 sanofi-aventis Heteroarylcyclopropanecarboxamides and their use as pharmaceuticals
US8104727B2 (en) 2007-03-12 2012-01-31 Denis Joanisse Adjustable article support
WO2009011850A2 (en) 2007-07-16 2009-01-22 Abbott Laboratories Novel therapeutic compounds
EA201070328A1 (ru) 2007-08-31 2010-08-30 Мерк Сероно С.А. Соединения триазолопиридина и их применение в качестве ингибиторов ask
WO2009123986A1 (en) 2008-03-31 2009-10-08 Takeda Pharmaceutical Company Limited Apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors
WO2010008843A1 (en) 2008-06-24 2010-01-21 Takeda Pharmaceutical Company Limited Apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors
WO2010045470A2 (en) 2008-10-15 2010-04-22 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions, kits, and methods for identification, assessment, prevention, and therapy of hepatic disorders
US20110294693A1 (en) 2008-11-17 2011-12-01 The George Washington University Compositions and Methods for Identifying Autism Spectrum Disorders
US20120010272A1 (en) 2009-03-27 2012-01-12 Merck Sharp & Dohme Corp. RNA Interference Mediated Inhibition of Apoptosis Signal-Regulating Kinase 1 (ASK1) Gene Expression Using Short Interfering Nucleic Acid (siNA)
TWI625121B (zh) 2009-07-13 2018-06-01 基利科學股份有限公司 調節細胞凋亡信號之激酶的抑制劑
WO2011041293A1 (en) 2009-09-30 2011-04-07 Takeda Pharmaceutical Company Limited Pyrazolo [1, 5-a] pyrimidine derivatives as apoptosis signal-regulating kinase 1 inhibitors
PT2531501E (pt) 2010-02-03 2014-02-17 Takeda Pharmaceutical Inibidores da cinase de regulação do sinal de apoptose 1
JP2013518909A (ja) 2010-02-08 2013-05-23 キナゲン，インク． アロステリックキナーゼ阻害が関係する治療方法および組成物
CN102884060B (zh) 2010-03-24 2019-07-19 阿米泰克治疗方案公司 用于抑制激酶的杂环化合物
NZ604831A (en) * 2010-07-02 2014-12-24 Gilead Sciences Inc Apoptosis signal-regulating kinase inhibitors
US20130236441A1 (en) 2010-11-18 2013-09-12 University Of Delaware Methods of treating and preventing thrombotic diseases using ask1 inhibitors
EP2651417B1 (en) 2010-12-16 2016-11-30 Calchan Limited Ask1 inhibiting pyrrolopyrimidine derivatives
JP2014507160A (ja) 2011-02-22 2014-03-27 カリス ライフ サイエンシズ ルクセンブルク ホールディングス エス．アー．エール．エル． 循環バイオマーカー
US20140228233A1 (en) 2011-06-07 2014-08-14 Traci Pawlowski Circulating biomarkers for cancer
TWI478908B (zh) 2011-07-01 2015-04-01 Gilead Sciences Inc 作為離子通道調節劑之稠合雜環化合物
US8924765B2 (en) 2011-07-03 2014-12-30 Ambiq Micro, Inc. Method and apparatus for low jitter distributed clock calibration
UY34573A (es) 2012-01-27 2013-06-28 Gilead Sciences Inc Inhibidor de la quinasa que regula la señal de la apoptosis
EP3237404B1 (en) 2014-12-23 2020-11-11 Gilead Sciences, Inc. Processes for preparing ask1 inhibitors
MA41252A (fr) 2014-12-23 2017-10-31 Gilead Sciences Inc Formes solides d'un inhibiteur d'ask 1

Also Published As

Publication number Publication date
US10508100B2 (en) 2019-12-17
US8742126B2 (en) 2014-06-03
EP2807151A1 (en) 2014-12-03
HK1204324A1 (zh) 2015-11-13
KR20190000898A (ko) 2019-01-03
JP5770950B2 (ja) 2015-08-26
RS54492B1 (en) 2016-06-30
MD20140082A2 (ro) 2015-01-31
US20170217933A1 (en) 2017-08-03
KR101582065B1 (ko) 2015-12-31
HUE028641T2 (en) 2016-12-28
CA2862030A1 (en) 2013-08-01
EA024746B1 (ru) 2016-10-31
ME02322B (me) 2016-06-20
NZ754169A (en) 2021-01-29
BR112014018355A2 (pt) 2017-06-20
CR20140405A (es) 2014-11-27
US20160235728A1 (en) 2016-08-18
TWI487523B (zh) 2015-06-11
MX2019007348A (es) 2019-09-05
AR117113A2 (es) 2021-07-14
PH12014501697A1 (en) 2014-10-20
UY34573A (es) 2013-06-28
TWI561514B (en) 2016-12-11
AU2013201586C1 (en) 2015-06-18
MX365954B (es) 2019-06-20
KR20160004401A (ko) 2016-01-12
IL233598A (en) 2015-06-30
CA2862030C (en) 2019-10-29
DK2807151T3 (en) 2016-02-22
UA112098C2 (uk) 2016-07-25
ES2558203T3 (es) 2016-02-02
TW201916877A (zh) 2019-05-01
TW201441213A (zh) 2014-11-01
JP2015508749A (ja) 2015-03-23
US9333197B2 (en) 2016-05-10
KR101799739B1 (ko) 2017-11-20
CL2014001988A1 (es) 2014-11-03
CA3026738C (en) 2020-12-15
PH12014501697B1 (en) 2014-10-20
IL233598A0 (en) 2014-08-31
CN104080771B (zh) 2018-11-09
US9750730B2 (en) 2017-09-05
US20140228412A1 (en) 2014-08-14
KR20170018474A (ko) 2017-02-17
MX2014009075A (es) 2014-09-01
EA201491283A1 (ru) 2014-12-30
US9873682B2 (en) 2018-01-23
PL2807151T3 (pl) 2016-05-31
NZ739339A (en) 2019-07-26
CA3026700A1 (en) 2013-08-01
KR20140117609A (ko) 2014-10-07
CA3026700C (en) 2020-12-15
US20140228411A1 (en) 2014-08-14
EP2807151B1 (en) 2015-11-18
AU2013201586B2 (en) 2015-01-22
CY1117201T1 (el) 2017-04-05
WO2013112741A1 (en) 2013-08-01
IL239311B (en) 2018-03-29
PT2807151E (pt) 2016-01-28
US20190248762A1 (en) 2019-08-15
AR089818A1 (es) 2014-09-17
US20180099950A1 (en) 2018-04-12
BR112014018355A8 (pt) 2017-07-11
SI2807151T1 (sl) 2016-08-31
KR101707764B1 (ko) 2017-02-16
ZA201405260B (en) 2016-05-25
MD4601B1 (ro) 2018-11-30
IL239311A0 (en) 2015-07-30
TWI634890B (zh) 2018-09-11
MA35861B1 (fr) 2014-12-01
US9254284B2 (en) 2016-02-09
SMT201600047B (it) 2016-02-25
TW201334782A (zh) 2013-09-01
CA3026738A1 (en) 2013-08-01
CN109438418A (zh) 2019-03-08
PE20141822A1 (es) 2014-11-27
CO7061073A2 (es) 2014-09-19
CN109438418B (zh) 2021-04-13
HRP20151399T1 (hr) 2016-01-29
KR20170128622A (ko) 2017-11-22
SG11201404348UA (en) 2014-08-28
AP2014007836A0 (en) 2014-07-31
AU2013201586A1 (en) 2013-08-15
IL257965A (en) 2018-05-31
TW201711684A (zh) 2017-04-01
CN104080771A (zh) 2014-10-01
IN2014DN06174A (pt) 2015-08-21
US20130197037A1 (en) 2013-08-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BR112014018355B1 (pt) Composto inibidor de quinase reguladora de sinal de apoptose, composição farmacêutica compreendendo o referido composto, uso e compostos intermediários do mesmo
AU2017201650B2 (en) Apoptosis signal-regulating kinase inhibitor
NZ754169B2 (en) Apoptosis signal-regulating kinase inhibitor

Legal Events

Date Code Title Description
B07D Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette]
B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B07E Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette]

Free format text: NOTIFICACAO DE ANUENCIA RELACIONADA COM O ART 229 DA LPI

B09A Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette]
B16A Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 24/01/2013, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS.